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植物杂志 1991年第3期18卷 17-18页

作者：何强泰南京师范大学生物系

平菇单孢杂交是利用不同优良品种的单孢菌丝相互配接,选取杂种第一代[E]的杂种优势。单孢菌丝即指一个担孢子形成的菌丝体。不同遗传性状的单孢菌丝配接,可以从中选育兼具双亲优点和较强杂交优势的优良杂交组合。

关键词：平菇单孢杂交育种育种

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采用同核体单孢杂交育种技术选育双孢蘑菇

食用菌学报 2011年第3期18卷 17-21页

作者：李冠喜华国栋王多明魏良志连云港市农业科学院江苏连云港222006 南京林业大学森林资源与环境学院江苏南京210037 连云港市海州区新坝镇农业技术推广中心江苏连云港222001

采用同核体单孢杂交育种技术,以低温高产的双1菌株和高温低产的双5菌株为亲本,选育双孢蘑菇优良新品种。通过担孢子分离和同核体的鉴别,获得同核体菌株共20个,同核体间配对杂交组合99个,获得10个杂交异核体菌株;经过菇房、出菇地棚栽培... 详细信息

采用同核体单孢杂交育种技术,以低温高产的双1菌株和高温低产的双5菌株为亲本,选育双孢蘑菇优良新品种。通过担孢子分离和同核体的鉴别,获得同核体菌株共20个,同核体间配对杂交组合99个,获得10个杂交异核体菌株;经过菇房、出菇地棚栽培和出菇大棚生产性试验,筛选出高产优质杂交菌株Z1。

关键词：双孢蘑菇单孢杂交育种杂交

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双孢蘑菇单孢杂交育种及其遗传分析

双孢蘑菇单孢杂交育种及其遗传分析

作者：弋淮四川农业大学

学位级别：硕士

双孢蘑菇是我国主要栽培食用菌之一,名列第三位,是我国传统的出口产品。随着双孢蘑菇产业的快速发展,生产上迫切需求新的双孢蘑菇品种替代已使用多年的现有品种。育种工作中寻找早期快速鉴别杂交新菌株的预测方法和手段,以有效减少出菇... 详细信息

双孢蘑菇是我国主要栽培食用菌之一,名列第三位,是我国传统的出口产品。随着双孢蘑菇产业的快速发展,生产上迫切需求新的双孢蘑菇品种替代已使用多年的现有品种。育种工作中寻找早期快速鉴别杂交新菌株的预测方法和手段,以有效减少出菇环节的工作量、降低育种成本和提高育种效率,成为育种工作者的探索热点和重点课题。近年来,随着分子生物学的发展,各种分子标记技术开也始应用在杂交新菌株的鉴定上,提高了育种效率。本研究是利用单孢杂交技术选育双孢蘑菇新品种,亲本菌株采用双孢蘑菇F56菌株、As2796和浙农1号菌株。获得同核体菌株41个,配对杂交组合420个,得到11个杂交异核体菌株。本研究采用ISSR分子标记对11个杂交菌株和亲本菌株进行分析。试验筛选出了10个扩增谱带清晰、多态性好的ISSR引物,共扩增出40条清晰易辨的多态性谱带,使用NTSYSpc2.1生物软件进行聚类分析,构建系统树。聚类分析结果表明,14个供试菌株遗传相似系数变异范围为0.6700～1.000,在相似系数0.8140时,14个菌株聚为4类。AG95与F56相似系数为1,被证明不是杂交新菌株。ISSR分子标记结果表明,除AG95外其余10个菌株均为杂交新菌株,杂交新菌株与亲本菌株遗传差异较大。将杂交菌株进行出菇试验,AG97被证明是一个优良的杂交菌株。本研究对杂交菌株AG97进行单孢孢子分离和组织分离,筛选了40个单孢菌株即F2代和2个组织分离的菌株。将43菌株与亲本As2796和F56进行遗传分析,包括ISSR分子标记、菌落形态与生长速度测定和出菇试验。ISSR分子标记结果表明,45个菌株遗传相似系数变异范围为0.4250～1.0000。AG97与组织分离的菌株AG97-1和AG97-3的相似系数最大,为1.0000,表明组织分离可较好的保持杂交菌株的遗传性状。F2代单孢菌株遗传相似系数变异范围为0.5250～0.9000,说明单孢菌株在DNA水平上具有比较显著的遗传变异,显示出丰富的遗传多样性。出菇试验结果表明,产量高于杂交菌株AG97的单孢菌株有AG975、AG9721、AG9722、AG9718和AG9717;单孢菌株子实体形态与AG97没有明显的差异。这些结果初步表明,从杂交F2代单孢菌株中,能够筛选到质量和产量都比较优良的新菌株。本研究对杂交菌株F2代菌株AG9710进行单孢分离,筛选了10个单孢菌株即F3代。将F3代菌株与AG9710、AG97以及亲本As2796和F56进行ISSR分子标记。结果表明,14个供试菌株遗传相似系数变异范围为0.5897～0.9231。F3代之间的遗传差距较大,同时F3代与杂交菌株AG97和亲本菌株的遗传差距增大。利用ISSR分子标记不仅可以揭示双孢蘑菇菌株之间的遗传关系,也可以为优良杂交菌株的预测和初筛提供判断依据,也为利用ISSR分子标记的方法辅助常规杂交育种提供了新的途径。

关键词：双孢蘑菇单孢杂交育种遗传分析 ISSR分子标记

基于交配型基因的蛹虫草单孢菌株分离与杂交育种研究

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基于交配型基因的蛹虫草单孢菌株分离与杂交育种研究

作者：李小凤北京农学院

学位级别：硕士

蛹虫草(Cordyceps militaris)是一种食药用菌,菌种退化导致蛹虫草子实体产量降低、活力下降,是制约蛹虫草栽培的最突出问题之一。蛹虫草是异宗配合真菌,存在两类不同源的交配型MAT1-1和MAT1-2。本研究以采集并分离的蛹虫草子实体为材料... 详细信息

蛹虫草(Cordyceps militaris)是一种食药用菌,菌种退化导致蛹虫草子实体产量降低、活力下降,是制约蛹虫草栽培的最突出问题之一。蛹虫草是异宗配合真菌,存在两类不同源的交配型MAT1-1和MAT1-2。本研究以采集并分离的蛹虫草子实体为材料,开展菌株分离与交配型鉴定、单孢分离与鉴定、菌丝培养条件比较、基于交配型基因继代培养退化、单孢杂交育种实验、杂交子代交配型基因表达分析、虫草素关键酶基因克隆与表达分析等研究,为选育性状优良、遗传稳定的蛹虫草菌株提供理论依据,具体内容如下:1.经形态与ITS鉴定,确定CM1901、YNCC04菌株为蛹虫草。经交配型基因鉴定,CM1901菌株为含有MAT1-1、MAT1-2的双交配型菌株,YNCC04菌株为仅含有MAT1-1的单交配型菌株。2.以蛹虫草CM1901菌株为材料,获得了102株子囊孢子单孢菌株。测定单孢菌株交配型基因,结果显示子囊孢子菌株交配型存在3种类型,包括仅含MAT1-1、仅含MAT1-2的单交配型和同时含有MAT1-1和MAT1-2的亲本型,数量分别为57、24和21株,MAT1-1:MAT1-2为78:45。基于单因素培养条件实验,亲本菌株与不同交配型单孢菌株表现出了不同营养需求。3.基于q PCR的继代培养退化研究结果表明,MAT1-1在仅含MAT1-1、亲本型单孢菌株和亲本菌株中表达均相对稳定;MAT1-2仅在MAT1-2单孢菌株中表达相对稳定,而在亲本型单孢菌株和亲本菌株中,随继代培养的进行,表达量迅速下降直至缺失。4.利用性状优良的单交配型菌株各3株、两两杂交(共9组),3种单孢型菌株各3个及亲本(共10组)为对照组,进行蛹虫草杂交出菇实验。结果显示:CM1901亲本可以在培养基中产生带有成熟子囊壳的子实体,但其鲜重为5.77 g/瓶,表现出菌株退化现象。在9个杂交组合中,7个出草,出草率为78%,优秀率为100%,产量范围在6.37-18.00 g/瓶;其中仅含MAT1-1的CMSS02菌株参与的杂交组合平均产量最高,为14.79 g/瓶,是亲本菌株的2.5倍;仅含MAT1-2的CMSS30菌株参与的杂交组合(除CMSS102×CMSS30)平均产量最高,为15.10 g/瓶,是亲本菌株的2.6倍。在9株单孢菌株中,出菇率为66.6%,优秀率为11.1%,产量范围在5.23-18.00 g/瓶;其中CMSS30产量最高,为19.17 g/瓶,是亲本菌株的3.3倍,有子囊壳,但子实体颜色发白,直径较细;其次是CMSS07,为17.23 g/瓶,是亲本菌株的2.9倍,但无成熟的子囊壳。综合各性状说明,基因不同交配型的单孢杂交可以提高蛹虫草子实体的性状和产量。5.子实体交配型基因表达结果显示,与继代培养的菌丝体相比较,交配型基因表达有明显的的差异,MAT1-1相对表达较低,MAT1-2相对于MAT1-1表达量较高。6.腺嘌呤磷酸核糖基转移酶(AMI)、IMP脱氢酶(Imp)、GMP合成酶(Gmp)报道是虫草素合成关键酶基因。q PCR结果表明,AMI、IMP都有较高的相对表达量,Gmp在各菌株中低表达。

关键词：蛹虫草退化交配型基因单孢杂交育种虫草素

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灵芝杂交育种及栽培技术

湖南农业科学 2022年第12期 7-10页

作者：吴芳王小艳王春晖李文得姜性坚湖南省食用菌研究所湖南长沙410013

为丰富湖湘地区栽培灵芝种质资源,开发地方气候适宜栽培品种,研究以赤芝和中华灵芝为亲本,采用单孢杂交育种方式,获得了39个杂交菌株;随后,通过拮抗试验挑选出15个与亲本具有明显拮抗作用的菌株;经生物学特性比较、出菇试验及杂交菌株... 详细信息

为丰富湖湘地区栽培灵芝种质资源,开发地方气候适宜栽培品种,研究以赤芝和中华灵芝为亲本,采用单孢杂交育种方式,获得了39个杂交菌株;随后,通过拮抗试验挑选出15个与亲本具有明显拮抗作用的菌株;经生物学特性比较、出菇试验及杂交菌株分子鉴定,最终筛选出生物学特性与产量较优的GH07和GH09杂交菌株;并从菌袋制作与培养、开袋催蕾、出菇期管理3个方面总结了杂交菌株的栽培技术。总的来看,GH07和GH09这2个杂交菌株具有菌柄较短、正品率高、生物转化率高、产孢量高等特点,具有良好的市场应用与开发潜力,能够为地方灵芝种质资源提供新的选择。

关键词：灵芝单孢杂交育种品种选育栽培技术

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黑色支系羊肚菌高产菌株选育

北方园艺 2022年第1期 116-121页

作者：左杰孟宪鹏徐力吕琪羽苏斌姜淑霞山东农业大学植物保护学院山东省农业微生物重点研究室山东泰安271018 泰安市泰山风景名胜区管理委员会山东泰安271000

以前期人工驯化出的耐高温羊肚菌菌株M840和高产菌株M40为亲本,在单孢分离进行基因测序后确定2种不同交配型菌丝进行单孢杂交,进行羊肚菌高产菌株的选育,以期为羊肚菌优良菌株选育提供参考依据。结果表明:经过出菇验证、遗传稳定性分析... 详细信息

以前期人工驯化出的耐高温羊肚菌菌株M840和高产菌株M40为亲本,在单孢分离进行基因测序后确定2种不同交配型菌丝进行单孢杂交,进行羊肚菌高产菌株的选育,以期为羊肚菌优良菌株选育提供参考依据。结果表明:经过出菇验证、遗传稳定性分析验证、农艺性状优良子实体分离、二代栽培出菇验证,最后获得了产量稳定且高产菌株Z5。

关键词：羊肚菌单孢杂交育种高产菌株

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大球盖菇耐热菌株选育及其耐热机制的研究

大球盖菇耐热菌株选育及其耐热机制的研究

作者：任纪帆山东农业大学

学位级别：硕士

大球盖菇(Stropharia rugosoannulata)味美色优,具有较高食药用价值,近年来深受市场和消费者青睐,人工栽培面积逐年扩大,产业发展迅速。随着栽培面积不断扩大,限制该产业发展的制约因素日益突显,表现在当栽培料温较长时间超过30℃时,菌... 详细信息

大球盖菇(Stropharia rugosoannulata)味美色优,具有较高食药用价值,近年来深受市场和消费者青睐,人工栽培面积逐年扩大,产业发展迅速。随着栽培面积不断扩大,限制该产业发展的制约因素日益突显,表现在当栽培料温较长时间超过30℃时,菌丝易出现“烧菌”及污染等不良现象;气温超过25℃时,子实体品质变差,易开伞等问题。因此,选育大球盖菇耐高温品种,对拓宽大球盖菇栽培季节,提高其产量和品质具有重要意义;进一步探索大球盖菇耐热菌株的耐热机理对今后的育种工作具有重要科学意义和应用价值。主要研究结果如下:1.大球盖菇单孢杂交育种研究通过单孢杂交育种技术,经过初筛、复筛、拮抗试验、继代培养、SRAP分子标记亲缘关系分析以及出菇试验,最终选育出优质高产的耐高温菌株J8L4,该菌株能在最高料温27℃～34℃、最高气温40℃～47℃连续7d的条件下生长良好,栽培后40d出菇,产量为14.56kg/m,I级菇比例和生物转化率高达66.21%、91.03%,现已申请了发明专利(山农球盖3号,201910546457.5),为产业发展提供优质高产耐高温菌株。2.大球盖菇耐热机制的研究(1)高温胁迫下不同耐热型大球盖菇菌丝体内生理指标的测定以耐热菌株和热敏感菌株为材料,对其高温胁迫不同时间下菌丝体内海藻糖、硫代巴比妥酸反应物(TBARS)含量以及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)、谷胱甘肽还原酶(GR)活性变化进行测定,研究不同热敏感型大球盖菇对高温胁迫的反应。结果显示在高温胁迫0～60h,两菌株的TBARS含量变化趋势为先上升后下降,热敏感菌株的TBARS含量增幅较大。CAT、GR、POD整体的活性变化呈先升高后下降的趋势,而超氧化物歧化酶在胁迫0～36h之前活性变化不明显,高温胁迫36h后开始持续增加。耐热菌株的四种抗氧化酶活性均高于热敏感菌株,其中CAT活性增幅最大。耐热菌株菌丝胞内海藻糖含量呈先上升后下降的趋势,在高温胁迫36h时海藻糖含量达到最高。热敏感菌株海藻糖积累呈先上升后下降,再上升又下降的趋势,在高温胁迫6h时达到最高。耐热菌株海藻糖含量增幅显著大于热敏感菌株。试验结果表明,在高温胁迫下,菌丝通过调节自身抗氧化酶的活性以及海藻糖的含量来缓解高温带来的氧化损伤,提高自身的抗逆性。(2)高温胁迫下不同耐热型大球盖菇菌株的转录组分析对38℃高温处理0h、24h后的耐热菌株和热敏感菌株进行转录组测序,通过基因表达分析来探讨大球盖菇的高温胁迫应答机制,为相关育种研究提供理论参考依据。GO功能聚类分析结果显示,差异表达基因主要富集在细胞壁、细胞膜、内质网的组分、生物学过程、分子功能以及信息素受体活性等。KEGG功能富集显示,差异基因的富集主要在甘油磷脂代谢、淀粉和蔗糖代谢以及内质网中的蛋白质加工等通路上。其中,编码热激蛋白HSP20、HSP40、HSP70、HSP90,核苷酸交换因子Hsp BP1、伴侣蛋白Gro EL、丙酮酸脱羧酶(PDC)、内质网I型甘露糖苷酶(ERMan I)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)等的基因表达量上调,而编码鞘磷脂磷酸二酯酶1(SMPD1)、海藻糖-6-磷酸酯酶(TPP)等的基因表达量下调,耐热菌株的调动幅度明显高于热敏感菌株,分析上述基因可能与大球盖菇的耐热性有关。同时利用RT-q PCR对相关差异基因的表达进行验证,结果显示相关差异基因的表达量同转录组分析结果一致。

关键词：大球盖菇耐高温机制单孢杂交育种转录组差异表达基因

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鸡腿蘑优良新品种CC007的选育研究

西北农业学报 2002年第3期11卷 109-111页

作者：袁静唐兴芳刘变芳何玉君西北农林科技大学陕西杨凌712100

以 CC0 0 1、CC0 0 2、CC0 0 3、CC0 0 4、CC0 0 5、CC0 0 6为亲本进行单孢杂交 ,纯拮抗试验和品比试验结果表明 ,其中 6个杂交新菌株产量明显高于亲本 ,以 CC0 0 7产量最高 ,生物学效率达 1 0 7.7% ,杂交优势为 6 4 .7g/袋 ,为优良的... 详细信息

以 CC0 0 1、CC0 0 2、CC0 0 3、CC0 0 4、CC0 0 5、CC0 0 6为亲本进行单孢杂交 ,纯拮抗试验和品比试验结果表明 ,其中 6个杂交新菌株产量明显高于亲本 ,以 CC0 0 7产量最高 ,生物学效率达 1 0 7.7% ,杂交优势为 6 4 .7g/袋 ,为优良的鸡腿蘑新品种。

关键词：鸡腿蘑选育 CC007品种单孢杂交育种