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卵形鲳鲹网箱养殖过程主要生长阶段DDTs残留特征及其来源分析

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水产学报 2017年第8期41卷 1264-1275页

作者：程波柯常亮李乐李刘冬郑重邹婉虹刘巧荣中国水产科学研究院质量与标准研究中心中国水产科学研究院南海水产研究所

为了解卵形鲳鲹养殖过程主要生长阶段DDTs残留特征及其来源途径,针对卵形鲳鲹实际网箱养殖生产条件,在放苗、养殖生产中期和收获3个主要时期,分别采集网箱中养殖水体、养殖鱼体、所用饲料和网箱处海底表层沉积物底泥样品,采用气相色谱... 详细信息

为了解卵形鲳鲹养殖过程主要生长阶段DDTs残留特征及其来源途径,针对卵形鲳鲹实际网箱养殖生产条件,在放苗、养殖生产中期和收获3个主要时期,分别采集网箱中养殖水体、养殖鱼体、所用饲料和网箱处海底表层沉积物底泥样品,采用气相色谱法测定样品中DDTs及其同系物含量。结果显示,苗种、成鱼、所用饲料及养殖水体和养殖环境表层沉积物底泥中,均检测出DDTs,其中苗种、养殖成鱼、所用饲料、养殖海水和表层沉积物底泥中DDTs平均含量分别为(3.15±0.42)、(4.49±0.39)、(3.95±0.33)μg/kg干重、(3.76±0.43)ng/L和(4.34±1.18)μg/kg干重。随着养殖过程的进行,鱼体中DDTs含量逐渐增加,收获上市时期鱼体肌肉中含量显著高于苗种时期的含量,但远低于0.5 mg/kg湿重的国家食品安全限量标准。从DDTs同系物种类上看,养殖海水、饲料和鱼体中ο,ρ′-DDT、ρ,ρ′-DDD、ρ,ρ′-DDT和ρ,ρ′-DDE 4种同系物均能检出,但沉积物中仅检测出前3种同系物。4类样品DDTs主要成分均为ο,ρ′-DDT和ρ,ρ′-DDT,其在鱼体中所占比例平均值分别为42.09%和37.07%;在饲料中所占比例平均值分别为44.85%和34.62%;在养殖海水中所占比例平均值分别为40.91%和37.99%;在养殖环境沉积物底泥中所占比例平均值分别为33.03%和51.34%。从鱼体、饲料、养殖海水和沉积物底泥中DDTs同系物组成比例和含量特征判断,饲料是鱼体后续生长中富集DDTs的主要来源途径之一。为保障卵形鲳鲹质量安全,应着重加强饲料中有毒有害物质的控制和管理。

关键词：卵形鲳鲹网箱养殖 DDTs 残留特征污染源

酶解鸡血球蛋白粉替代鱼粉对卵形鲳鲹(Trachinotus ovatus)幼鱼生长性能、抗氧化能力、免疫力及肠道菌群的影响

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动物营养学报 2023年第3期35卷 1910-1925页

作者：岳茹黄小林谭小红周增太虞为宗志伦黄忠周传朋荀鹏伟黄健彬林黑着河北农业大学海洋学院秦皇岛066003 中国水产科学研究院南海水产研究所农业农村部南海渔业资源开发利用重点实验室广东省渔业生态环境重点实验室广州510300 中国水产科学研究院南海水产研究所深圳试验基地深圳518121 仲恺农业工程学院动物科技学院广州510225 襄阳维恩生物科技有限公司襄阳441200

本试验旨在研究酶解鸡血球蛋白粉替代鱼粉对卵形鲳鲹幼鱼生长性能、血浆生化和免疫指标、血细胞数、肠道形态、肝脏抗氧化能力及肠道菌群的影响。挑选300尾平均体质量为(6.66±0.17)g的健壮的卵形鲳鲹,随机分为4组,每组3个重复,每个重... 详细信息

本试验旨在研究酶解鸡血球蛋白粉替代鱼粉对卵形鲳鲹幼鱼生长性能、血浆生化和免疫指标、血细胞数、肠道形态、肝脏抗氧化能力及肠道菌群的影响。挑选300尾平均体质量为(6.66±0.17)g的健壮的卵形鲳鲹,随机分为4组,每组3个重复,每个重复25尾。对照组(P0组)投喂基础饲料,试验组分别投喂以酶解鸡血球蛋白粉替代基础饲料中1.5%(P1.5组)、3.0%(P3.0组)和4.5%(P4.5组)鱼粉的等氮等脂饲料。试验期8周。结果表明:1)P3.0和P4.5组的终末体质量、增重率、特定生长率、摄食量和蛋白质效率显著低于P0和P1.5组(P0.05)。3)P1.5组的血浆葡萄糖(GLU)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)含量和谷草转氨酶(AST)活性显著低于P0、P3.0和P4.5组(P卵形鲳鲹幼鱼机体免疫力,改善肠道菌群结构,对生长性能、肠道形态和抗氧化能力的作用与鱼粉相似。

关键词：卵形鲳鲹酶解鸡血球蛋白粉生长性能免疫抗氧化能力肠道菌群

低鱼粉饮食中添加半胱氨酸对卵形鲳鲹幼鱼脂质和蛋白质代谢的影响

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南方水产科学 2023年第4期19卷 116-125页

作者：刘佳兴郭华阳朱克诚刘宝锁张楠冼霖张殿昌大连海洋大学水产与生命学院辽宁大连116023 中国水产科学研究院南海水产研究所/农业农村部南海渔业资源开发利用重点实验室广东广州510300 广东省海洋生物种业工程技术研究中心广东广州510300

为研究半胱氨酸对低鱼粉引起的卵形鲳鲹(Trachinotus ovatus)幼鱼[(10.05±0.05)g]代谢紊乱的影响,采用动植物蛋白(鸡粉、大豆浓缩蛋白、发酵豆粕等)部分替代鱼粉制作卵形鲳鲹基础饮食,分别添加0(C0组,对照组)、0.30%(C1组)、0.60%(C2组... 详细信息

为研究半胱氨酸对低鱼粉引起的卵形鲳鲹(Trachinotus ovatus)幼鱼[(10.05±0.05)g]代谢紊乱的影响,采用动植物蛋白(鸡粉、大豆浓缩蛋白、发酵豆粕等)部分替代鱼粉制作卵形鲳鲹基础饮食,分别添加0(C0组,对照组)、0.30%(C1组)、0.60%(C2组)、0.90%(C3组)和1.20%(C4组)半胱氨酸制成5种等氮等脂饲料。56 d的饲养实验结果显示:1)半胱氨酸通过激活S6K/PI3K/TOR/4E-BP1通路,提高卵形鲳鲹蛋白质合成代谢能力。补充0.6%~0.9%半胱氨酸通过上调肌肉核糖体蛋白S6激酶(S6K)、雷帕霉素靶蛋白(TOR)、磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)和4E结合蛋白1(4E-BP1)基因的mRNA水平,增加肌肉和血清总蛋白(Total protein,TP)含量与肌肉粗蛋白含量,降低血氨(Serum ammonia,SA)、肌肉和肝脏尿素氮(Urea nitrogen,UN)含量,促进肌肉蛋白质沉积。2)补充0.6%~0.9%半胱氨酸通过下调肌肉中过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)基因的mRNA水平,降低乙酰辅酶A羧化酶(ACC)、脂肪酸合成酶(FAS)基因的mRNA水平与酶活水平,抑制脂肪合成代谢;同时,上调肌肉中过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)基因的表达水平,使激素敏感性脂肪酶(HSL)和肉毒碱棕榈酰转移酶1(CPT1)基因高表达并伴随酶活提高,进而促进肌肉中脂肪酸β氧化反应,减少蛋白质因分解供能所带来的消耗,促进肌肉中蛋白质沉积。

关键词：卵形鲳鲹半胱氨酸脂代谢蛋白质代谢鱼粉替代

基于卵形鲳鲹基因组重测序的InDel标记挖掘与耐低氧性状关联分析

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南方水产科学 2022年第5期18卷 100-109页

作者：伞利择刘宝锁张楠郭梁郭华阳朱克诚张殿昌河北农业大学海洋学院河北秦皇岛066003 中国水产科学研究院南海水产研究所/农业农村部南海渔业资源开发利用重点实验室广东广州510300 广东省海洋生物种业工程技术研究中心广东广州510300

卵形鲳鲹(Trachinotus ovatus)是高耗氧率的鱼类,低氧极易导致其死亡。筛选其耐低氧性状InDel分子标记并挖掘影响耐低氧性状的功能基因,可为选育具有较强耐低氧能力的卵形鲳鲹提供有益指导。利用全基因组重测序技术分析了卵形鲳鲹基因In... 详细信息

卵形鲳鲹(Trachinotus ovatus)是高耗氧率的鱼类,低氧极易导致其死亡。筛选其耐低氧性状InDel分子标记并挖掘影响耐低氧性状的功能基因,可为选育具有较强耐低氧能力的卵形鲳鲹提供有益指导。利用全基因组重测序技术分析了卵形鲳鲹基因InDel差异,挖掘卵形鲳鲹与耐低氧性状显著关联的InDel位点,并探讨了与耐低氧性状相关的候选基因。结果表明,测序共获得693.48 Gb数据,其中Q30的平均值为90.8%,注释分析发现了共2574178个InDel位点。敏感组50尾卵形鲳鲹所特有的InDel共249395个,其中2209个位于外显子上,在核苷酸切除修复信号通路和细胞黏着分子中存在变异基因。将InDel位点与耐低氧性状关联分析发现,3个InDel位点(InDel 22883061、InDel 24919481和InDel 14451779)接近显著性阈值,注释分析获得了9个候选基因。筛选到的InDel位点对后期分子标记选择育种的选择和鉴定有重要价值,注释到的候选基因为卵形鲳鲹耐低氧的机理研究提供了基础和依据。

关键词：卵形鲳鲹 InDel 重测序耐低氧性状

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卵形鲳鲹SST1基因的克隆与组织表达

西北农业学报 2021年第8期30卷 1130-1141页

作者：黄姻冯鹏霏潘传燕余艳玲武霞杜雪松张永德罗洪林广西壮族自治区水产科学研究院广西水产遗传育种与健康养殖重点实验室南宁530021 广西师范大学生命科学学院广西桂林541006

为了解卵形鲳鲹(Trachinotus ovatus)SST1基因的生物学信息、胚胎发育不同时期的表达水平及其在组织中的表达和分布情况,进而探讨SST1基因可能的生理功能及作用机制。对卵形鲳鯵基因组(登录号:PRJNA574895)中的SST1基因(ID:EVM0001630)... 详细信息

为了解卵形鲳鲹(Trachinotus ovatus)SST1基因的生物学信息、胚胎发育不同时期的表达水平及其在组织中的表达和分布情况,进而探讨SST1基因可能的生理功能及作用机制。对卵形鲳鯵基因组(登录号:PRJNA574895)中的SST1基因(ID:EVM0001630)进行生物信息学分析,并对其在卵形鲳鯵胚胎发育的不同时期及其在幼鱼不同组织中的表达情况进行定量分析。结果表明,卵形鲳鲹的SST1基因全长1155 bp,开放阅读框序列长1104 bp,共编码368个氨基酸,蛋白分子质量为41.42 ku,理论等电点pI为8.47,属于带正电的疏水性蛋白。SST1蛋白无信号肽序列,亚细胞定位主要于细胞质膜,属于膜蛋白,包含17个磷酸化位点,存在7个跨膜结构域,三维结构主体为7段α-螺旋并列扭曲排列成的一柱状结构。序列比对和系统进化树分析显示,卵形鲳鲹与黄尾鰤和高体鰤共聚于一个分支,氨基酸序列同一性分别为98.39%和98.37%。定量PCR分析结果表明,SST1在卵形鲳鲹胚胎发育的前13个时期微量表达,进入初孵仔期表达量迅速升高。SST1在卵形鲳鲹幼鱼不同组织中的表达量差异极显著,其中在脑组织中表达量最高,其次是卵巢和精巢,在背鳍、皮肤、肌肉等其他11个组织中的表达量相对较低。说明SST1在卵形鲳鲹神经内分泌、性腺发育及生殖细胞发生过程中可能发挥着重要作用。

关键词：卵形鲳鲹 SST1 基因克隆组织表达生物信息学分析

复合油和低鱼粉饲料在卵形鲳鲹养殖中的应用效果研究

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海洋渔业 2023年第2期45卷 140-149页

作者：郑钧谢帝芝叶儒锴张海涛王卓铎谢瑞涛李远友华南农业大学海洋学院广州510642 广东恒兴饲料实业股份有限公司农业农村部华南水产与畜禽饲料重点实验室广东湛江524000

为评估课题组前期研发的卵形鲳鲹(Trachinotus ovatus)(又称金鲳)复合油、脂肪粉以及低鱼粉饲料在养殖生产中的应用效果,利用饲料公司的商品料生产设备生产4种等氮(48%)等脂(11%)配合饲料(D1~D4):其中,D1~D3为饲料公司的金鲳商品料配方(... 详细信息

为评估课题组前期研发的卵形鲳鲹(Trachinotus ovatus)(又称金鲳)复合油、脂肪粉以及低鱼粉饲料在养殖生产中的应用效果,利用饲料公司的商品料生产设备生产4种等氮(48%)等脂(11%)配合饲料(D1~D4):其中,D1~D3为饲料公司的金鲳商品料配方(含20%鱼粉),仅添加的脂肪源不同,分别为10%鱼油(D1)、10%卵形鲳鲹复合油(D2)、8%卵形鲳鲹复合油+4%卵形鲳鲹脂肪粉(D3);D4为本课题组研发的低鱼粉饲料(含6.6%鱼粉),脂肪源与D3一致。以此4种饲料于海水池塘网箱(2 m×2 m×1.5 m)中养殖卵形鲳鲹幼鱼,试验鱼体质量(64.75±0.70)g,实验周期8周。结果显示,与D1组相比,D2~D4组鱼的生长性能和形态指标无显著差异(P>0.05),但D2组的饲料系数显著降低(P0.05);鱼肌肉的剪切力、咀嚼性、胶着性等质构特性指标各饲料组无显著差异(P>0.05)。研究表明,与对照组D1(鱼油+20%鱼粉)相比,D2~D4组使用的饲料不仅具有同样的促生长效果,且D3和D4组饲料还可改善鱼体血脂代谢和肝脏抗氧化性能,并提升背肌蛋白质含量,说明卵形鲳鲹复合油和低鱼粉饲料在卵形鲳鲹人工养殖生产中有大规模推广应用的可行性。

关键词：卵形鲳鲹复合油低鱼粉饲料生长性能肌肉品质

卵形鲳鲹基因组调研及其SSR分子标记的开发应用

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南方农业学报 2020年第5期51卷 983-994页

作者：张永德文露婷罗洪林林勇杜雪松余艳玲韦孜娜黄姻广西水产科学研究院/广西水产遗传育种与健康养殖重点实验室南宁530021

[目的]通过高通量测序技术调研卵形鲳鲹基因组数据并开发SSR分子标记,为卵形鲳鲹全基因组测序与组装、种质资源保护利用及良种选育提供技术支撑。[方法]通过Illumina Hiseq 2500测序平台对卵形鲳鲹基因组进行调研,采用K-mer方法对基因... 详细信息

[目的]通过高通量测序技术调研卵形鲳鲹基因组数据并开发SSR分子标记,为卵形鲳鲹全基因组测序与组装、种质资源保护利用及良种选育提供技术支撑。[方法]通过Illumina Hiseq 2500测序平台对卵形鲳鲹基因组进行调研,采用K-mer方法对基因组大小、杂合率、G+C含量及序列重复性等进行分析,从调研数据中分析SSR的分布特征,筛选出多态性SSR位点,并对卵形鲳鲹养殖群体进行遗传多样性分析。[结果]卵形鲳鲹基因组大小为642.68 Mb,杂合率为0.31%,重复序列比例为30.19%,G+C含量为41.45%,提示卵形鲳鲹基因组为简单基因组。基因组初步组装结果显示,Contig总长度为627.23 Mb,N50、N90分别为8.21和1.71 Mb;Scalffold总长度为628.19 Mb,N50、N90分别为10.19和2.04 Mb。从卵形鲳鲹基因组调研数据中共检测出190121条SSR序列,SSR序列分布密度为295.8条/Mb。在所有SSR序列中,以二核苷酸重复基元最多(115557条),占60.78%;其次是三核苷酸重复基元(54839条),占28.84%;六核苷酸重复基元最少(1172条),占0.62%。在二核苷酸重复基元中以TG和AC的重复数较多,分别占二核苷酸重复基元总数的22.99%和21.76%。从合成的50对SSR引物中筛选获得29对多态性SSR引物,采用这29对SSR引物对卵形鲳鲹群体进行遗传多样性分析,结果发现29个SSR位点共检测到98个等位基因,其有效等位基因数(Ne)为1.3998~3.9123(平均为2.6690),期望杂合度(He)为0.2856~0.7444(平均为0.5965),多态信息含量(PIC)为0.2647~0.6968(平均为0.5195);在29个SSR位点中,高度多态性位点(PIC>0.50)有15个,其余14个为中度多态性位点(0.25卵形鲳鲹群体遗传多样性较丰富。[结论]卵形鲳鲹基因组为简单基因组,利用基因组调研数据可实现SSR分子标记大规模开发,且新开发的SSR分子标记可用于卵形鲳鲹群体遗传多样性分析。

关键词：卵形鲳鲹基因组核苷酸重复基元 SSR分子标记遗传多样性

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卵形鲳鲹DIGIRR基因克隆与表达分析

卵形鲳鲹DIGIRR基因克隆与表达分析

作者：高爽爽广西大学

学位级别：硕士

SIGIRR(Single Ig IL-1R related molecule)是Toll/IL-1R超家族的重要成员,可以与TLRs竞争性结合接头分子,抑制TLRs诱导的炎症反应的过度激活,在调节先天免疫和自身性疾病中起关键作用。DIGIRR(Double Ig IL-1R related molecule)是鱼类特有的SIGIRR同源物,能够负调控IL-1或LPS诱导的炎症反应,在鱼类免疫系统中发挥重要作用。卵形鲳鲹是我国东南沿海地区重要的海水养殖鱼类,受高密度养殖和水质恶化影响,由细菌、病毒和寄生虫感染引起的病害给卵形鲳鲹养殖业造成巨大损失。研究卵形鲳鲹DIGIRR基因的分子特征、免疫应答机制和蛋白功能将为其病害防治和抗病遗传育种提供新思路和新策略。本研究鉴定了卵形鲳鲹DIGIRR(TroDIGIRR)基因,展开其序列结构特征、正常组织表达以及免疫应答规律、亚细胞定位、探究互作分子和多克隆抗体制备的研究。主要获得以下成果:1、TroDIGIRR基因的cDNA全长为2167 bp;ORF为1572 bp,推定编码523个氨基酸。蛋白结构分析显示,TroDIGIRR具有一个信号肽、两个Ig结构域、一个跨膜区和一个TIR结构域。同源性分析表明,TroDIGIRR氨基酸序列与鱼类DIGIRR的同源性最高(68.5%-86.3%),与鱼类SIGIRR同源性为54.1%-68.5%;TroDIGIRR的Ig结构域和TIR结构域氨基酸序列与其他鱼类DIGIRR相应序列的同源性分别为57.3%-87.6%和76.2%-92.5%。进化分析显示,TroDIGIRR与其他鱼类DIGIRR聚为一支。以上分析表明,TroDIGIRR是脊椎动物DIGIRR的类似物,在进化过程中高度保守。2、qPCR检测健康卵形鲳鲹DIGIRR基因的表达分布。结果表明,TroDIGIRR在所检组织(脑、鳃、皮肤、肌肉、肠道、心脏、肝脏、脾脏和头肾)中呈组成型分布,在肠道表达量最高,肝脏、头肾和脾脏次之,在心脏中表达最低,这表明其参与机体各种生命活动。3、LPS、poly I:C和溶藻弧菌刺激后,TroDIGIRR在免疫组织中的表达变化为:(1)LPS刺激后,与对照组相比头肾、肝脏、肠道和鳃TroDIGIRR的表达水平在6 h显著下调,在12 h和24 h均显著上调(P卵形鲳鲹DIGIRR蛋白主要分布在细胞质中。6、构建真核重组质粒,共转染HEK-293T细胞48 h后提取细胞总蛋白,利用免疫共沉淀(Co-IP)与Western blot技术,探究TroDIGIRR与TroMy D88和TroTRIF蛋白互作关系。结果显示,TroDIGIRR能与TroMy D88相互作用,而与TroTRIF不互作。

关键词：卵形鲳鲹 DIGIRR 表达分析多克隆抗体亚细胞定位 Co-IP

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卵形鲳鲹肾脏的显微和超微结构观察

海洋渔业 2015年第5期37卷 434-441页

作者：区又君李加儿蔡文超农业部南海渔业资源开发利用重点实验室中国水产科学研究院南海水产研究所广州510300

利用石蜡组织切片和透射电镜技术对卵形鲳鲹(Trachinotus ovatus)肾脏进行显微和超微结构观察研究。结果显示,根据卵形鲳鲹肾小管上皮细胞的结构特点,将其划分为颈段、第一近曲小管、第二近曲小管、远曲小管和集合小管5个部分。卵形鲳... 详细信息

利用石蜡组织切片和透射电镜技术对卵形鲳鲹(Trachinotus ovatus)肾脏进行显微和超微结构观察研究。结果显示,根据卵形鲳鲹肾小管上皮细胞的结构特点,将其划分为颈段、第一近曲小管、第二近曲小管、远曲小管和集合小管5个部分。卵形鲳鲹肾小体长径平均70μm,短径平均40μm;比淡水鱼种类的肾小体直径要小。肾小管中第一近曲小管的上皮细胞游离端具有丰富的微绒毛,并含有丰富的线粒体,应为重吸收的主要场所。而第二近曲小管上皮细胞游离端微绒毛较少,远曲小管和集合管的内壁均没有微绒毛,但三者均可见有较多的线粒体,表明它们仍具有一定的重吸收功能。

关键词：卵形鲳鲹肾脏显微结构超微结构