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实时观察Rho激酶对离体培养施万细胞形态和迁移的作用

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解剖学报 2010年第6期41卷 912-915页

作者：黄智慧王莹温州医学院低氧医学研究所机能实验学教研室浙江温州325035 温州医学院生命科学学院检验医学教研室浙江温州325035

目的探讨Rho激酶(ROCK)对离体培养大鼠施万细胞形态和迁移的作用。方法运用原代培养施万细胞技术,并采用细胞免疫荧光化学技术鉴定施万细胞的纯度,同时建立实时观察施万细胞形态和迁移的单细胞迁移平台。基于该平台,在迁移施万细胞前方... 详细信息

目的探讨Rho激酶(ROCK)对离体培养大鼠施万细胞形态和迁移的作用。方法运用原代培养施万细胞技术,并采用细胞免疫荧光化学技术鉴定施万细胞的纯度,同时建立实时观察施万细胞形态和迁移的单细胞迁移平台。基于该平台,在迁移施万细胞前方给予ROCK抑制剂Y-27632浓度梯度,显微实时观察该抑制剂对施万细胞形态和迁移的作用。结果 1.细胞免疫荧光化学显示原代培养的细胞为高纯度的施万细胞;2.单细胞迁移平台非常适合实时研究施万细胞形态和迁移;3.在迁移施万细胞前方给予ROCK抑制剂Y-27632浓度梯度能明显地促进施万细胞突起分支增多,突起变细长,并抑制施万细胞迁移。结论 ROCK能维持施万细胞形态,并调节施万细胞运动、迁移能力。

关键词： Rho激酶施万细胞细胞形态迁移 Y-27632 免疫荧光化学大鼠

NR1和GluR2在成年大鼠海马结构的共表达

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四川大学学报（医学版） 2008年第1期39卷 15-18页

作者：张莉于玮韩太真谢雯罗禹西安交通大学医学院生理学与病理生理学系西安710061 西安医学院生理学教研室西安交通大学环境与疾病相关基因教育部重点实验室

目的探讨NMDA受体NR1亚单位(NMDA/NR1)和AMPA受体GluR2亚单位(AMPA/GluR2)在正常成年大鼠海马结构的分布特征。方法在多聚甲醛固定的海马切片上,采用免疫荧光组织化学方法染色,通过激光扫描共聚焦显微镜观察NR1和GluR2在正常成年大鼠海... 详细信息

目的探讨NMDA受体NR1亚单位(NMDA/NR1)和AMPA受体GluR2亚单位(AMPA/GluR2)在正常成年大鼠海马结构的分布特征。方法在多聚甲醛固定的海马切片上,采用免疫荧光组织化学方法染色,通过激光扫描共聚焦显微镜观察NR1和GluR2在正常成年大鼠海马结构中的表达与分布。结果NR1和GluR2在正常成年大鼠海马结构广泛表达,并且两者免疫荧光染色阳性表达的分布基本一致,其中在CA1和CA3区的锥体细胞层以及齿状回门区的中间神经元表达最强;在CA1和CA3区的分子层以及齿状回的颗粒细胞层中也有明显的NR1和GluR2免疫荧光染色颗粒的分布;但在CA3区的分子层和齿状回的多形层NR1的表达阳性强于GluR2。阳性反应主要位于神经细胞的胞膜和突起。结论NMDA/NR1和AMPA/GluR2在海马结构中的分布特征基本一致,提示它们可能共同参与完成海马的某些重要功能。

关键词： NMDA/NR1 AMPA/GluR2 海马结构免疫荧光化学

ATPase F1α在人结直肠癌组织和细胞株中的表达及其意义

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中国肿瘤生物治疗杂志 2009年第2期16卷 181-186页

作者：李敏玉朱海沫周俊平楼国良第二军医大学附属长海医院特需诊疗科上海200433

目的:观察人结直肠癌组织和细胞株中ATPaseF1α的表达,并探讨其意义。方法:应用免疫组化EnVision法测定收集自长海医院2007年8月至12月的44例结直肠癌组织及癌旁组织手术切除标本中ATPaseF1α的表达;半定量RT-PCR方法检测8例结直肠癌及... 详细信息

目的:观察人结直肠癌组织和细胞株中ATPaseF1α的表达,并探讨其意义。方法:应用免疫组化EnVision法测定收集自长海医院2007年8月至12月的44例结直肠癌组织及癌旁组织手术切除标本中ATPaseF1α的表达;半定量RT-PCR方法检测8例结直肠癌及癌旁组织中ATPaseF1αmRNA的表达水平。采用免疫荧光法检测ATPaseF1α在人结肠癌Lo-Vo细胞株胞膜的表达;采用CCK-8活细胞计数法检测抗ATPaseF1α抗体对LoVo细胞增殖的抑制作用。结果:44例结直肠癌组织中ATPaseF1α的表达显著高于癌旁组织(P0.05)。结肠癌LoVo细胞株胞膜上可见颗粒状分布的ATPaseF1α,ATPaseF1α抗体对LoVo细胞的增殖活性有明显的抑制作用(P<0.01)。结论:人结直肠癌组织和细胞株均高表达ATPaseF1α,其作为肿瘤抗原,有可能成为结直肠癌靶向治疗的新靶点。

关键词： ATP合成酶结直肠肿瘤免疫组织化学免疫荧光化学 CCK-8

孕马血清促性腺激素刺激后卵巢储备功能随年龄变化的研究

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免疫学杂志 2009年第4期25卷 409-412页

作者：梁元晶徐长辉 KIM Beomsu PERESIE Jennifer YEH John 首都医科大学基础医学院生殖医学研究中心 Department of Gynecology-Obstetrics University at BuffaloThe State University of New York

目的探讨孕马血清促性腺激素(PMSG)刺激后不同年龄组雌性大鼠血清中抗中肾旁管激素(AMH)的变化规律,探讨PMSG刺激后AMH对预测卵巢储备功能的作用。方法SD雌性大鼠分为幼年组、成年组和老年组。PMSG注射后54 h,运用ELISA和免疫荧光化学方... 详细信息

目的探讨孕马血清促性腺激素(PMSG)刺激后不同年龄组雌性大鼠血清中抗中肾旁管激素(AMH)的变化规律,探讨PMSG刺激后AMH对预测卵巢储备功能的作用。方法SD雌性大鼠分为幼年组、成年组和老年组。PMSG注射后54 h,运用ELISA和免疫荧光化学方法,检测血清和卵巢中AMH的表达。结果血清AMH水平,幼年组(2.92±0.55)ng/mL,成年组(1.90±0.11)ng/mL,老年组(0.80±0.08)ng/mL,成年组与幼年组(P<0.05)、老年组与幼年组(P<0.001)、老年组与成年组(P<0.001)相比,差异具有统计学意义。卵巢中卵泡总数,幼年组57.3±5.5,成年组31.6±3.6,老年组15.1±1.4,成年组与幼年组(P<0.001)、老年组与幼年组(P<0.001)、老年组与成年组(P<0.05)相比,差异具有统计学意义。AMH阳性卵泡的数量,幼年组9.2±2.0,成年组6.3±1.4,老年组4.4±0.8,呈下降趋势。结论随着大鼠年龄增长,PMSG刺激后,卵巢中分泌AMH的生长卵泡数量减少,血清AMH水平显著降低。PMSG刺激后的AMH水平是一个较好的反映卵巢储备功能的指标。

关键词：卵巢储备 ELISA 免疫荧光化学

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丹参在胚胎干细胞向心肌细胞分化中的作用

中国病理生理杂志 2010年第A10期26卷 1999-2000页

作者：魏文娟马玲马海英金玉楠于艳秋中国医科大学基础医学院病理生理教研室辽宁沈阳110000

双膦酸盐对破骨细胞分化中组织蛋白酶K及骨吸收功能的影响

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中国组织工程研究 2014年第33期18卷 5293-5298页

作者：董伟冯晓洁梁永强彭宏峰邓久鹏温黎明戚孟春河北联合大学口腔医学院河北省唐山市063000

背景:有研究表明双膦酸盐可抑制破骨细胞的骨吸收功能,但对其骨吸收功能关键细胞因子组织蛋白酶K是否产生作用,至今少有报道。目的:观察双膦酸盐对破骨细胞分化中组织蛋白酶K及骨吸收功能影响。方法:用小鼠单核巨噬细胞RAW264.7诱导培... 详细信息

背景:有研究表明双膦酸盐可抑制破骨细胞的骨吸收功能,但对其骨吸收功能关键细胞因子组织蛋白酶K是否产生作用,至今少有报道。目的:观察双膦酸盐对破骨细胞分化中组织蛋白酶K及骨吸收功能影响。方法:用小鼠单核巨噬细胞RAW264.7诱导培养破骨细胞。实验分2组:对照组加入质量浓度100μg/L核因子κB受体活化因子配体进行诱导至收获细胞,双膦酸盐组在对照组的基础上加入10-7 mol/L阿仑膦酸盐处理至收获细胞。培养第7天检测各组破骨细胞生成和骨吸收功能,培养72 h免疫荧光检测两组组织蛋白酶K表达差异,Western blot检测组织蛋白酶K蛋白表达情况。结果与结论:两组均有抗酒石酸酸性磷酸酶阳性多核破骨细胞生成,并在牙本质磨片上形成吸收陷窝;但对照组抗酒石酸酸性磷酸酶阳性多核细胞数目、吸收陷窝数目及陷窝面积均大于双膦酸盐组(P免疫荧光检测组织蛋白酶K表达对照组强于双膦酸盐组(P<0.01);Western blot检测组织蛋白酶K表达双膦酸盐组低于对照组(P<0.01)。结果证实,双膦酸盐通过抑制组织蛋白酶K因子的表达,阻碍破骨细胞的骨吸收功能。

关键词：组织构建骨组织工程双膦酸盐破骨细胞抗酒石酸酸性磷酸酶组织蛋白酶K 骨吸收陷窝免疫印迹免疫荧光化学骨质疏松扫描电镜牙本质磨片国家自然科学基金

人非小细胞肺癌F_1ATPase-α的表达及临床意义

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第二军医大学学报 2007年第11期28卷 1219-1222页

作者：朱海沫李敏玉史平周俊平楼国良第二军医大学属长海医院特需诊疗科上海200433

目的:研究人类非小细胞肺癌(NSCLC)组织中ATP合酶F1ATPase-α的表达,并探讨其临床意义。方法:(1)以EnVision免疫组织化学方法检测38例NSCLC配对标本、7例肺良性肿瘤与肺炎性病变标本的F1ATPase-α表达情况。(2)应用RT-PCR方法检测12例NS... 详细信息

目的:研究人类非小细胞肺癌(NSCLC)组织中ATP合酶F1ATPase-α的表达,并探讨其临床意义。方法:(1)以EnVision免疫组织化学方法检测38例NSCLC配对标本、7例肺良性肿瘤与肺炎性病变标本的F1ATPase-α表达情况。(2)应用RT-PCR方法检测12例NSCLC组织、癌旁肺组织中F1ATPase-α的mRNA表达。(3)用免疫荧光法检测F1ATPase-α在正常支气管上皮细胞与A549细胞胞膜中的表达。结果:(1)F1ATPase-α在肺癌组织呈中高度表达者36例(36/38),低度表达2例;癌旁正常配对组织成呈中高度表达11例(11/38),低度表达27例;7例肺良性病变组织全部低度表达。肺腺癌F1ATPase-α的高表达显著高于肺鳞癌(11/16vs5/20,P<0.05)。F1ATPase-α高表达率在肿瘤不同部位、分化程度、大小、淋巴结转移及临床分期之间差异无统计学意义。(2)12例肺癌组织中F1ATPase-αmRNA相对表达量为0.54±0.19,显著高于配对的癌旁肺组织(0.31±0.12,P<0.01)。(3)肺癌A549细胞胞膜上有颗粒状分布的F1ATPase-α,正常支气管上皮细胞未检测到。结论:(1)F1ATPase-α在NSCLC中有相对较高的表达水平。(2)F1ATPase-α表达于非小细胞肺癌A549细胞株的细胞膜上,提示有作为靶向药物治疗分子靶点的潜力。

关键词： ATP合成酶复合物癌,非小细胞肺免疫组织化学免疫荧光化学

胰腺癌组织转录因子GATA-6表达及其意义的探讨

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中华肿瘤防治杂志 2011年第14期18卷 1101-1104页

作者：陈文博张世能庄燕妍庄晓虹黄凤婷唐健中山大学孙逸仙纪念医院消化内科广东广州510120

目的:探讨胰腺癌组织GATA-6的表达及其对胰腺癌发生、发展的可能作用及临床意义。方法:采用免疫组化检测33例胰腺癌、15例慢性胰腺炎和6例正常胰腺组织GATA-6蛋白的表达;免疫细胞荧光法检测胰腺癌细胞株Panc-1、BxPC-3和SW1990及正常胰... 详细信息

目的:探讨胰腺癌组织GATA-6的表达及其对胰腺癌发生、发展的可能作用及临床意义。方法:采用免疫组化检测33例胰腺癌、15例慢性胰腺炎和6例正常胰腺组织GATA-6蛋白的表达;免疫细胞荧光法检测胰腺癌细胞株Panc-1、BxPC-3和SW1990及正常胰腺导管上皮细胞H6C7的GATA-6蛋白表达情况;Real-time RT-PCR技术检测上述细胞株的GATA-6 mRNA表达;并分析GATA-6与胰腺癌临床病理参数的关系。结果:GATA-6蛋白在胞核中表达,胰腺癌组织GATA-6的阳性表达率(88.9%)显著高于慢性胰腺炎(40.0%)和正常胰腺组织(16.7%),P<0.01,但与性别、年龄、分化程度和临床分期均无显著性相关;3种胰腺癌细胞株均有GATA-6蛋白表达,而正常胰腺导管上皮细胞无表达;3种胰腺癌细胞株GATA-6 mRNA表达也明显高于正常胰腺导管上皮细胞,P<0.05。结论:GATA-6在胰腺癌组织及细胞中呈高表达,提示GATA-6在胰腺癌的发生、发展中可能起一定作用。

关键词：胰腺肿瘤 GATA-6 免疫组化免疫荧光化学

人肝细胞毛细胆管表达IL-2Rα的研究及意义

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临床与实验病理学杂志 2008年第5期24卷 548-551页

作者：陆忠华印永强胡锡琪朱腾方邢益平范钦和南京医科大学第一附属医院病理科南京210029 无锡市妇幼保健医院病理科无锡214000 复旦大学上海医学院病理系上海200032

目的了解人肝细胞毛细胆管是否表达IL-2Rα,观察其表达特异性和灵敏度。方法对正常人肝组织、慢性乙型肝炎等不同病种人肝组织进行IL-2Rα标记,通过免疫组织化学染色、免疫荧光化学染色及免疫电镜3种方法观察其表达。结果免疫组化染色... 详细信息

目的了解人肝细胞毛细胆管是否表达IL-2Rα,观察其表达特异性和灵敏度。方法对正常人肝组织、慢性乙型肝炎等不同病种人肝组织进行IL-2Rα标记,通过免疫组织化学染色、免疫荧光化学染色及免疫电镜3种方法观察其表达。结果免疫组化染色法和免疫荧光染色法显示IL-2Rα标记人肝细胞膜毛细胆管面定位正确,无非特异性染色,而肝细胞膜的血窦面、细胞质、细胞核不被IL-2Rα标记。酶标记免疫电镜显示人肝细胞膜毛细胆管面有明显电子致密物沉积。结论人肝组织毛细胆管确实表达IL-2Rα,其特异性和灵敏度均优于CEA(多克隆抗体)。

关键词：人肝细胞毛细胆管 IL-2Rα 免疫组织化学免疫荧光化学免疫电镜