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单纯疱疹病毒1型与阿尔茨海默病的研究进展

中华微生物学和免疫学杂志 2021年第2期41卷 149-153页

作者：高杨李雪琦李琦涵中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室昆明650118

单纯疱疹病毒1型(herpes simplex virus type 1,HSV-1)感染常引起口唇疱疹,但近年来其引发的生殖器疱疹越来越多,且与阿尔茨海默病等神经系统疾病的发生密切相关。阿尔茨海默病(Alzheimer disease,AD)是一种慢性进行性的中枢神经系统变... 详细信息

单纯疱疹病毒1型(herpes simplex virus type 1,HSV-1)感染常引起口唇疱疹,但近年来其引发的生殖器疱疹越来越多,且与阿尔茨海默病等神经系统疾病的发生密切相关。阿尔茨海默病(Alzheimer disease,AD)是一种慢性进行性的中枢神经系统变性病,其发病机制尚未完全阐明,目前也缺乏能够明确改善该疾病的药物。关于AD的HSV-1致病假说由来已久,但一直没有确切的证据证明两者之间的联系,本文将对HSV-1导致AD发病机制的研究进展进行简单综述。

关键词：单纯疱疹病毒1型阿尔茨海默病 β淀粉样蛋白 tau蛋白

单纯疱疹病毒1型引起的发热出疹性疾病需要与手足口病进行鉴别

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病毒学报 2013年第4期29卷 415-420页

作者：祝双利刘建锋孙强李静李晓嫘张勇陈瑛温小云严冬梅黄国虹张宝敏张波安洪秋李慧许文波中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所世界卫生组织西太平洋区脊髓灰质炎参比实验室北京102206 甘肃省疾病预防控制中心兰州730000

对2008年在甘肃省发生的一起疑似手足口病(HFMD)的发热出疹性疾病的流行进行病原体的实验室检测,明确引起这起传染病流行的病原体。从4名发热出疹患者采集的8份临床标本中(每个患者采集咽拭子和疱疹液标本),首先将临床标本接种到RD和HE... 详细信息

对2008年在甘肃省发生的一起疑似手足口病(HFMD)的发热出疹性疾病的流行进行病原体的实验室检测,明确引起这起传染病流行的病原体。从4名发热出疹患者采集的8份临床标本中(每个患者采集咽拭子和疱疹液标本),首先将临床标本接种到RD和HEp-2细胞上进行病毒分离,对病毒分离阳性的标本提取病毒核酸,然后使用荧光定量-逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)进行人肠道病毒(HEV)核酸的检测。对HEV检测结果阴性的标本采用序列非依赖的单引物扩增技术(SISPA)进行"未知病原体"的鉴定。分离到的6株病毒均鉴定为单纯疱疹病毒I型(HSV-1),结合分析这起流行中患者的临床表现、流行病学调查结果以及实验室检测结果,表明HSV-1是引起这起发热出疹性疾病流行的病原体。6株HSV-1的gG区核苷酸和氨基酸水平上差异都较小,同源性分别高达98.8%和97.9%,说明这起疫情是由同一个病毒传播链引起的。HSV-1等病毒引起的发热出疹性疾病需要与HFMD进行鉴别诊断,由于仅从临床症状和流行病学资料上判断引起发热出疹性疾病的病原体是非常困难的,因此,必须依赖于实验室的诊断。

关键词：发热出疹性疾病手足口病序列非依赖的单引物扩增技术单纯疱疹病毒1型 A基因型

单纯疱疹病毒1型感染致Mollaret脑膜炎继发癫痫发作:1例报道并文献综述

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临床医学进展 2023年第12期13卷 18757-18762页

作者：赵燕红王澜静刘丽君邢天丽滕继军青岛大学附属医院神经内科山东青岛青岛大学医学院山东青岛首都医科大学宣武医院神经内科北京

目的:报告1例单纯疱疹病毒1型(Herpes simplex virus type 1, HSV-1)感染致Mollaret脑膜炎(Mollaret’s meningitis)继发癫痫发作的病例,旨在提高临床医生对该病的认识。方法:回顾性分析我院确诊的1例Mollaret脑膜炎患者的临床资料,并... 详细信息

目的:报告1例单纯疱疹病毒1型(Herpes simplex virus type 1, HSV-1)感染致Mollaret脑膜炎(Mollaret’s meningitis)继发癫痫发作的病例,旨在提高临床医生对该病的认识。方法:回顾性分析我院确诊的1例Mollaret脑膜炎患者的临床资料,并结合相关文献进行总结。结果:患者临床以反复发热伴头疼,及继发癫痫发作为特点,脑脊液二代测序(next-generation sequencing, NGS)检查发现HSV-1核酸序列阳性,诊断为Mollaret脑膜炎,经抗病毒及对症治疗1周后症状完全缓解。结论:Mollaret脑膜炎是临床少见疾病,由HSV-1感染更是少见,易误诊、漏诊,应提高早期识别率,减少不必要的检查及治疗。

关键词： Mollaret脑膜炎良性复发性无菌性脑膜炎单纯疱疹病毒1型癫痫

单纯疱疹病毒1型糖蛋白gD的表达纯化及多克隆抗体的制备

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中国病原生物学杂志 2021年第1期16卷 6-11页

作者：邢效瑞周正丽信彩岩杨闽楠西南医科大学口腔医学研究所四川泸州646000 西南医科大学基础医学院

目的表达及纯化单纯疱疹病毒1型(Herpes simplex virus type 1,HSV-1)糖蛋白D(glycoprotein D,gD)并制备多克隆抗体。方法双酶切pcDNA 3.1-HSV1-gD和pFastBacTM I质粒,gD基因克隆到pFastBacTM I载体,连接产物转化E.coli DH10Bac感受态细胞并鉴定重组杆状病毒质粒Bacmid-gD。将构建正确的重组杆粒转染Sf9细胞包装杆状病毒。杆状病毒经传代扩增后,诱导重组gD蛋白的表达,使用Ni-NTA亲和层析及凝胶过滤层析纯化重组gD蛋白,进行15%SDS-PAGE电泳鉴定并采用肽指纹图谱分析纯化的gD蛋白。将纯化的gD蛋白进行热稳定性试验检测其在不同缓冲液条件下的稳定性。用重组gD蛋白免疫小鼠,利用ELISA法检测血清抗体滴度。结果成功构建重组质粒pFastBacTM I-gD,转化E.coli DH10Bac感受态细胞后,经蓝白斑筛选鉴定重组杆状病毒质粒Bacmid-gD,鉴定正确的重组质粒感染Sf9细胞,包装出重组杆状病毒,获得滴度为8×108 pfu/ml的P3代杆状病毒。重组杆状病毒再次感染Sf9细胞能够表达高纯度可溶性的重组gD蛋白。不同缓冲液条件下重组gD蛋白稳定性良好。用gD蛋白免疫小鼠,获得ELISA效价为1×105的多克隆抗体。结论成功构建重组杆状病毒质粒Bacmid-gD,表达的HSV-1 gD蛋白稳定及免疫原性良好,制备的抗gD蛋白多克隆抗体滴度高,为HSV-1的亚单位疫苗的制备鉴定了基础。

关键词：单纯疱疹病毒1型 gD糖蛋白可溶性表达及纯化多克隆抗体

单纯疱疹病毒1型US11蛋白结合DNA甲基转移酶的作用研究3A

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实用医学杂志 2019年第1期35卷 56-60页

作者：钟霞潘建华童坚海口市人民医院检验科海口570208 海南医学院附属医院外科海口570102

目的通过免疫共沉淀联合质谱分析筛查与单纯疱疹病毒1型(HSV-1)中US11蛋白存在潜在相互作用的宿主蛋白。方法使用荧光标记的HSV-1病毒感染人成纤维细胞(HFF),通过免疫共沉淀(IP)方法对US11及其相互作用蛋白进行提取和纯化,并与质谱(MS)... 详细信息

目的通过免疫共沉淀联合质谱分析筛查与单纯疱疹病毒1型(HSV-1)中US11蛋白存在潜在相互作用的宿主蛋白。方法使用荧光标记的HSV-1病毒感染人成纤维细胞(HFF),通过免疫共沉淀(IP)方法对US11及其相互作用蛋白进行提取和纯化,并与质谱(MS)联用来鉴定相关蛋白。结果利用IP-MS分析技术成功筛选出7个与US11存在潜在相互作用宿主蛋白,其中DNA甲基转移酶3A(DNMT3A)被定性为一种新的US11结合蛋白。结论 HSV-1病毒US11蛋白与哺乳动物DNA甲基转移酶机制的功能关联,DNMT3A是HSV-1感染所需的有效宿主因子。

关键词：免疫共沉淀质谱单纯疱疹病毒1型 US11蛋白 DNA甲基转移酶3A

单纯疱疹病毒1型(HSV-1)糖蛋白B基因疫苗对HSV-1原发及潜伏感染的抑制作用

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中国生物制品学杂志 2015年第1期28卷 17-20页

作者：孟祥俊苏云大连大学附属中山医院辽宁大连116001

目的观察单纯疱疹病毒1型（herpes simplex virus-1,HSV-1）糖蛋白B基因疫苗（pg B）在防治HSV-1原发及潜伏感染的作用。方法将BALB/c小鼠随机分为4组：A组（实验组,注射含质粒pg B的PBS）、B组（阳性对照组,注射灭活的HSV-1病毒液）、... 详细信息

目的观察单纯疱疹病毒1型（herpes simplex virus-1,HSV-1）糖蛋白B基因疫苗（pg B）在防治HSV-1原发及潜伏感染的作用。方法将BALB/c小鼠随机分为4组：A组（实验组,注射含质粒pg B的PBS）、B组（阳性对照组,注射灭活的HSV-1病毒液）、C组（载体对照组,注射含质粒pc DNA3的PBS）和D组（空白对照组,注射PBS）。各组小鼠均于双侧股四头肌多点注射,共免疫3次,间隔3周。于末次免疫3周后行角膜划痕接种HSV-1。术后1～14、21和28 d行角膜荧光素染色,在裂隙灯显微镜下观察角膜炎病变形成情况。角膜接种病毒第30天,处死全部小鼠,取三叉神经节,接种Vero细胞,观察病毒潜伏感染形成情况。结果 A组和B组小鼠接种HSV-1后仅有轻度角膜上皮炎发生,且6 d内全部愈合,组间比较差异无统计学意义（P〉0.05）;C组和D组小鼠接种后第2天角膜上皮炎达到高峰,7 d后炎症慢慢消失,与A组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。A组和B组小鼠接种后未发生角膜基质炎,且无1例死亡;C组和D组小鼠在接种后第5天出现炎症反应,并逐渐加重,接种后11～14 d角膜基质炎达到高峰,在接种后第30天有30%小鼠死亡。Vero细胞检测病毒潜伏感染,A组和B组未发生细胞病变,而C组和D组第5天发生细胞病变。结论 pg B能有效预防实验小鼠HSV-1原发感染,并抑制潜伏感染的形成。

关键词：单纯疱疹病毒1型糖蛋白B 基因疫苗原发感染潜伏感染单纯疱疹病毒性角膜炎

单纯疱疹病毒1型DNA聚合酶辅助亚基UL42的研究进展

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微生物与感染 2021年第6期16卷 409-416页

作者：张云帆陈炼凯张蕊中国农业大学动物医学院北京100193

单纯疱疹病毒1型(Herpes simplex virus type 1,HSV-1)UL42作为病毒编码的DNA聚合酶辅助亚基之一,是一种多功能蛋白,其在催化和调节病毒在细胞核内的有效复制发挥了重要的作用。已知UL42能提高DNA聚合酶催化亚基UL30的持续合成能力,激... 详细信息

单纯疱疹病毒1型(Herpes simplex virus type 1,HSV-1)UL42作为病毒编码的DNA聚合酶辅助亚基之一,是一种多功能蛋白,其在催化和调节病毒在细胞核内的有效复制发挥了重要的作用。已知UL42能提高DNA聚合酶催化亚基UL30的持续合成能力,激活病毒DNA聚合酶活性;介导DNA聚合酶的入核;与DNA模板链结合,提高病毒复制的保真度,以及含有抑制DNA聚合酶活性的肽段,提示其在病毒复制过程中也可能具有负调控作用。近期亦有报道显示,UL42能够阻断肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)激活的核转录因子(nuclear factor kappa-B,NF-κB)信号通路以及干扰素调控因子3(interferon regulatory factor 3,IRF-3)的功能,提示其在病毒逃逸宿主天然免疫反应中发挥了一定的功能,但具体的作用机制尚不明确。本文对目前国内外HSV-1 UL42的结构特点、主要功能、作用机制及其在抗病毒药物研发中的研究进展进行综述,为后续揭示病毒致病机制和抗病毒药物的研发提供参考。

关键词：单纯疱疹病毒1型 DNA聚合酶 UL42蛋白

单纯疱疹病毒1型糖蛋白D主要抗原表位区的表达、纯化及鉴定

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基础医学与临床 2013年第3期33卷 350-355页

作者：刘红刘宾和骁赵晓涛北京大学人民医院检验科北京100044 北京大学工学院生物医学工程系北京100871

目的原核表达单纯疱疹病毒1型(HSV-1)糖蛋白D(gD)主要抗原表位区,纯化融合表达蛋白并对其进行鉴定。方法用Lasergene7.0中Protean软件对HSV-1 gD氨基酸序列进行抗原表位预测和分析,筛选出gD主要抗原表位区(gD MED),人工合成该区域cDNA序... 详细信息

目的原核表达单纯疱疹病毒1型(HSV-1)糖蛋白D(gD)主要抗原表位区,纯化融合表达蛋白并对其进行鉴定。方法用Lasergene7.0中Protean软件对HSV-1 gD氨基酸序列进行抗原表位预测和分析,筛选出gD主要抗原表位区(gD MED),人工合成该区域cDNA序列,构建原核表达载体pET-GST-gD MED;将重组质粒转化大肠杆菌(E.coli)BL21(DE3)pLysS,用异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导表达,通过GST.Bind纯化试剂盒对gDMED融合蛋白进行纯化;Western blot对gD MED融合蛋白的免疫活性进行分析。结果 HSV-1 gD在266～394区域富含抗原表位,人工合成了该区域的cDNA序列,并成功构建了原核表达载体pET-GST-gD MED;gD MED融合蛋白主要以可溶形式表达,分子质量约为45 ku,纯度能达95%;Western blot结果显示,gD MED融合蛋白能与感染HSV-1患者的血清发生特异结合。结论成功表达和纯化了具有良好抗原性的HSV-1 gD MED融合蛋白,为HSV免疫诊断试剂盒和基因工程疫苗的研制提供了依据。

关键词：单纯疱疹病毒1型糖蛋白D 主要抗原表位区原核表达

单纯疱疹病毒1型感染神经胶质细胞的代谢组学研究

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中国组织化学与细胞化学杂志 2017年第2期26卷 134-141页

作者：马丽华杨宏静徐晓艳石中全邓榕重庆三峡医药高等专科学校基础医学部重庆404120 重庆医科大学神经科学研究中心重庆400016 重庆三峡中心医院神经内科重庆404120

目的研究单纯疱疹病毒1型(HSV-1)对人类少突胶质细胞(OL细胞)代谢的影响,从而探讨HSV-1感染的分子机制。方法将OL细胞随机分为两组,一组为感染组,感染HSV-1,一组为正常对照组,不感染HSV-1,运用核磁共振氢谱(~1H NMR)检测二组细胞培养液... 详细信息

目的研究单纯疱疹病毒1型(HSV-1)对人类少突胶质细胞(OL细胞)代谢的影响,从而探讨HSV-1感染的分子机制。方法将OL细胞随机分为两组,一组为感染组,感染HSV-1,一组为正常对照组,不感染HSV-1,运用核磁共振氢谱(~1H NMR)检测二组细胞培养液水相代谢产物,最后由偏最小二乘法-判别分析(PLS-DA)对数据进行分析。结果感染组与正常对照组细胞培养液水相代谢物的组成有显著差异:被HSV-1感染的OL细胞的培养液中,亮氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺增多,丙氨酸、甘氨酸、组氨酸、异亮氨酸、乳酸减少。结论 HSV-1感染改变OL细胞的氨基酸代谢,HSV-1可能通过扰乱宿主细胞的代谢路径,促进自己的繁殖,并影响神经系统的功能活动。

关键词：单纯疱疹病毒1型代谢组学核磁共振氢谱神经胶质细胞