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中国病理生理杂志 2016年第6期32卷 1099-1105页

作者：林鑫子黄晨玲子罗新帅翰林暨南大学附属第一医院妇产科广东广州510632

目的：探讨人早孕蜕膜间充质干细胞（hDMSCs）治疗大鼠宫腔粘连（IUA）的可行性和有效性。方法：体外分离、培养、纯化、鉴定h DMSCs。将30只雌性SD大鼠随机分为3组：蜕膜间充质干细胞治疗组（IUA＋hDMSCs）、IUA模型组和假手术（sham）... 详细信息

目的：探讨人早孕蜕膜间充质干细胞（hDMSCs）治疗大鼠宫腔粘连（IUA）的可行性和有效性。方法：体外分离、培养、纯化、鉴定h DMSCs。将30只雌性SD大鼠随机分为3组：蜕膜间充质干细胞治疗组（IUA＋hDMSCs）、IUA模型组和假手术（sham）组,每组各10只。IUA＋hDMSCs组和IUA组复制IUA模型后10 min内,IUA＋hDMSCs组经尾静脉注射2×10~6个Dio标记的hDMSCs,每3天补充1次,连续注射3次;IUA组经尾静脉注射相同容量的PBS;sham组仅行开腹手术。3个动情周期后取子宫行HE染色和Masson染色,测量子宫内膜厚度、子宫内膜腺体数目、子宫内膜小血管数目和纤维化面积比率,并行免疫组化检测子宫内膜组织细胞角蛋白、波形蛋白、转化生长因子（TGF）-β1及整合素αγβ3的表达量,q PCR检测IUA相关基因含量,免疫荧光观察h DMSCs在内膜中的分布情况,并评估大鼠的生育能力。结果：IUA组部分子宫腔闭锁,内膜萎缩,腺体减少,大量纤维化改变。IUA＋hDMSCs组与IUA组相比子宫间质厚度明显增加（P〈0.05）,大量腺体增生和小血管新生（P〈0.05）,纤维化程度减小（P〈0.05）,与sham组比较无统计学差异。IUA＋hDMSCs组细胞角蛋白、波形蛋白和整合素αγβ3表达量明显高于IUA组（P〈0.05）,而TGF-β1表达量低于IUA组（P〈0.05）。qPCR结果显示与IUA组相比,除TNF-α和结缔组织生长因子下调外,IUA＋hDMSCs组的干细胞因子、血管内皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子和thrombospondin-1均明显上调。免疫荧光结果显示Dio- DMSCs主要分布于腔上皮层,部分位于间质。IUA＋hDMSCs组大鼠双侧子宫均妊娠,平均胎鼠数量与IUA组相比有统计学差异（P〈0.05）。结论：hDMSCs可在受损的大鼠子宫内膜中存活、增殖,有效修复大鼠的子宫内膜,抑制IUA。

关键词：人早孕蜕膜间充质干细胞宫腔粘连大鼠

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中重度IUA治疗方法有效性的Meta分析及hDMSCs氧化应激损伤机制研究

中重度IUA治疗方法有效性的Meta分析及hDMSCs氧化应激损伤机制研究

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作者：苏秀梅暨南大学

学位级别：硕士

目的:1.通过Meta分析评价中重度宫腔粘连(intrauterine adhesion,IUA)宫腔镜下粘连带电切术(transcervical resection of adhesion,TCRA)术后应用球囊及节育器预防复发的有效性,以期为TCRA术后选用合适的治疗方法提供循证学依据。2.建... 详细信息

目的:1.通过Meta分析评价中重度宫腔粘连(intrauterine adhesion,IUA)宫腔镜下粘连带电切术(transcervical resection of adhesion,TCRA)术后应用球囊及节育器预防复发的有效性,以期为TCRA术后选用合适的治疗方法提供循证学依据。2.建立人早孕蜕膜间充质干细胞(human decidual mesenchymal stem cells,hDMSCs)氧化应激模型,模拟宫腔粘连损伤,通过观察细胞形态学、细胞活性氧水平、线粒体膜电位及凋亡相关蛋白的变化,探讨氧化应激条件下hDMSCs损伤机制。方法:1.搜索公开发表的关于中重度宫腔粘连TCRA术后使用球囊及节育器治疗的文献进行Meta分析,计算机检索数据库,时间为2010年1月至2017年9月的中/英文公开发表的研究。制订纳入及排除标准,对文献进行严格筛选,所有数据采用Revman 5.2统计软件进行分析,并使用森林图和漏斗图分析结果。2.以过氧化氢模拟宫腔粘连环境,建立hDMSCs体外氧化应激模型。分别以0μM、10μM、40μM、80μM、160μM、320μM的过氧化氢溶液作用于P3代hDMSCs,6小时后,观察其细胞形态学改变、氧化及抗氧化指标、线粒体膜电位变化及凋亡相关蛋白相对量的变化。结果:1.根据标准排除,纳入的文献有15篇。中重度宫腔粘连宫腔镜粘连分离术后进行球囊和节育环治疗的总共有1389例,使用球囊和节育环预防术后再粘连分别为698例和691例。Meta分析发现:(1)15个研究比较了术后再粘连情况,宫腔镜粘连分离术后节育环组再粘连发生率高于球囊组,组间比较差异有显著性(Z=5.83,OR 0.46,95%CI 0.36.60,P细胞形态学改变:正常的hDMSCs为梭形贴壁细胞;10μM HO处理6小时候后,细胞尚保持原有梭形外观,但细胞轻度肿胀,密度轻度下降;随着HO浓度的增加,细胞渐进性皱缩并密度降低,可见凋亡细胞,并出现细胞碎裂现象。3.氧化与抗氧化能力变化:超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)酶活力随着过氧化氢浓度的增加而降低,二者呈负相关关系(r=-0.904,P=0.035),各浓度组细胞SOD酶活力与对照组比较,差异有统计学意义(P细胞谷胱甘肽浓度与对照组比较,差异有统计学意义(P细胞MDA浓度与对照组比较,差异有统计学意义(P细胞内ROS的平均荧光值随HO浓度的增加而增加,各浓度组细胞与空白组比较,ROS的平均荧光值升高,差异均有统计学意义(P=0.000)。4.线粒体膜电位变化:与空白对照组相比,10μM组红绿荧光比率无明显变化,差异无统计学意义(P>0.05);余四个浓度组细胞与空白组比较,线粒体膜电位降低,差异均有统计学意义(P=0.000)。除80μM组与160μM组比较无统计学意义(P>0.05),余不同浓度组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。5.各组PARP-1蛋白相对表达量均数由高到低依次为320μM组(1.004)、160μM组(0.959)、80μM组(0.740)、40μM组(0.406)、10μM组(0.211)、空白对照组(0.150)。各实验组与对照组相比,10μM组无显著性差异(P=0.154),其余4组均有显著性差异,五个实验组之间,除320μM组与160μM组之间差异无显著性差异(P=0.282)外,余各实验组间均有显著性差异。各组Caspase-3蛋白相对表达量均数由高到低依次为320μM组(0.973)、160μM组(0.730)、80μM组(0.620)、40μM组(0.096)、10μM组(0.092)、空白对照组(0.003)。各实验组与对照组相相比均有显著性差异,五个实验组之间,除10μM组与40μM组之间差异无显著性差异(P=0.895)外,余各实验组间比较均有显著性差异。结论1.与宫内节育器相比,TCRA术后放置球囊可明显降

关键词：人早孕蜕膜间充质干细胞宫腔粘连活性氧氧化应激凋亡 Meta分析

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