检索结果-南通市图书馆

作者：周婕南京中医药大学

学位级别：硕士

目的:以HUVEC细胞为研究对象,研究六君子汤含药血清对H2O2诱导的HUVEC细胞内皮间质化的作用及机制探讨。方法:1.体外培养HUVEC细胞株;***-8法检测不同浓度的六君子汤含药血清和H2O2对HUVEC细胞活力的影响,以细胞存活率为依据筛选H2O2最... 详细信息

目的:以HUVEC细胞为研究对象,研究六君子汤含药血清对H2O2诱导的HUVEC细胞内皮间质化的作用及机制探讨。方法:1.体外培养HUVEC细胞株;***-8法检测不同浓度的六君子汤含药血清和H2O2对HUVEC细胞活力的影响,以细胞存活率为依据筛选H2O2最佳浓度进行后续实验;3.细胞迁移实验、成管实验分别检测正常组、模型组及不同浓度六君子汤含药血清组细胞迁移数、细胞成管长度;*** blot检测正常组、模型组及不同浓度六君子汤含药血清组 EndMT 相关蛋白 SNA11、α-SMA、CD31、VE-cadherin 以及 PI3K/AKT 通路相关蛋白PI3K、AKT、p-AKT、GSK-3β、p-GSK-3β的表达水平。结果:1.细胞存活率与H2O2浓度呈负相关。与正常组相比,H2O2浓度为50μmol/L时无统计学意义（P＞0.05）,浓度为大于100 μmol/L时细胞存活率降低,具有统计学意义（P＜0.05）,浓度大于200μmol/L,细胞存活率明显下降（P＜0.0001）。H2O2浓度为400、800 μmol/L时,细胞存活率小于50%,为进一步实验研究,选取浓度为200μmol/L的H2O2溶液进行后续实验;2.不同浓度六君子汤含药血清对HUVEC细胞存活率无影响,与空白血清组相比无统计学意义（P＞0.05）,表明3种浓度对HUVEC细胞均无毒性,将其分为低剂量组、中剂量组、高剂量组,进行后续实验;3.与正常组相比,模型组细胞迁移数、细胞成管长度显著增加,差异均有统计学意义（P＜0.01）;与模型组相比,3个浓度的六君子汤含药血清组细胞迁移数及细胞成管长度均减少（低剂量组P＜0.05,中、高剂量组P＜0.01）;4.与正常组相比,模型组SNAI1、α-SMA蛋白表达上调,VE-cadherin、CD31蛋白表达下调,PI3K、p-AKT、p-GSK-3β蛋白表达上调,差异均有统计学意义（P＜0.01）;与模型组相比,3个浓度的六君子汤含药血清组SNAI1、α-SMA蛋白表达下调,VE-cadherin、CD31蛋白表达上调,PI3K、p-AKT、p-GSK-3β蛋白表达下调,差异均有统计学意义（低剂量组P＜0.05,中、高剂量组P＜0.01）。结论:1.H2O2有效诱导HUVEC细胞EndMT的发生;2.六君子汤含药血清能够通过抑制HUVEC细胞的迁移、成管,抑制新生血管的生成;3.六君子汤含药血清可能通过调控PI3K/AKT通路抑制HUVEC细胞EndMT的发生。

关键词：六君子汤含药血清内皮细胞间质化湿性年龄相关性黄斑变性 PI3K/AKT信号通路

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六君子汤含药血清对A549/DDP细胞E-cadherin和N-cadherin表达的影响

六君子汤含药血清对A549/DDP细胞E-cadherin和N-cadherin表达的影...

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作者：甄芳辽宁中医药大学

学位级别：硕士

目的:探讨六君子汤含药血清对人肺腺癌顺铂耐药细胞株(A549/DDP)顺铂(DDP)耐药的作用及其对上皮钙黏蛋白(E-cadherin)和神经钙黏蛋白(N-cadherin)表达的影响。材料与方法:采用血清药理学方法提取含药血清,采用随机分组法将40只SD大鼠分... 详细信息

目的:探讨六君子汤含药血清对人肺腺癌顺铂耐药细胞株(A549/DDP)顺铂(DDP)耐药的作用及其对上皮钙黏蛋白(E-cadherin)和神经钙黏蛋白(N-cadherin)表达的影响。材料与方法:采用血清药理学方法提取含药血清,采用随机分组法将40只SD大鼠分为四组:空白血清组和六君子汤含药血清高剂量组,六君子汤含药血清中剂量组,六君子汤含药血清低剂量组,灌胃给药时间间隔为24小时,持续给药5天,最后一天提取血清。再用培养基RPMI1640将各组血清分别稀释成浓度为5%和10%的含药血清,用预先配制好的含药血清干扰A549/DDP细胞株生长,其作用时间分别为12小时、24小时、48小时,以含药血清最高的生长抑制率为标准选择作为最佳含药血清的浓度,以及最佳含药血清的最佳作用时间点。MTT法:共分为4组:A549细胞+空白血清组,A549/DDP细胞+空白血清组,A549/DDP细胞+TGF-β1诱导空白血清组,A549/DDP细胞+TGF-β1诱导含药血清组,检测各组细胞对DDP的IC50,计算耐药逆转倍数;免疫细胞化学法和Western blot检测各组细胞中E-cadherin和N-cadherin蛋白的表达。结果:1.六君子汤含药血清对A549/DDP细胞的生长具有显著的抑制作用,且在一定范围内,浓度越高抑制效果越大,时间越长抑制率越高,选择中浓度的六君子汤含药血清作为干扰试剂,其稀释浓度选择10%,作用时间为48小时,此条件下的含药血清对于细胞毒性比较低。2.经过TGF-β1诱导的A549/DDP细胞比A549/DDP细胞对顺铂的耐药性显著增加,在最佳干预条件下,六君子汤含药血清耐药逆转倍数为4.12。3.六君子汤含药血清使A549/DDP细胞中的E-cadherin表达水平上调,N-cadherin的表达水平下调。结论:1.六君子汤含药血清可能通过抑制细胞上皮-间质转化来增强A549/DDP对DDP的敏感性,从而逆转降低A549/DDP细胞对顺铂的耐药程度。

关键词： A549/DDP细胞株 TGF-β1 六君子汤含药血清 EMT 耐药逆转

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六君子汤含药血清对A549/DDP细胞及E-cadherin和N-cadherin表达的影响

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解剖科学进展 2017年第2期23卷 162-166页

作者：甄芳于丹刘春英辽宁中医药大学研究生学院辽宁沈阳110032 辽宁中医药大学基础医学院病理学教研室辽宁沈阳110032

目的研究六君子汤含药血清对人肺腺癌顺铂耐药细胞株(A549/DDP)顺铂(DDP)耐药的作用及其对上皮钙黏蛋白(E-cadherin)和神经钙黏蛋白(N-cadherin)表达的影响。方法采用血清药理学方法制备含药血清,随机将40只SD大鼠分为血清对照组和六君... 详细信息

目的研究六君子汤含药血清对人肺腺癌顺铂耐药细胞株(A549/DDP)顺铂(DDP)耐药的作用及其对上皮钙黏蛋白(E-cadherin)和神经钙黏蛋白(N-cadherin)表达的影响。方法采用血清药理学方法制备含药血清,随机将40只SD大鼠分为血清对照组和六君子汤(高、中、低剂量)含药血清组,每日灌胃给药1次,连续5天后提取血清。再用培养液将各组血清稀释成5%和10%浓度作用于A549/DDP细胞株12h、24h、48h,以此筛选出最佳浓度及最佳作用时间点。MTT法检测各组细胞对DDP的IC50,计算耐药逆转倍数;免疫细胞化学法和Western blot检测各组细胞中E-cadherin和N-cadherin蛋白的表达。结果六君子汤含药血清对A549/DDP细胞有明显抑制作用,且呈浓度和时间依赖关系,中剂量10%浓度含药血清作用48h作用较强且细胞毒性低,在此浓度下,TGF-β1诱导的A549/DDP的IC50明显下降(P六君子汤含药血清逆转A549/DDP细胞的顺铂耐药可能与抑制细胞上皮-间质转化,增强A549/DDP对DDP的敏感性有关。

关键词： A549/DDP细胞株 A549细胞株 TGF-β1 六君子汤含药血清 E-cadherin N-cadherin 耐药逆转

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