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艾灸通过核转录因子κB信号通路调控海马凋亡相关蛋白表达改善糖尿病认知功能减退大鼠学习记忆能力

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针刺研究 2023年第2期48卷 180-184页

作者：张乐乐袁爱红杨骏查必祥顾光樊吟秋杨钰凇阚文静安徽中医药大学研究生院合肥230038 安徽中医药大学第一附属医院合肥230031

目的:观察艾灸对糖尿病认知减退大鼠海马凋亡相关蛋白、核转录因子κB(NF-κB)的影响,探讨艾灸改善学习记忆的作用机制。方法:SD大鼠随机分为正常组、模型组和艾灸组,每组10只。以高脂高糖饲料联合小剂量链脲佐菌素腹腔注射诱导糖尿病... 详细信息

目的:观察艾灸对糖尿病认知减退大鼠海马凋亡相关蛋白、核转录因子κB(NF-κB)的影响,探讨艾灸改善学习记忆的作用机制。方法:SD大鼠随机分为正常组、模型组和艾灸组,每组10只。以高脂高糖饲料联合小剂量链脲佐菌素腹腔注射诱导糖尿病认知功能减退大鼠模型。艾灸组艾灸“神庭”“百会”及“大椎”,每次20 min,每周6次,治疗4周。检测各组大鼠随机血糖,水迷宫实验测定各组大鼠学习记忆能力,Western blot及实时荧光定量PCR法检测各组大鼠海马B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)和NF-κB p65蛋白及mRNA相对表达量。结果:治疗后,模型组大鼠随机血糖值较正常组明显升高(P蛋白及mRNA表达较正常组明显升高(P蛋白及mRNA表达较正常组明显降低(P蛋白及mRNA表达较模型组明显降低(P蛋白及mRNA表达较模型组明显升高(P凋亡相关蛋白表达,改善认知功能,NF-κB信号通路可能参与其中。

关键词：糖尿病认知功能减退艾灸凋亡相关蛋白核转录因子κB

艾灸改善血管性痴呆大鼠认知功能及对海马神经元凋亡相关蛋白的影响

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中国针灸 2021年第12期41卷 1371-1378页

作者：杨坤宋小鸽阮静茹蔡圣朝朱才丰秦晓凤吴萌萌贺成功安徽中医药大学第二附属医院老年病三科合肥230061 安徽中医药大学针灸经络研究所合肥230038 安徽中医药大学针灸推拿学院

目的:观察艾灸对血管性痴呆(VD)大鼠海马神经元凋亡相关蛋白的影响,探讨艾灸改善VD可能的机制。方法:从100只SD大鼠(剔除3只)中选取30只随机分为正常组和假手术组,每组15只。剩余67只大鼠采用双侧颈总动脉缺血再灌注法复制VD模型,将造... 详细信息

目的:观察艾灸对血管性痴呆(VD)大鼠海马神经元凋亡相关蛋白的影响,探讨艾灸改善VD可能的机制。方法:从100只SD大鼠(剔除3只)中选取30只随机分为正常组和假手术组,每组15只。剩余67只大鼠采用双侧颈总动脉缺血再灌注法复制VD模型,将造模成功的45只大鼠随机分为模型组、艾灸组、西药组,每组15只。造模成功后第7天,艾灸组悬灸“关元”“命门”“大椎”穴,每穴15 min,每日1次,艾灸6 d后休息1 d,连续4周。西药组予尼莫地平灌胃,每天2 mg/kg,每日3次,连续4周。分别于干预前后采用Morris水迷宫实验检测各组大鼠逃避潜伏期;干预后,采用TUNEL法检测大鼠海马CA1区神经元凋亡率,免疫荧光双标法检测大鼠海马CA1区B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)/神经元核抗原(NeuN)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)/NeuN共表达阳性细胞数,免疫荧光单标法检测大鼠海马CA1区细胞色素C(cytC)、线粒体外膜受体Tom20(Tom20)蛋白表达,Western blot法检测大鼠海马组织p53基因上调凋亡调控因子(PUMA)蛋白表达。结果:干预前,与正常组、假手术组比较,模型组、艾灸组、西药组大鼠逃避潜伏期延长(P凋亡率升高、Bcl-2/NeuN共表达阳性细胞数减少、Bax/NeuN共表达阳性细胞数增多(P凋亡率降低、Bcl-2/NeuN共表达阳性细胞数增多、Bax/NeuN共表达阳性细胞数减少(P凋亡率降低、Bcl-2/NeuN共表达阳性细胞数增多、Bax/NeuN共表达阳性细胞数减少(P蛋白及海马组织PUMA蛋白表达增多(P蛋白及海马组织PUMA蛋白表达减少(P蛋白及海马组织PUMA蛋白表达减少(P蛋白表达,促进Bcl-2释放,抑制海马神经元凋亡有关。

关键词：血管性痴呆艾灸神经元凋亡凋亡相关蛋白

凋亡相关蛋白在激素性幼兔股骨头缺血坏死动物模型中的表达及意义

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中华实用儿科临床杂志 2014年第17期29卷 1349-1351页

作者：罗宇俞松王健唐诗鹏陆建国闫陶然卓金伟遵义医学院附属医院小儿矫形外科 563003

目的观察各凋亡相关蛋白在激素性幼兔股骨头缺血坏死动物模型股骨头组织中的表达情况，探讨该模型中调控凋亡的主要通路。方法选用2月龄的新西兰大白兔，制作糖皮质激素性幼兔股骨头缺血坏死模型及对照组模型，根据是否发病将激素注射... 详细信息

目的观察各凋亡相关蛋白在激素性幼兔股骨头缺血坏死动物模型股骨头组织中的表达情况，探讨该模型中调控凋亡的主要通路。方法选用2月龄的新西兰大白兔，制作糖皮质激素性幼兔股骨头缺血坏死模型及对照组模型，根据是否发病将激素注射组分为未发病组和发病组。取股骨头软骨及软骨下骨组织用免疫组织化学法检测凋亡通路中凋亡相关蛋白天冬氨酸特异酶切的半胱氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）、Caspase-8、人结合凋亡蛋白酶活化因子-1（apaf-1）、钙蛋白酶-1（calpain-1）的表达情况。分别测定在单位视野中Caspase-3、Caspase_8、apaf-1、calpain-1的积分光密度（IOD）值。结果1．Caspase-3的IOD值分别为发病组25142．72±21528．48，未发病组2069．63±1096．96，对照组301．80±99．66。Caspase-8的IOD值分别为发病组24942．63±18942．99，未发病组2016．31±1518．70，对照组236．85±97．94。Apaf-1的IOD值分别为发病组8514．23±6384．20，未发病组1118．49±1360．59，对照组95．13±38．05。Calpain-1的IOD值分别为发病组9636．71±9123．81，未发病组1881．10．4-3277．86，对照组126．71±47．35。Caspase-3在发病组和未发病组、对照组间差异有统计学意义（H=11．470、23．996，P＜0．01）；Caspase-8在发病组和对照组间差异有统计学意义（H=22．178，P＜0．01）；apaf-1在发病组和对照组间差异有统计学意义（H=22．808，P＜0．01）；calpain-1在发病组和对照组间差异有统计学意义（H=13．553，P＜0．01）。2．线性回归分析：Caspase-8能够显著的预测Caspase-3，且回归方程回归效应显著，回归方程能够解释40．3％的变异，而apaf-1和calpain-1对Caspase-3的回归效应不显著。结论凋亡受体通路可能在股骨头缺血坏死的凋亡过程中发挥主要调控作用。

关键词：凋亡相关蛋白股骨头缺血坏死动物模型幼兔糖皮质激素

肺癌合并呼吸道感染患者肺部病原菌分布及其对凋亡相关蛋白的影响

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中国微生态学杂志 2022年第1期34卷 70-73页

作者：李倩杨在亮张秀丽重庆市第六人民医院呼吸内科重庆400060 重庆市中医院乳腺外科

目的探讨肺癌合并呼吸道感染患者肺部病原菌分布及其对凋亡相关蛋白的影响,为该病的治疗提供参考。方法选择2017年3月至2019年3月我院收治的肺癌合并呼吸道感染患者62例为观察组,再选取同期我院收治的肺癌未合并呼吸道感染患者60例为对... 详细信息

目的探讨肺癌合并呼吸道感染患者肺部病原菌分布及其对凋亡相关蛋白的影响,为该病的治疗提供参考。方法选择2017年3月至2019年3月我院收治的肺癌合并呼吸道感染患者62例为观察组,再选取同期我院收治的肺癌未合并呼吸道感染患者60例为对照组。分析观察组患者病原微生物分布情况,比较两组患者炎症因子[白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)]水平,同时比较两组患者凋亡蛋白[B淋巴细胞瘤-2蛋白(Bcl-2)、B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白(Bax)]水平。采用Pearson相关分析法分析炎症因子与凋亡蛋白表达的相关性。结果观察组患者感染革兰阴性菌45株,占72.58%,其中以大肠埃希菌为主(27株,43.55%);感染革兰阳性菌10株,以金黄色葡萄球菌为主(6株,9.68%);感染真菌7株,占11.29%,以白假丝酵母为主(6株,9.68%)。观察组患者IL-6、IL-10、HMGB1水平均显著高于对照组(均P相关(r=0.516、0.497、0.622,均P相关(r=-0.437、-0.504、-0.433,均P凋亡相关蛋白水平。

关键词：肺癌呼吸道感染微生物分布凋亡相关蛋白

凋亡相关蛋白POTE在晚期非小细胞肺癌顺铂耐药中的功能研究

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凋亡相关蛋白POTE在晚期非小细胞肺癌顺铂耐药中的功能研究

作者：陈秀苏州大学

学位级别：硕士

研究背景肺癌是目前全球发病率、死亡率最高的恶性肿瘤之一。在我国，肺癌的发病率在逐年上升，并且已经成为我国城市人口癌症死亡的主要原因。非小细胞肺癌（Non-small cell lung cancer, NSCLC）是肺癌的主要病理类型，占80%左... 详细信息

研究背景肺癌是目前全球发病率、死亡率最高的恶性肿瘤之一。在我国，肺癌的发病率在逐年上升，并且已经成为我国城市人口癌症死亡的主要原因。非小细胞肺癌（Non-small cell lung cancer, NSCLC）是肺癌的主要病理类型，占80%左右。由于早期肺癌缺乏特异性症状，65%-70%的NSCLC患者确诊时已处于晚期，失去手术治疗的机会。晚期肺癌治疗一般采取多学科综合治疗，其中化疗是最重要手段之一。自80年代以来，随着第三代化疗药物不断涌现，以铂类为基础联合第三代化疗新药的方案成为晚期NSCLC的标准化疗（Standard Chemotherapy, SC）方案，但其化疗的有效率（Response Rate, RR）仅为30%-40%，NSCLC的5年生存率仅为15%。而造成化疗失败的主要原因是耐药。一直以来，顺铂被认为是晚期NSCLC化疗的基石，几乎所有一线NSCLC化疗方案都是与顺铂联合应用的方案。顺铂的抗癌作用机制是药物进入肿瘤细胞后，与DNA交叉连接，形成稳定的顺铂-DNA复合物，阻断DNA复制，导致肿瘤细胞死亡。当前认为导致顺铂耐药的机制包括肿瘤细胞内药物浓度降低、药物在细胞内被降解代谢以及DNA损伤修复增强。除此之外，还包括凋亡信号转导通路的改变。顺铂抗肿瘤作用的主要机制是诱导肿瘤细胞凋亡。体内外研究发现，肿瘤细胞凋亡发生改变主要由于细胞凋亡信号转导通路异常，凋亡相关因子表达异常引起。 POTE基因家族是灵长类生物所特有的，包含13个高度同源的基因亚型，分别位于8条不同的染色体上。在多种肿瘤组织（前列腺癌，结肠癌，肺癌，乳腺癌，卵巢癌和胰腺癌）及生殖细胞中表达，但在正常组织中不表达。在肿瘤组织中高表达的主要亚型是POTE-2γ和POTE-2α。目前POTE的功能尚不明确。有研究在Hela细胞及精子细胞中发现，POTE可能与Fas/FasL、BAK、Casepase-3等凋亡相关蛋白相互作用，与凋亡信号相关。本实验室前期运用二维凝胶电泳及质谱分析的方法，在A549（人肺腺癌细胞珠）和A549/DDP（顺铂诱导的耐药细胞株）中分析差异性蛋白时发现：POTE蛋白在A549/DDP细胞株中表达明显低于A549细胞。本研究旨在筛选出在A549细胞中起主导作用的POTE亚型，并分析其在A549细胞和A549/DDP细胞中的表达差异。收集应用含铂双药治疗的临床样本（肿瘤组织），初步分析POTE表达变化与NSCLC患者化疗疗效之间的关系。本研究共分三部分进行：第一部分:A549/DDP耐药株建立及生物学行为鉴定【目的】A549细胞株基础上诱导的A549/DDP细胞株的建立及其生物学行为的鉴定。【方法】采用顺铂敏感人肺腺癌细胞株A549经顺铂诱导产生对顺铂耐药的耐药细胞株A549/DDP;MTT法检测两细胞株对顺铂的敏感性。【结果】 1.人肺腺癌敏感细胞株A549顺铂诱导产生耐药的细胞株A549/DDP。 2. MMT法检测结果显示顺铂对A549和A549/DDP细胞的增殖均有抑制作用，顺铂对 A549和A549/DDP细胞的IC50值分别为5.6和42.6ug/ml，耐药倍数为7.57倍。【结论】成功获得了人非小细胞肺癌耐药细胞株A549/DDP，明确耐药细胞株的耐药指数为7.57倍。第二部分POTE蛋白在A549细胞中主要的表达亚型及其在铂类耐药中的作用和机制【目的】本部分实验旨在筛选出A549细胞中POTE主要表达的亚型，明确其在A549和A549/DDP细胞中分子水平和蛋白水平的表达差异，探讨POTE-2γ与凋亡相关因子（Fas、Bax、Bak、Caspase-3）的关系。【材料和方法】1.运用Trizol提取A549细胞中的总RNA;2.运用PCR产物克隆筛选的方法，筛选出62个菌落测序;3.运用DNAstar软件进行碱基比对;4.应用蛋白印迹法（Western Blot, WB）验证POTE-2γ在A549和A549/DDP细胞中的表达差异;5.运用蛋白印迹的方法分别检测顺铂在不同时间和浓度梯度时，A549及A549/DDP两细胞株中POTE-2γ及凋亡相关因子（Fas、Bax、Bak、Caspase-3）表达量的变化;6.构建慢病毒载体,感染A549细胞，下调POTE-2γ表达，蛋白印迹检测目标蛋白（Fas、Bax、Bak）表达变化。【结果】 1.PCR克隆筛选出的62个菌落中，其中4个测序失败，58个完成测序。完成测序的58个序列通过碱基比对均为POTE-2γ。 2.慢病毒对A549细胞中POTE-2γ表达量的干扰效率约73.6%。 3.蛋白印迹法及免疫细胞化学验证结果显示POTE-2γ在A549及A549/DDP两细胞株间存在表达

关键词：晚期非小细胞肺癌顺铂耐药 POTE-2γ 凋亡相关蛋白肿瘤标记物

凋亡相关蛋白3细胞周期素1在肺腺癌中的表达及意义

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中国药物与临床 2015年第8期15卷 1081-1083页

作者：王颖郑绘霞山西医科大学第一医院病理科太原030001 山西省忻州市中医院肺脾科

肺癌是一种危害人类生命与健康的呼吸道恶性肿瘤,我国肺癌的年发病率在以1.63%的速度增加,2000—2005年的肺癌新增数量为12万人次。肺腺癌已经被发现是肺癌组织分类中最为多见的一种类型,大约占到其总数的一半。而且据研究,肺腺癌多见... 详细信息

肺癌是一种危害人类生命与健康的呼吸道恶性肿瘤,我国肺癌的年发病率在以1.63%的速度增加,2000—2005年的肺癌新增数量为12万人次。肺腺癌已经被发现是肺癌组织分类中最为多见的一种类型,大约占到其总数的一半。而且据研究,肺腺癌多见于低龄女性、较早即可发生血行转移,治疗效果差、预后不理想。凋亡相关蛋白3（APR3）是一种凋亡相关基因,它可能通过影响肿瘤细胞的分化和凋亡,

关键词：肺腺癌凋亡相关蛋白细胞周期素凋亡相关基因血行转移原位腺癌 Cyclin 浸润性腺癌阳性细胞成骨细胞增殖

黄角颗粒对脑缺血再灌注损伤大鼠炎性因子及凋亡相关蛋白的影响

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中国康复理论与实践 2018年第8期24卷 893-899页

作者：潘宋斌万琳邵卫唐坤姚汉云武汉市第一医院神经内科湖北武汉市430022 武汉市中医医院内分泌科湖北武汉市430014

目的探讨黄角颗粒对脑缺血再灌注损伤大鼠炎性因子及凋亡相关蛋白的影响。方法 SPF级Sprague-Dawley健康雄性大鼠40只随机分为假手术组、模型组和黄角颗粒组,每组10只,余10只备用。采用线栓法构建大鼠脑缺血2 h再灌注模型,其中假手术组... 详细信息

目的探讨黄角颗粒对脑缺血再灌注损伤大鼠炎性因子及凋亡相关蛋白的影响。方法 SPF级Sprague-Dawley健康雄性大鼠40只随机分为假手术组、模型组和黄角颗粒组,每组10只,余10只备用。采用线栓法构建大鼠脑缺血2 h再灌注模型,其中假手术组和模型组在假手术前或缺血再灌注前30 min予生理盐水10 ml/kg灌胃,黄角颗粒组在缺血再灌注前30 min予黄角颗粒溶液10 ml/kg(生药含量1 g/ml)灌胃。再灌注24 h后,Longa评分法对各组大鼠进行神经功能评分,TTC染色检测各组脑梗死体积百分比,HE染色观察各组脑组织病理形态,TUNEL检测各组脑细胞凋亡,ELISA检测各组血清中白细胞介素(IL)-1β、IL-6和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量,Western blotting检测各组大鼠脑组织中cleaved-caspase 3、cleaved-caspase 9、Bax和Bcl-2蛋白的表达。结果与模型组相比,黄角颗粒组神经功能评分显著降低(P凋亡率降低(P凋亡相关。

关键词：脑缺血再灌注损伤黄角颗粒炎性因子凋亡相关蛋白大鼠

牙科烤瓷合金对金黄地鼠颊囊黏膜中凋亡相关蛋白表达的影响

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中国组织工程研究 2019年第6期23卷 883-887页

作者：陈润邱冰妍江磊潘宇王颖卉程辉福建医科大学附属口腔医院修复科福建省福州市350002 福建医科大学口腔医学研究院福建省福州市350002 福建省级机关医院口腔科福建省福州市350001 福建医科大学口腔医学美学与生物力学研究中心福建省福州市350002

背景:有研究证实,牙科烤瓷合金具有不同程度的细胞毒性,可导致细胞凋亡,但以往关于牙科烤瓷合金引起细胞凋亡的研究多采用体外实验,无法很好地模拟口腔环境。目的:观察牙科烤瓷合金对金黄地鼠颊囊黏膜中凋亡相关蛋白表达的影响。方法:取... 详细信息

背景:有研究证实,牙科烤瓷合金具有不同程度的细胞毒性,可导致细胞凋亡,但以往关于牙科烤瓷合金引起细胞凋亡的研究多采用体外实验,无法很好地模拟口腔环境。目的:观察牙科烤瓷合金对金黄地鼠颊囊黏膜中凋亡相关蛋白表达的影响。方法:取60-70 d龄雄性金黄地鼠36只(北京维通利华实验动物技术有限公司提供),随机分6组,分别在颊囊黏膜表面缝合固定镍铬烤瓷合金、钴铬烤瓷合金、纯钛烤瓷合金、钯基烤瓷合金、金铂烤瓷合金及聚丙烯(阴性对照)。固定14,28 d,切取与试件接触的颊囊黏膜,Western Blot检测黏膜细胞中Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9蛋白表达情况。结果与结论:(1)固定14,28 d时,金铂烤瓷合金组Caspase-3蛋白表达量与阴性对照组比较无明显差异(P>0.05),其余4种烤瓷合金组Caspase-3蛋白表达量高于阴性对照组(P 蛋白表达量均高于阴性对照组(P蛋白表达量高于阴性对照组(P蛋白表达量与阴性对照组比较无明显差异(P> 0.05);(3)固定14 d时,各烤瓷合金组Caspase-9蛋白表达量均高于阴性对照组(P 蛋白表达量与阴性对照组比较无明显差异(P> 0.05),其余烤瓷合金组Caspase-9蛋白表达量均高于阴性对照组(P 凋亡相关信号分子的表达增加。

关键词：口腔材料牙科烤瓷合金细胞凋亡金黄地鼠颊囊黏膜凋亡相关蛋白金属烤瓷合金颊囊鼠属组织工程

小白菊内酯对骨肉瘤细胞凋亡与凋亡相关蛋白的影响及作用机制研究

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陕西医学杂志 2022年第2期51卷 151-154,163页

作者：纪涛任建政李正华陈小龙武警陕西省总队医院陕西西安710054 陕西省人民医院陕西西安710068

目的:探讨小白菊内酯(PTL)对骨肉瘤细胞凋亡及凋亡相关蛋白的影响及作用机制。方法:CCK-8实验检测并筛选出PTL抑制骨肉瘤细胞活性的有效作用浓度,再通过流式细胞法检测PTL促进骨肉瘤细胞发生凋亡的有效作用浓度,最终确定出用于后续实验... 详细信息

目的:探讨小白菊内酯(PTL)对骨肉瘤细胞凋亡及凋亡相关蛋白的影响及作用机制。方法:CCK-8实验检测并筛选出PTL抑制骨肉瘤细胞活性的有效作用浓度,再通过流式细胞法检测PTL促进骨肉瘤细胞发生凋亡的有效作用浓度,最终确定出用于后续实验的有效PTL浓度,实时荧光定量PCR法和Western blot法从分子水平检测PTL对骨肉瘤细胞凋亡及相关凋亡蛋白表达的影响。结果:CCK-8实验结果表明,PTL浓度为5、10μmol/L时,对骨肉瘤细胞活力和凋亡均无显著影响。而PTL浓度为20、40μmol/L时,显著抑制骨肉瘤细胞活性(均P凋亡,且20、40μmol/L PTL两组间比较差异无统计学意义(均P>0.05)。故选择20μmol/L PTL用于后续实验,细胞爬片及TUNEL实验证实PTL(20μmol/L)显著促进骨肉瘤细胞凋亡(P蛋白表达上调,Cleaved-Caspase 3/Caspase 3比值上调,并抑制Bcl-2 mRNA和蛋白表达(均P凋亡。

关键词：小白菊内酯骨肉瘤细胞凋亡流式细胞法细胞活性凋亡相关蛋白