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m型硫氧还蛋白对马铃薯Y病毒侵染烟草的影响

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烟草科技 2015年第11期48卷 11-15页

作者：贾蒙骜张荣春商胜华陈兴江郭玉双王仁刚贵州省烟草科学研究院烟草行业分子遗传重点实验室毕节市烟草公司威宁县分公司贵州省毕节市威宁县553100

为进一步明确病毒与寄主间的相互作用关系,通过同源比对在烟草细胞中克隆到具有m型硫氧还蛋白(m-type thioredoxin)特征的基因,暂命名为Nt Trm。利用原生质体瞬时转化技术、病毒诱导的基因沉默技术(VIGS)、半定量-PCR以及Northern blot... 详细信息

为进一步明确病毒与寄主间的相互作用关系,通过同源比对在烟草细胞中克隆到具有m型硫氧还蛋白(m-type thioredoxin)特征的基因,暂命名为Nt Trm。利用原生质体瞬时转化技术、病毒诱导的基因沉默技术(VIGS)、半定量-PCR以及Northern blot检测技术研究Nt Trm的表达以及Nt Trm表达与PVY积累的关系。结果表明,在PVY接种10 d后红花大金元叶片中Nt Trm表达明显上调;在本氏烟草叶片中Nt Trm下调显著促进了PVY在烟草叶片中的积累;而在烟草原生质体中Nt Trm过量表达则会明显抑制病毒RNA的积累。初步说明烟草细胞内编码m型硫氧还蛋白的基因受PVY侵染而被诱导表达,这类基因的上调表达可能影响PVY在烟草细胞中的侵染。

关键词：烟草 m型硫氧还蛋白马铃薯Y病毒侵染

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侵染人参果的马铃薯M病毒基因组全序列分析

微生物学报 2003年第3期43卷 336-341页

作者：郑红英陈炯陈剑平浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所

测定了侵染人参果的马铃薯M病毒 (PVM Ch)基因组全序列。线状、单链正义RNA全长 852 6bp ,含 6个开读框 (ORF) ,具麝香石竹潜隐病毒属 (GenusCarlavirus)典型结构特征。序列比较表明它与其他PVM分离物各基因核苷酸和编码蛋白氨基酸序列... 详细信息

测定了侵染人参果的马铃薯M病毒 (PVM Ch)基因组全序列。线状、单链正义RNA全长 852 6bp ,含 6个开读框 (ORF) ,具麝香石竹潜隐病毒属 (GenusCarlavirus)典型结构特征。序列比较表明它与其他PVM分离物各基因核苷酸和编码蛋白氨基酸序列同源性分别为62 5 %～ 97 2 %和 60 9%～ 97 4% ,其中CP基因最保守 ,而TGB3基因变异最大。系统进化树分析表明美国爱达荷州马铃薯分离物 (PVM Id) (AF0 2 3877)为PVM的一个远缘株系 ,而其他 4个PVM分离物的成簇在外壳蛋白 (Coatprotein ,CP)和核酸结合蛋白 (Nucleicacidbindingpro tein ,NABP)区域略有差异。这是PVM在人参果上侵染的首次报道。

关键词：侵染人参果序列分析马铃薯M病毒基因系统进化树基因组结构

侵染昆虫前后冬虫夏草菌类枯草杆菌蛋白酶基因表达研究

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药学学报 2013年第7期48卷 1164-1168页

作者：鲁增辉石萍陈仕江重庆市中药研究院重庆400065

通过检测类枯草杆菌蛋白酶Pr1基因的表达变化,了解Pr1基因在冬虫夏草菌侵染贡嘎蝠蛾过程中所起的作用。根据GenBank中已登录的Pr1基因的同源序列设计引物,利用PCR扩增的方法得到采自四川康定的冬虫夏草菌菌株Pr1基因部分序列,结合荧光定... 详细信息

通过检测类枯草杆菌蛋白酶Pr1基因的表达变化,了解Pr1基因在冬虫夏草菌侵染贡嘎蝠蛾过程中所起的作用。根据GenBank中已登录的Pr1基因的同源序列设计引物,利用PCR扩增的方法得到采自四川康定的冬虫夏草菌菌株Pr1基因部分序列,结合荧光定量PCR(qRT-PCR)方法,检测冬虫夏草菌在侵染贡嘎蝠蛾幼虫前后Pr1基因的表达变化。PCR扩增得到Pr1基因部分片段535 bp,GenBank登录号KC009680。qRT-PCR结果显示冬虫夏草菌侵染贡嘎蝠蛾后Pr1基因表达量显著上升,侵染后的Pr1基因表达量是侵染前的2～3倍,Pr1基因在冬虫夏草菌侵染贡嘎蝠蛾的过程中可能起重要作用。本研究为筛选高致病力的冬虫夏草菌奠定了基础。

关键词：冬虫夏草侵染 Pr1基因

禾谷多粘菌(Polymyxa graminis)侵染及传毒体系的研究

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微生物学报 2000年第4期40卷 352-358页

作者：田兆丰陈笑瑜朱坤于嘉林刘仪中国农业大学农业生物技术国家实验室北京100094

在人工气候箱内 ,以小麦为寄主建立了专性寄生禾谷多粘菌 (Polymyxagraminis)的侵染体系 ,使P .graminis能够快速大量繁殖 ,生活史缩短为 1 3～ 1 5d。简化了单孢子堆分离以及病根表面消毒等分离纯化方法 ,对接种菌源材料、寄主苗龄、... 详细信息

在人工气候箱内 ,以小麦为寄主建立了专性寄生禾谷多粘菌 (Polymyxagraminis)的侵染体系 ,使P .graminis能够快速大量繁殖 ,生活史缩短为 1 3～ 1 5d。简化了单孢子堆分离以及病根表面消毒等分离纯化方法 ,对接种菌源材料、寄主苗龄、温度、pH值及营养液成分等影响因素进行了测定 ,优化完善了P .graminis的砂培条件。建立了针对小麦黄花叶病毒(wheatyellowmosaicvirus,WYMV)的稳定高效室内传毒体系。在此体系上 ,真菌传带病毒的效率可达 70 % ,机械接种病毒后的小麦显症时间可缩短至 30d左右。

关键词：禾谷多粘菌侵染真菌传毒植物病害

用共聚焦激光扫描显微镜观测GFP标记的内生固氮菌Klebsiella oxytoca SA2侵染水稻根

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Acta Botanica Sinica 2001年第6期43卷 558-564页

作者：安千里杨学健董越梅冯丽洁匡柏健李久蒂中国科学院植物研究所北京100093

用高效绿色荧光蛋白 (greenfluorescentprotein ,GFP)突变体EGFPmut2的基因标记内生固氮菌———产酸克雷伯氏菌 (Klebsiellaoxytoca (Fl櫣ｇｇｅ)Lautrop)SA2 ,用标记菌接种限菌培养条件下生长的水稻 (OryzasativaL .)幼苗 ,在接种后 1... 详细信息

用高效绿色荧光蛋白 (greenfluorescentprotein ,GFP)突变体EGFPmut2的基因标记内生固氮菌———产酸克雷伯氏菌 (Klebsiellaoxytoca (Fl櫣ｇｇｅ)Lautrop)SA2 ,用标记菌接种限菌培养条件下生长的水稻 (OryzasativaL .)幼苗 ,在接种后 1、2、4、8、12、16和 2 1d ,用共聚焦激光扫描显微镜对水稻鲜根进行光学切片 ,显示了标记菌从水稻根成熟区表面向根内入侵的过程。定殖在根表面的标记菌主要从侧根伸出的位置侵入侧根皮层 ,从邻近发生侧根的位置进入内皮层和维管柱。SA2还能从初生根成熟区无侧根伸出的位置侵入皮层向维管柱迁移。SA2入侵水稻根引发了水稻根局部的过敏反应以阻滞细菌进一步入侵 ,表现为侵入根内的细菌周围的根细胞细胞壁变厚 ,在蓝光下发出很强的黄绿荧光。

关键词：内生固氨菌侵染绿色荧光蛋白共聚焦激光扫描显微镜水稻根植物

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扩展青霉侵染柑橘机制分析（英文）

食品科学 2019年第16期40卷 97-106页

作者：赵利娜李慧芳余江刘坤张晓云杨其亚张红印江苏大学食品与生物工程学院

从细胞壁降解酶的角度利用转录组技术分析扩展青霉(Penicilliumexpansum)侵染柑橘的机制。P. expansum H1在改良的Marcus培养基和柑橘体内均可以产生细胞壁降解酶聚半乳糖醛酸酶、果胶甲基半乳糖醛酸酶、内切β-1,4-葡聚糖酶和β-葡萄... 详细信息

从细胞壁降解酶的角度利用转录组技术分析扩展青霉(Penicilliumexpansum)侵染柑橘的机制。P. expansum H1在改良的Marcus培养基和柑橘体内均可以产生细胞壁降解酶聚半乳糖醛酸酶、果胶甲基半乳糖醛酸酶、内切β-1,4-葡聚糖酶和β-葡萄糖苷酶。同时,与P. expansum H1侵染柑橘相关的基因表达量均上调,如与细胞壁降解相关的基因、与桔霉素产生相关的基因、与宿主pH值改变相关的基因、与抗氧化应激反应相关及与效应因子相关的基因。结果表明:在P. expansum H1侵染柑橘的过程中,细胞壁降解酶、桔霉素、pH值、抗氧化酶等均起到重要的作用。

关键词：扩展青霉柑橘侵染酶活转录组

重组型大豆花叶病毒河北分离物序列特征及侵染性

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作物学报 2015年第11期41卷 1657-1662页

作者：林静杨永庆侯文焕杨春燕谢令琴智海剑张孟臣河北农业大学农学院河北保定071001 河北省农林科学院粮油作物研究所/国家大豆改良中心石家庄分中心/农业部黄淮海大豆生物学与遗传育种重点实验室/河北省作物遗传育种实验室河北石家庄050035 南京农业大学作物遗传与种质创新国家重点实验室/农业部大豆生物学与遗传育种重点实验室/国家大豆改良中心江苏南京210095

重组型大豆花叶病毒(recombined soybean mosaic virus,SMV-R)是一种新SMV类型,在我国多个大豆产区广泛流行。本研究对一个重组型SMV河北分离物(HB-RS)进行全基因组测序,比较与非重组型SMV在侵染4个大豆品种后病毒浓度积累的差异。结果... 详细信息

重组型大豆花叶病毒(recombined soybean mosaic virus,SMV-R)是一种新SMV类型,在我国多个大豆产区广泛流行。本研究对一个重组型SMV河北分离物(HB-RS)进行全基因组测序,比较与非重组型SMV在侵染4个大豆品种后病毒浓度积累的差异。结果显示,除poly-A尾巴外,HB-RS(NCBI登录号为KR065437)由9993个核苷酸组成,包含一个开放阅读框(open reading frame,ORF),翻译后形成3202个氨基酸,系统进化分析结果显示HB-RS分离物与另外两个重组型SMV分离物聚在一组。抗性鉴定结果显示,4个品种对HB-RS和Sc6平均病情指数分别为59.5和60.5,相同大豆品种对不同的株系(分离物)可能呈现不同的症状和抗性表现,其中冀豆17对Sc6和HB-RS分别表现高抗和中抗,表明大豆对SMV的抗性存在一定的株系(分离物)专化性。此外,HB-RS在4个品种中的浓度积累均高于Sc6,在南农1138-2病毒浓度最高,达522 U,其次为五星1号(471 U)和冀黄13(199 U),最低为冀豆17,仅90 U。说明HB-RS在寄主体内更具有生存适应性,不同品种对SMV存在抗性差异。冀豆17可作为抗性品种和亲本进一步推广。

关键词：重组型大豆花叶病毒基因组病毒浓度侵染

梨火疫病菌在库尔勒香梨枝条中的侵染定殖和扩展特征研究

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果树学报 2023年第8期40卷 1692-1702页

作者：吕天宇徐琳赟席海珅韩剑罗明新疆农业大学农学院·农林有害生物检测与防控重点实验室乌鲁木齐830052 农业农村部西北荒漠绿洲农林外来入侵生物防控重点实验室乌鲁木齐830052

【目的】示踪梨火疫病菌Erwinia amylovora在库尔勒香梨(Pyrus sinkiangensis Yu)(简称香梨)枝条组织中侵染定殖和扩展特征,为梨火疫病的有效防治提供依据。【方法】以分离获得梨火疫病强致病力菌株E.a001为材料,采用热激法将携带有绿... 详细信息

【目的】示踪梨火疫病菌Erwinia amylovora在库尔勒香梨(Pyrus sinkiangensis Yu)(简称香梨)枝条组织中侵染定殖和扩展特征,为梨火疫病的有效防治提供依据。【方法】以分离获得梨火疫病强致病力菌株E.a001为材料,采用热激法将携带有绿色荧光蛋白基因(green fluorescent protein,GFP)质粒phc60-gfp转化E.a001,获得了能发出强烈绿色荧光的标记菌株E.a001-gfp。利用该标记菌株接种香梨枝条,检测、观察其在香梨枝条组织中的侵染定殖和扩展动态。【结果】针刺接种和喷雾接种E.a001-gfp引起枝条发病的最低浓度分别为106cfu·mL^(-1)和107cfu·mL^(-1)。相同浓度的病原菌接种,喷雾接种较针刺接种后发病显症时间延迟2~3 d。梨火疫病菌侵染枝条产生的坏死病斑的扩展速率随病原菌浓度提高而升高;病菌在1年生枝条上的生长扩展速度显著快于在2年生枝条内的扩展速度。梨火疫病菌入侵后主要存在于枝条维管系统中,大量分布于皮层薄壁细胞和韧皮部薄壁细胞间隙,少量存在于木质部导管中。在香梨发病枝条上,病健交界处的活菌数量最高,可达到108cfu·g^(-1),未显症部位0~10 cm处病原菌为105cfu·g^(-1),但在香梨枝条病斑外未显症部位10~15 cm处均未分离出病原菌。【结论】研究明确了梨火疫病菌在香梨枝条组织中的扩展距离、迁移时间及速率,以及分布及定殖量,为病枝的准确修剪和制定病害的综合防控措施提供了科学依据。

关键词：库尔勒香梨梨火疫病菌绿色荧光蛋白基因标记侵染扩展

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甘蔗鞭黑粉菌侵染甘蔗的早期可视化观察

微生物学报 2021年第3期61卷 596-606页

作者：兰仙软王雨坤吴昊鸣卢姗仇金凤李茹陈保善广西大学生命科学与技术学院广西南宁530004 亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室广西南宁530004 广西甘蔗生物学重点实验室广西南宁530004 广西大学农学院广西南宁530004

【目的】甘蔗鞭黑粉菌(Sporisorium scitamineum)引起的甘蔗黑穗病是我国甘蔗生产重要的病害。示踪甘蔗鞭黑粉菌侵染甘蔗的过程将有助于揭示其致病性和甘蔗抗黑穗病机制,为抗病品种的选育以及黑穗病的防治奠定基础。【方法】利用农杆菌... 详细信息

【目的】甘蔗鞭黑粉菌(Sporisorium scitamineum)引起的甘蔗黑穗病是我国甘蔗生产重要的病害。示踪甘蔗鞭黑粉菌侵染甘蔗的过程将有助于揭示其致病性和甘蔗抗黑穗病机制,为抗病品种的选育以及黑穗病的防治奠定基础。【方法】利用农杆菌介导的遗传转化技术对甘蔗鞭黑粉菌进行黄色荧光标记,对转化子进行配合及致病力检测,将标记菌株接种甘蔗感病品种ROC22及抗病品种中蔗1号、中蔗6号和中蔗9号并进行早期可视化观察。【结果】组成型表达的eYFP不影响标记菌株的配合及致病能力,而且黄色荧光性状能通过冬孢子稳定遗传。激光共聚焦显微观察表明,注射接种病原菌第5天,在感病品种ROC22的生长点已可见荧光菌丝及少量聚集状菌丝体,在抗病品种中蔗1号、中蔗6号和中蔗9号中可见少量单一丝状菌丝,无聚集状菌丝体。接种后35 d,在ROC22中可见大量聚集状菌丝体,但在中蔗品种中的聚集状菌丝体明显较少,而以中蔗1号最少。【结论】成功构建了甘蔗鞭黑粉菌侵染甘蔗的荧光示踪系统,并发现中蔗系列品种存在抑制甘蔗鞭黑粉菌菌丝体在细胞间扩展的机制。

关键词：甘蔗鞭黑粉菌荧光标记甘蔗侵染