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人β防御素2、3在慢性牙周炎合并高血压患者牙龈组织中的水平研究

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临床口腔医学杂志 2024年第5期40卷 273-277页

作者：周歆王玉雪张昊郑钧元周永庆十堰市人民医院(湖北医药学院附属人民医院) 湖北十堰442000 十堰市人民医院口腔科湖北十堰442000

目的:探讨人β防御素(human beta-defensin, hBD)-2、3与慢性牙周炎(chronic periodontitis, CP)和高血压之间的关系。方法:前瞻性收集十堰市人民医院口腔科就诊的慢性牙周炎合并高血压患者20例,慢性牙周炎患者20例,牙周健康受试者20例... 详细信息

目的:探讨人β防御素(human beta-defensin, hBD)-2、3与慢性牙周炎(chronic periodontitis, CP)和高血压之间的关系。方法:前瞻性收集十堰市人民医院口腔科就诊的慢性牙周炎合并高血压患者20例,慢性牙周炎患者20例,牙周健康受试者20例。弗罗里达探针进行牙周指标检测,包括探诊深度(probing depth, PD)、临床附着丧失(clinical attachment level, CAL)以及出血指数(bleeding index, BI)。采用RT-qPCR检测牙龈组织中hBD-2、3 mRNA的表达,免疫组织化学染色检测牙龈组织中hBD-2、3蛋白表达并进行半定量分析。结果:PD、CAL在慢性牙周炎合并高血压组中最高,健康组中最低,差异具有统计学意义(P2、3 mRNA水平最高,慢性牙周炎组次之,慢性牙周炎合并高血压组最低(P2、3 mRNA与PD、CAL均呈负相关,hBD-2、3 mRNA与BI呈中等程度负相关。免疫组化结果显示慢性牙周炎组和慢性牙周炎合并高血压组hBD-2、3评分之间差异均不具有统计学意义(P>0.05)。结论:高血压可能是慢性牙周炎患者牙周组织破坏程度加重的危险因素,其原因可能与牙龈组织中hBD-2、3表达降低有关。

关键词：高血压慢性牙周炎人β防御素-2 人β防御素-3

人β防御素-2基因的合成及其真核表达载体的构建

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第三军医大学学报 2003年第10期25卷 921-922页

作者：雷撼钱桂生黄桂君吴国明第三军医大学附属新桥医院全军呼吸内科研究所重庆400037

目的　合成人 β防御素 2 (Humanβ defensin 2 ,hBD 2 )基因并构建其真核表达载体 ,为hBD 2基因的转染和表达奠定基础。方法　根据GenBank中的hBD 2结构基因序列 ,设计合成了 3条长度为 82bp的长寡聚核苷酸引物 (H1、H2、H3 ) ,用PCR... 详细信息

目的　合成人 β防御素 2 (Humanβ defensin 2 ,hBD 2 )基因并构建其真核表达载体 ,为hBD 2基因的转染和表达奠定基础。方法　根据GenBank中的hBD 2结构基因序列 ,设计合成了 3条长度为 82bp的长寡聚核苷酸引物 (H1、H2、H3 ) ,用PCR延伸扩增的方法进行全长为 2 11bp的基因合成 ;PCR产物经双酶切后 ,克隆入真核表达载体pLXSN并导入细菌扩增。结果　PCR产物和重组载体经凝胶电泳及测序分析 ,证实合成的基因与原序列一致 ,并成功克隆到真核表达载体pLXSN上。结论　用PCR延伸扩增法合成基因 ,能方便快捷地获得目的基因片段 ,提高了基因合成的准确性。

关键词：人β防御素-2 基因合成 PCR延伸扩增方法真核表达载体

人β防御素-2及Toll样受体基因多态性与早产胎膜早破的相关性研究

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中国妇产科临床杂志 2020年第1期21卷 53-55页

作者：杜升烨亓琳杜波王超黄宪霞薛美济南市人民医院产科 271100

目的探讨人β防御素-2(β-defensin-2,HBD-2)及Toll样受体(TLR)基因多态性与早产胎膜早破的相关性。方法选取2015年5月至2017年5月济南市人民医院产科收治的105例早产胎膜早破患者为研究对象(早产胎膜早破组),并选择40例正常足月分娩产... 详细信息

目的探讨人β防御素-2(β-defensin-2,HBD-2)及Toll样受体(TLR)基因多态性与早产胎膜早破的相关性。方法选取2015年5月至2017年5月济南市人民医院产科收治的105例早产胎膜早破患者为研究对象(早产胎膜早破组),并选择40例正常足月分娩产妇为对照组,采用聚合酶链反应-限制性内切酶片断长度多态性(PCR-RFLP)法检测两组胎膜组织中HBD-2、TLR受体单核苷酸多态性(SNP)。结果早产胎膜早破组HBD-2基因CC型占58.10%、CG型占28.57%、GG型占13.33%,对照组CC型占72.50%、CG型占22.50%、GG型占5.00%,两组差异显著(P2基因突变率大于对照组,但差异无统计学意义(7.62%vs 5.00%,P>0.05),Asp299Gly/Thr399Ile位点TLR4基因突变率大于对照组,但差异无统计学意义(5.71%vs 0.00%,P>0.05)。结论HBD-2携带GG基因型、等位基因G过多分布女性可能是导致早产胎膜早破的易感人群,Arg753Gln位点TLR2、Asp299Gly/Thr399Ile位点TLR4基因多态性与早产胎膜早破无相关性。

关键词：人β防御素-2 Toll样受体基因多态性早产胎膜早破

人β防御素-2稳定表达细胞株的建立及其表达产物对耐药大肠埃希菌抗菌活性研究

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免疫学杂志 2014年第8期30卷 704-706,711页

作者：杨剑陈新年李娟陈逸轩陈文莉兰州大学基础医学院病理生理研究所 730000

目的建立稳定表达人β防御素2(hBD2)的COS-7细胞株,并检测其表达产物对耐药大肠埃希菌的抗菌活性。方法将重组hBD2真核表达载体pCMV-hBD2通过脂质体转染COS-7细胞,筛选稳定表达hBD2单克隆细胞株;经RT-PCR和Western blot检测稳定转染后... 详细信息

目的建立稳定表达人β防御素2(hBD2)的COS-7细胞株,并检测其表达产物对耐药大肠埃希菌的抗菌活性。方法将重组hBD2真核表达载体pCMV-hBD2通过脂质体转染COS-7细胞,筛选稳定表达hBD2单克隆细胞株;经RT-PCR和Western blot检测稳定转染后目的基因在转录水平和蛋白水平的表达;用微量稀释法检测稳定转染后细胞培养上清液对耐药大肠埃希菌的抗菌作用。结果筛选出稳定表达hBD2的COS-7细胞株,检测到目的基因在转录水平和蛋白水平均有表达,且其表达产物使耐药大肠埃希菌存活率降至15%。结论建立了稳定表达hBD2的COS-7细胞株,其表达产物对耐药大肠埃希菌具有一定的抗菌活性。

关键词：人β防御素-2 稳定表达耐药大肠埃希菌抗菌活性

人β防御素-2通过TGF-β/Smad信号通路对胃癌SGC7901细胞增殖、迁移和侵袭的影响

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中国细胞生物学学报 2019年第7期41卷 1301-1307页

作者：时妍梅李娟刘燕陈康周蕾陈新年兰州大学基础医学院病理生理学研究所兰州730000 河西学院医学院张掖743000 兰州大学第二医院普通外科三病区兰州730000

该文探讨了人β防御素-2(hBD2)对胃癌SGC7901细胞的增殖、迁移和侵袭的影响。将真核表达载体pCMV-hBD2转染于人胃癌SGC7901细胞。采用qPCR和免疫印迹法(Western blot)检测转染效率。Western blot检测TGF-β1、p-Smad2/3、Smad2/3、MMP9... 详细信息

该文探讨了人β防御素-2(hBD2)对胃癌SGC7901细胞的增殖、迁移和侵袭的影响。将真核表达载体pCMV-hBD2转染于人胃癌SGC7901细胞。采用qPCR和免疫印迹法(Western blot)检测转染效率。Western blot检测TGF-β1、p-Smad2/3、Smad2/3、MMP9的蛋白表达水平。Transwell法检测SGC7901细胞迁移和侵袭能力。EdU法和流式细胞术分别检测增殖能力与细胞周期。结果显示,转染真核表达载体pCMV-hBD2的SGC7901细胞, hBD2的表达水平明显高于SGC7901和转染pCMV-Blank的SGC7901细胞。SGC7901-hBD2细胞中TGF-β1、p-Smad2/3和MMP9的蛋白表达水平均低于SGC7901和SGC7901-Blank细胞,而Smad2/3表达水平不变。同时,其迁移侵袭和增殖能力均受到抑制,细胞周期G0/G1期阻滞。该实验结果表明, hBD2可能通过下调TGF-β/Smad信号通路调控SGC7901细胞的迁移侵袭以及增殖能力。

关键词：人β防御素-2 迁移侵袭增殖胃癌SGC7901细胞 TGF-β/Smad信号通路

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人β防御素-2与呼吸系统感染

上海医学 2015年第1期38卷 83-86页

作者：毛彦雄徐金富瞿介明复旦大学附属华东医院呼吸内科上海200040 同济大学附属上海市肺科医院呼吸科

呼吸道与外界环境相通，经常遭到包括病原微生物在内的外源性物质的入侵。呼吸道上皮不仅是抵抗病原微生物的物理屏障，还能通过分泌抗菌多肽和蛋白来抑制并消灭入侵的病原微生物。防御素是呼吸道上皮分泌的一种重要抗菌多肽，是一个相... 详细信息

呼吸道与外界环境相通，经常遭到包括病原微生物在内的外源性物质的入侵。呼吸道上皮不仅是抵抗病原微生物的物理屏障，还能通过分泌抗菌多肽和蛋白来抑制并消灭入侵的病原微生物。防御素是呼吸道上皮分泌的一种重要抗菌多肽，是一个相对分子质量为4000～5000的阳离子抗微生物多肽家族，具有广谱抗微生物活性。

关键词：人β防御素-2 呼吸系统感染抗病原微生物阳离子抗微生物多肽广谱抗微生物活性呼吸道上皮相对分子质量抗菌多肽

外源性人β防御素-2调节子宫内膜异位症细胞增殖/凋亡及炎性因子的表达

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中山大学学报（医学科学版） 2012年第4期33卷 429-433页

作者：徐丽南王子莲何科陈淑琴中山大学附属第一医院妇产科广东广州510080

【目的】探讨体外条件下加入外源性人β防御素-2蛋白对子宫内膜异位症(EMs)细胞增殖/凋亡和炎性因子表达的影响。【方法】组织块消化法原代培养EMs细胞,Western Blot法检测EMs细胞hβD-2蛋白、TNF-α及IL-1β的蛋白表达;Western Blot法... 详细信息

【目的】探讨体外条件下加入外源性人β防御素-2蛋白对子宫内膜异位症(EMs)细胞增殖/凋亡和炎性因子表达的影响。【方法】组织块消化法原代培养EMs细胞,Western Blot法检测EMs细胞hβD-2蛋白、TNF-α及IL-1β的蛋白表达;Western Blot法检测加入重组人hβD-2蛋白(40μg/mL)前后EMs细胞内TNF-α,IL-1β蛋白表达变化;按不同梯度浓度(80、40、20、10μg/mL)加入人β防御素-2蛋白(hβD-2)后,ELISA法检测EMs细胞培养液上清中TNF-α,IL-1β细胞因子的浓度;加入高剂量hβD-2蛋白(120μg/mL)并培养EMs细胞24H设为实验组,对照组为完全培养基培养的EMs细胞,MTT法检测实验组及对照组EMs细胞增殖情况;PI法检测实验组及对照组EMs细胞凋亡情况。【结果】原代培养的EMs细胞可表达hβD-2蛋白、TNF-α、IL-1β蛋白;加入外源性重组人hβD-2蛋白后,EMs细胞表达TNF-α、IL-1β蛋白下调;EMs细胞培养液上清中可检测出TNF-α,IL-1β的表达;在加入hβD-2后,EMs细胞培养液上清内TNF-α、IL-1β表达下降,且随着加入hβD-2浓度增高其下降趋势增大,差异有统计学意义(80>40>20>10μg/mL,P人β防御素2蛋白孵育后(120μg/mL),与对照组相比,EMs细胞的增殖受到明显抑制,且凋亡明显增加(P2可以影响子宫内膜异位症细胞内炎症因子TNF-α,IL-1β的表达,并可抑制EMs细胞的增殖,促进其凋亡。为治疗EMs提供新的理论依据。

关键词：子宫内膜异位症人β防御素-2 炎性因子增殖/凋亡

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人β防御素-2研究进展

重庆医学 2005年第1期34卷 135-137页

作者：廖伟钱桂生第三军医大学新桥医院全军呼吸内科研究所重庆400037

内源性抗生素肽(endogenous antibiotic peptides)是动、植物天然免疫的重要介质,在哺乳动物(包括人)中,由于对革兰氏阳性菌、阴性菌、真菌、螺旋体、分枝杆菌及某些包膜病毒等均有很强杀伤活性,故将其命名为防御素(defensin).迄今为止... 详细信息

内源性抗生素肽(endogenous antibiotic peptides)是动、植物天然免疫的重要介质,在哺乳动物(包括人)中,由于对革兰氏阳性菌、阴性菌、真菌、螺旋体、分枝杆菌及某些包膜病毒等均有很强杀伤活性,故将其命名为防御素(defensin).迄今为止,在人体中已发现的防御素共有两类(α、β)10种.其中β防御素家族共发现3种,分子量为4～5kD,含38～47个氨基酸残基阳离子,分别为人β防御素-1,2,3(human β-defensin-1,2,3. hBD-1,2,3).德国Harder J等[1]于1997年首先发现hBD-2,他们用大肠杆菌亲和柱结合高压液相层析法在牛皮癣病人皮肤中分离并纯化到约4.3kD的多肽,经氨基酸序列分析表明与牛的TAP(气管抗菌肽)、LAP(舌抗菌肽)及hBD-1同源,属于人β抗菌肽成员之一,命名hBD-2.已证实hBD-2是黏膜和上皮细胞抵抗微生物入侵的重要介质,在持续暴露在病原微生物的器官表面发挥重要的抗菌作用.

关键词：人β防御素-2 上皮组织

人β防御素-2联合HPV16 E7c免疫小鼠的免疫学效应实验研究

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南昌大学学报（医学版） 2013年第1期53卷 8-12页

作者：罗丹青苏虹曾文兴邓玲张志勇王美珍李东旭王福财刘玉琳施桥发南昌大学医学院 2009级南昌330006 南昌大学基础医学院免疫学教研室南昌330006 南昌大学抚州分院护理系江西抚州344000 江西省人民医院检验科南昌330006 基础医学院免疫学教研室南昌330006

目的探讨以人β防御素-2为佐剂的HPV16E7c免疫功能及细胞免疫应答。方法将30只小鼠按随机数字表法分为3组:PBS组、pcDNA3.1(+)/E7c组、pEGFP-C1/HBD2-E7c组,每组10只。PBS组采用PBS100μg·只-1行股四头肌肌内注射,进行初次免疫;pcDNA3.... 详细信息

目的探讨以人β防御素-2为佐剂的HPV16E7c免疫功能及细胞免疫应答。方法将30只小鼠按随机数字表法分为3组:PBS组、pcDNA3.1(+)/E7c组、pEGFP-C1/HBD2-E7c组,每组10只。PBS组采用PBS100μg·只-1行股四头肌肌内注射,进行初次免疫;pcDNA3.1(+)/E7c组采用pcDNA3.1(+)/E7c质粒100μg·只-1行股四头肌肌内注射,进行初次免疫;pEGFP-C1/HBD2-E7c组采用pEGFP-C1/HBD2-E7c联合质粒100μg·只-1行股四头肌肌内注射,进行初次免疫。3组初次免疫后,再间隔2周,以上述方法和剂量加强免疫2次。共免疫3次。3组小鼠免疫1周后,断颈处死小鼠,取小鼠脾脏称重,计算脾脏脏器指数及计数脾淋巴细胞数量,流式细胞仪检测淋巴细胞亚群CD4+、CD8+细胞数量及比值;采用摘眼球采血法收集小鼠血清,采用ELISA法检测小鼠血清E7抗体水平。结果 pcDNA3.1(+)/E7c组、pEGFP-C1/HBD2-E7c组小鼠脾脏脏器指数均明显低于PBS组(均P2-E7c组、pcDNA3.1(+)/E7c组小鼠CD4+、CD8+阳性细胞比例、绝对数均明显高于PBS组(均P2-E7c组、pcDNA3.1(+)/E7c组小鼠CD4+/CD8+比值均明显低于PBS组(均P2-E7c组、pcDNA3.1(+)/E7c组小鼠血清E7抗体水平均明显高于PBS组(均P2-E7c组小鼠血清E7抗体水平明显高于pcDNA3.1(+)/E7c组(P人β防御素-2可明显改善HPV16E7c基因的免疫原性,提高HPV16E7特异性抗体水平,升高免疫小鼠脾CD4+和CD8+T淋巴细胞数量。

关键词：人乳头瘤病毒16型人β防御素-2 E7抗体血清细胞免疫动物,实验小鼠