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Rab27A蛋白调控转录因子E盒结合锌指蛋白1对白细胞介素-6/信号转导与转录激活因子3信号通路的影响

中华实验外科杂志 2023年第4期40卷 611-614页

作者：杨树范静婧马斌林新疆医科大学附属肿瘤医院乳腺甲状腺外科乌鲁木齐830011

目的探索三阴性乳腺癌中Rab27A蛋白调控转录因子E盒结合锌指蛋白1(ZEB1)对白细胞介素(IL)-6/信号转导与转录激活因子3(STAT3)信号通路的影响。方法通过生信分析Rab27A与ZEB1在三阴性乳腺癌中表达,在体外培养三阴性乳腺癌细胞(MDA-MB-231... 详细信息

目的探索三阴性乳腺癌中Rab27A蛋白调控转录因子E盒结合锌指蛋白1(ZEB1)对白细胞介素(IL)-6/信号转导与转录激活因子3(STAT3)信号通路的影响。方法通过生信分析Rab27A与ZEB1在三阴性乳腺癌中表达,在体外培养三阴性乳腺癌细胞(MDA-MB-231、MDA-MB-468)使用慢病毒转染技术进行Rab27A、ZEB1过表达及敲减,并通过回复实验构建Rab27A过表达ZEB1敲减、Rab27A敲减ZEB1过表达的三阴性乳腺癌细胞系。运用蛋白质印迹法(Western blot)验证其蛋白表达。通过免疫印迹技术研究Rab27A调控ZEB1对IL-6/STAT3信号通路的影响,Shapiro-Wilk检测实验数据均服从正态分布。结果在三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞系中,蛋白质印迹法(Western blot)结果显示,ZEB1过表达组高于阴性对照组,差异有统计学意义(0.607±0.019比0.460±0.073,F=124.111,P信号通路被显著激活(2.010±0.092比1.440±0.089,F=196.692,P信号通路有激活趋势,差异有统计学意义(1.808±0.053比1.440±0.089,F=196.692,P信号通路有激活趋势,差异有统计学意义(1.545±0.007比1.282±0.011,F=2211.290,P激活IL-6/STAT3信号通路.

关键词：乳腺癌白细胞介素-6 信号转导与转录激活因子3信号通路

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丹参酮ⅡA调控凋亡及信号转导与转录激活因子3信号通路抑制人结肠癌细胞增殖及迁移

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中华实验外科杂志 2023年第6期40卷 1063-1066页

作者：陈琛徐纪中宋军民郑州大学第一附属医院消化内科郑州450052 郑州大学第一附属医院结直肠肛门外科郑州450052

目的:观察丹参酮ⅡA(TanⅡA)对人结肠癌细胞(SW480、HCT116细胞)增殖、凋亡与迁移的影响,探究其分子机制。方法:采用人结肠癌SW480及HCT116细胞,随机分为对照组,丹参酮ⅡA(25、50、100μmol/L)处理组,噻唑蓝比色法(MTT)检测细胞增殖,流... 详细信息

目的:观察丹参酮ⅡA(TanⅡA)对人结肠癌细胞(SW480、HCT116细胞)增殖、凋亡与迁移的影响,探究其分子机制。方法:采用人结肠癌SW480及HCT116细胞,随机分为对照组,丹参酮ⅡA(25、50、100μmol/L)处理组,噻唑蓝比色法(MTT)检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,划痕试验分析细胞迁移。采用蛋白质印迹法(Western blot)检测SW480细胞中凋亡通路血管内皮生长因子(VEGF)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)、bcl-2相关X蛋白(bax)蛋白及信号转导与转录激活因子3(STAT3)信号通路STAT3、c-Myc蛋白表达水平。结果:丹参酮ⅡA呈剂量及时间依赖性的方式抑制SW480及HCT116细胞增殖;与对照组比较,丹参酮ⅡA(50、100μmol/L)处理组细胞凋亡率分别增加了23.1%、35.3%及26.8%、34.6%;丹参酮ⅡA(50、100μmol/L)干预后,两组细胞的迁移抑制率分别增加了26.6%、36.5%及39.8%、42.0%;丹参酮ⅡA干预后SW480细胞中细胞凋亡通路中VEGF、bcl-2蛋白表达下调,bax蛋白表达显著上调;而STAT3信号通路中STAT3、p-STAT3、c-Myc蛋白相对表达量显著降低。结论:丹参酮ⅡA可抑制结肠癌SW480及HCT116细胞增殖,促进凋亡,降低迁移能力,其机制可能与下调凋亡通路中VEGF、bcl-2蛋白并上调bax蛋白表达;下调STAT3信号通路中STAT3、p-STAT3、c-Myc蛋白表达相关。

关键词：丹参酮ⅡA 结直肠癌增殖侵袭迁移信号转导与转录激活因子3信号通路

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大黄酸对免疫球蛋白A肾病的改善作用及机制研究

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中国药房 2023年第7期34卷 819-824,848页

作者：陈杉杉彭胜男洪婷江西中医药大学中医学院南昌330004 江西中医药大学临床医学院南昌330004

目的基于信号转导与转录激活因子3(STAT3)信号通路,研究大黄酸改善免疫球蛋白A肾病(IgAN)模型大鼠的作用及机制。方法将大鼠随机分为正常对照组、IgAN模型组和大黄酸治疗组(100 mg/kg),每组10只。IgAN模型组和大黄酸治疗组采用牛血清白... 详细信息

目的基于信号转导与转录激活因子3(STAT3)信号通路,研究大黄酸改善免疫球蛋白A肾病(IgAN)模型大鼠的作用及机制。方法将大鼠随机分为正常对照组、IgAN模型组和大黄酸治疗组(100 mg/kg),每组10只。IgAN模型组和大黄酸治疗组采用牛血清白蛋白+脂多糖+四氯化碳联合法复制IgAN模型。造模第7周开始,大黄酸治疗组大鼠灌胃相应药物,正常对照组和模型组大鼠灌胃等量生理盐水,连续4周。末次给药后,检测大鼠尿红细胞数、24 h尿蛋白(24 h-UTP)以及血清中免疫球蛋白A(IgA)、小肠黏液中分泌型IgA(sIgA)的水平;观察大鼠肾皮质和小肠黏膜Peyer结的病理形态学变化以及肾皮质中IgA沉积情况;检测大鼠小肠黏膜Peyer结中白细胞介素17(IL-17)、IL-6和转化生长因子β(TGF-β)的表达水平;检测Peyer结中STAT3和维甲酸受体相关孤儿受体γt(RORγt)mRNA的表达水平;检测Peyer结中磷酸化STAT3(p-STAT3)和RORγt蛋白的表达水平。结果与正常对照组比较,IgAN模型组大鼠尿红细胞数、24 h-UTP以及血清中IgA、小肠黏液中sIgA水平均显著升高(P信号通路活性、调控小肠黏膜Peyer结内的免疫功能有关。

关键词：大黄酸免疫球蛋白A肾病肠黏膜 Peyer结信号转导与转录激活因子3信号通路

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基于STAT3信号探索大黄酸调节肠道Peyer结免疫对IgAN的防治作用及机制研究

基于STAT3信号探索大黄酸调节肠道Peyer结免疫对IgAN的防治作用及...

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作者：陈杉杉江西中医药大学

学位级别：硕士

目的:本课题通过研究大黄酸对免疫球蛋白A肾病(IgAN)模型大鼠信号转导与转录激活因子3(STAT3)信号通路及小肠黏膜派尔集合淋巴结(Peyer结)免疫功能的影响,探讨大黄酸防治IgAN的作用及机制,为临床上IgAN的防治提供新的思路和可行性依据... 详细信息

目的:本课题通过研究大黄酸对免疫球蛋白A肾病(IgAN)模型大鼠信号转导与转录激活因子3(STAT3)信号通路及小肠黏膜派尔集合淋巴结(Peyer结)免疫功能的影响,探讨大黄酸防治IgAN的作用及机制,为临床上IgAN的防治提供新的思路和可行性依据。方法:将40只SPF级雄性SD大鼠,随机分为正常对照组、IgAN模型组、大黄酸治疗组和大黄酸预防组,每组10只。IgAN模型组和大黄酸治疗组前6周牛血清白蛋白(BSA)隔日灌胃(400 mg/kg),大黄酸预防组前6周大黄酸(100 mg/kg)+BSA(400mg/kg)混悬液隔日灌胃;第6周和第8周脂多糖(LPS)尾静脉注射各1次(0.05 mg/次),四氯化碳(CCl)蓖麻油溶液皮下注射每周1次(0.6 m L/次),连续9周;正常对照组用等量生理盐水代替药物。第7周开始大黄酸治疗组和大黄酸预防组每日灌胃大黄酸(100 mg/kg),连续4周;正常对照组和IgAN模型组灌胃等量生理盐水。末次灌胃后,检测大鼠尿沉渣红细胞数、24小时尿蛋白定量(24 h-UTP)、血清肌酐(SCr)和血清尿素氮(BUN);酶联免疫吸附测定法(ELISA)测血清免疫球蛋白A(IgA)和小肠黏液分泌型IgA(s IgA)的含量;苏木素-伊红(HE)染色法观察肾脏和Peyer结病理形态变化,并进行Katafuchi评分和体视学测量;免疫荧光(IF)观察肾小球系膜区IgA沉积情况;免疫组化法(IHC)检测小肠黏膜Peyer结白介素6(IL-6)、白介素17(IL-17)和转化生长因子-β(TGF-β)的表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-q PCR)测小肠黏膜Peyer结STAT3和下游转录因子维甲酸受体相关孤儿受体γt(RORγt)信使核糖核苷酸(m RNA)表达水平;蛋白免疫印迹技术(WB)测小肠黏膜Peyer结中磷酸化STAT3(p-STAT3)和RORγt蛋白表达情况。结果:1.大黄酸对IgAN模型大鼠尿沉渣红细胞数和24 h-UTP的影响:与正常对照组相比,IgAN模型组大鼠尿红细胞数和24 h-UTP均显著升高(P<0.01);与IgAN模型组比较,大黄酸治疗组和大黄酸预防组大鼠尿红细胞数和24 h-UTP均显著降低(P<0.01)。2.大黄酸对IgAN模型大鼠SCr和BUN的影响:与正常对照组相比,IgAN模型组大鼠SCr和BUN均显著升高(P<0.01);与IgAN模型组比较,大黄酸治疗组大鼠SCr和BUN均降低(P<0.05),大黄酸预防组大鼠SCr和BUN均显著降低(P<0.01);与大黄酸治疗组比较,大黄酸预防组大鼠BUN显著降低(P<0.01)。3.大黄酸对IgAN模型大鼠血清IgA和小肠黏液s IgA的影响:与正常对照组相比,IgAN模型组大鼠血清IgA和小肠黏液s IgA浓度均显著升高(P<0.01);与IgAN模型组比较,大黄酸治疗组和大黄酸预防组大鼠血清IgA和小肠黏液s IgA浓度均显著降低(P<0.01);与大黄酸治疗组比较,大黄酸预防组大鼠血清IgA浓度显著降低(P<0.01)。4.大黄酸对IgAN模型大鼠肾脏组织病理学改变的影响:与正常对照组相比,IgAN模型组大鼠肾小体增大,肾小囊扩张,球内系膜增生、纤维化明显,肾小管肿胀阻塞(P<0.01);与IgAN模型组相比,大黄酸治疗组和大黄酸预防组大鼠肾小体肥大、系膜增生纤维化以及肾小管肿胀等情况均有不同程度的改善(P<0.01);与大黄酸治疗组比较,大黄酸预防组大鼠肾小体肥大、系膜增生纤维化以及肾小管肿胀等情况有明显改善(P<0.01)。5.大黄酸对IgAN模型大鼠肾脏组织IgA沉积的影响:正常对照组大鼠肾脏组织IgA荧光不明显。与正常对照组相比,IgAN模型组大鼠肾皮质显现亮绿色颗粒状IgA沉积(P<0.01);与IgAN模型组比较,大黄酸治疗组和大黄酸预防组大鼠肾皮质荧光强度减弱(P<0.01);与大黄酸治疗组比较,大黄酸预防组大鼠肾皮质荧光减弱更加鲜明(P<0.01)。6.大黄酸对IgAN模型大鼠小肠黏膜Peyer结病理形态的影响:与正常对照组相比,IgAN模型组大鼠Peyer结内生发中心增大,体密度明显增加(P<0.01);与IgAN模型组比较,大黄酸治疗组和大黄酸预防组大鼠Peyer结内生发中心均减小,体密度均明显降低(P<0.01)。7.大黄酸对IgAN模型大鼠小肠黏膜Peyer结中IL-17、IL-6、TGF-β表达的影响:与正常对照组相比,IgAN模型组大鼠小肠黏膜Peyer结中IL-17、IL-6、TGF-β的表达均显著升高(P<0.01);与IgAN模型组比较,大黄酸治疗组和大黄酸预防组大鼠IL-17、IL-6、TGF-β的表达显著降低(P<0.01)。8.大黄酸对IgAN模型大鼠小肠黏膜Peyer结中STAT3 m RNA和RORγt m RNA表达的影响:与正常对照组相比,IgAN模

关键词：大黄酸 IgAN 肠黏膜 Peyer结细胞因子信号转导与转录激活因子3信号通路

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