检索结果-南通市图书馆

几丁酶—蛋白酶融合基因的构建与球孢白僵菌毒力的提高

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

几丁酶—蛋白酶融合基因的构建与球孢白僵菌毒力的提高

作者：冯静西南大学

学位级别：硕士

昆虫病原真菌是一类重要的生防真菌，在农林害虫的防治上起着重要的作用。它主要通过机械压力和水解酶的作用来穿透昆虫体壁，Pr1类蛋白酶和几丁质酶在其中起着重要作用。前人的研究表明，超量表达蛋白酶或几丁酶基因可以提高重组菌株... 详细信息

昆虫病原真菌是一类重要的生防真菌，在农林害虫的防治上起着重要的作用。它主要通过机械压力和水解酶的作用来穿透昆虫体壁，Pr1类蛋白酶和几丁质酶在其中起着重要作用。前人的研究表明，超量表达蛋白酶或几丁酶基因可以提高重组菌株的毒力，但目前对于二者在穿透昆虫体壁时是否存在协同作用还不清楚。为了研究蛋白酶和几丁酶在昆虫病原真菌穿透寄主体壁时的相互作用，本文首先用扫描电镜观察了被蛋白酶CDEP-1、几丁酶Bbchit1及二者混合酶液处理过的桃蚜体壁，结果表明，蛋白酶与几丁酶混合液分解寄主体壁的能力更强。进而将球孢白僵菌Pr1类蛋白酶基因CDEP-1分别与几丁酶基因Bbchit1和Machit1融合，分生孢子电击转化法将融合基因导入球孢白僵菌中。Northern blotting和Western blotting结果证明，这些基因均在重组菌株中组成性转录和表达。生物测定结果表明，超量表达CDEP-1、Bbchit1单价基因及二者融合基因CDEP-1：：Bbchit1均能提高重组菌株对桃蚜的毒力，且融合基因重组菌株的毒力提高幅度更大。在孢子浓度为1×10个／ml时，与野生型菌株Bb0062-15相比，超量表达蛋白酶CDEP-1基因重组菌株的致死中时(LT)平均缩短了8.84％;超量表达几丁酶Bbchit1基因重组菌株的LT平均缩短了9.92％;而融合基因CDEP-1：：Bbchit1重组菌株的LT平均缩短了21.12％。接种108h及120h后，融合基因CDEP-1：：Bbchit1重组菌株CDEP-1：：Bbchit1-41的致死中浓度(LC)分别降低了67.42％和60.50％，下降幅度分别为CDEP-1-6和Bbchit1-26 LC之和的2.22(108h)和1.65倍(120h)。表明超量表达融合基因CDEP-1：：Bbchit1能协同提高球孢白僵菌对寄主的毒力。生物测定结果还表明，单独超量表达绿僵菌几丁酶Machit1基因不能提高重组菌株的毒力，但超量表达融合基因CDEP-1：：Machit1的重组菌株却能显著提高球孢白僵菌的毒力。在孢子浓度为1×10个／mL时，超量表达融合基因CDEP-1：：Machit1重组菌株的LT平均缩短了18.07％;在108h及120h时，CDEP-1：：Machit1-37的LC分别比野生型菌株缩短了38.89％(108h)和41.68％(120h)，均低于相应浓度及时间下蛋白酶基因CDEP-1重组菌株的LT及LC。上述结果表明，昆虫病原真菌的蛋白酶和几丁质酶在分解昆虫体壁时，存在协同作用。据我们所知，目前尚无同类报道。

关键词：昆虫病原真菌球孢白僵菌几丁酶蛋白酶基因融合毒力

两种拮抗菌β-1,3-葡聚糖酶和几丁酶的产生及其抑菌的可能机理

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

科学通报 2001年第20期46卷 1713-1717页

作者：范青田世平刘海波徐勇中国科学院植物研究所北京100093

膜醭毕赤酵母（Ｐｉｃｈｉａ　ｍｅｍｂｒａｎｅｆａｃｉｅｎｓ　Ｈａｎｓｅｎ）和季也蒙假丝酵母（Ｃａｎｄｉｄａ　ｇｕｉｌｌｉｅｒｍｏｎｄｉｉ）是两株能有效抑制桃、油桃果实采后软腐病的拮抗菌．研究了拮抗菌的β－１，３－葡聚... 详细信息

膜醭毕赤酵母（Ｐｉｃｈｉａ　ｍｅｍｂｒａｎｅｆａｃｉｅｎｓ　Ｈａｎｓｅｎ）和季也蒙假丝酵母（Ｃａｎｄｉｄａ　ｇｕｉｌｌｉｅｒｍｏｎｄｉｉ）是两株能有效抑制桃、油桃果实采后软腐病的拮抗菌．研究了拮抗菌的β－１，３－葡聚糖和几丁酶活性在ｉｎ　ｖｉｔｒｏ　和ｉｎ　ｖｉｖｏ上的诱导．结果表明，以葡萄糖＋细胞壁制品（ＣＷＰ）作为碳源时在Ｌｉｌｌｙ－Ｂａｒｎｅｔｔ基本培养基中诱导的（　－１，３－葡聚糖活性最高，其中膜醭毕赤酵母和季也蒙假丝酵母的最高值分别达１１４．０　ＳＵ（ｓｐｅｃｉｆｉｃ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｕｎｉｔ，　比活单位）和１０３．２　ＳＵ，而以葡萄糖作为惟一碳源时诱导的β－１，３－葡聚糖活性则最低．在Ｃｚａｐｅｃｋ　基本培养基中，膜醭毕赤酵母诱导的几丁酶（外切及内切几丁酶）活性显著地高于季也蒙假丝酵母，如膜醭毕赤酵母外切几丁酶最大活性达３．１３　ＳＵ，显著地高于季也蒙假丝酵母的最大活性（２．２４　ＳＵ）．酵母菌悬浮液和碳源也能诱导桃果实伤口处β－１，３－葡聚糖和几丁酶的产生．研究表明β－１，３－葡聚糖和几丁酶在抑制病菌时都有一定作用，并可能具有协同效果．

关键词：生物防治酵母菌软腐病 β-1,3-葡聚糖酶几丁酶抑菌机理拮抗菌桃油桃

溃疡病菌对杨树几丁酶、β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶的诱导作用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

植物病理学报 1997年第2期27卷 181-185页

作者：胡景江朱玮西北林学院

杨树溃疡病菌Ｄｏｔｈｉｏｒｅｌａｇｒｅｇａｒｉａ及其菌丝体提取物都能诱导杨树几丁酶、β－Ｎ－乙酰氨基葡萄糖苷酶的积累，但在诱导的速度和强度上，抗病品种和感病品种有明显的差异。抗病品种毛白杨这两种酶不仅积累的速度快，而... 详细信息

杨树溃疡病菌Ｄｏｔｈｉｏｒｅｌａｇｒｅｇａｒｉａ及其菌丝体提取物都能诱导杨树几丁酶、β－Ｎ－乙酰氨基葡萄糖苷酶的积累，但在诱导的速度和强度上，抗病品种和感病品种有明显的差异。抗病品种毛白杨这两种酶不仅积累的速度快，而且幅度也远大于感病品种北京杨。在Ｄ．ｇｒｅｇａｒｉａ感染实验中，毛白杨几丁酶和β－Ｎ－乙酰氨基葡萄糖苷酶活性升高的幅度分别是北京杨的４．７倍和３倍；在菌丝体提取物的诱导实验中，毛白杨这两种酶升高的幅度分别是北京杨的４．５倍和２．７倍。因此可以认为几丁酶和β－Ｎ－乙酰氨基葡萄糖苷酶与杨树对溃疡病的抗性反应有关，是其防卫系统的要素之一。

关键词：杨树几丁酶乙酰氨基葡萄糖苷酶溃疡病

抑制稻瘟病菌生长的几丁酶产生菌的分离和鉴定

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

植物保护学报 1998年第4期25卷 289-294页

作者：王焰玲秦敏周青张义正四川联合大学生物工程系成都610064

采用稻瘟病菌细胞壁富集方法分离到4株几丁质酶产生菌。它们都具有较高的几丁酶活性,且能在培养基上对稻瘟病菌的生长产生明显的抑制作用。经鉴定,确认它们均为革兰氏阴性杆菌,其中菌株DW2为单端极生单鞭毛,好氧,氧化酶反应阳性并能还... 详细信息

采用稻瘟病菌细胞壁富集方法分离到4株几丁质酶产生菌。它们都具有较高的几丁酶活性,且能在培养基上对稻瘟病菌的生长产生明显的抑制作用。经鉴定,确认它们均为革兰氏阴性杆菌,其中菌株DW2为单端极生单鞭毛,好氧,氧化酶反应阳性并能还原硝酸盐,属于假单胞菌属细菌(Pseudomonas spp.);菌株DW1、DW4为两端极生单鞭毛,微好氧,氧化酶反应阳性并能还原硝酸盐,属于弯曲杆菌属细菌(Campylobacter spp.);而菌株DW3的菌落为橙黄色,氧化酶反应为阳性,不还原硝酸盐,菌体单个或成链,无鞭毛,在几丁质半固体培养基上能滑动,属于噬胞菌属细菌(Cytophaga spp.)。

关键词：几丁酶抑菌作用稻瘟病菌产生菌分离

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

高等植物几丁酶研究进展

植物生理学通讯 1989年第1期25卷 8-13页

作者：张世明中国科学院上海植物生理研究所上海200032

几丁醇是一种分解聚N—乙酰胺基葡萄糖分子的糖苷酶,普遍存在于自然界。高等植物中,几丁酶虽然普遍存在,但迄今没有发现底物。因此,高等植物几丁酶的功能是个十分吸引人而又研究不多的问题。本文介绍高等植物几丁酶的分布、酶学性质,基... 详细信息

几丁醇是一种分解聚N—乙酰胺基葡萄糖分子的糖苷酶,普遍存在于自然界。高等植物中,几丁酶虽然普遍存在,但迄今没有发现底物。因此,高等植物几丁酶的功能是个十分吸引人而又研究不多的问题。本文介绍高等植物几丁酶的分布、酶学性质,基因结构和可诱导性等研究结果。并介绍了几丁酶在植物抗真菌病中的作用的研究进展。

关键词：高等植物几丁酶性质

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

植物几丁酶与植物对病虫害的自我防御

北方园艺 1999年第4期 44-45页

作者：韩旭中国农业科学院蔬菜花卉研究所北京市白石桥路30号100081

稻瘟菌诱导的水稻几丁酶、β-1.3-葡聚糖酶活性及分布

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

植物生理学报（0257-4829) 1992年第1期18卷 29-36页

作者：杜良成王钧中国科学院上海植物生理研究所

稻瘟菌(Pyricularia oryzae C.)孢子感染或菌丝培养液处理后,水稻的几丁酶和β-1,3-葡聚糖酶活力被分别诱导提高6～9倍和3～5倍。用亲和层析初步纯化的几丁酶在体外能降解稻瘟菌细胞壁和抑制它的孢子萌发。这两个酶在细胞间隙和细胞内... 详细信息

稻瘟菌(Pyricularia oryzae C.)孢子感染或菌丝培养液处理后,水稻的几丁酶和β-1,3-葡聚糖酶活力被分别诱导提高6～9倍和3～5倍。用亲和层析初步纯化的几丁酶在体外能降解稻瘟菌细胞壁和抑制它的孢子萌发。这两个酶在细胞间隙和细胞内都有分布。

关键词：几丁酶水稻稻瘟菌 β-葡聚糖酶

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

苦瓜几丁酶的纯化及性质

Acta Botanica Sinica 1993年第6期35卷 486-489页

作者：裴炎张正圣夏玉先宋水清西南农业大学农学系重庆630716

几丁酶(EC 3·2·1·14)能将几丁质分解为寡聚N-乙酰胺基葡萄糖或N-乙酰胺基葡萄糖。几丁质是许多真菌细胞壁的主要成分。在高等植物中未发现几丁质的存在,但却广泛存在有几丁酶。近年来的研究表明,植物中的几丁酶在植物对病原真菌侵染... 详细信息

几丁酶(EC 3·2·1·14)能将几丁质分解为寡聚N-乙酰胺基葡萄糖或N-乙酰胺基葡萄糖。几丁质是许多真菌细胞壁的主要成分。在高等植物中未发现几丁质的存在,但却广泛存在有几丁酶。近年来的研究表明,植物中的几丁酶在植物对病原真菌侵染所作出的保卫反应中有重要的作用。植物几丁酶的性质与功能已引起人们的兴趣和重视。苦瓜(Momordica charantia L.)是一种病害很少的蔬菜作物,其几丁酶的纯化及性质研究尚未见报道。为了探讨苦瓜抗病性的蛋白质基础,本文对此进行了研究。

关键词：苦瓜几丁酶提纯

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

扁豆几丁酶的特性和诱导

植物生理学报（0257-4829) 1996年第3期22卷 272-276页

作者：夏玉先裴炎李先碧张林西南农业大学生物技术研究中心

采用再生几丁质亲和层析和两性电解质等电聚焦电泳，纯化了扁豆荚几了酶，其分子量３０ｋＤ，等电点为９．１，主要呈内切酶活性。扁豆荚中不同组织几丁酶比活力有很大差异。在豆荚发育过程中，其酶活性变化呈单峰曲线，而比活力则持续... 详细信息

采用再生几丁质亲和层析和两性电解质等电聚焦电泳，纯化了扁豆荚几了酶，其分子量３０ｋＤ，等电点为９．１，主要呈内切酶活性。扁豆荚中不同组织几丁酶比活力有很大差异。在豆荚发育过程中，其酶活性变化呈单峰曲线，而比活力则持续上升，表明扁豆几丁酶活性变化与发育相关。经ＨｇＣｌ２处理后，扁豆荚壳和种子的几丁酶活性均明显提高。在扁豆荚发育的不同阶段，几丁酶的诱导特性也有明显差异，幼嫩豆荚几丁酶诱导活性的增加更为明显。

关键词：扁豆几丁酶特性诱导