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多肽组学技术在体液生物标志物中的研究进展

质谱学报 2021年第5期42卷 926-941,I0010页

作者：郑琬琳万磊磊李水明洪晓榆王勇深圳大学生命科学学院深圳市海洋生物资源与生态环境重点实验室深圳市脑病和大数据研究所广东深圳518055 深圳湾实验室广东深圳518055 深圳-香港脑科学创新研究院广东深圳518055

多肽组学是蛋白质组学技术的延伸,理论上是指器官、组织、细胞和体液中分子质量小于10 ku的全部内源性多肽。体液多肽组包含了丰富的人体病理和生理信息,自2000年提出生物标记物研究以来,引起了研究者的广泛关注。本文对多肽组学的研究... 详细信息

多肽组学是蛋白质组学技术的延伸,理论上是指器官、组织、细胞和体液中分子质量小于10 ku的全部内源性多肽。体液多肽组包含了丰富的人体病理和生理信息,自2000年提出生物标记物研究以来,引起了研究者的广泛关注。本文对多肽组学的研究方法和3种体液多肽组生物标志物的发展和应用进行总结,提出多肽组的宽泛性,探讨利用肽段分子质量作为标记物的缺点,指出在多肽组分析的各个步骤都可能引入一定的不确定性。

关键词：质谱体液多肽组生物标记物

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不同体液来源外泌体分离鉴定方法评估

中国生物化学与分子生物学报 2021年第8期37卷 989-997页

作者：杨建廖立田卫东口腔再生医学国家地方联合工程实验室成都610041 口腔转化医学教育部工程研究中心成都610041 四川大学华西口腔医学院口腔疾病研究国家重点实验室成都610041

外泌体是细胞分泌的磷脂双分子层胞外囊泡,作为载体在细胞间发挥着物质传递和信息交流的功能。外泌体存在于多种不同体液中,在疾病诊断和药物载体方面具有良好的应用前景。由于外泌体纳米级别的大小和异质性,以及体液复杂的组成,使得体... 详细信息

外泌体是细胞分泌的磷脂双分子层胞外囊泡,作为载体在细胞间发挥着物质传递和信息交流的功能。外泌体存在于多种不同体液中,在疾病诊断和药物载体方面具有良好的应用前景。由于外泌体纳米级别的大小和异质性,以及体液复杂的组成,使得体液来源外泌体的分离尤为困难。目前,体液来源外泌体分离有6种常用方法:超速离心法、沉淀法、分子筛色谱层析法、密度梯度离心法、膜超滤法和膜特异性吸附法。每种方法都有其独特的优点与不足,单独使用均难以分离获得高质量的外泌体。不同体液来源外泌体分离方法的选择也存在差异。随着近年来微流控技术等一些新型方法的涌现与经典方法的不断改进,促使外泌体分离技术得到完善,有利于外泌体在临床与科研的相关应用研究。本篇综述对不同体液来源外泌体的提取鉴定方法作出比较及评估,总结了不同体液来源外泌体提取方法的选择和差异,为后续体液外泌体相关研究提供参考。

关键词：外泌体体液分离鉴定

新生儿坏死性小肠结肠炎回肠造口术后细胞和体液免疫水平的改变

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中华小儿外科杂志 2019年第2期40卷 127-132页

作者：孙静李彦媚陈慧敏刘云锋萧敏华吴锦晖肖妮蓉钟微余家康广州市妇女儿童医疗中心临床营养科 510623 广州市妇女儿童医疗中心血液肿瘤科 510623 广州市妇女儿童医疗中心检验科 510623 广州市妇女儿童医疗中心新生儿外科 510623

目的新生儿坏死性小肠结肠炎(neonatal necrotizing enterocolitis, NEC)是一种全身免疫紊乱累及肠道导致回结肠炎症坏死的一种严重疾病,回肠造口术是常有的手术方式,本文拟探讨术后细胞和体液免疫水平的改变。方法通过流式细胞仪和生... 详细信息

目的新生儿坏死性小肠结肠炎(neonatal necrotizing enterocolitis, NEC)是一种全身免疫紊乱累及肠道导致回结肠炎症坏死的一种严重疾病,回肠造口术是常有的手术方式,本文拟探讨术后细胞和体液免疫水平的改变。方法通过流式细胞仪和生化仪检测NEC患儿围手术期总淋巴细胞亚群(total lymphocyte subsets,TBNK)和免疫球蛋白水平,并与其他疾病肠道手术患儿进行对比分析。结果两组患儿入院时基本情况、手术应激和恢复情况相当,相比对照组,NEC组患儿术前NK细胞数量(266.40±351.80)cells/μl和辅助T细胞/抑制T细胞比例(2.80±1.88)%明显下降(P=0.02,P=0.01),淋巴细胞绝对数(3884.69±3280.17)cells/μl、辅助T细胞绝对数(1805.16±1277.90)cells/μl较高(P=0.05,P=0.05),免疫球蛋白IgG水平(8.39±3.03 )g/L明显升高(P=0.01)。至术后第三天临床情况稳定后NEC组患儿仍处于免疫亢进状态,B细胞/淋巴细胞比例(16.84±9.62)%有所上升(P=0.03),其分泌的补体C4(0.16±0.05)g/L也明显升高(P=0.03)。两组术后未观察到严重并发症以及死亡。结论NEC患儿术后3d仍处于免疫亢进状态,提示应对这些高危儿的细胞免疫和体液免疫水平进行动态监测,为后续的肠内营养支持、特别是早期肠内营养提供参考,提高治疗效率、改善临床结局。另外,这些免疫成分的变化机制尚待进一步研究。

关键词：小肠结肠炎坏死性回肠造口术免疫细胞体液

利用功能性微孔MOF在体液中进行羊疾病标志物的荧光探测

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利用功能性微孔MOF在体液中进行羊疾病标志物的荧光探测

作者：马云康青岛科技大学

学位级别：硕士

畜牧业是国民经济的重要产业,如何提高畜牧的存活率和繁殖率是整个畜牧业的重点关注问题。其中,对于羊养殖业来说,绵羊支原体肺炎(MO)是给其带来严重损失的主要传染病之一。该疾病传染率高且会造成羊发育迟缓甚至死亡,由于疫苗效果不理... 详细信息

畜牧业是国民经济的重要产业,如何提高畜牧的存活率和繁殖率是整个畜牧业的重点关注问题。其中,对于羊养殖业来说,绵羊支原体肺炎(MO)是给其带来严重损失的主要传染病之一。该疾病传染率高且会造成羊发育迟缓甚至死亡,由于疫苗效果不理想,早期诊断切断传播链仍是最有效的方法。然而传统方法经济效益差且操作繁琐,有待提出一种新的检测方法用于绵羊支原体的检测。另外,针对传统育种方法较难改善羊的生殖能力,通过检测绵羊多胎基因(Fec B),可达到改善育种目的。本文构建了两种荧光生物传感器,分别应用于绵羊支原体和绵羊Fec B基因的检测。(1)以多孔金属有机骨架(MOF)为支架,以MO和G-四链体(G4)特异序列的发夹DNA为探针,制备了一种新型的MO纳米探针。利用Th T在空腔结构G4的限制下产生的强荧光发射,制备了该化合物。MOF的使用有效地限制了G4作为探针部分的折叠行为,改善了自由态G4probe在缓冲区中造成的强背景信号的缺陷。选择性实验结果表明,只有微量的ΔG含量较低的目标才可能是MOF高效触发G4探针释放行为,进而改变Th T荧光行为的关键。通过观察信号的变化,可以确定DNA的靶点。该探针的检出限较低,在1×10 M到1×10 M浓度范围内的目标DNA浓度均呈良好的线性相关。此外,整个策略所涉及的操作简单,总成本低。提示该探针在进一步的临床诊断中具有一定的应用价值。这项研究在报道为MO成功构建ΔG-敏感传感器方面是新颖的。(2)构建了一种基于MOF的荧光生物传感器用于检测Fec B基因。通过poly A和poly C对具有生物酶活性的MOF进行遮蔽,当具有GT单碱基错配的Fec B基因存在时,由于错配外翻的碱基与poly A/poly C的配对,诱导poly A和poly C从MOF表面脱离,暴露的MOF表面将底物邻苯二胺(OPD)催化为2,3-二氨基苯那嗪(DAP)进而产生强烈荧光信号。结果表明,该生物传感器对于GT错配具有优良的选择性,可以在TT错配,AT错配中对GT错配进行区分。在缓冲液及5%血清中的线性范围从1×10 M到1×10 M,在血清中的检出限低至0.247 n M。且该生物传感器稳定性良好,制备一周内对Fec B的检测信号波动低于5%,显示出较好的应用潜力。

关键词： MOF 荧光羊疾病体液生物传感器

混合效应模型在玻璃体液推断死亡时间中的应用

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法医学杂志 2018年第1期34卷 13-17页

作者：杨明真李辉军张天叶丁自娇吴士凡邱鑫罡刘茜华中科技大学同济医学院法医学系湖北武汉430030 华中科技大学同济医学院附属同济医院检验科湖北武汉430030 上海市公安局物证鉴定中心上海市现场物证重点实验室上海200083

目的通过检测不同温度下家兔尸体玻璃体液内K^+、Mg^(2+)浓度随PMI的变化规律,探索应用混合效应模型推断死亡时间(postmortem interval,PMI)的可行性。方法家兔处死后分别置于5℃、15℃、25℃和35℃温度下保存,在0~120h内每12h双眼交替... 详细信息

目的通过检测不同温度下家兔尸体玻璃体液内K^+、Mg^(2+)浓度随PMI的变化规律,探索应用混合效应模型推断死亡时间(postmortem interval,PMI)的可行性。方法家兔处死后分别置于5℃、15℃、25℃和35℃温度下保存,在0~120h内每12h双眼交替微量提取玻璃体液80~100μL。应用生化免疫分析仪检测玻璃体液中K^+、Mg^(2+)的浓度。应用混合效应模型进行分析拟合,建立PMI推断方程。使用放置于10℃、20℃、30℃温度下均经过20、40、65h的样本检测数据对PMI推断方程进行验证。结果各温度(y)下家兔玻璃体液中K^+、Mg^(2+)浓度[f(x,y)]随PMI(x)延长均呈上升趋势。在5℃~35℃,PMI及温度拟合的K^+、Mg^(2+)浓度方程分别为:f_(K^+)(x,y)=3.413 0+0.309 2 x+0.337 6 y+0.010 83 xy-0.00247x^2(P体液物质浓度双参数推断PMI,将为解决玻璃体液化学物质在PMI推断中的实际应用提供新方法。

关键词：法医病理学玻璃体死亡时间体液混合效应模型钾镁

体液piRNA作为疾病潜在生物标志物的研究进展

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检验医学 2022年第8期37卷 782-786页

作者：邬燕倩俞翀沈鹭郑浩然洪叶挺杭州医学院检验医学院生物工程学院浙江杭州311300 浙江省人民医院泌尿外科浙江杭州310014 温州医科大学检验医学院生命科学院浙江温州325035

PIWI蛋白相互作用RNA(piRNA)是一类可以沉默转座子及调控mRNA翻译的新型非编码小RNA。piRNA主要参与生殖细胞的发育和精子的发生,与肿瘤等疾病的发生、发展也密切相关。在特定疾病状态下,体液中的piRNA会出现差异表达,具有作为新型生物... 详细信息

PIWI蛋白相互作用RNA(piRNA)是一类可以沉默转座子及调控mRNA翻译的新型非编码小RNA。piRNA主要参与生殖细胞的发育和精子的发生,与肿瘤等疾病的发生、发展也密切相关。在特定疾病状态下,体液中的piRNA会出现差异表达,具有作为新型生物标志物的潜力。文章就体液piRNA作为各种疾病潜在的生物标志物的研究进展作一综述。

关键词： PIWI蛋白相互作用RNA 体液生物标志物

SARS-CoV-2的宿主组织分布和体液中排放研究进展

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中国人兽共患病学报 2021年第12期37卷 1118-1122页

作者：张拥军凌华陈爱平重庆医药高等专科学校重庆401331 重庆市疾病预防控制中心重庆400042 高致病性病原微生物重庆市重点实验室重庆400042

由SARS-CoV-2引起的2019年冠状病毒病(COVID-19)大流行已经持续超过1年,目前对于疾病发病机制尚不完全清晰。本文从病原学角度,总结病毒受体在人体不同组织分布以及不同器官的临床表现,基于尸检报告得出病毒的人体组织细胞嗜性,根据连... 详细信息

由SARS-CoV-2引起的2019年冠状病毒病(COVID-19)大流行已经持续超过1年,目前对于疾病发病机制尚不完全清晰。本文从病原学角度,总结病毒受体在人体不同组织分布以及不同器官的临床表现,基于尸检报告得出病毒的人体组织细胞嗜性,根据连续体液样品的检测报告推测病毒排放到不同体液中持续时间及特点,以便深入理解SARS-CoV-2的致病机制,选择合理的临床诊断检材,正确解读检测结果,促进感染者管理和治疗、科学防控COVID-19全球大流行疫情。

关键词： SARS-CoV-2 2019年冠状病毒病血管紧张素转化酶2 体液病毒排放

体液游离寄生虫DNA在寄生虫病诊断中的研究进展

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中国人兽共患病学报 2017年第2期33卷 163-169页

作者：何顺伟李晓燕赵瑞雪彭源魏晓星青海大学生态环境工程学院西宁810016 青海大学附属医院西宁810016 青海大学医学院西宁810016

目前在多种寄生虫感染患者的血清、血浆、尿液、唾液等体液中检测到相应的游离寄生虫DNA分子(Cell-Free Parasite DNA,CFPD),由于其高度的特异性和灵敏性,在寄生虫病无创诊断和连续监测等方面展示出较强优势。本文即对近年来国内外学者... 详细信息

目前在多种寄生虫感染患者的血清、血浆、尿液、唾液等体液中检测到相应的游离寄生虫DNA分子(Cell-Free Parasite DNA,CFPD),由于其高度的特异性和灵敏性,在寄生虫病无创诊断和连续监测等方面展示出较强优势。本文即对近年来国内外学者对寄生虫感染者体液中CFPD的研究现状作一综述,以期为今后寄生虫病诊断的发展方向提供新思路,并对当前存在的相关问题进行探讨。

关键词：体液寄生虫游离DNA 诊断研究进展

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体液生物标志物与多发性硬化的诊断

中华神经科杂志 2015年第6期48卷 531-535页

作者：常艳宇胡学强中山大学附属第三医院神经内科广州510630

多发性硬化（multiple sclerosis,MS）是一种中枢神经系统（central nervous system,CNS）自身免疫性脱髓鞘疾病.全球约有250万人罹患MS[1],我国内地估计有5万～10万MS患者.MS是当前年轻人群致残的主要原因之一,早期诊断和及时、适当的... 详细信息

多发性硬化（multiple sclerosis,MS）是一种中枢神经系统（central nervous system,CNS）自身免疫性脱髓鞘疾病.全球约有250万人罹患MS[1],我国内地估计有5万～10万MS患者.MS是当前年轻人群致残的主要原因之一,早期诊断和及时、适当的干预对改善MS患者预后,减少致残率很有必要.但目前MS的诊断仍依赖于临床表现和影像学检查,因此,寻找与MS病理生理过程相关的生物标志物（biomarkers）,对MS的早期诊断具有重要意义.

关键词：多发性硬化生物标志物早期诊断体液中枢神经系统病理生理过程脱髓鞘疾病自身免疫性