人β防御素-2基因在SPC细胞中的转染表达

作     者：雷撼 钱桂生 梁永杰 黄桂君 吴国明 LEI Han;QIAN Gui-sheng;LIANG Yong-jie;HUANG Gui-jun;WU Guo-ming

作者机构：同济大学附属东方医院呼吸内科上海200120 第三军医大学全军呼吸病研究所重庆400038 

出 版 物：《同济大学学报（医学版）》 (Journal of Tongji University(Medical Science))

年 卷 期：2006年第27卷第1期

页      面：27-30页

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 071007[理学-遗传学] 

主　　题：人β防御素-2 基因合成 真核表达载体 基因转染 

摘      要：目的合成人β防御素-2(hum anβ-defensin-2,hBD-2)基因并构建其真核表达载体,转染SPC细胞,检测其表达,明确hBD-2重组载体的表达活性,为hBD-2基因转染和表达的研究奠定基础。方法根据Genebank中的hBD-2结构基因序列设计合成三条引物,用PCR延伸扩增的方法合成hBD-2基因,克隆入真核表达载体pLXSN;通过脂质体转染法将pLXSN-hBD-2导入SPC细胞,采用W estern-b lot法检测hBD-2的表达。结果经凝胶电泳及测序分析,证实合成的基因与原序列一致,并成功克隆到真核表达载体pLXSN上,所构建的真核表达重组载体pLX-SN-hBD-2转染SPC细胞后呈现有效表达。结论成功构建了PCR合成的hBD-2基因真核表达重组载体pLXSN-hBD-2,通过基因转染的方法导入SPC细胞并获得表达hBD-2,为进一步的动物转基因抗感染实验研究提供了依据。