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中国药学杂志 2019年第8期54卷 614-619页

作者：刘健肖朝江崔淑君李阳董相姜北大理大学药物研究所药学与化学学院云南大理671000

目的对匙萼金丝桃(Hypericum uralum)化学成分进行分离鉴定;对部分成分的镇痛与β-羟高铁血红素形成抑制活性进行测试。方法利用硅胶、Sephadex LH-20等材料柱色谱和现代波谱技术对匙萼金丝桃体积分数95%乙醇提取物乙酸乙酯部分化学成... 详细信息

目的对匙萼金丝桃(Hypericum uralum)化学成分进行分离鉴定;对部分成分的镇痛与β-羟高铁血红素形成抑制活性进行测试。方法利用硅胶、Sephadex LH-20等材料柱色谱和现代波谱技术对匙萼金丝桃体积分数95%乙醇提取物乙酸乙酯部分化学成分进行分离和结构鉴定;采用小鼠乙酸扭体法、热水甩尾法和β-羟高铁血红素形成抑制实验对部分单体化合物进行生物活性测试。结果从匙萼金丝桃体积分数95%乙醇提取物乙酸乙酯部位中分离得到13个化合物,分别鉴定为(-)-圣草素(1),3,4,5-三羟基(口山)酮(2),1,7-二羟基(口山)酮(3),4-羟基-2,3-二甲氧基(口山)酮(4),toxyloxanthone B(5),1,3,6,7-四羟基酮(6),2,3-二甲氧基(口山)酮(7),1,5,6-三羟基-3-甲氧基(口山)酮(8),hyperielliptone HD(9),3,3',4,4'-四羟基联苯(10),莽草酸(11),槲皮素-3-O-(4″-甲氧基)-α-L-鼠李糖(12)和原花青素A-2(13)。镇痛活性测试结果表明,化合物3和12具有一定的外周镇痛活性;同时,化合物1表现出较强的β-羟高铁血红素形成抑制活性。结论化合物1～13均为首次从该植物中分离得到;匙萼金丝桃镇痛与抗疟活性具有相应物质基础。

关键词：匙萼金丝桃 (-)-圣草素 1,7-二羟基酮镇痛活性 β-羟高铁血红素形成抑制活性抗疟活性

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白花酸藤果与匙萼金丝桃的化学成分与生物活性研究

白花酸藤果与匙萼金丝桃的化学成分与生物活性研究

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作者：刘健大理大学

学位级别：硕士

本论文共分为三章,第一章叙述了白花酸藤果的化学成分及相关的生物活性研究;第二章阐述了匙萼金丝桃化学成分与生物活性研究;第三章综述了酸藤子属植物的研究进展。目的:研究两种药用植物白花酸藤果(Embelia ribes)和匙萼金丝桃(Hyperic... 详细信息

本论文共分为三章,第一章叙述了白花酸藤果的化学成分及相关的生物活性研究;第二章阐述了匙萼金丝桃化学成分与生物活性研究;第三章综述了酸藤子属植物的研究进展。目的:研究两种药用植物白花酸藤果(Embelia ribes)和匙萼金丝桃(Hypericum uralum)的化学成分及生物活性。方法:利用硅胶、大孔树脂D101、葡聚糖凝胶Sephadex LH-20、反相RP-18、MCI树脂等多种层析技术进行分离纯化,运用理化性质和现代波谱技术(NMR、MS、UV)等对纯化得到的单体化合物进行结构鉴定;此外,采用镇痛实验和抗疟实验对相关成分进行活性研究。结果:本实验从白花酸藤果地上部分95%乙醇提取物中共分离得到6个化合物,分别鉴定为:β-谷甾醇(1)、豆甾醇(2)、胡萝卜苷(3)、儿茶素(4)、芦丁(5)、异槲皮素(6)。在小鼠醋酸扭体实验中,白花酸藤果地上部分总提物在1000 mg/kg剂量下的镇痛率为47.78%;乙酸乙酯部位、正丁醇部位和水部位在500 mg/kg剂量下的镇痛率分别为51.00%、51.00%、48.28%;混合物1和2、化合物3、4、5及6在100 mg/kg剂量下镇痛率分别为40.00%、22.89%、55.26%、44.21%、29.74%。在小鼠热水甩尾实验中,混合物1和2、化合物3、4及5在100 mg/kg剂量下的痛阈提高率分别为26.09%、31.71%、8.70%、13.72%。从白花酸藤果地下部分95%乙醇提取物共分离得到8个化合物,分别鉴定为:β-谷甾醇(1’)、豆甾醇(2’)、胡萝卜苷(3’)、芦丁(4’)、(+)-lyoniresinol-3α-O-β-D-glucopyranoside(5’)、儿茶素(6’)、信筒子醌(7’)、2,5-二羟基-3-十三烷基-1,4-苯醌(8’)。?-羟高铁血红素形成抑制活性实验结果表明,化合物3’、4’、6’和7’的活性均较弱;化合物7’在100 mg/kg/day的剂量下体内抗疟实验中的平均抑制率为54.53%,在50 mg/kg剂量下的小鼠醋酸扭体实验中的镇痛率为82.74%,在50 mg/kg剂量下的小鼠热水甩尾实验中的痛阈提高率为134.37%。从匙萼金丝桃全株95%乙醇提取物乙酸乙酯部分初步分离鉴定了19个化合物,分别鉴定为:(-)-圣草素(1)、槲皮素(2),表儿茶素(3)、3,4,5-三羟基酮(4)、1,7-二羟基酮(5)、4-羟基-2,3-二甲氧基酮(6)、toxyloxanthone B(7)、1,3,6,7-四羟基酮(8)、2,3-二甲氧基酮(9)、1,5,6-三羟基-3-甲氧基酮(10)、hyperielliptone HD(11)、3,3’,4,4’-四羟基联苯(12)、莽草酸(13)、胡萝卜苷(14)、豆甾醇(15)、β-谷甾醇(16)、桦木酸(17)、槲皮素-3-O-(4’’-甲氧基)-α-L-鼠李糖(18)、原花青素A-2(19)。从匙萼金丝桃中分离得到的化合物5和18在50 mg/kg剂量下的小鼠醋酸扭体实验中的镇痛率分别为22.56%及50.89%,在50 mg/kg剂量下的小鼠热水甩尾实验中无活性。结论:白花酸藤果地上部分各组分均具有较好的镇痛活性。从白花酸藤果地上部分分离得到的化合物4在小鼠醋酸扭体实验中活性最好;从白花酸藤果地上部分分离得到的混合物1和2、化合物3和5在小鼠热水甩尾实验中表现出一定的镇痛活性。从白花酸藤果地下部分分离得到的化合物3’、4’、6’和7’仅表现出微弱的?-羟高铁血红素形成抑制活性,化合物7’在体内抗疟活性研究实验中表现出较好的活性,同时其在镇痛实验中也表现出较强的活性。从匙萼金丝桃中分离得到的化合物18在50 mg/kg剂量下的小鼠醋酸扭体实验中表现出和200 mg/kg剂量下阳性药相当的活性。

关键词：白花酸藤果匙萼金丝桃化学成分抗疟活性镇痛活性

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匙萼金丝桃化学成分研究

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大理大学学报 2018年第4期3卷 1-4页

作者：刘健肖朝江张盼盼崔淑君李阳姜北大理大学药学与化学学院云南大理671000 大理大学药物研究所云南大理671000

目的:研究匙萼金丝桃的化学成分。方法:采用硅胶、Sephadex LH-20等多种柱层析方法对匙萼金丝桃化学成分进行分离纯化,并运用现代波谱学技术与理化性质等手段对分离的化合物进行结构鉴定。结果:从匙萼金丝桃95%乙醇提取物的乙酸乙酯部... 详细信息

目的:研究匙萼金丝桃的化学成分。方法:采用硅胶、Sephadex LH-20等多种柱层析方法对匙萼金丝桃化学成分进行分离纯化,并运用现代波谱学技术与理化性质等手段对分离的化合物进行结构鉴定。结果:从匙萼金丝桃95%乙醇提取物的乙酸乙酯部位中分离得到6个化合物,分别鉴定为:β-谷甾醇(1)、豆甾醇(2)、胡萝卜苷(3)、桦木酸(4)、槲皮素(5)、表儿茶素(6)。结论:化合物1~6均首次从该植物中分离得到。

关键词：匙萼金丝桃化学成分甾体黄酮萜类

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《中国药学杂志》2019年第54卷关键词索引

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中国药学杂志 2019年第24期54卷 2102-2114页

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抗HUVEC细胞高糖损伤活性物质的筛选及其机制的研究

抗HUVEC细胞高糖损伤活性物质的筛选及其机制的研究

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作者：冯彤彤西南交通大学

学位级别：硕士

持久性的高糖环境对血管内皮细胞的损害是糖尿病并发症的重要机制之一。缓解高糖环境对血管内皮细胞的损伤可以有效防治糖尿病主要并发症。本研究体外建立人脐静脉内皮细胞(HUVEC)高糖损伤模型,试图从匙萼金丝桃(Hypericum uralum Buch.... 详细信息

持久性的高糖环境对血管内皮细胞的损害是糖尿病并发症的重要机制之一。缓解高糖环境对血管内皮细胞的损伤可以有效防治糖尿病主要并发症。本研究体外建立人脐静脉内皮细胞(HUVEC)高糖损伤模型,试图从匙萼金丝桃(Hypericum uralum Buch.-*** ***)和尖萼金丝桃(Hypericum acmosepalum ***)提取物、蜂王浆(Royal jelly,RJ)组分中筛选出抗高糖损伤的活性组分,并进一步对部分活性组分进行抗高糖损伤的机制探究,为进一步研发抗血管内皮细胞损伤的新药奠定一定实验基础。1.高糖损伤筛选模型及阳性对照的建立本实验采用CCK-8法,探究了不同浓度、不同时间的高浓度葡萄糖对HUVEC细胞的抑制作用。探究了两个时间点(24、48 h),比较了五个浓度(22、33、44、55、66 mmol/L)的葡萄糖对HUVEC细胞的抑制作用。结果显示,当葡萄糖浓度为44 mmol/L,孵育时间为48 h时,对HUVEC细胞的抑制率是56%左右,抑制作用较强,故模型组选用葡萄糖浓度为44 mmol/L,孵育时间为48 h。还探究了阿司匹林作为阳性对照的最适浓度,比较了0.01、0.05、0.1、0.5、1、2 mmol/L的阿司匹林修复作用。依据实验结果,将阳性对照的浓度定为0.1 mmol/L的阿司匹林。2.抗HUVEC细胞高糖损伤活性物质的筛选及活性组分EC的确定本实验将利用前期确定的高糖诱导的细胞氧化应激衰老模型以及阿司匹林阳性对照,对匙萼金丝桃(21种组分)、尖萼金丝桃(24种组分)以及蜂王浆(脂溶蛋白、水溶蛋白)共47个组分,进行抗HUVEC细胞高糖损伤活性物质的筛选,筛选浓度为50μg/m L。对于活性好的组分,再分6个浓度梯度(10、20、40、60、80、100μg/m L)进行筛选,并求出半数有效浓度(EC)。结果显示,匙萼金丝桃(Hu系列)2、4、20、55、71、72、78、79、81、82、85、87、93、94、95、97号样品,尖萼金丝桃(Ha系列)10、12、16、17、19、20、21、22、23、27、31、32、33、34、35、36、39号样品以及蜂王浆脂溶蛋白、水溶蛋白,细胞活力明显高于模型组,说明其对高糖损伤的HUVEC细胞有修复作用;Hu55、Hu72、Hu78、Hu81、Hu82、Hu87、Hu93、Hu94、Hu95、Hu97、Ha10、Ha16、Ha17、Ha20、Ha21、Ha23、Ha24、Ha26、Ha31、Ha35、Ha36、Ha39的EC分别是51.622、17.108、35.841、8.549、28.229、12.86、15.958、29.033、5.731、15.717、7.671、36.771、4.144、31.634、22.752、8.541、22.23、10.499、34.097、13.406、27.876、10.446μg/m L。3.四种活性组分抗HUVEC细胞高糖损伤的相关机制探究本部分研究了来自金丝桃属植物,活性最高的Hu95、Ha17以及RJ脂溶蛋白、RJ水溶蛋白四种活性组分的部分作用机制。利用前期建立的损伤模型,再分别加入不同浓度的各活性组分作用于模型细胞,CCK-8法检测活性组分对模型细胞增殖的影响;β-半乳糖苷酶法检测活性样品对模型细胞衰老的影响;酶联免疫吸附法检测活性组分对模型细胞炎症因子TNF-α和IL-4分泌的影响;流式细胞术检测活性组分对模型细胞ROS的分泌的影响;Hoechst33342/PI双染法检测四种活性组分对模型细胞凋亡及坏死的影响;检测四种活性组分对模型细胞SOD分泌的影响。结果显示,一定浓度下的活性组分可以促进模型细胞的增殖、降低β-半乳糖苷酶的染色阳性率、增加SOD的酶活、减少ROS、炎症因子TNF-α和IL-4的分泌、减少细胞凋亡。这表明活性组分的抗高糖损伤的作用可能与增强抗氧化酶-SOD酶活、提高模型细胞清除ROS的能力、影响炎症反应、减少细胞凋亡有关。

关键词：尖萼金丝桃匙萼金丝桃蜂王浆抗高糖损伤筛选氧化炎症凋亡

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