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亚胺培南联合8种抗菌药物对产KPC-2酶肺炎克雷伯菌的体外联合药敏试验

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中国感染与化疗杂志 2019年第4期19卷 410-416页

作者：郝敏秦晓华复旦大学附属华山医院抗生素研究所国家卫健委抗生素临床药理重点实验室

目的观察亚胺培南与替加环素、黏菌素、阿米卡星、环丙沙星、利福平、头孢他啶、厄他培南、克拉维酸联合对携带blaKPC-2碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌(CRKP)的体外抗菌作用。方法10株携带blaKPC-2的肺炎克雷伯菌分离自复旦大学附属华山医... 详细信息

目的观察亚胺培南与替加环素、黏菌素、阿米卡星、环丙沙星、利福平、头孢他啶、厄他培南、克拉维酸联合对携带blaKPC-2碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌(CRKP)的体外抗菌作用。方法10株携带blaKPC-2的肺炎克雷伯菌分离自复旦大学附属华山医院神经外科术后肺部感染和中枢神经系统感染患者的痰液和脑脊液标本。测定14种常用抗菌药物对其最低抑菌浓度(MIC)。采用棋盘稀释法进行联合药敏试验,计算部分抑菌浓度指数(FIC)判定联合效果。采用体外时间-杀菌曲线观察联合杀菌作用。结果10株菌株对黏菌素和替加环素具较好的体外敏感性。棋盘法结果显示所有抗菌药物联合组合均未见对受试菌产生拮抗作用。其中亚胺培南与克拉维酸联合对7株受试菌具有协同作用,其次是亚胺培南与厄他培南的联合,以及亚胺培南与头孢他啶或利福平联合。时间-杀菌曲线结果显示亚胺培南联合克拉维酸、利福平或头孢他啶对受试菌同样具有相同的协同杀菌作用。结论体外试验显示亚胺培南联合头孢他啶、利福平或克拉维酸对产KPC酶的CRKP具有协同抑菌或杀菌活性,此可供临床参考。

关键词： KPC 碳青霉烯类肺炎克雷伯菌体外联合药敏

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耐碳青霉烯大肠埃希菌的体外联合药敏研究

中国卫生检验杂志 2023年第15期33卷 1828-1830,1846页

作者：冯雪君倪冬英付琳周雪李红胜嘉兴市第二医院检验科浙江314000 嘉兴市中医医院检验科

目的评估亚胺培南联合克拉维酸或头孢他啶对耐碳青霉烯大肠埃希菌(CRECO)的体外抗菌作用。方法收集2020年6月—2022年11月全院临床标本分离的33株CRECO,测定16种常用抗菌药物的最低抑菌浓度,通过抑制剂增强试验法初步筛选碳青霉烯酶型,... 详细信息

目的评估亚胺培南联合克拉维酸或头孢他啶对耐碳青霉烯大肠埃希菌(CRECO)的体外抗菌作用。方法收集2020年6月—2022年11月全院临床标本分离的33株CRECO,测定16种常用抗菌药物的最低抑菌浓度,通过抑制剂增强试验法初步筛选碳青霉烯酶型,采用棋盘微量肉汤法进行联合药敏试验,计算部分抑菌浓度指数判定联合效果。结果33株CRECO菌株呈现多重耐药,只对黏菌素和替加环素具较好的体外敏感性。碳青霉烯酶型初筛显示90.91%的CRECO产B类金属酶β-内酰胺酶,而产A类碳青霉烯酶占9.09%。棋盘法联合药敏结果显示,亚胺培南与克拉维酸联合药敏前后MIC值下降(P联合药敏前后MIC值下降(P体外试验显示亚胺培南联合克拉维酸或头孢他啶对其具有协同杀菌或抑菌活性,可以为临床治疗提供参考。

关键词：大肠埃希菌碳青霉烯酶体外联合药敏

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一株猪源大肠杆菌的分离鉴定及耐药性分析

一株猪源大肠杆菌的分离鉴定及耐药性分析

作者：杜冬冬山东农业大学

学位级别：硕士

近十几年来，为防治疾病及促进生长，大量抗菌药物应用于集约化养猪生产中。抗菌药物长期、广泛和不合理使用以及抗菌药物的选择压力等原因使大肠杆菌耐药菌株不断增多、耐药谱不断扩大，有的菌株甚至对尚未用于临床的新型抗菌药物也表... 详细信息

近十几年来，为防治疾病及促进生长，大量抗菌药物应用于集约化养猪生产中。抗菌药物长期、广泛和不合理使用以及抗菌药物的选择压力等原因使大肠杆菌耐药菌株不断增多、耐药谱不断扩大，有的菌株甚至对尚未用于临床的新型抗菌药物也表现出了耐药性。因此，积极开展猪源大肠杆菌耐药性监测，阐明耐药表型与基因型特征，将有利于遏制大肠杆菌耐药性发生发展，优化抗菌药物的合理应用，通过联合用药有利于防治大肠杆菌。本文采集猪场患病猪只的病料，经细菌分离纯化，运用细菌培养特性试验、生化试验和16s rRNA测序鉴定等方法鉴定临床分离菌株。该分离菌为一株致病性大肠杆菌。通过WHO推荐的Kirby-Bauer(K-B)法测定其对24种抗菌药物的耐药性。根据药敏试验结设计了13对引物分别为TEM、SHV、CTX-M-1、CTX-M-8、CTX-M-9、OXA-1、OXA-2、CMY-4、OXA-10、erm、ant(6)-iv、aac(6′)/aph(2″)、tetM，并扩增细菌基因组的耐药基因。采用微量肉汤稀释法测定加替沙星、头孢噻肟钠、丁胺卡那、庆大霉素、磷霉素和盐酸左旋氧氟沙星分别对猪源大肠杆菌耐药菌株的最低抑菌浓度(minimuminhibitory coneentration，MIC)。采用6×6棋盘法分别测定了加替沙星与其余五种抗生素的体外联合抗菌活性。试验结果表明，从培养特性、生化试验说明所分离菌株为大肠杆菌。16s rRNA测序结果表明分离菌株与大肠杆菌E482（Escherichia coli E482）同源性达99.9%。药敏试验结果表明分离株大肠杆菌对于阿莫西林、氨苄西林、青霉素、头孢噻呋钠、新霉素、庆大霉素、安普霉素、克林沙星、环丙沙星、恩诺沙星、盐酸左旋氧氟沙星、强力霉素、土霉素、红霉素、磷霉素、氟苯尼考高度耐药（R），对于哌拉西林、比阿培南、粘杆菌素耐药（R），对于头孢曲松、头孢噻肟、氨曲南中度敏感（I）,对于美罗培南、丁胺卡那敏感（S）。加替沙星、头孢噻肟钠、丁胺卡那、庆大霉素、磷霉素和盐酸左旋氧氟沙星分别对猪源大肠杆菌耐药菌株的最低抑菌浓度（MIC）分别为16ug/ml、64ug/ml、256ug/ml、512ug/ml、512ug/ml、256ug/ml。加替沙星与庆大霉素的FIC为0.5;加替沙星与盐酸左旋氧氟沙星的FIC为0.375;加替沙星与头孢噻肟钠的FIC为0.75;加替沙星与丁胺卡那的FIC为0.625;加替沙星与磷霉素的FIC为0.75。该株分离菌与大肠杆菌E482（Escherichia coli E482）同源性达99.9%，该大肠杆菌耐受多种药物，扩增发现大肠杆菌基因组内存在tetM基因、ant(6)-iv基因、OXA-1基因、CTX-M-9基因、TEM基因。联合药敏试验结果显示加替沙星与庆大霉素、盐酸左旋氧氟沙星体外联合表现为协同作用，加替沙星与头孢噻肟钠、丁胺卡那、磷霉素体外联合表现为相加作用。

关键词：大肠杆菌分离鉴定耐药性最小抑菌浓度体外联合药敏

碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌的药敏试验及其常见耐药基因筛查

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碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌的药敏试验及其常见耐药基因筛查

作者：张余彬福建医科大学

学位级别：硕士

目的评价替加环素(TGC)单药以及替加环素联合阿米卡星(AK)、替加环素联合多粘菌素B(PB)对碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌(CRKP)的体外抗菌活性;调查相关耐药基因的流行分布;探讨复敏液对纸片法检测替加环素药敏试验的影响。分析4例CRKP血... 详细信息

目的评价替加环素(TGC)单药以及替加环素联合阿米卡星(AK)、替加环素联合多粘菌素B(PB)对碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌(CRKP)的体外抗菌活性;调查相关耐药基因的流行分布;探讨复敏液对纸片法检测替加环素药敏试验的影响。分析4例CRKP血流感染不同抗感染方案的疗效及体外药敏试验,为临床治疗碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌提供参考。方法1.收集本院2018年2月至2018年10月临床科室分离的非重复CRKP菌株共71株。采用VITEK 2 Compact仪器法检测GN-09药敏卡含有的抗菌药物的体外药敏试验;采用纸片法检测替加环素和阿米卡星的体外药敏试验;采用微量肉汤稀释法检测替加环素单药、替加环素联合阿米卡星和替加环素联合多粘菌素B的MIC值,通过棋盘格联合药敏试验设计不同浓度的药敏组合并计算部分抑菌浓度指数(fractional inhibitory concentration index,FICI);探讨滴加复敏液纸片法检测替加环素结果的可靠性。以PCR方法筛查CRKP中替加环素、阿米卡星和多粘菌素B的常见相关耐药基因携带情况(包括tet(A)、tet(X)、rmt A、rmt B、arm A、aac(3)-I、aac(3)-II、aac(6?)-Ib、ant(3??)-Ia、MCR-1基因),部分测序结果在Gene Bank数据库中通过BLAST比对以确定耐药基因。2.收集本院2019年2月至2020年3月临床血液感染分离的CRKP菌株共4株及其临床资料。采用VITEK 2 Compact仪器法检测常见抗菌药物的MIC值(同第一部分);采用棋盘格联合药敏试验检测替加环素、多粘菌素B和替加环素联合多粘菌素B的MIC值,并计算FIC指数。以PCR方法筛查替加环素和多粘菌素B的常见相关耐药基因携带情况(同第一部分)。结合临床病例分析联合抗感染方案与炎症指标、体外药敏试验之间的关联。结果*** 2 Compact仪器法结果显示CRKP对头孢他啶、头孢曲松、头孢吡肟、氨苄西林/舒巴坦和哌拉西林/他唑巴坦耐药率均为100%(71/71),对亚胺培南和美罗培南耐药率均为98.6%(70/71),对环丙沙星和左氧氟沙星耐药率均为93.0%(66/71),对氨曲南、阿米卡星耐药率分别为97.2%(69/71)和87.3%(62/71)。纸片法结果显示CRKP对阿米卡星、替加环素的耐药率分别为76.1%(54/71)、5.6%(4/71);微量肉汤稀释法结果显示CRKP对阿米卡星、替加环素和多粘菌素B的耐药率分别为85.9%(61/71)、7.0%(5/71)、4.2%(3/71);当替加环素与阿米卡星联合作用后,棋盘格联合药敏试验结果表现为协同作用、相加作用、无关作用、拮抗作用分别为8.5%(6/71)、15.5%(11/71)、70.4%(50/71)和5.6%(4/71)。当替加环素与多粘菌素B联合作用后,棋盘格联合药敏试验结果表现为协同作用、相加作用和无关作用分别为4.2%(3/71)、78.9%(56/71)和16.9%(12/71),无拮抗作用。方法学评价:微量肉汤稀释法和VITEK 2 Compact仪器法检测CRKP对阿米卡星的敏感性相一致(?0.99),纸片法检测结果与前两种方法的差异均具有统计学意义(?=13.56,P联合作用后,联合药敏结果显示两药的MIC值均下降,替加环素与单药作用的MIC值相比,差异具有统计学意义(t=2.39,P联合药敏中阿米卡星MIC值与单药作用的相比下降更明显,差异具有统计学意义(t=16.61,P<0.01)。滴加复敏液后,替加环素的敏感率(97.2%)均显著高于滴加复敏液前的66.2%(?=8.90,P<0.01)和微量肉汤稀释法的77.5%(?=11.22,P<0.01)。PCR扩增71株CRKP中共23株携带氨基糖苷类耐药基因,携带单个耐药基因的有:rmt B基因、aac(3)-I基因、aac(3)-II基因和aac(6?)-Ib基因携带率分别为9.9%(7/71)、2.8%(2/71)、4.2%(3/71)和14.1%(10/71);同时携带两种耐药基因的有:rmt B基因和aac(6?)-Ib基因携带率为1.4%(1/71);未检测出rmt A耐药基因、arm A耐药基因和ant(3??)-Ia耐药基因。对替加环素进行耐药基因检测发现:外排泵tet(A)基因携带率为81.7%(58/71),其中同时携带两种耐药基因的有:tet(A)基因和rmt B基因、tet(A)基因和aac(6?)-Ib

关键词：碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌替加环素耐药基因体外联合药敏血流感染

那他霉素单独与联合氟康唑或伊曲康唑的体外抗念珠菌效应

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长江大学学报（自然科学版） 2017年第20期14卷 44-47页

作者：郭静荆州市第二人民医院妇产科湖北荆州434100

目的:测定临床分离的念珠菌对抗真菌药物那他霉素(natamycin,NAT)的敏感性,并研究NAT分别和氟康唑(fluconazole,FLU)、伊曲康唑(itraconazole,ITC)联合抗念珠菌效应。方法:参考美国临床实验室标准化研究所(Clinical Laboratory Standard... 详细信息

目的:测定临床分离的念珠菌对抗真菌药物那他霉素(natamycin,NAT)的敏感性,并研究NAT分别和氟康唑(fluconazole,FLU)、伊曲康唑(itraconazole,ITC)联合抗念珠菌效应。方法:参考美国临床实验室标准化研究所(Clinical Laboratory Standard Institute,CLSI)M27-A3方案测定NAT、FLU和ITC对40株念珠菌的最低抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC),同时以棋盘法测定NTA分别和FLU或ITC联合抗真菌作用。结果:微量液基稀释法测得NAT、FLU和ITC对白念珠菌(15株)MIC范围分别为:2.0~4.0、2~64μg/mL和2~16μg/mL;对克柔念珠菌(5株)MIC范围分别为:2.0~4.0、16~64μg/mL和0.5~2μg/mL;对光滑珠菌(10株)MIC范围分别为:1.0~4.0、4~32μg/mL和1~4μg/mL;对热带念珠菌(10株)MIC范围分别为:2.0、1~4μg/mL和0.5~2μg/mL。NAT与FLU在体外联合应用时,对67%(10/15)的白念珠菌、40%(4/10)的光滑念珠菌和对50%(5/10)的热带念珠菌变现为协同作用;NAT与ITC在联合应用时,对33%(5/15)的白念珠菌、20%(1/5)的克柔念珠菌和60%(6/10)的光滑念珠菌和对40%(4/10)的热带念珠菌变现为协同作用;NAT与FLU或ITC在体外联合应用时,对所有菌株均无拮抗作用。结论:念珠菌在体外对NAT敏感,当NAT与FLU或ITC联合时,对部分念珠菌有联合效应,无拮抗效应。

关键词：念珠菌那他霉素体外联合药敏

阿奇霉素与头孢噻肟对肺炎克雷白杆菌联合药敏研究

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上海医药 2009年第7期30卷 320-322页

作者：张克良奚彩萍承晓京叶波章小燕常州市妇幼保健院药剂科常州213003 常州市妇幼保健院检验科常州213003

目的:研究阿奇霉素与头孢噻肟对30株临床分离肺炎克雷白杆菌的联合抗菌效应。方法:采用棋盘法设计,微量肉汤稀释法测定。测定不同浓度组合的两种抗菌药物对30株肺炎克雷白杆菌的最低抑菌浓度,计算FIC指数,并观察两药不同加药顺序对效应... 详细信息

目的:研究阿奇霉素与头孢噻肟对30株临床分离肺炎克雷白杆菌的联合抗菌效应。方法:采用棋盘法设计,微量肉汤稀释法测定。测定不同浓度组合的两种抗菌药物对30株肺炎克雷白杆菌的最低抑菌浓度,计算FIC指数,并观察两药不同加药顺序对效应的影响。结果:阿奇霉素与头孢噻肟联合应用后对肺炎克雷白杆菌的浓度-累积抑菌百分率均比单独应用有较大提高。FIC指数结果表明,阿奇霉素与头孢噻肟联合应用后对肺炎克雷白杆菌20%为协同作用,63%为相加作用,10%为无关作用,7%为拮抗作用。先后联用与同时应用抗菌效应无显著性差异(P>0.05)。结论:一般情况下,对临床分离肺炎克雷白杆菌,阿奇霉素与头孢噻肟联合应用是合理的。

关键词：阿奇霉素头孢噻肟肺炎克雷白杆菌体外联合药敏棋盘法