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科学中国人 1999年第9期 24-26页

作者：王成俊杜林芳罗昌容张兆清刘光蓉熊兆奎林锡刚四川大学生物工程系四川大学原子核研究所四川禾嘉优质小麦研究中心

前言离子束注入是一项高新技术,开始于六十年代初期,那时主要应用于半导体工业,到七十年代,这项技术迅速发展到材料科学领域中,八十年代离子束技术已成为材料表面处理的一项重要的,不可缺少的技术。离子束技术应用于作物育种,是我国... 详细信息

前言离子束注入是一项高新技术,开始于六十年代初期,那时主要应用于半导体工业,到七十年代,这项技术迅速发展到材料科学领域中,八十年代离子束技术已成为材料表面处理的一项重要的,不可缺少的技术。离子束技术应用于作物育种,是我国科学工作者的首创,并取得了一定的成绩。

关键词：冬春性低能离子束注入小麦株高杂交组合生物效应离子束技术粒色优良性状粒重穗粒数

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低能离子束注入番茄种子后突变体的细胞信号传导分析

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生物物理学报 2009年第S1期25卷 499-499页

作者：梁秋霞黄群策曹刚强应芳卿刘艳波黄文郑州大学河南省离子束生物工程重点实验室中国郑州450052 郑州大学生物工程系中国郑州450001 郑州市蔬菜研究所中国郑州450000

通过低能离子注入后可以获得大量的突变体,对其细胞学特性进行深入研究是离子束生物工程领域内重要的研究方向。本项研究以河南四号番茄种子(HN4)为试验材料,

关键词：番茄种子低能离子束注入细胞信号传导突变体低能离子注入离子束生物工程细胞学特性突变株系研究方向试验材料

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离子束注入胸腺嘧啶的紫外、红外效应研究

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光散射学报 2001年第1期13卷 39-44页

作者：谷运红秦广雍霍裕平卞坡王卫东苏明杰郑州大学离子束生物工程省重点实验室郑州450052

本文中我们利用紫外、红外光谱等分析手段获取低能离子束生物诱变的信息。发现用30 ke V低能氮离子和氩离子在 0 - 2× 1 0 16 ions/cm2注入剂量范围内注入胸腺嘧啶 ,其残存率随剂量的变化趋势均出现了不同于γ射线等辐照时的线性或肩... 详细信息

本文中我们利用紫外、红外光谱等分析手段获取低能离子束生物诱变的信息。发现用30 ke V低能氮离子和氩离子在 0 - 2× 1 0 16 ions/cm2注入剂量范围内注入胸腺嘧啶 ,其残存率随剂量的变化趋势均出现了不同于γ射线等辐照时的线性或肩型曲线 ,而呈现一种新的变化趋势——“马鞍型”曲线 ,表明参与结构的质量沉积不足以解释“马鞍型”曲线。红外光谱的分析结果表明在离子束注入过程中胸腺嘧啶分子确实存在结构上的修复。研究结果表明紫外、红外光谱可以给出离子束注入前后生物分子结构突变或重组、分子结构突变与注入剂量的关系以及分子的修复等信息。

关键词：低能离子束注入胸腺嘧啶 “马鞍型”曲线紫外光谱红外光谱生物诱变注入剂量分子修复分子结构

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漆酶高产菌株的选育及其酶学性质研究

漆酶高产菌株的选育及其酶学性质研究

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作者：王诗然安徽工程大学

学位级别：硕士

近年来,有关漆酶的研究已引起人们的广泛关注。漆酶(Laccase. EC.1.***.3.2)是一种含铜离子的多酚氧化酶,广泛分布于真菌特别是白腐菌中。漆酶可与多酚类和芳香二胺类等多种底物作用,因此广泛应用于工业生产的各领域中。本文以漆酶产生... 详细信息

近年来,有关漆酶的研究已引起人们的广泛关注。漆酶(Laccase. EC.1.***.3.2)是一种含铜离子的多酚氧化酶,广泛分布于真菌特别是白腐菌中。漆酶可与多酚类和芳香二胺类等多种底物作用,因此广泛应用于工业生产的各领域中。本文以漆酶产生菌灵芝菌(Ganoderma lucidum)U60为出发菌,采用低能N+束注入技术诱变选育得到漆酶高产菌株UIM-281,并对菌株产酶条件、漆酶的纯化、酶学性质进行了研究。主要研究结果如下：1、利用低能N+束注入技术对漆酶产生菌灵芝菌(Ganoderma lucidum)U60菌丝体进行辐照诱变。通过研究15 keV能量下不同注入剂量与灵芝菌存活率及突变率的生物学效应关系,确定了在2.6×1015～3.9×1015 ions/cm2注入剂量范围内可获得高比例正突变株。选择3:12×1015 ions/cm2的注入剂量参数后,经多轮注入诱变,获得了遗传性稳定的漆酶高产突株UIM-281;发酵产酶实验表明,UIM-281的产漆酶活力峰值分别是出发菌株U60的1.7倍及2.28倍,且产酶发酵周期相对缩短24 h,是工业发酵中更加经济高效的灵芝漆酶发酵菌株。2、通过单因素试验和Plackett-Burman设计法,进行灵芝菌UIM-281发酵产漆酶培养基主要因子的筛选,得到玉米粉、麸皮和ABTS的质量浓度三个显著因素。最陡爬坡实验逼近以上三因素最优水平后,应用中心组合设计以及响应面分析,建立了以漆酶酶活为响应值的二次回归方程模型,得到最优发酵条件为：玉米粉17.56 g/L,麸皮17.91 g/L, ABTS 0.0274 g/L葡萄糖10 g/L,豆粉10 g/L, KH2PO4 4.5g/L,经验证,在此条件下,漆酶酶活为6325.3 U/L,比化学合成培养基漆酶产量提高了将近1.27倍,该研究为工业发酵产漆酶提供了理论依据。3、首先采用Plackett-Burman(PB)设计法筛选出影响灵芝菌G. lucidumUIM-281发酵产漆酶的主效应因素为装液量、摇床转速和培养时间。最陡爬坡实验逼近以上三因素最优水平后,应用中心组合设计以及响应面分析,建立了以漆酶酶活为响应值的二次回归方程模型,得到最优发酵条件为：装液量52 mL,摇床转速158 r/min,培养时间172 h,温度28℃,接种量10%,初始pH5.5,种龄96h。上述条件下理论预测值8342.6U/L,验证实验测得酶活为8387.7U/L,与预测值接近,说明预测模型可靠性较高,可应用于漆酶发酵条件的优化。4、对UIM-281所产粗酶液进行非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native-PAGE),活性染色结果表明该漆酶无同工酶。通过35%-65%丙酮二级沉淀和微孔滤膜过滤进行纯化后,由SDS-PAGE测得漆酶的表观分子量约为46 KDa。漆酶酶学性质研究结果表明：该漆酶的最适反应温度为50℃,最适反应pH为6。在10℃和pH 4.8时保存具有最佳的稳定性;金属离子Mn2+、Ba2+、Mg2+、Ca2+、Fe2+和抑制剂巯基乙醇、十二烷基硫酸钠和叠氮化钠对酶都有不同程度的抑制作用,其中Fe2+,十二烷基硫酸钠和叠氮化钠表现出强烈的抑制作用,而Co2+和Cu2+对酶有明显的激活作用,Zn2+和Na+则对酶活的影响不大;米氏常数Km为1.552 mmol/L。

关键词：漆酶低能离子束注入选育优化酶学性质

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