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基于PRRSV人工感染鄂通两头乌筛选抗病指示性状和候选基因

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基于PRRSV人工感染鄂通两头乌筛选抗病指示性状和候选基因

作者：高国丽华中农业大学

学位级别：硕士

猪繁殖与呼吸综合征(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome,PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus,PRRSV)引起的一种以各年龄段猪呼吸障碍、母猪繁殖障碍、仔猪高死亡率为主要特征的病毒性疾病。迄今为止PRRS的防控方式主要有生物安全和疫苗接种,目前PRRSV商业化的灭活疫苗主要是基于单个的PRRSV毒株,对高度变异的PRRSV感染没有发挥很好的保护作用,而弱毒疫苗可能出现毒力返强等问题。因此在遗传水平上增强宿主对PRRS的抗病性,实施抗病育种,为PRRS防控提供新的方法。本课题组通过人工感染PRRSV后发现通城猪与大白猪相比表现出较强的抗病力,两品种在临床症状、细胞因子水平、血常规指标、肺部病理损伤程度、血清中的病毒载量等性状存在显著差异。进一步利用抗病性存在显著差异的大白猪与通城猪杂交,再经连续多代的横交构建了高代横交群体,这个群体是抗病性状基因定位和抗病基因鉴定的理想资源群体。因此,本研究利用自主构建的高代横交群体为研究对象,通过人工感染PRRSV后对病毒载量、血常规指标、体温、体重、存活力(存活与否及存活时间)等反应宿主抗病性的指标进行测定,并对所测定的性状进行分析来筛选抗病指示性状。选择抗病和易感两极端个体进行外周血转录组测序,筛选抗病候选基因并进行信号通路分析。主要结果如下:1. 利用大白猪×通城猪高代横交群体进行PRRSV人工感染,测定感染不同时点的病毒载量和增重、血常规指标等性状,分析变化规律利用已构建的PRRS抗病的通城猪与易感的大白猪高代横交群体中的72头仔猪进行PRRSV人工感染试验,观察其临床症状,收集感染第0-35天的体温和临床症状,进行血常规指标、病毒载量和体重的测定。结果显示PRRSV感染后陆续出现各种临床症状,体温持续升高到感染后第6天,最高体温达43.9℃,平均体温41.2±1.1℃,以后体温略有下降但仍高于正常体温,第10天后以锯齿形式逐渐降低直至正常体温。感染第7天出现个体死亡,第10天为死亡的高峰期,第14天后平缓、19天后稳定。病毒载量在第0-4天升高,第4天达到峰值并持续到第7天,第7-35天病毒载量逐渐下降至6 logcopies/m L。PRRSV感染后第0-4天体重增长速度缓慢,第4-21天体重一直呈负增长、第7-11天体重减少量达最大值、第21-35天体重呈正增长且增长量逐渐增加。第4,7天与感染前第0天相比,白细胞计数、淋巴细胞百分比、单核细胞计数均都极显著降低(P体重增长和血常规指标的差异,抗病组和易感组在病毒载量、体重增长量、血常规指标等性状都存在显著差异,抗病组的病毒载量在第4、7、11天显著低于易感组(P体重增长量在第7-14天均显著高于易感组(P体重增长都与感染后14天存活呈中度相关,4种血液性状与病毒载量也呈中度相关。根据这种相关性可通过早期的病毒载量高低和体重增长量以及4种血液性状的变化来判断个体抗过病毒感染而存活下来的可能性,因此早期病毒载量和体重增长以及4种血液性状可作为PRRS抗病性的指示性状。2. 通过转录组测序分析人工感染PRRSV后不同时间点的抗病个体和易感个体外周血基因表达差异为了从转录水平上研究抗病个体和易感个体对PRRS抗病性的差异,选取PRRSV感染前第0天和感染后第4、7、11天的抗病个体(7头)和易感个体(10头)的外周血白细胞(简称外周血)进行转录组测序分析。首先对不同时间点的外周血进行时序分析,发现感染后第4天与感染前第0天相比有2422个差异表达基因、感染后第7天与感染前第0天相比有1717个差异表达基因,感染后第11天与感染前第0天相比有3372个差异表达基因;通过KEGG、GO富集分析发现第4天特有的差异表达基因富集在细胞分裂和分化,可能对猪的生长发育存在影响,感染后第7天特有的差异表达基因富集在wnt通路和信号传导上,可能在免疫反应中发挥作用,感染后第11天特有的差异表达基因主要富集在转录后加工和翻译后修饰。在HP-PRRSV感染后的不同阶段宿主发挥的的免疫应答途径不同。其次用加权基因共表达网络分析(Weighted Gene Co-Expression Network Analysis,WGCNA)抗病组和易感组不同

关键词： HP-PRRS 鄂通两头乌病毒载量体重增长血常规指标转录组指示性状抗病候选基因

综合口腔运动干预在早产儿经口喂养中运用研究

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中文科技期刊数据库（全文版）医药卫生 2022年第1期 0043-0045页

作者：田华珍浙江省丽水市青田县人民医院浙江丽水323900

为提高早产儿喂养质量,改善早产儿体重,促进早产儿健康成长,探讨早产儿采用综合口腔运动护理干预的应用价值。方法:采用回顾性分析法,从2020年10月-2021年3月这一时间段进行抽样,抽选样本数量为80,抽样对象为这一期间我院收治的早产儿,... 详细信息

为提高早产儿喂养质量,改善早产儿体重,促进早产儿健康成长,探讨早产儿采用综合口腔运动护理干预的应用价值。方法:采用回顾性分析法,从2020年10月-2021年3月这一时间段进行抽样,抽选样本数量为80,抽样对象为这一期间我院收治的早产儿,再按照入院时间先后将抽选的早产儿分为两组,1/2纳入对照组,实施常规喂养,剩余1/2纳入观察组,实施综合口腔运动干预,从对照组和观察组早产儿经喂养后的喂养指标、喂养前后体重变化等方面来对比喂养效果,分析综合口腔运动干预的作用。结果:从早产儿每分钟摄入奶量方面可知,观察组数据高于对照组(P体重可知无明显差异(P>0.05);实施喂养干预后,比较观察组和对照组早产儿体重可知观察组早产儿明显高于对照组(P体重症状,应用价值高,值得临床广泛应用。

关键词：综合口腔运动早产儿经口喂养喂养指标体重增长

双胎妊娠产妇产前体重增长指标及血清白蛋白水平预测不良妊娠结局的价值分析

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川北医学院学报 2022年第8期37卷 988-991,1054页

作者：邓霞梅罗运山罗秀珍来宾市人民医院产科广西来宾546100 来宾市人民医院重症医学科广西来宾546100

目的:分析双胎妊娠产妇产前体重增长指标及血清白蛋白(ALB)水平预测不良妊娠结局的价值。方法:选取130例双胎妊娠产妇为研究对象,根据不同妊娠结局分为研究组(出现不良妊娠结局,n=52)和对照组(未出现不良妊娠结局,n=78)。比较两组产妇... 详细信息

目的:分析双胎妊娠产妇产前体重增长指标及血清白蛋白(ALB)水平预测不良妊娠结局的价值。方法:选取130例双胎妊娠产妇为研究对象,根据不同妊娠结局分为研究组(出现不良妊娠结局,n=52)和对照组(未出现不良妊娠结局,n=78)。比较两组产妇产前体重增长指标、血清ALB水平,分析其对不良妊娠结局的预测价值。结果:130例双胎妊娠产妇共有52例出现不良妊娠结局,发生率为40%;其中,以早产、低出生体重儿的构成比最高,分别占38.46%和23.08%。研究组产妇的孕周短于对照组(P增长、产前体重、体重增长及产前血清ALB水平均低于对照组(P增长、产前体重、体重增长及产前血清ALB水平预测双胎妊娠产妇不良结局的受试者工作特征曲线(ROC曲线)下面积(AUC)差异均有统计学意义(P体重增长;在Cut-off值下,产前血清ALB的预测灵敏度最高,BMI增长的预测特异度最高。结论:双胎妊娠产妇产前较低的体重增长指标和血清ALB水平可用于预测不良妊娠结局,临床医生应加强孕期的营养指导和体重管理。

关键词：双胎妊娠体重增长白蛋白不良妊娠结局

孕期营养及体重增长对妊娠结局影响的研究进展

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内蒙古医学杂志 2022年第7期54卷 840-843页

作者：梁艳荣刘爱菊张俊绘常进科内蒙古医科大学呼和浩特010110 内蒙古自治区妇幼保健院呼和浩特010010

随着人们生活水平的不断提高,育龄期女性孕期营养过剩和孕期体重增长过多、过快等问题引起的妊娠期合并症及不良分娩结局逐渐成为妇产科领域的热议话题[1,2]。一项研究表明,大于50%的孕妇认为,孕期补充营养越多,胎儿越健康,大约有27%的... 详细信息

随着人们生活水平的不断提高,育龄期女性孕期营养过剩和孕期体重增长过多、过快等问题引起的妊娠期合并症及不良分娩结局逐渐成为妇产科领域的热议话题[1,2]。一项研究表明,大于50%的孕妇认为,孕期补充营养越多,胎儿越健康,大约有27%的孕妇认为,在满足胎儿生长所需的基础上,孕期体重增长不会增加不良妊娠结局的风险[3],所以,孕期营养过剩及孕期体重增长过度的现象普遍存在,最终导致一系列不可逆转的妊娠合并症及不良分娩结局的发生。

关键词：孕期营养体重增长妊娠结局

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早产儿体重增长的动态评估及其意义

中华儿科杂志 2010年第9期48卷 661-667页

作者：茹喜芳冯琪王颖张欣李星蒙景雯郭在晨北京大学第一医院儿科 100034

目的研究早产儿宫内外生长迟缓发生率情况;显示该组人群婴儿时期生长模式.方法回顾分析2002年1月至2009年4月,我院新生儿重症监护病房（Neonatal Intensive Care Unit,NICU）住院治疗,并坚持出院后随访的早产儿.入选标准：胎龄〈37周... 详细信息

目的研究早产儿宫内外生长迟缓发生率情况;显示该组人群婴儿时期生长模式.方法回顾分析2002年1月至2009年4月,我院新生儿重症监护病房（Neonatal Intensive Care Unit,NICU）住院治疗,并坚持出院后随访的早产儿.入选标准：胎龄〈37周;单胎;生后24 h内入院;住院时间≥14 d;出院后至少随访至校正年龄3个月.住院期间对早产儿宫内、外生长迟缓、生后2周及校正胎龄38～40周时仍住院患儿生长迟缓（≤生长曲线的第10百分位）情况进行描述,并对随访期早产儿生长迟缓情况及体重增长趋势进行描述.结果符合纳入标准患儿共计239例（男135例,女104例）,以体重评价,IUGR及出院时EUGR发生率分别为25.5%及40.6%,IUGR及出院时EUGR发生率均随体重减少而增加,未呈现随胎龄增加而降低的趋势.校正胎龄38～40周仍住院者生长迟缓发生率为61.8%.婴儿期校正年龄生长迟缓发生率38～40周20.5%,28 d 15%,61 d 8.8%,91 d17%,122 d 10.4%,152 d 10.1%,183 d 11.9%及274 d 7.4%,校正年龄3个月后生长迟缓发生率未再进一步降低.校正年龄6个月时女童生长迟缓发生率（19.3%）高于男童（3.8%）（x2=6.181,P=0.017）.胎龄〈32周、出生体重≤1500 g者中仅男童胎龄〈32周者于校正年龄2个月及4个月时平均体重高于生长曲线第50百分位,余婴儿期平均体重低于生长曲线第50百分位.结论早产/低出生体重儿是生长迟缓的高危人群,极低出生体重儿问题较为突出.生长迟缓问题随年龄增加有所减轻,远期预后有待进一步随访.

关键词：婴儿早产胎儿生长迟缓体重增长随访研究

养鱼“八字经”在杂交鳢水花培育过程中的应用

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科学养鱼 2023年第10期 24-25页

作者：李文静厦门润和动物药业有限公司福建厦门361000

杂交鳢是由产地为华中地区的乌鳢和产地为华南地区的斑鳢杂交所产生的子一代,由于其具有口感好、消费旺、产量高、耐低氧、耐运输、病害少等特点,近些年养殖数量增长明显。杂交鳢从水花鱼苗到商品鱼的养殖过程中,水花鱼苗培育是最难的... 详细信息

杂交鳢是由产地为华中地区的乌鳢和产地为华南地区的斑鳢杂交所产生的子一代,由于其具有口感好、消费旺、产量高、耐低氧、耐运输、病害少等特点,近些年养殖数量增长明显。杂交鳢从水花鱼苗到商品鱼的养殖过程中,水花鱼苗培育是最难的部分。这个阶段主要是将杂交鳢从30万尾/千克左右养殖到500尾/千克左右,历时一个月左右,体重增长300倍。由于生长速度快,水体环境多变,这个阶段的水花鱼苗培育面临着诸多挑战。笔者从传统的养鱼“八字经”所归纳的水、种、饵、密、混、轮、防、管8个方面分析杂交鳢的管理要点和推荐解决方案。

关键词：鱼苗培育养殖数量水体环境子一代体重增长杂交鳢水花管理要点

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肉犊牛的体重增长规律及饲养要点

畜牧兽医科技信息 2022年第9期38卷 169-170页

作者：刘春东哈尔滨完达山奶牛养殖有限公司黑龙江哈尔滨150000

当前,在肉牛的饲养生产过程中,生长发育最直接的指标就是体重,而肉犊牛的体重增长规律通常包括体重增长一般规律和体重增长的平衡性以及补偿增长规律。需要根据肉犊牛实际的体重增长规律为其供应充足的营养,确保犊牛可以呈现快速的生长... 详细信息

当前,在肉牛的饲养生产过程中,生长发育最直接的指标就是体重,而肉犊牛的体重增长规律通常包括体重增长一般规律和体重增长的平衡性以及补偿增长规律。需要根据肉犊牛实际的体重增长规律为其供应充足的营养,确保犊牛可以呈现快速的生长发育状态,以获得良好的生产效果,最终有效提高肉牛生产的经济收益。本文主要针对肉犊牛体重的增长规律进行分析,并且根据多年的实践经验总结有效的饲养措施,供参考。

关键词：肉犊牛体重增长一般规律饲养管理

多样化妊娠队列中孕期体重变化与50年死亡率的关联:一项前瞻性、观察性队列研究

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中华围产医学杂志 2024年第1期27卷 2-2页

作者：薛亦伟杨慧霞北京大学第一医院妇产科

关于孕期不合理的体重增长对不良母儿妊娠结局的影响已有较多文献报道, 但是很少有研究关注孕期增重(gestational weight gain, GWG)与母亲远期健康之间的关系。2023年10月, 一项前瞻性、观察性队列研究[1]在线发表于Lancet, 该文章基... 详细信息

关于孕期不合理的体重增长对不良母儿妊娠结局的影响已有较多文献报道, 但是很少有研究关注孕期增重(gestational weight gain, GWG)与母亲远期健康之间的关系。2023年10月, 一项前瞻性、观察性队列研究[1]在线发表于Lancet, 该文章基于美国1959年至1965年建立的一个围产期合作项目妊娠队列, 结合国家死亡指数以及社会保障死亡者文件中截至2016年底的人口数据, 探究孕期体重改变与50年后全因死亡率以及心血管、糖尿病等特定病因死亡率之间的关系。

关键词：孕期体重队列研究孕期增重全因死亡率观察性体重增长 gestational 合作项目

孕期体重增长及营养治疗对妊娠期糖尿病结局的影响

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中华预防医学杂志 2010年第10期44卷 903-907页

作者：范岩峰许榕仙蔡李倩杜丽雅厦门市妇幼保健院营养科 361003 福建医科大学公共卫生学院营养与食品卫生系

目的探讨孕期体重增长情况与妊娠期糖尿病（GDM）的关系,分析饮食治疗对改善GDM结局的作用.方法 2007-2009年,在厦门市妇幼保健院收集GDM患者265例,并以同期就诊的正常孕妇571名作为对照组.收集一般情况资料并于孕20周前、孕26～27周... 详细信息

目的探讨孕期体重增长情况与妊娠期糖尿病（GDM）的关系,分析饮食治疗对改善GDM结局的作用.方法 2007-2009年,在厦门市妇幼保健院收集GDM患者265例,并以同期就诊的正常孕妇571名作为对照组.收集一般情况资料并于孕20周前、孕26～27周（孕中期）、孕35～36周（孕晚期）及分娩前监测体重,分析不同年龄段（＜25、25～、30～、≥35岁）两组孕妇不同孕周的体重增长情况及28周前体重增长对GDM发病的影响,同时对GDM患者给予营养治疗并评价血糖控制情况对妊娠结局的影响.结果 25～、30～、≥35岁年龄段GDM组孕期总体重增长分别为（16.9±6.3）、（16.8±6.1）、（16.5±6.0）kg,对照组分别为（13.9±3.0）、（13.8±2.7）、（13.3±2.7）kg（t值分别为6.259、5.885、3.533,P值均＜0.05）;孕20～27周间,＜25、25～、30～岁年龄段GDM组增长的体重分别为（5.2±1.0）、（5.4±1.7）、（4.8±1.3）kg,对照组分别为（3.3±1.3）、（3.7±1.6）、（3.5±0.7）kg（t值分别为5.026、9.659、11.19,P值均＜0.05）;孕26～36周间,≥35岁年龄段GDM组体重增长为（3.6±2.0）kg,低于对照组的（4.0±0.9）kg（t=-2.449,P＜0.05）.25～、30～岁年龄段GDM组孕28周前体重增长超过13 kg的暴露率分别为41.22%（54/131）及44.94%（40/89）,对照组分别为30.04%（76/253）及26.07%（55/211）（OR值分别为1.633、2.315,P值均＜0.05）.血糖控制良好组及对照组的新生儿出生体重异常率分别为6.6%（12/182）及9.4%（54/571）,均低于血糖控制不佳组的20.5%（17/83）（x2值分别为11.490、9.119,P值均＜0.0125）,血糖控制不佳组早产率为21.7%（18/83）,高于对照组的10.8%（62/571）（x2=7.945,P＜0.0125）.血糖控制良好组及血糖控制不佳组的剖宫产率分别为46.7%（85/182）及65.0%（54/83）,均高于对照组的25.4%（145/571）（x2值分别为29.540、53.860,P值均＜0.0125）.结论孕中期体重增长对GDM的发病有影响,25～岁年龄段的孕妇孕28周前总体重增长不宜超过13 kg;及时对GDM孕妇进行营养治疗并控制血糖,能改善其妊娠结局.

关键词：孕妇糖尿病体重增长营养疗法