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人干扰素α1b喷雾剂抑菌剂筛选及抑菌效力研究

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药物分析杂志 2024年第2期44卷 359-367页

作者：刘琳琳董历子崔越朱秋媚苏畅张宇刘景会长春生物制品研究所有限责任公司长春130012

目的:探索人干扰素α1b喷雾剂制剂处方中抑菌剂及其最低有效抑菌浓度,确定抑菌剂的合理添加剂量。方法:应用生物学活性检测方法进行人干扰素α1b喷雾剂制剂处方中抑菌剂的筛选,确定抑菌剂,然后按照2020年版《中华人民共和国药典》通则1... 详细信息

目的:探索人干扰素α1b喷雾剂制剂处方中抑菌剂及其最低有效抑菌浓度,确定抑菌剂的合理添加剂量。方法:应用生物学活性检测方法进行人干扰素α1b喷雾剂制剂处方中抑菌剂的筛选,确定抑菌剂,然后按照2020年版《中华人民共和国药典》通则1121抑菌效力检查法测定抑菌效力确定抑菌剂的最低有效抑菌浓度。以金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌和黑曲霉为试验菌株,进行菌落计数方法适用性试验。设计抑菌剂剂量筛选试验,对不同浓度的抑菌剂分别对4种试验菌的抑菌效果进行考察,筛选出抑菌剂的合理添加量。结果:筛选出人干扰素α1b喷雾剂制剂处方中的抑菌剂为苯扎溴铵;苯扎溴铵浓度为0.05~0.1 mg·mL^(-1)时对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌和黑曲霉的抑菌效力均符合A级。结论:确定了人干扰素α1b喷雾剂制剂处方中抑菌剂苯扎溴铵的最低有效抑菌浓度为0.05 mg·mL^(-1)。

关键词：人干扰素α1b 喷雾剂抑菌剂苯扎溴铵抑菌效力最低有效抑菌浓度

人干扰素α1b体外抗SARS-CoV-2 Omicron株的药效

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中国生物制品学杂志 2023年第2期36卷 158-162页

作者：刘琳琳李玉薇邹勇张雪梅卢佳刘小可王泽鋆刘玉林刘景会长春生物制品研究所有限责任公司吉林长春130012 武汉生物制品研究所有限责任公司湖北武汉430000

目的评价人干扰素(interferon,IFN)α1b体外抗严重急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)Omicron株的药效。方法采用CCK-8法检测人IFNα1b原液、人IFNα1b滴眼液、人IFNα1b喷雾剂、瑞德西韦共4种药物的细胞毒性;qPCR法检测人IFNα1b对SARS-CoV-2 Omicron株(bA.5/bA.2/bA.1)的抑制效果。结果最高浓度(1×107IU/mL)人IFNα1b原液和最高浓度(150μmol/L)瑞德西韦对Vero细胞未达到半数细胞毒性;人IFNα1b滴眼液和人IFNα1b喷雾剂的半数毒性浓度(CC50)分别为29958和37550 IU/mL,对Vero细胞具有毒性。人IFNα1b提前孵育2 h后再攻毒,对bA.1、bA.2、bA.5株的半数有效浓度(EC_(50))分别为9.30、13.38、12.33 IU/mL,瑞德西韦分别为0.3147、0.2910、0.3003μmol/L。人IFNα1b与病毒同时孵育,对bA.1、bA.2、bA.5株的EC_(50)分别为19.68、10.91、18.84 IU/mL,对照药瑞德西韦分别为0.3205、0.2744、0.3041μmol/L。结论在体外细胞水平上,极低活性的人IFNα1b即可对SARS-CoV-2 Omicron株具有较好的抑制作用,有望成为治疗SARS-CoV-2 Omicron株感染的临床特效药。

关键词：严重急性呼吸综合征冠状病毒2 Omicron株人干扰素α1b 药效学

人源抗人干扰素α1b全抗体在昆虫细胞中的表达、纯化和鉴定

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免疫学杂志 2012年第4期28卷 312-316页

作者：龚斌李川梁米芳中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所北京100052 广西钦州学院海洋学院 535000

目的克隆、杆状病毒/昆虫表达系统表达人源抗人干扰素α1b（huIFN-α1b）全抗体基因,获得全抗体蛋白。方法利用PCR技术以gIII-scFv融合表达的噬菌粒质粒为模板,分别克隆了5株抗体基因的轻链和重链;经Nco I/Xho I和Sac I/Hind III分别酶... 详细信息

目的克隆、杆状病毒/昆虫表达系统表达人源抗人干扰素α1b（huIFN-α1b）全抗体基因,获得全抗体蛋白。方法利用PCR技术以gIII-scFv融合表达的噬菌粒质粒为模板,分别克隆了5株抗体基因的轻链和重链;经Nco I/Xho I和Sac I/Hind III分别酶切,与经过相同酶切的pAC-K-CH3载体连接构建了昆虫细胞sf9表达载体pAC-K-CH3-H-L;经测序鉴定正确后,转染进入昆虫细胞sf9进行异源表达。采用免疫荧光（IFA）和ELISA对全抗体的表达和结合情况进行初步鉴定。采用Protein-A亲和层析柱对收获的全抗体IgG蛋白进行纯化,将纯化后的抗体蛋白进行SDS-PAGE电泳和Western blotting鉴定。结果成功扩增了人源抗人干扰素α1b抗体轻链和重链基因;免疫荧光（IFA）鉴定表明5株重组质粒在昆虫细胞sf9表达出了全抗体蛋白,ELISA鉴定表明其中3株与huIFN-α1b特异性结合;经Protein-A亲和层析柱纯化后每升细胞培养上清收获了5~20 mg的蛋白,Western blotting鉴定表明3株纯化的全抗体蛋白和huIFN-α1b特异性结合。结论通过杆状病毒/昆虫表达系统获得了3株人源抗人干扰素α1b（huIFN-α1b）全抗体蛋白。

关键词：杆状病毒/昆虫表达系统人干扰素α1b IgG全抗体表达纯化

人干扰素α1b体外抗呼吸道病毒的药效学研究

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中国药物评价 2024年第3期41卷 222-232页

作者：刘琳琳王晓波苏畅张廷辉刘玉林刘景会长春生物制品研究所有限责任公司吉林长春130012 中国科学院武汉病毒研究所湖北武汉430000

目的:评价人干扰素(interferon,IFN)α1b体外广谱抗呼吸道病毒的药效。方法:采用CPE(细胞病变)法检测IFNα1b和阳性对照药对MDCK、U937、LLC-MK2、Hep-2、Vero E6、bHK-21、RD、A549细胞的毒性;采用神经氨酸酶活性检测法检测IFNα1b对... 详细信息

目的:评价人干扰素(interferon,IFN)α1b体外广谱抗呼吸道病毒的药效。方法:采用CPE(细胞病变)法检测IFNα1b和阳性对照药对MDCK、U937、LLC-MK2、Hep-2、Vero E6、bHK-21、RD、A549细胞的毒性;采用神经氨酸酶活性检测法检测IFNα1b对流感病毒株CIV-H1N1/CNIC-1909(H1N1)、A/kansas/14/2017(NYMCX-327)(H3N2)和b/Maryland/15/2016(NYMCbX-69A)的抑制效果;采用ELISA试剂盒检测法检测IFNα1b对A型流感病毒株(H1N1,A/PuertoRico/8/1934)及引起的炎症因子的抑制效果;采用间接免疫荧光检测法(IFA)检测IFNα1b对呼吸道合胞病毒(RSV A2)的抑制效果以及对人副流感病毒(HPIV3)的抑制效果;采用CPE法检测IFNα1b对登革2型(DENV-2)病毒的抑制效果、检测IFNα1b对EV71病毒的抑制效果、检测IFNα1b对人类腺病毒3型病毒株(AdV3)和人类腺病毒5型病毒株(AdV5)的抑制效果。采用空斑法检测IFNα1b对人类1型单纯疱疹病毒(HSV-1)的抑制效果。结果:IFNα1b对MDCK细胞的CC 50值为479572 U·mL^(-1),抑制H1N1的EC 50为4265 U·mL^(-1),选择指数(SI)为112.44,抑制H3N2的EC 50为101950 U·mL^(-1),SI为4.70,抑制b型流感病毒的EC 50为18240 U·mL^(-1),SI为18.50;IFNα1b对U937细胞的CC 50值为大于100000 U·mL^(-1),抑制H1N1病毒的EC 50为37897 U·mL^(-1),SI为大于2.64,抑制炎症因子IP-10的EC 50为大于100000 U·mL^(-1),抑制炎症因子IL-8的EC 50为大于100000 U·mL^(-1);IFNα1b和对LLC-MK2细胞的CC 50值为大于10000 U·mL^(-1),抑制HPIV3病毒的EC 50为3.92 U·mL^(-1);IFNα1b对Hep 2细胞的CC 50值为大于100000 U·mL^(-1),抑制RSV病毒的EC 50为1661 U·mL^(-1),SI为大于60.2;IFNα1b对Vero E6细胞的CC 50值为大于500 U·mL^(-1);IFNα1b对bHK-21细胞的CC 50值为大于100 U·mL^(-1),抑制DENV-2病毒的EC 50为0.90 U·mL^(-1),SI为大于111.11;IFNα1b对RD细胞的CC 50值为大于100000 U·mL^(-1),抑制EV71病毒的EC 50为大于100000 U·mL^(-1);IFNα1b对A549细胞的CC 50值为大于100000 U·mL^(-1),抑制AdV3病毒的EC 50为100000 U·mL^(-1),抑制AdV5病毒的EC 50为100000 U·mL^(-1);IFNα1b对Vero细胞的CC 50值为大于100000 U·mL^(-1),抑制HSV-1病毒的EC 50为6898 U·mL^(-1),SI为大于14.5。结论:在体外细胞水平上,IFNα1b对A型流感病毒H1N1和H3N2、b型流感病毒、RSV病毒、DENV-2病毒、HPIV3病毒、HSV-1病毒均具有抑制作用,对EV71病毒、AdV3病毒和AdV5病毒无抑制作用,IFNα1b有望成为预防和治疗上呼吸道病毒感染的临床药物。

关键词：人干扰素α1b 体外药效学呼吸道病毒

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临床医学研究与实践 2023年第18期8卷 90-93,102页

作者：马敏高东莲富县人民医院陕西延安727500 佳县中医院陕西榆林719200

目的探讨人干扰素α1b联合阿昔洛韦治疗爱泼斯坦-巴尔病毒(EbV)相关性传染性单核细胞增多症(IM)的临床效果。方法选取2021年10月至2022年10月我院收治的108例EbV相关性IM患儿为研究对象,依据编号的奇偶性将其分为对照组(54例,阿昔洛韦治... 详细信息

目的探讨人干扰素α1b联合阿昔洛韦治疗爱泼斯坦-巴尔病毒(EbV)相关性传染性单核细胞增多症(IM)的临床效果。方法选取2021年10月至2022年10月我院收治的108例EbV相关性IM患儿为研究对象,依据编号的奇偶性将其分为对照组(54例,阿昔洛韦治疗)和观察组(54例,在对照组基础上联合人干扰素α1b辅助治疗)。比较两组的治疗效果。结果观察组的治疗总有效率高于对照组(P素-6(IL-6)、降钙素原(PCT)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、C反应蛋白(CRP)水平低于对照组,白细胞介素-10(IL-10)水平高于对照组(P19阳性(CD19^(+))、白细胞分化抗原4阳性(CD4^(+))、白细胞分化抗原4阳性/白细胞分化抗原8阳性(CD4^(+)/CD8^(+))高于对照组,白细胞分化抗原8阳性(CD8^(+))低于对照组(Pb)水平低于对照组(P0.05)。结论人干扰素α1b联合阿昔洛韦治疗EbV相关性IM的效果较佳,且安全性理想,可显著改善患儿的免疫功能、炎症反应,具有重要应用价值。

关键词：爱泼斯坦-巴尔病毒传染性单核细胞增多症人干扰素α1b 阿昔洛韦

金振口服液辅助布地奈德+人干扰素α1b治疗小儿毛细支气管炎的临床疗效评估

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数理医药学杂志 2022年第9期35卷 1348-1350页

作者：张晓环佗跃鸽许昌市妇幼保健院许昌461000

目的:观察金振口服液辅助布地奈德+人干扰素α1b治疗小儿毛细支气管炎的临床疗效。方法:选取2019年5月-2020年8月于某院符合纳入排除标准的小儿毛细支气管炎患儿108例,依据随机单盲法将其分为联合组和对照组各54例。对照组给予布地奈德... 详细信息

目的:观察金振口服液辅助布地奈德+人干扰素α1b治疗小儿毛细支气管炎的临床疗效。方法:选取2019年5月-2020年8月于某院符合纳入排除标准的小儿毛细支气管炎患儿108例,依据随机单盲法将其分为联合组和对照组各54例。对照组给予布地奈德+人干扰素α1b治疗,联合组在对照组的基础上联合金振口服液辅助干预治疗。比较两组患者治疗前后临床症候积分、肺功能、机体炎症水平及临床疗效和不良反应发生情况。结果:治疗后,联合组各临床症状积分、呼吸频率(RR)、呼吸时间比(Ti/Te)、潮气量(VT)、达峰值时间比(tPTEF/tE)、干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-10(IL-10)及白细胞介素-4(IL-4)等指标均明显优于对照组;联合组临床总有效率比对照组高(P0.05)。结论:金振口服液辅助布地奈德+人干扰素α1b治疗小儿毛细支气管炎可有效缓解临床症状,改善肺功能,降低机体炎症水平,整体治疗效果显著,可在临床推广应用。

关键词：金振口服液布地奈德人干扰素α1b 小儿毛细支气管炎

浅析人干扰素α1b联合乙酰半胱氨酸治疗儿童支气管肺炎的疗效观察

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中文科技期刊数据库（全文版）医药卫生 2023年第12期 87-90页

作者：陈英远李晓娟田立华吉林省四平市妇婴医院吉林四平13600

探讨并研究在治疗儿童支气管肺炎过程中采用人干扰素α1b与乙酰半胱氨酸治疗的效果评价。方法将在2021年10月至2022年10月间我院小儿呼吸内科收治的病例中随机选择的210例支气管肺炎患儿作为本次研究对象,并将这些患儿分为两个组,其中... 详细信息

探讨并研究在治疗儿童支气管肺炎过程中采用人干扰素α1b与乙酰半胱氨酸治疗的效果评价。方法将在2021年10月至2022年10月间我院小儿呼吸内科收治的病例中随机选择的210例支气管肺炎患儿作为本次研究对象,并将这些患儿分为两个组,其中一组给予布地奈德和硫酸特布他林雾化吸入及常规抗炎治疗,称为对照组;在此基础上增加人干扰素α1b联合乙酰半胱氨酸雾化吸入进行治疗,称为治疗组。经过治疗后,对比治疗组和对照组的临床治疗效果、症状持续时间、家长对治疗结果的满意度及炎性介质水平。结果在治疗有效性方面,治疗组高于对照组;在临床症状持续时间方面,治疗组短于对照组;在炎性介质水平方面,治疗组CRP水平和PCT水平优于对照组;在家长满意度方面,治疗组高于对照组,以上数据中,均可保证(P人干扰素α1b联合乙酰半胱氨酸雾化吸入进行治疗可强化治疗效果,缩短治疗时间。

关键词：人干扰素α1b 乙酰半胱氨酸儿童支气管肺炎

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特异结合人IFNα1b中和抗体的两个短肽

病毒学报 1997年第2期13卷 169-172页

作者：马学军杜东毅尹华丽侯云德中国预防医学科学院病毒学研究所

特异结合人ＩＦＮα１ｂ中和抗体的两个短肽马学军杜东毅尹华丽侯云德（中国预防医学科学院病毒学研究所，北京１０００５２）关键词噬菌体表面呈现，肽库，人干扰素α１ｂ噬菌体表面呈现（Ｐｈａｇｅｄｉｓｐｌａｙ）技术是Ｓｍｉｔｈ... 详细信息

特异结合人ＩＦＮα１ｂ中和抗体的两个短肽马学军杜东毅尹华丽侯云德（中国预防医学科学院病毒学研究所，北京１０００５２）关键词噬菌体表面呈现，肽库，人干扰素α１ｂ噬菌体表面呈现（Ｐｈａｇｅｄｉｓｐｌａｙ）技术是Ｓｍｉｔｈ博士［１］于１９８５年建立起来的，...

关键词：人干扰素α1b 中和抗体短肽