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免疫突触——共刺激作用机制研究进展

国外医学（免疫学分册） 2001年第2期24卷 100-102页

作者：闫晓彩西安交通大学医学院免疫病理研究室陕西西安710061

共刺激作用在T细胞的激活及信号传导过程中发挥着重要作用 ,人们一直在探讨其作用的具体方式。在第一信号存在条件下 ,当共刺激信号出现 ,也只有在共刺激信号出现时 ,通过信号传导启动细胞骨架的运动 ,从而在抗原呈递细胞和T细胞之间形... 详细信息

共刺激作用在T细胞的激活及信号传导过程中发挥着重要作用 ,人们一直在探讨其作用的具体方式。在第一信号存在条件下 ,当共刺激信号出现 ,也只有在共刺激信号出现时 ,通过信号传导启动细胞骨架的运动 ,从而在抗原呈递细胞和T细胞之间形成一个称之为免疫突触的交接面。该细胞将各种信号有机地整合。

关键词：免疫突触共刺激作用 CD28 信号传导基因转录

转染人4IgB7-H3细胞株的构建及其对T细胞共刺激作用的研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2007年第3期27卷 253-253页

作者：同迎会马震宇王勤陈永井谢芳王雪峰马珍妮张学光苏州大学医学生物技术研究所 215007 苏州大学生化工程研究所 215007 苏州大学病理学教研室 215007 苏州大学生命科学学院 215007

作为新发现的花色刺激分子，B7-H3的生物学功能还存在着争议。B7-H3在小鼠中仅有单个的IgV-IgC样区称为2IgB7-H3，在人类中除了2IgB7-H3,还存在具有两个IgV-IgC样区的4IgB7-H3在人类细胞株和组织中比2IgB7-H3有着更广泛的表达，在单核... 详细信息

作为新发现的花色刺激分子，B7-H3的生物学功能还存在着争议。B7-H3在小鼠中仅有单个的IgV-IgC样区称为2IgB7-H3，在人类中除了2IgB7-H3,还存在具有两个IgV-IgC样区的4IgB7-H3在人类细胞株和组织中比2IgB7-H3有着更广泛的表达，在单核细胞来源的DC（未成熟和成熟）上主要的表达形式也可能是IgB7-H3。

关键词：细胞株共刺激作用 T细胞 B7-H3 转染生物学功能细胞来源未成熟

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B细胞在诱导免疫耐受中的作用机制

免疫学杂志 2010年第7期26卷 643-646页

作者：张国超齐晖李富荣周汉新深圳市人民医院肝胆外科 518020 深圳市人民医院临床医学研究中心 518020 深圳市人民医院老年病研究所 518020

免疫耐受是机体对抗原的一种特殊免疫应答状态。在诱导耐受特别是在诱导外周T细胞耐受中,B细胞不仅可以分泌抗体及参与免疫调节,而且可以作为特异性的抗原提呈细胞起到重要作用。它可以活化T细胞导致免疫反应,也可以致T细胞耐受帮助诱... 详细信息

免疫耐受是机体对抗原的一种特殊免疫应答状态。在诱导耐受特别是在诱导外周T细胞耐受中,B细胞不仅可以分泌抗体及参与免疫调节,而且可以作为特异性的抗原提呈细胞起到重要作用。它可以活化T细胞导致免疫反应,也可以致T细胞耐受帮助诱导免疫耐受。认识B细胞如何诱导耐受可以为设计新的疗法调节自身免疫疾病和移植免疫中免疫耐受与免疫反应之间的平衡提供服务。

关键词： B淋巴细胞免疫耐受抗原提呈抑制因子共刺激作用

小鼠可溶性CD83对树突状细胞表达共刺激分子和共刺激活性的影响

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中国免疫学杂志 2006年第9期22卷 792-796页

作者：徐军发黄保军熊平冯玮徐勇方敏郑芳龚非力广东医学院临床免疫学教研室湛江524023 华中科技大学同济医学院免疫学系武汉430030

目的:研究可溶性小鼠CD83(mCD83)对树突状细胞(DC)表达共刺激分子及共刺激活性的影响。方法:克隆mCD83基因,构建mCD83胞外功能区与人IgG1αFc段融合基因的真核表达载体pmCD83-hIg,并在COS-7细胞中表达可溶性mCD83-hIg融合蛋白。采用ELIS... 详细信息

目的:研究可溶性小鼠CD83(mCD83)对树突状细胞(DC)表达共刺激分子及共刺激活性的影响。方法:克隆mCD83基因,构建mCD83胞外功能区与人IgG1αFc段融合基因的真核表达载体pmCD83-hIg,并在COS-7细胞中表达可溶性mCD83-hIg融合蛋白。采用ELISA、Western blot和RT-PCR技术检测mCD83-hIg融合基因在COS-7细胞中的表达。用mCD83-hIg处理小鼠DC细胞系(DC2.4)采用流式细胞术检测DC细胞周期、细胞凋亡和共刺激分子CD80、CD86的表达影响;采用混合白细胞培养试验,检测mCD83-hIg对DC2.4刺激同种异基因T细胞增殖及产生IL-2和IFN-γ的影响。结果:酶切和序列测定鉴定显示构建的真核表达载体完全正确;mCD83-hIg对DC2.4细胞周期和细胞凋亡无影响,但可下调DC2.4表面共刺激分子CD80和CD86的表达;mCD83-hIg处理过的DC2.4刺激同种异基因T细胞增殖及产生IL-2和IFN-γ的能力显著下降。结论:mCD83-hIg可抑制DC表达共刺激分子并下调DC共刺激活性,从而抑制同种异基因T细胞增殖和产生细胞因子。

关键词： mCD83-hIg 树突状细胞 DC2.4 共刺激分子共刺激作用混合白细胞培养 T细胞增殖 IL-2 IFN-γ

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天然免疫系统非克隆识别机制的进展

中国科学基金 1999年第4期13卷 208-211页

作者：王伯瑶吴琦黄宁华西医科大学感染免疫研究室成都610041

本文综述了高等动物存在两大相互依存、相互作用的完整的抗感染防御系统,即天然免疫的非克隆识别机制和以克隆选择为基础的获得性免疫。天然免疫的非克隆识别机制诱导抗原提呈细胞表达共刺激因子,触发获得性免疫反应,并通过释放细胞因... 详细信息

本文综述了高等动物存在两大相互依存、相互作用的完整的抗感染防御系统,即天然免疫的非克隆识别机制和以克隆选择为基础的获得性免疫。天然免疫的非克隆识别机制诱导抗原提呈细胞表达共刺激因子,触发获得性免疫反应,并通过释放细胞因子引导获得性免疫系统发生特异的免疫效应反应。在天然免疫反应中,通过胚胎细胞编码的受体识别病原体几种特有的保守分子,诱导天然免疫细胞表达抗菌肽、共刺激因子和效应细胞因子。认识天然免疫识别的分子机制,在疫苗设计和发展免疫治疗新举措上,意义重大。

关键词：天然免疫识别机制共刺激作用非克隆识别

人诱导共刺激分子配体ICOSL单克隆抗体及ELISA试剂盒的研制及应用

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人诱导共刺激分子配体ICOSL单克隆抗体及ELISA试剂盒的研制及应用

作者：胡筱涵苏州大学

学位级别：硕士

T细胞活化需要双信号:第一信号是TCR(T cell receptor)识别抗原提呈细胞表面抗原肽-MHC复合物,第二信号是T细胞和抗原提呈细胞共刺激分子之间的互相作用,共同决定T细胞的活化增殖,维持并调节活化级联反应,抑或转变为无反应状态甚至凋亡... 详细信息

T细胞活化需要双信号:第一信号是TCR(T cell receptor)识别抗原提呈细胞表面抗原肽-MHC复合物,第二信号是T细胞和抗原提呈细胞共刺激分子之间的互相作用,共同决定T细胞的活化增殖,维持并调节活化级联反应,抑或转变为无反应状态甚至凋亡。正性共刺激分子ICOS(inducible costimulator)与其配体ICOSL(inducible costimulator ligand)相互作用后能有效地促进T细胞的增殖、活化和细胞因子的分泌等,还会参与Tfh(T follicular helper cells)增殖分化和生发中心反应,从而对B细胞分泌抗体发挥作用。同时ICOS/ICOSL信号通路在自身免疫性疾病、移植免疫、肿瘤免疫乃至感染性免疫的发生发展过程中具有重要的生物学功能。正性共刺激分子ICOSL以两种形式存在:可溶型和膜型。膜型ICOSL分子一定程度表达在活化的B细胞、巨噬细胞、树突状细胞和部分T细胞亚群,也可诱导表达于血管内皮细胞、上皮细胞或成纤维细胞上。ICOSL与其表达在T细胞上的受体ICOS结合,可以不依赖于B7/CD28通路作用于T细胞发挥功能。ICOS分子胞内段含有一个“YMFM”基序,可与PI3K结合发挥其激酶活性,作用于下游信号通路,即ICOS/ICOSL信号途径会激活T细胞内依赖PI3K的信号途径。一般情况下可溶性共刺激分子可以通过专一的mRNA编码经免疫细胞直接分泌产生,也可以由膜型分子经蛋白水解酶(如基质金属蛋白酶等)的裂解而形成。临床资料分析显示,部分可溶性共刺激分子具有临床诊断的价值,然而机体中是否存在可溶性ICOSL,它是通过何种机制产生的,表达特性如何,在对膜型ICOS/ICOSL的调节作用中扮演何种角色,在临床疾病的免疫病理中发挥何种生物学作用等,这些问题还有待研究。因此,ICOS/ICOSL信号通路对T细胞在免疫应答中的调节发挥重要的生物学作用。通过研究ICOS/ICOSL的表达及其介导的信号通路与临床疾病的关系,阐明其在免疫病理中的作用和机理,可以为某些疾病的免疫诊断和免疫治疗寻求新的途径。本课题研究旨在构建转基因细胞L929/ICOSL的基础上,研制出特异性的鼠抗人ICOSL单克隆抗体,同时分析其生物学特性,进一步探究单抗对ICOS/ICOSL途径的调节作用和对T细胞增殖及其细胞因子分泌的影响;并应用所得单抗研制特异性检测人可溶性icosl(sicosl)的elisa试剂盒,对试剂盒的精确性和稳定性进行评价;利用研制的elisa试剂盒检测健康志愿者和系统性红斑狼疮患者外周血可溶性icosl的表达水平,探究sicosl可能的产生机制,进而探讨该可溶性因子在系统性红斑狼疮免疫病理中的临床意义。上述研究结果为阐明膜型icosl和可溶型icosl的生物学意义及icos/icosl在自身免疫性疾病中的作用提供了新的线索。一、鼠抗人icosl单克隆抗体的研制及其生物学特性的研究【目的】研制特异性鼠抗人icosl单克隆抗体,为探究人icosl分子在不同细胞上或多种疾病中的表达奠定物质基础,并为探讨icos/icosl信号通路的生物学意义提供物质材料。【方法】以高表达人icosl分子的转基因细胞l929/icosl免疫balb/c小鼠,采用杂交瘤细胞融合技术将骨髓瘤细胞与免疫小鼠脾脏细胞进行融合,运用流式细胞术对杂交瘤细胞的培养上清进行初筛,将合格的杂交瘤细胞株反复检测和亚克隆,成功获得两株特异性好且能够持续稳定分泌鼠抗人icosl单抗的杂交瘤细胞株;采取cba法和快速定性试纸法鉴定抗体亚型;通过westernblot、dotblot、细胞免疫荧光技术和elisa以及两株单抗之间或单抗与蛋白之间的竞争结合抑制实验分析所得单抗的生物学特性;用流式细胞术和间接免疫荧光分析icosl在多种肿瘤细胞表面的表达水平;研究所得单抗在人t细胞体外增殖实验中的生物学功能。【结果】1、成功获得两株稳定分泌特异性鼠抗人icosl单克隆抗体的杂交瘤细胞株:13d11和20b10。这两株单抗可用于流式细胞术、westernblot、dotblot、elisa、细胞免疫荧光技术的检测分析;2、竞争抑制实验表明,两株单抗识别icosl分子不同的抗原表位,且都与商品化单抗2d3不同;两株单抗均能有效阻断icos/icosl的结合;3、t细胞体外增殖实验结果表明,单克隆抗体13d11可抑制活化t细胞的体外增殖,且其抑制作用随单抗浓度的增加而增强。【结论】成功获得两株特异性鼠抗人icosl单克隆抗体,两者识别icosl不同的抗原表位,为研制检测人可溶性icosl的elisa试剂盒,进一步用来测定可溶性icosl的表达水平奠定了良好的物质基础;也为分析膜型icosl的表达特性,探讨icos/icosl信号通路对免疫系统

关键词： ICOSL 单克隆抗体 ELISA 可溶性ICOSL 共刺激作用

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B7h分子与相关疾病

中国中西医结合皮肤性病学杂志 2006年第4期5卷 255-258页

作者：史雪彬王金龙天津医科大学基础医学院免疫学教研室天津300070

协同刺激分子在免疫应答中的作用日益受到关注,本文拟就B7家族新成员B7h的分子生物学特征及在自身免疫病中的作用作一综述。

关键词： B7h 共刺激作用自身免疫病

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小鼠肿瘤疫苗的制备及鉴定

西南国防医药 1996年第3期6卷 132-134页

作者：刘晓波田伏洲邵洪李晓军尹致良成都军区总医院全军普外中心 610083

将小鼠骨髓瘤细胞(SP2/0)与脂多糖(LPS)活化的B淋巴细胞在聚乙二醇(PEG)介导下融合,经筛选获得8株状态良好的阳性细胞。这些细胞(传代第二次)能耐受HAT液,而对8—氮杂鸟嘌呤(20μgml)敏感,其染色体数在105～112条之内,表明这8株细胞均为... 详细信息

将小鼠骨髓瘤细胞(SP2/0)与脂多糖(LPS)活化的B淋巴细胞在聚乙二醇(PEG)介导下融合,经筛选获得8株状态良好的阳性细胞。这些细胞(传代第二次)能耐受HAT液,而对8—氮杂鸟嘌呤(20μgml)敏感,其染色体数在105～112条之内,表明这8株细胞均为SP2/0细胞与B细胞融合而成的杂交细胞。其中三株杂交细胞(IF6、IF11、2A6)能显著增强T淋巴细胞的增殖反应(P共刺激作用。其表面可能表达了B7等共刺激分子。

关键词：骨髓瘤细胞(SP2/0) B淋巴细胞细胞融合共刺激作用

小鼠骨髓瘤细胞与活化B细胞的融合及其体外共刺激T细胞 …

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中国实验临床免疫学杂志 1998年第2期10卷 6-8页

作者：刘晓波田伏洲成都军区总医院全军普外中心

将小鼠骨髓瘤细胞（ＳＰ２／０）与脂多糖（ＬＰＳ）活化的Ｂ淋巴细胞在聚乙二醇（ＰＥＧ）介导下融合，经筛选获得８株状态良好的阳性细胞。这些细胞（传代第二次）能耐受ＨＡＴ液，而对８－氮杂鸟嘌呤（２０μｇ／ｍｌ）敏感，其染色... 详细信息

将小鼠骨髓瘤细胞（ＳＰ２／０）与脂多糖（ＬＰＳ）活化的Ｂ淋巴细胞在聚乙二醇（ＰＥＧ）介导下融合，经筛选获得８株状态良好的阳性细胞。这些细胞（传代第二次）能耐受ＨＡＴ液，而对８－氮杂鸟嘌呤（２０μｇ／ｍｌ）敏感，其染色体数在１０５￣１１２条之间，表明这８株细胞均为ＳＰ２／０细胞与Ｂ细胞融合而成的杂交细胞。其中三株杂交细胞（ＩＦ６、ＩＦ１１、２Ａ６）能显著增强Ｔ淋巴细胞的增殖反应（Ｐ〈０．０１）。

关键词：骨髓瘤细胞 B淋巴细胞细胞融合共刺激作用