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全自动免疫组化法与一代测序技术在检测人脑胶质瘤异柠檬酸脱氢酶1突变中的应用价值比较

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现代肿瘤医学 2022年第4期30卷 599-602页

作者：林俐朱祥风付萍王秋实肖华亮陆军军医大学大坪医院病理科重庆400042

目的:通过比较全自动免疫组化法与一代测序技术在检测人脑胶质瘤异柠檬酸脱氢酶1(isocitrate dehydrogenase 1,IDH1)基因突变中的优点和缺点,为临床检测脑胶质瘤IDH1基因突变提供有效的方案。方法:收集99例石蜡包埋的临床脑胶质瘤手术标... 详细信息

目的:通过比较全自动免疫组化法与一代测序技术在检测人脑胶质瘤异柠檬酸脱氢酶1(isocitrate dehydrogenase 1,IDH1)基因突变中的优点和缺点,为临床检测脑胶质瘤IDH1基因突变提供有效的方案。方法:收集99例石蜡包埋的临床脑胶质瘤手术标本,采用全自动免疫组化染色机进行IDH1-R132H免疫组化染色,由三名高年资病理医师根据染色结果对IDH1基因突变状态进行判别。同时提取上述99例石蜡包埋的脑胶质瘤组织全基因组DNA,运用ABI3500测序仪检测IDH1-R132H基因突变状态。采用Kappa检验比较两种检测方法检测脑胶质瘤IDH1基因突变状态的一致性。结果:全自动免疫组化染色结果显示99例脑胶质瘤中22例IDH1-R132H阳性;一代测序技术检测结果显示上述病例中20例IDH1基因突变,2例因为DNA质量不佳导致检测无结果。Kappa检验证实全自动免疫组化法和一代测序技术检测脑胶质瘤IDH1基因突变具有较好的一致性(Kappa系数为0.94)。结论:全自动免疫组化法与一代测序技术检测脑胶质瘤IDH1基因突变状态具有高度的一致性,临床实际应用中可首选全自动免疫组化法,而一代测序技术适用于免疫组化检测结果为突变阴性的病例。

关键词：脑胶质瘤 IDH1 一代测序全自动免疫组化

淋巴瘤组织切片CD10全自动免疫组化最佳染色条件初探

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临床与实验病理学杂志 2023年第7期39卷 881-883页

作者：李东鹏何夫义李明王弦安徽省亳州市人民医院病理科亳州236800 安徽医科大学第二附属医院病理科合肥230601 安徽医科大学基础医学院病理学教研室合肥230032

CD10又称共同型急性淋巴细胞白血病抗原,表达于上皮和非上皮组织,在粒细胞、未成熟的淋巴细胞及生发中心细胞阳性[1-2]。在病理诊断中,该抗体主要用于一些淋巴瘤和白血病的分型和诊断,如弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B cell lym-pho... 详细信息

CD10又称共同型急性淋巴细胞白血病抗原,表达于上皮和非上皮组织,在粒细胞、未成熟的淋巴细胞及生发中心细胞阳性[1-2]。在病理诊断中,该抗体主要用于一些淋巴瘤和白血病的分型和诊断,如弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B cell lym-phoma,DLBCL)、滤泡性淋巴瘤(follicular lymphoma,FL)、Burkitt淋巴瘤、前驱B淋巴母细胞性淋巴瘤/白血病、血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤(angioimmunoblastic T-cell lymphoma,AITL)及滤泡性T细胞淋巴瘤等。由此可见,CD10免疫组化检测在淋巴瘤类型鉴别诊断中非常重要,但作者在工作中发现,较多基层医院的会诊切片CD10免疫组化染色效果欠佳,甚至影响诊断,分析其原因,除了组织蜡块固定等因素外,更多的原因是未摸索出适合本实验室的最佳染色方案。为此,本实验室在全自动免疫组化平台基础上进行该抗体临床实验室自建项目(laboratory developed test,LDT)实验,建立实验室内部质控方案,取得了良好的染色效果,现介绍如下。

关键词：淋巴瘤全自动免疫组化质控 CD10

全自动免疫组化筛查ALK基因融合非小细胞肺癌及其病理特征

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北华大学学报（自然科学版） 2016年第2期17卷 209-212页

作者：冯强彭森刘霞徐州市中心医院江苏徐州221009

目的探讨全自动免疫组化筛查间变性淋巴瘤激酶(ALK)基因融合非小细胞肺癌的临床特点及病理特征.方法选取经病理检查确诊的554例非小细胞肺癌组织,采用Ventana抗ALK试剂和全自动免疫组化(IHC)染色检测ALK状态,分析ALK基因融合非小细胞肺... 详细信息

目的探讨全自动免疫组化筛查间变性淋巴瘤激酶(ALK)基因融合非小细胞肺癌的临床特点及病理特征.方法选取经病理检查确诊的554例非小细胞肺癌组织,采用Ventana抗ALK试剂和全自动免疫组化(IHC)染色检测ALK状态,分析ALK基因融合非小细胞肺癌的临床特点和病理特征.结果本次研究的554例非小细胞肺癌患者组织中,共筛选出34例ALK阳性,占6.14%;年龄0.05).组织形态学方面,34例ALK阳性非小细胞肺癌中28例为肺腺癌,6例为非肺腺癌.16例实体型为主腺癌合并黏液产生,7例腺泡型为主腺癌,1例为乳头型为主腺癌,4例为浸润性黏液腺癌,4例为鳞状细胞癌.EGFR基因突变检测显示:仅有1例合并该基因突变,其余均为野生型.9例IHC阳性样本,9例ALK基因融合非小细胞肺癌,9例IHC阴性样本经荧光原位杂交技术检测和RT-PCR检测均为阴性结果,6例IHC染色可能为阳性,经荧光原位杂交技术检测均显示为ALK融合阴性.结论 ALK基因融合肺癌是非小细胞肺癌一新的分子亚型,具有独特的临床表现和病理形态;Ventana抗ALK试剂和IHC染色是检测ALK阳性非小细胞肺癌首选方法,对提高该类型肺癌的检出率及个体化治疗具有重要意义.

关键词：非小细胞肺癌全自动免疫组化间变性淋巴瘤激酶

Bond-Max全自动免疫组化染色机的日常维护

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医疗装备 2019年第7期32卷 122-122页

作者：王侃绍兴市人民医院设备处浙江绍兴312000

早期的免疫组化通过手工操作完成,由于整个制片过程复杂,耗时较长,技术人员在手工操作中对标本前处理的试剂孵育温度和时间难以准确把握,导致染色效果和重复性都较差[1-2]。近期医院引进1台Bond-Max全自动免疫组化染色机,免疫组化的所... 详细信息

早期的免疫组化通过手工操作完成,由于整个制片过程复杂,耗时较长,技术人员在手工操作中对标本前处理的试剂孵育温度和时间难以准确把握,导致染色效果和重复性都较差[1-2]。近期医院引进1台Bond-Max全自动免疫组化染色机,免疫组化的所有步骤(烤片、脱蜡、抗原修复、阻断、标记一抗、二抗、显色直到复染)都可以自动完成,真正实现全自动操作,不仅节省人力,也确保免疫组化染色质量恒定。现分享我们对全自动免疫组化染色机在使用和维护中的体会和认识。

关键词：全自动免疫组化染色维护

NSCLC患者EGFR特异性突变抗体与荧光定量PCR法的对比研究以及与病理特征和预后的关系

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NSCLC患者EGFR特异性突变抗体与荧光定量PCR法的对比研究以及与病...

作者：王肖肖河北医科大学

学位级别：硕士

目的:1.本研究旨在探讨表皮生长因子受体（Epidermal growth factor receptor,EGFR）在非小细胞肺癌（Non-small cell lung cancar,NSCLC）中的突变状态与临床病理特征及预后的关系。2.探讨EGFR基因突变性抗体在NSCLC检测中的敏感性和... 详细信息

目的:1.本研究旨在探讨表皮生长因子受体（Epidermal growth factor receptor,EGFR）在非小细胞肺癌（Non-small cell lung cancar,NSCLC）中的突变状态与临床病理特征及预后的关系。2.探讨EGFR基因突变性抗体在NSCLC检测中的敏感性和特异性,评估全自动免疫组化（Immunohistochemistry,IHC）法在NSCLC EGFR基因突变状态评价中的指导作用。方法:1.回顾性研究2015年4月至2016年12月河北医科大学第四医院胸外科手术切除并经术后病理证实为NSCLC的患者717例,完善临床病理资料,并通过电话随访获得患者生存资料,采用荧光定量PCR法检测EGFR基因突变状态统计学分析其与临床病理特征、总生存期（Overall survival,OS）和无病生存期（Disease-free survival,DFS）的关系。2.将上述收集的717例诊断为NSCLC的手术切除标本,采用全自动免疫组化法检测EGFR Exon 19del E746-A750和Exon 21 L858R的突变状态,与荧光定量PCR法基因检测结果比较,评价EGFR突变性抗体免疫组织化学表达的敏感性和特异性。3.应用SPSS22.0统计软件对数据进行统计学处理,EGFR突变情况与临床病理特征采用χ检验,以P0.05）。选取717例NSCLC的手术切除标本,经全自动免疫组化法检测显示:3+病例75例（10.46%）,2+病例227例（31.65%）,1+和0病例分别为83例（11.57%）和332例（46.32%）。与荧光定量PCR法基因检测结果相比:当定义1+至3+均为阳性时,特异性达80.17%,敏感性84.76%;当定义2+,3+为阳性时,特异性为95.34%,而敏感性为76.47%;当定义3+为阳性而0至2+均为阴性时,特异性达100%,但敏感性低,为20.05%。结论:1.经荧光定量PCR法检测EGFR基因突变的病理类型中,腺癌突变率为61.26%;鳞癌突变率为9.68%;腺鳞癌突变率为41.67%。EGFR在腺癌中的突变率高于其他病理类型。2.经荧光定量PCR法检测EGFR基因突变率为57.60%,主要以E19Ex19Del和E21 L858R突变为主。***基因突变与性别、吸烟史、肿瘤直径均有关;与患者年龄、淋巴结转移、TNM分期、临床分期、脉管瘤栓、气道播散、神经受侵、胸膜受侵无关。4.虽然荧光定量PCR的检测结果仍然是金标准,但全自动免疫组化检测法具有较高的特异性。对于IHC3+的病例,可直接判读为突变阳性,对于2+病例判读为阳性的准确率较高,如条件允许仍可行基因检测,对于1+及阴性的病例,需进一步行基因检测。

关键词：非小细胞肺癌表皮生长因子受体全自动免疫组化病理特征突变

回顾分析174例FISH和IHC全自动平台检测HER-2基因的状态

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中国医学创新 2019年第29期16卷 23-28页

作者：林云恩龙惠东韩秀晶秦积龙谭小军广州医科大学附属肿瘤医院广东广州510095 广州医科大学附属第一医院

目的:分析全自动免疫组化(IHC)和荧光原位杂交(FISH)技术平台检测乳腺浸润性导管癌患者的HER-2蛋白(即C-erbB2蛋白)和HER-2基因扩增的结果的一致性,分析蛋白基因表达状况与临床病理特征的关系。方法:回顾性分析174例乳腺浸润性导管癌患... 详细信息

目的:分析全自动免疫组化(IHC)和荧光原位杂交(FISH)技术平台检测乳腺浸润性导管癌患者的HER-2蛋白(即C-erbB2蛋白)和HER-2基因扩增的结果的一致性,分析蛋白基因表达状况与临床病理特征的关系。方法:回顾性分析174例乳腺浸润性导管癌患者的临床资料,样本经手术、麦默通活检或穿刺取样。分析IHC和FISH检测结果;比较IHC检测C-erbB2蛋白与FISH检测HER-2基因的一致性;分析FISH与IHC检测结果与ER、PR及临床病理参数的关系。结果:FISH检测显示,HER-2基因无扩增表达(-)101例、HER-2基因有不同程度的扩增表达(+)73例;IHC检测显示,C-erbB2蛋白(-)、(+)、(++)、(+++)分别为4、15、114、41例;C-erbB2蛋白(+)和HER-2基因扩增(-)的一致率86.7%(13/15),C-erbB2蛋白(++)和HER-2基因扩增(-)的一致率70.1%(81/114),C-erbB2蛋白(+++)和HER-2基因扩增(+)的一致率92.7%(38/41),两者阳性结果具有高度一致性(Kappa=0.766,P组织学分级有关(P0.05)。结论:可以利用一致性非常好的IHC和FISH两大平台来检测乳腺浸润性导管癌HER-2蛋白和基因的表达状态,以协助临床用药指导;IHC相对价格便宜,初步筛查蛋白结果,可以优先采用,对于结果为不确定的(++)IHC检测标本,再进一步应用FISH法明确HER-2基因扩增状态,以免误导临床;检测操作和阅片判读过程中规范化流程和高科技仪器设备起到很好的辅助作用。

关键词：乳腺癌 HER-2基因荧光原位杂交全自动免疫组化

非小细胞肺癌患者ALK表达与临床病理特征对比分析

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安徽医学 2018年第12期39卷 1466-1469页

作者：王弦李晓灿江冬瑞叶飞飞吴强安徽医科大学第二附属医院病理科合肥230601 安徽医科大学基础医学院病理教研室合肥230001

目的研究100例非小细胞肺癌(NSCLC)患者间变性淋巴瘤激酶(ALK)的表达,并与其临床病理特征进行统计学分析。方法收集安徽医科大学第二附属医院2016年1月至2017年10月收治的NSCLC患者标本100例,采用全自动免疫组化法检测ALK表达情况,统计... 详细信息

目的研究100例非小细胞肺癌(NSCLC)患者间变性淋巴瘤激酶(ALK)的表达,并与其临床病理特征进行统计学分析。方法收集安徽医科大学第二附属医院2016年1月至2017年10月收治的NSCLC患者标本100例,采用全自动免疫组化法检测ALK表达情况,统计分析ALK表达与其临床病理特征。结果 100例NSCLC患者中,6例ALK阳性,阳性表达率为6. 00%。不同年龄、不同肿块直径、不同病理分型患者的ALK阳性表达率进行比较,差异有统计学意义(P 0. 05)。结论 NSCLC患者ALK的表达情况与患者的年龄、肿块直径和病理分型有关,可为临床相关疾病的诊疗提供了重要参考。

关键词：非小细胞肺癌间变性淋巴瘤激酶全自动免疫组化

NSCLC患者EGFR特异性突变抗体与荧光定量PCR法的对比研究

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NSCLC患者EGFR特异性突变抗体与荧光定量PCR法的对比研究