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中国人群慢性淋巴细胞白血病免疫球蛋白重链可变区基因组成及突变分析

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中华医学遗传学杂志 2009年第2期26卷 196-199页

作者：张亚平陈丽娟徐卫乔纯钱思轩仇红霞缪扣荣刘红李建勇江苏省南通大学附属医院血液科 226001 南京医科大学第一附属医院、江苏省人民医院血液科

目的研究中国慢性淋巴细胞白血病（chronic lymphocytic leukemia，CLL）患者免疫球蛋白重链可变区（immunoglobulin variable heavy chain region，IGVH）基因各个片段的组成以及突变情况。方法应用多重PCR技术扩增64例CLL患者的IGV... 详细信息

目的研究中国慢性淋巴细胞白血病（chronic lymphocytic leukemia，CLL）患者免疫球蛋白重链可变区（immunoglobulin variable heavy chain region，IGVH）基因各个片段的组成以及突变情况。方法应用多重PCR技术扩增64例CLL患者的IGVH基因片段，纯化PCR扩增产物后直接测序，应用IMGT／V-QUEST及IGBlast数据库分析，明确VH基因有无突变和突变位置，以及VH、DH、JH家族各个成员组成情况。结果 64例CLL患者中，VH3家族31例（48％）、VH4家族26例（41％）、VH1家族4例（6％）、VH2家族2例（3％）、VH7家族1例（2％）。44例患者发生体细胞突变，占CLL患者的69％；20例无突变，占CLL患者的3l％，其中6例（9％）VH基因的同源性为100％。VH4家族中有9例无突变（9／26，35％）；VH3家族中8例无突变（8／31，26％）；VH1家族中1例无突变（1／4，25％）。在所检测的CLI，标本中，VH4—34是最常见的VH基因片段，检测出8例（13％），其中无突变3例；其次为VH4—59，检测出7例（11％），无突变者3例。DH基因中DH3家族最常见，有25例（39％）；其中11例（11／20，55％）出现在无突变组中。无突变组中最常见的DH基因片段为DH3—10和DH3—22，各为4例（4／20，20％）。JH基因中JH6家族最常见，检测出23例（36％），其中9例出现在无突变组中（9／20，45％）。结论中国CLL患者IGVH基因家族表达比例和突变情况与西方国家存在显著差异，推测可能与不同的种族和环境中的抗原选择有关，其预后意义有待进一步探讨。

关键词：慢性淋巴细胞白血病免疫球蛋白重链可变区基因突变

应用免疫球蛋白重链可变区上框架区来源的抗原九肽获得的细胞毒T细胞功能分析

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中华血液学杂志 2005年第8期26卷 453-457页

作者：郭晓玲朱平刘英刘静朱霞北京大学第一医院血液科 100034 解放军总医院儿科郑州大学医学院第三附属医院儿科

目的明确在B淋巴细胞肿瘤表面的免疫球蛋白重链可变区(IgHV)的框架区(FR)上是否存在可以激发细胞毒T淋巴细胞(CTL)的抗原表位,这些来源于FR的抗原肽是否能够激发家族特异性的免疫反应,探讨按照B淋巴细胞肿瘤的IgHV基因分型进行家族性的... 详细信息

目的明确在B淋巴细胞肿瘤表面的免疫球蛋白重链可变区(IgHV)的框架区(FR)上是否存在可以激发细胞毒T淋巴细胞(CTL)的抗原表位,这些来源于FR的抗原肽是否能够激发家族特异性的免疫反应,探讨按照B淋巴细胞肿瘤的IgHV基因分型进行家族性的免疫治疗的可能性。方法利用生物信息学系统预测了40例B淋巴细胞肿瘤表面的免疫球蛋白序列的抗原表位,人工合成不同基因家族的抗原九肽,利用T2细胞结合实验检测预测的抗原肽和HLA分子的亲合力。利用体外CTL刺激扩增体系,诱导特异性的CTL细胞增殖,用肽/HLA四聚体检测特异性CTL的数目,应用LDH释放实验检测CTL的细胞毒活性并验证其家族特异性。结果在B淋巴细胞肿瘤的7个IgHV基因家族中找到了12个高亲和力的抗原九肽,其中10个(83%)位于FR,以HLA-A*0201正常供者的外周血单个核细胞(PBMNC)负荷该九肽作为抗原呈递细胞去刺激自身PBMNC,经过4轮刺激,CD8和肽/HLA四聚体双阳性细胞从0.38%上升到49.38%。LDH释放实验证明对HLA-A*0201(+)、IgHV1(+)靶细胞有明显的杀伤作用,并且被IgHV1肽刺激出的CTL不能识别负荷IgHV3肽的靶细胞。结论IgHV基因FR抗原九肽可以刺激产生具有HLA限制性的并且肽特异性的CTL,同时这样的杀伤作用具有家族特异性,以此为靶位有望对B淋巴细胞肿瘤进行家族特异性的免疫治疗。

关键词：免疫球蛋白重链可变区框架区抗原九肽细胞毒T细胞淋巴瘤细胞

小鼠(BALB/c)未分化型免疫球蛋白重链可变区(VH)基因的克隆

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遗传 1986年第6期 19-20+31页

作者：杨志兴曲宝兰杨学成刘伟民李文贤张云湖王军伏陈虹黑龙江省科学院应用微生物研究所哈尔滨黑龙江省科学院应用微生物研究所

我们曾报道了由小鼠胎儿基因文库中克隆未分化型免疫球蛋白重链恒定区C基因的研究结果。与此同时我们还从小鼠基因文库中克隆出未分化型免疫球蛋白重链可变区V基因。并对其进行了初步的研究。免疫球蛋白的重链和轻链可变区的空间叠折形... 详细信息

我们曾报道了由小鼠胎儿基因文库中克隆未分化型免疫球蛋白重链恒定区C基因的研究结果。与此同时我们还从小鼠基因文库中克隆出未分化型免疫球蛋白重链可变区V基因。并对其进行了初步的研究。免疫球蛋白的重链和轻链可变区的空间叠折形成了抗原-抗体结合位点,这对于结合特异抗原具有重要作用。因此克隆与研究免疫球蛋白可变区基因对于认识抗体的特异性、多样性都有一定的意义。我们从相当于一个小鼠基因组的1.2×10~6个重组子中,克隆到8个V基因,并从其中之一分离到5.0kb的含免疫球蛋白重链可变区V基因的DNA片段。

关键词：基因克隆基因组基因文库染色体组免疫球蛋白重链可变区不完全酶切 V_H BALB/c 未分化型小家鼠小鼠

套细胞淋巴瘤中免疫球蛋白重链可变区基因突变状态与预后的关系

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中华医学信息导报 2015年第5期30卷 18-18页

推荐理由：套细胞淋巴瘤（MCL）是一种侵袭性8细胞恶性肿瘤，但新近发现部分MCL患者临床呈惰性。MCL特征性染色体异常时t（11；l4）（q13：q32），这一易位将第11号染色体的cyclin D1基因置于第14号染色体免疫球蛋白（Ig）重链转录增强... 详细信息

推荐理由：套细胞淋巴瘤（MCL）是一种侵袭性8细胞恶性肿瘤，但新近发现部分MCL患者临床呈惰性。MCL特征性染色体异常时t（11；l4）（q13：q32），这一易位将第11号染色体的cyclin D1基因置于第14号染色体免疫球蛋白（Ig）重链转录增强子下游，导致cyclin D1蛋白高表达。

关键词：免疫球蛋白重链可变区套细胞淋巴瘤基因突变 cyclin 预后状态性染色体异常 11号染色体

慢性淋巴细胞白血病患者免疫球蛋白重链片段及其突变状态的研究

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中华血液学杂志 2011年第8期32卷 529-532页

作者：于珍李增军易树华周可树郝牧齐军元李长虹邱录贵中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

目的探讨我国慢性淋巴细胞白血病（CLL）患者免疫球蛋白重链可变区基因（IgVH）突变状态、基因偏颇性及其预后价值。方法应用多重PCR法检测CLL患者表达型IgVH片段使用情况及突变状态，并与患者生存和预后进行相关性分析。结果①共检测初... 详细信息

目的探讨我国慢性淋巴细胞白血病（CLL）患者免疫球蛋白重链可变区基因（IgVH）突变状态、基因偏颇性及其预后价值。方法应用多重PCR法检测CLL患者表达型IgVH片段使用情况及突变状态，并与患者生存和预后进行相关性分析。结果①共检测初诊CLL患者85例，80例（94．1％）成功测序。②IgVH片段的使用存在明显的偏颇性，其中常见的为VH3家族（32例，40．0％）、VH4家族（24例，30．0％），而VH5、VH6和VH7家族少见。VH4—39是最常见的VH基因片段。而J4和D3分别是JH家族和DH家族中使用频率最高的片段。③IgVH突变型56例（70．0％），非突变型24例（30．0％）。其中VH3家族突变率为90．7％（29例），VH4家族突变率为62．5％（15例）。④突变组与未突变组患者无进展生存时间（82个月和17个月，P=0．000）和总生存时间（90个月和41个月，P=0．009）差异均有统计学意义。⑤CLL患者IgVHCDR3区序列具重现性，2例VH片段为VH1-69的患者其CDR3序列与文献报道序列有很高的同源性。VH片段为VH1—18、VH3—7、VH3-23的患者中分别有2例CDR3序列完全相同。结论不同地区间CLL患者IgVH基因家族使用情况和突变状态存在一定差异，IgVH CDR3区序列具重现性，推测相对有限的抗原参与了CLL的发病。

关键词：白血病淋巴细胞慢性聚合酶链反应免疫球蛋白重链可变区 DNA突变分析

华氏巨球蛋白血症患者44例免疫球蛋白重链序列使用特征的分析

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中华医学遗传学杂志 2023年第3期40卷 263-268页

作者：汤菁夏奕尹华王莉吴佳竹陈睿泽梁金花朱华渊范磊李建勇徐卫南京医科大学第一附属医院(江苏省人民医院)血液科南京210036

目的探讨免疫球蛋白重链可变区(IGHV)基因的变异状态与华氏巨球蛋白血症(WM)患者预后的相关性。方法采集2010年12月至2020年12月在江苏省人民医院初诊的44例WM患者的血液和/或骨髓样本,通过直接测序确定主克隆并进行免疫球蛋白重链(IGH... 详细信息

目的探讨免疫球蛋白重链可变区(IGHV)基因的变异状态与华氏巨球蛋白血症(WM)患者预后的相关性。方法采集2010年12月至2020年12月在江苏省人民医院初诊的44例WM患者的血液和/或骨髓样本,通过直接测序确定主克隆并进行免疫球蛋白重链(IGH)基因的序列分析,描述WM患者IGHV-IGHD-IGHJ基因的使用特征。结果在44例患者中,IGHV3基因家族的使用率最高,该结果与中国医学科学院血液病研究所的数据相似,主要使用的片段为IGHV3-23(20.45%vs.15.44%)及IGHV3-74(11.36%vs.7.35%),其次为IGHV4基因家族(15.91%vs.24.26%)。但使用IGHV4家族与预后无相关性。以98%作为IGHV变异状态的截断值,仅5例患者IGHV无变异,且与预后无相关性。根据X-tile分析,选择将92.6%作为WM患者IGHV变异状态的截断值,26例(59.1%)IGHV无变异患者的血清乳酸脱氢酶增高(P区分WM患者的IGHV变异状态。

关键词：免疫球蛋白重链可变区基因变异华氏巨球蛋白血症预后

华氏巨球蛋白血症患者44例免疫球蛋白重链序列使用特征的分析

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华氏巨球蛋白血症患者44例免疫球蛋白重链序列使用特征的分析

应用CpG-寡脱氧核苷酸免疫刺激进行慢性淋巴细胞白血病的染色体研究

2024中国肿瘤标志物学术大会暨CACA整合肿瘤学高峰论坛暨第十七届肿瘤标志物青年科学家论坛暨中国肿瘤标志物产业创新大会

作者：汤菁夏奕尹华王莉吴佳竹陈睿泽梁金花朱华渊范磊李建勇徐卫江苏省人民医院(南京医科大学第一附属医院)

目的探讨免疫球蛋白重链可变区(IGHV)基因的变异状态与华氏巨球蛋白血症(WM)患者预后的相关性.方法采集2010年12月至2020年12月在江苏省人民医院初诊的44例WM患者的血液和/或骨髓样本,通过直接测序确定主克隆并进行免疫球蛋白重链(IGH)... 详细信息

目的探讨免疫球蛋白重链可变区(IGHV)基因的变异状态与华氏巨球蛋白血症(WM)患者预后的相关性.方法采集2010年12月至2020年12月在江苏省人民医院初诊的44例WM患者的血液和/或骨髓样本,通过直接测序确定主克隆并进行免疫球蛋白重链(IGH)基因的序列分析,描述WM患者IGHV-IGHD-IGHJ基因的使用特征。结果在44例患者中,IGHV3基因家族的使用率最高,该结果与中国医学科学院血液病研究所的数据相似,主要使用的片段为IGHV3-23(20.45%vs.15.44%)及IGHV3-74 (11.36%vs.7.35%),其次为IGHV4基因家族(15.91%vs.24.26%).但使用IGHV4家族与预后无相关性.以98%作为IGHV变异状态的截断值,仅5例患者IGHV无变异,且与预后无相关性.根据XGtile分析,选择将92.6%作为WM患者IGHV变异状态的截断值,26例(59.1%)IGHV无变异患者的血清乳酸脱氢酶增高(P区分WM患者的IGHV变异状态。

关键词：免疫球蛋白重链可变区基因变异华氏巨球蛋白血症预后

来源： cnki会议评论

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中华医学遗传学杂志 2010年第1期27卷 86-91页

作者：吴亚芳薛永权陈苏宁姚利蒋慧张俊沈娟潘金兰王勇白淑潇苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所 215006

目的验证CpG-寡脱氧核苷酸（CpG—oligodeoxynucleotide，CpG—ODN）免疫刺激是否能提高B细胞慢性淋巴细胞白血病（chronic lymphocytic leukemia，CLL）核型异常检出率。方法抽取57例B-CLL患者的骨髓或外周血，分别加入CpG-ODN DSP30... 详细信息

目的验证CpG-寡脱氧核苷酸（CpG—oligodeoxynucleotide，CpG—ODN）免疫刺激是否能提高B细胞慢性淋巴细胞白血病（chronic lymphocytic leukemia，CLL）核型异常检出率。方法抽取57例B-CLL患者的骨髓或外周血，分别加入CpG-ODN DSP30＋白细胞介素-2（interleukin-2，IL-2）、植物血凝素（phytohemagglutinin，PHA）、美洲商陆（pokeweed，PWM）和IL-2后进行培养，5d后按常规收获并制备染色体，应用R显带技术进行核型分析。应用Cen12、D13S25、Rb1、ATM、P53、MYB和IgH探针对其中19例核型正常的患者进行组合荧光原位杂交（fluorescence in situ hybridization，FISH）检测。抽提骨髓或外周血单个核细胞基因组DNA，应用聚合酶链反应（polymerase chain reaction，PCR）扩增免疫球蛋白重链可变区（immunoglobulin variable heavy chain，IgVH）并进行DNA序列分析。应用流式细胞仪（flow cytometry，FCM）检测白血病细胞的CD38和ZAP70表达。结果DSP30＋IL-2组的异常核型检出率（43．85％）明显高于PHA组（15．09％）、PWM组（17．31％）和IL-2组（3．13％）（P〈0．01）。DSP30＋IL-2组共检出畸变52种。数目异常以＋12或＋12伴其它异常为最多见（9例）；结构异常以易位为最多见（14例），包括平衡易位11例和不平衡易位3例，前者中又以14q32重排为最多见（7例）。FISH显示19例正常核型患者中13例（68．42％）显示1种或多种异常，包括12三体和p53缺失各1例，IgH重排和部分缺失各1例，13q14．3缺失11例，其中5例合并RB1缺失，1例合并RB1部分缺失，未见ATM和MYB缺失者。PCR揭示10／18例有IgVH突变（55．55％）。FCM检测揭示10／45例CD38＋，35／45例CD38-，11／27例ZAP70＋，16／27例ZAP70-。同时进行CD38和ZAP70检测的26例中，5例为CD38＋ZAP70＋，13例为CD38-ZAP70-，2例为CD38＋ZAP70-，6例为CD38-ZAP70＋。统计学分析揭示复杂核型异常与IgVH无突变之间有相关性，但未发现CD38或ZAP70表达与核型之间有相关性。结论CpG—ODN可显著提高CLL的核型异常特别是各种平衡和不平衡易位的检出率；FISH是常规核型分析的重要补充，二者结合能提供更全面的遗传学信息。

关键词：慢性淋巴细胞白血病细胞遗传学 CpG-寡脱氧核苷酸荧光原位杂交免疫球蛋白重链可变区突变

慢性淋巴细胞白血病患者IgVH基因突变研究

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中华血液学杂志 2008年第3期29卷 164-167页

作者：张亚平陈丽娟郑文娟吴雨洁仇红霞钱思轩徐卫李建勇南京医科大学第一附属医院、江苏省人民医院血液科 210029

目的探讨我国慢性淋巴细胞白血病（CLL）患者IgVH基因各家族成员的发生频率以及突变情况。方法应用多重PCR技术检测29例CLL患者的IgVH基因突变，纯化PCR扩增产物后直接测序，测序结果应用IMGT／V—QUEST数据库进行比对分析，明确有无IgV... 详细信息

目的探讨我国慢性淋巴细胞白血病（CLL）患者IgVH基因各家族成员的发生频率以及突变情况。方法应用多重PCR技术检测29例CLL患者的IgVH基因突变，纯化PCR扩增产物后直接测序，测序结果应用IMGT／V—QUEST数据库进行比对分析，明确有无IgVH突变及突变位置。结果21例患者有体细胞突变，占CLL患者的72.4％；8例无突变。VH3家族16例，占CLL患者的55．2％，其中体细胞突变13例，占81．2％；VH4家族11例，占CLL患者的37．9％，其中突变7例，占63．6％；1例（3．5％）IgVH2-5＊10发生体细胞突变；1例（3．5％）IgVH7-4-1＊02无突变；未发现VH1、VH5和VH6家族成员。结论我国CLL患者IgVH基因家族表达比例与西方国家存在显著差异，可能与种族和环境因素有关，这也可能是西方国家与我国CLL发病率差异的原因之一。

关键词：白血病,淋巴细胞,慢性免疫球蛋白重链可变区基因突变