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饲用纤维素酶及产酶微生物

宁夏农学院学报 2000年第4期21卷 72-78页

作者：卜登攀宁夏农学院动物科学系永宁 750105

纤维素酶对于纤维性物质的生物转化具有重要的开发前景 ,其在饲料工业中的应用效果已逐步得到了肯定 ,因此纤维素酶引起世界各国的关注。本文主要从纤维素酶的来源、在畜牧生产及开发饲料资源方面的应用及应用前景、应用中存在的问题以... 详细信息

纤维素酶对于纤维性物质的生物转化具有重要的开发前景 ,其在饲料工业中的应用效果已逐步得到了肯定 ,因此纤维素酶引起世界各国的关注。本文主要从纤维素酶的来源、在畜牧生产及开发饲料资源方面的应用及应用前景、应用中存在的问题以及纤维素酶的分子生物学研究进展等方面作了论述。

关键词：纤维素酶饲料添加剂产酶微生物木霉

南海底层鱼突额鹦嘴鱼Scarus ovifrons Temminck et Schlegel,1846肠道产酶微生物研究

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中国农业科技导报 2007年第5期9卷 95-100页

作者：黄光祥周志刚何夙旭邵娜石鹏君刘玉春姚斌华中农业大学水产学院武汉430074 中国农业科学院饲料研究所北京100081

通过不同培养基对南海底层鱼突额鹦嘴鱼Scarus ovifrons Temminck et Schlegel,1846肠道微生物进行分离与16S、18S rDNA鉴定,并构建系统发育树,然后结合选择性培养基进行产蛋白酶、甘露聚糖酶、木聚糖酶、纤维素酶、淀粉酶等微生物的筛... 详细信息

通过不同培养基对南海底层鱼突额鹦嘴鱼Scarus ovifrons Temminck et Schlegel,1846肠道微生物进行分离与16S、18S rDNA鉴定,并构建系统发育树,然后结合选择性培养基进行产蛋白酶、甘露聚糖酶、木聚糖酶、纤维素酶、淀粉酶等微生物的筛选。结果表明,从突额鹦嘴鱼肠道分离纯化出23株微生物,其中14株产酶,以产蛋白酶与淀粉酶为主,部分产纤维素酶、甘露聚糖酶、木聚糖酶;产酶微生物主要为Bacillussp.;分离出3株菌(H-16、J-13与Y-13G)其16S、18S rDNA序列与模式种相似度低于97%,为潜在的新种。研究表明,南海底层鱼突额鹦嘴鱼肠道含有大量产酶微生物。

关键词：突额鹦嘴鱼Scarus ovifrons Temminck et Schlegel 1846 肠道产酶微生物

刺参消化道产酶微生物的分离鉴定及其产酶功能研究

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刺参消化道产酶微生物的分离鉴定及其产酶功能研究

南海底层鱼突额鹦嘴鱼Scarus ovifrons肠道产酶微生物研究

“全球变化下的海洋与湖沼生态安全”学术交流会

作者：高菲李凤辉谭杰孙慧玲燕敬平中国水产科学研究院黄海水产研究所

为获得可应用于刺参养殖的有益微生物,利用传统培养和分子生物学相结合的方法对刺参肠道中的产酶微生物进行了分离、筛选和鉴定,并对其产酶能力、酶活性和抑菌活性进行了研究。根据其产生胞外酶的能力,从刺参肠道中共分离得到39株产酶... 详细信息

为获得可应用于刺参养殖的有益微生物,利用传统培养和分子生物学相结合的方法对刺参肠道中的产酶微生物进行了分离、筛选和鉴定,并对其产酶能力、酶活性和抑菌活性进行了研究。根据其产生胞外酶的能力,从刺参肠道中共分离得到39株产酶菌株。利用限制性内切酶Mbo I对所有菌株的16S rDNA进行限制性片段长度多态性分析结果显示,分离得到的39株产酶菌株在100%的遗传相似性水平上可以聚类为8个可操作分类单元（OTUs）。系统发育分析表明37株产酶菌株属于芽孢杆菌属（Bacillus）,2株为枝芽孢菌属（Virgibacillus）。产酶能力分析结果表明分离得到的芽孢杆菌属能产生蛋白酶、淀粉酶和纤维素酶,是刺参成参肠道中主要的产酶微生物,而枝芽孢菌属的菌株只能产生蛋白酶。产酶活性研究结果显示产酶微生物的蛋白酶活性、淀粉酶活性和纤维素酶活性分别为3.56-92.11U/mL、3.27-87.23 U/mL和0.97-57.74 U/mL,其中蛋白酶活性、淀粉酶活性和纤维素酶活性最强的菌株分别为IBSC2-8、IBSC2-6和IBSC2#-4。抑菌活性结果显示10株产酶微生物对灿烂弧菌（Vibro splendidus）的生长有抑制作用,菌株IBSC2-10对灿烂弧菌具有最强的抑菌活性,抑菌圈直径达37.6mm。肠道微生物较高的产酶能力表明,它们在刺参消化过程中可能发挥重要作用。本研究分离的芽孢杆菌属菌株可以作为潜在益生菌用于刺参养殖。

关键词：刺参消化道产酶微生物产酶活性抑菌活性

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南海底层鱼突额鹦嘴鱼Scarus ovifrons肠道产酶微生物研究

2008年中国水产学会学术年会

作者：黄光祥周志刚何夙旭邵娜石鹏君刘玉春姚斌中国农业科学院饲料研究所华中农业大学水产学院

通过不同培养基对南海底层鱼突额鹦嘴鱼Scarus ovifrons肠道微生物进行分离与16S、18S rDNA鉴定,并构建系统发育树,然后结合选择性培养基进行产蛋白酶、甘露聚糖酶、木聚糖酶、纤维素酶、淀粉酶等微生物的筛选。结果表明,从突额鹦嘴鱼... 详细信息

通过不同培养基对南海底层鱼突额鹦嘴鱼Scarus ovifrons肠道微生物进行分离与16S、18S rDNA鉴定,并构建系统发育树,然后结合选择性培养基进行产蛋白酶、甘露聚糖酶、木聚糖酶、纤维素酶、淀粉酶等微生物的筛选。结果表明,从突额鹦嘴鱼肠道分离纯化出23株微生物,其中14株产酶,以产蛋白酶与淀粉酶为主,部分产纤维素酶、甘露聚糖酶、木聚糖酶;产酶微生物主要为Bacillus sp.;分离出三株菌(H-16、J-13与Y-13G)其16S、18S rDNA序列与模式种相似度低于97%,为潜在的新种。本研究表明,南海底层鱼突额鹦嘴鱼肠道含有大量产酶微生物。

关键词：突额鹦嘴鱼 Scarus ovifrons Temminck et Schlegel,1846 肠道产酶微生物

来源： cnki会议评论

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刺参消化道微生物组成及其产酶功能研究

刺参消化道微生物组成及其产酶功能研究

作者：李凤辉上海海洋大学

学位级别：硕士

刺参(Apostichopus japonicus)属于海参纲(Holothuroidea)、仿刺参属(Apostichopus)，是我国北方主要的食用海参，具有较高的食用、保健和药用价值，被誉为“海味八珍”之首。由于需求量巨大，近几年，刺参养殖业在山东和辽宁大力发展... 详细信息

刺参(Apostichopus japonicus)属于海参纲(Holothuroidea)、仿刺参属(Apostichopus)，是我国北方主要的食用海参，具有较高的食用、保健和药用价值，被誉为“海味八珍”之首。由于需求量巨大，近几年，刺参养殖业在山东和辽宁大力发展，刺参已成为我国北方大部分地区主要的海水养殖种类，取得了巨大的经济价值和社会价值。益生菌已经在水产养殖中得到广泛的应用。本研究分析了刺参消化道内含物及其周围环境沉积物中的微生物组成，并对刺参消化道中菌群的产酶功能进行了研究，为研发刺参养殖专用益生菌提供了理论依据。利用16S rDNA454高通量测序技术对刺参前肠、后肠内含物及周围沉积物中细菌组成进行了研究。从10个肠道内含物样品和4个沉积物样品中共获得了188,623个优化序列和15,527个OTUs。前肠和后肠内含物以及周围沉积物中的细菌分别可以归为38.0±4.7、31.2±6.2和27.8±6.5个纲。刺参周围沉积物中细菌的丰度及Shannon多样性指数均高于刺参肠道。变形菌门（Proteobacteria）在刺参消化道内含物和周围沉积物中均占优势。前肠、后肠以及沉积物中的优势纲分别为全噬菌纲（Holophagae）和γ-变形菌纲（Gammaproteobacteria）、γ-变形菌纲（Gammaproteobacteria）和-变形菌纲(Deltaproteobacteria)、 γ-变形菌纲（Gammaproteobacteria）和-变形菌纲(Deltaproteobacteria)。主成分分析和Heatmap图显示刺参前肠、后肠及周围沉积物具有不同的细菌组成。在刺参肠道中检测到的芽孢杆菌属、乳酸菌以及假单胞菌属可作为潜在益生菌。本研究还发现，刺参的选择性摄食可能是导致刺参前肠内含物和周围沉积物细菌组成不同的主要原因。从刺参消化道中分离、筛选了产酶菌株，并研究了其产酶能力。根据其产生胞外酶的能力，从刺参肠道中共分离得到39株菌株。利用限制性内切酶MboI对所有菌株的16S rDNA进行限制性片段长度多态性分析结果显示，这39株产酶菌株在100%的遗传相似性水平上可以聚类为8个操作分类单元（OTUs）。系统发育分析表明37株产酶菌株属于芽孢杆菌属（Bacillus），剩余的2株为枝芽孢菌属（Virgibacillus）。产酶能力分析结果表明，芽孢杆菌属是刺参成参肠道中主要的产酶微生物，可以产生蛋白酶、淀粉酶和纤维素酶，而枝芽孢菌属只能产生蛋白酶。肠道微生物较高的产酶能力表明它们在刺参消化过程中发挥着重要的作用。结果也表明本实验分离的芽孢杆菌属菌株可以作为潜在益生菌用于刺参养殖。对分离筛选到的菌株进行了蛋白酶、淀粉酶和纤维素酶活性测定，并分析了它们对刺参“腐皮综合症”病原菌灿烂弧菌（Vibro splendidus）的抑菌作用。研究结果表明产酶微生物的蛋白酶活性、淀粉酶活性和纤维素酶活性分别为3.56-92.11U/mL、3.27-87.23U/mL和0.97-57.74U/mL，其中，蛋白酶活性、淀粉酶活性和纤维素酶活性最强的菌株分别为IBSC2-8、IBSC2-6和IBSC2#-4。10株产酶微生物对灿烂弧菌的生长产生抑制作用，IBSC2-10对灿烂弧菌具有最强的抑菌活性，抑菌圈直径达37.6mm。研究结果为刺参养殖专用微生态制剂的研发提供基础。

关键词：刺参微生物肠道产酶微生物产酶活性抑菌活性

新疆天山雪莲根部冻土产酶微生物的分离及淀粉水解酶基因的克隆与表达研究

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新疆天山雪莲根部冻土产酶微生物的分离及淀粉水解酶基因的克隆与...

作者：张国华北京化工大学

学位级别：硕士

本论文以采自新疆天山的雪莲(Saussureae Involucratae *** Maxim.)根部冻土为实验材料,采用不同的培养方法从冻土样品中分离微生物,对雪莲根部冻土环境微生物的多样性进行初步调查,并对其产酶情况作出了初步研究。结果表明,在雪莲根部... 详细信息

本论文以采自新疆天山的雪莲(Saussureae Involucratae *** Maxim.)根部冻土为实验材料,采用不同的培养方法从冻土样品中分离微生物,对雪莲根部冻土环境微生物的多样性进行初步调查,并对其产酶情况作出了初步研究。结果表明,在雪莲根部冻土低温环境中,假单孢菌属(Pseudeomonas)、黄杆菌属(Flavobacterium)、节杆菌属(Arthrobacter)等为优势菌群。分离的微生物中,大多数微生物都可以分泌产生淀粉酶,并存在大量产生纤维素酶、木聚糖酶、甘露聚糖酶等的微生物。低温环境中蕴含大量新颖的未开发的微生物,为新型酶制剂的开发提供了宝贵的材料,具有深入研究的意义。淀粉酶在饲料工业等领域有较高的应用价值和研究意义。本论文根据a-淀粉水解酶家族共有的保守区序列设计一对简并引物(Amy-F/Amy-R),采用降落PCR(touch-down PCR)反应,从分离的雪莲根部冻土微生物基因组DNA中克隆到14条淀粉水解酶基因片段,这些片段之间的同源性比较低,表明雪莲根部冻土微生物中蕴含着丰富新颖的淀粉水解酶基因。利用TAIL-PCR技术,进一步从三株淀粉水解能力较强的细菌中克隆得到与淀粉的降解有关基因全长序列,包括Flavobacterium sp.M-2来源的a-淀粉酶基因(amyA),Proteobacterium ***-18菌株来源的去分支酶基因(glgD)和Arthrobacter sp.G-7来源的去分支酶基因(glgE),以及两个糖苷水解酶基因ghB和abfC来源于Flavobacteriumsp.M-2。这5个基因与已报道的相关基因序列相似性较低,表明这5个基因具有新颖性。选取2个低温菌来源的淀粉水解酶基因amyA和glgD在大肠杆菌中进行了诱导表达研究。结果表明,在18-20℃,诱导剂浓度为0.2-0.4 mM,诱导24-48小时,amyA和glgD基因在大肠杆菌中均得到了表达,而在37℃下诱导均不能表达。其中,amyA基因在大肠杆菌细胞内表达,其表达活性为1.12 U·mL,SDS-PAGE电泳分析表明其表达蛋白质分子量约为100 kD,与理论分子量相近,非变性蛋白电泳结果表明该蛋白具有淀粉酶活性;glgD表达的重组蛋白分子量大小约为80 kD,其淀粉酶活性为0.9 U·mL。结果表明低温蛋白基因在大肠杆菌中诱导表达条件的不同,也表明本研究利用简并引物扩增结合TAIL-PCR技术克隆基因的有效性。重组表达的低温淀粉水解酶有望应用于工业领域。

关键词：雪莲根部冻土产酶微生物低温微生物低温淀粉酶基因克隆基因表达

产酶复合微生物制剂对生长育肥猪的生产和消化性能的影响

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上海畜牧兽医通讯 2004年第3期 34-36页

作者：曹建国潘正伟程丽红徐国华彭国云顾慧新陈正华赵芳根江瀚乔宇马正驰潘正祥上海市农业科学院畜牧兽医研究所 201106 上海东方种畜场有限公司 201209 上海交通大学动物科学系 2003届201101 上海创博生态工程有限公司 200232

长期以来,人们一直采用在猪饲粮中添加抗菌药物类生长促进剂维持健康、促进生长及提高饲料利用率.但是大量使用抗生素,在抑制病原微生物的同时,也抑杀了动物体内生理性微生物,扰乱了微生物种群或群落间相互制约的格局,破坏微生态平衡,... 详细信息

长期以来,人们一直采用在猪饲粮中添加抗菌药物类生长促进剂维持健康、促进生长及提高饲料利用率.但是大量使用抗生素,在抑制病原微生物的同时,也抑杀了动物体内生理性微生物,扰乱了微生物种群或群落间相互制约的格局,破坏微生态平衡,而导致动物特别是幼龄动物对病原微生物的易感性.同时,抗生素药物的长期使用容易产生耐药菌株,特别是某些药物在畜产品中的残留,影响畜产品品质的提高,直接威胁人类的健康与安全.因此,很多国家通过立法禁止使用部分抗生素、抗菌药物作为动物生长促进剂.为此,能够替代抗生素、抗菌药物而又无毒副作用、无残留的天然生长促进剂--微生态制剂应运而生.

关键词：复合微生物制剂产酶微生物生长育肥猪生产性能消化性能饲料添加剂

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新疆天山雪莲根部冻土产酶微生物的初步研究

中国农业科技导报 2008年第2期10卷 82-87页

作者：张国华罗会颖陈劲春姚斌北京化工大学生命科学与技术学院北京100029 中国农业科学院饲料研究所北京100081

利用不同培养基对新疆天山雪莲根部冻土微生物进行了分离与培养,通过16S或18S rDNA序列扩增初步鉴定了分离所得微生物,并构建系统发育树。结合选择性培养基进行了产蛋白酶、产甘露聚糖酶、产木聚糖酶、产纤维素酶和产淀粉酶等微生物的... 详细信息

利用不同培养基对新疆天山雪莲根部冻土微生物进行了分离与培养,通过16S或18S rDNA序列扩增初步鉴定了分离所得微生物,并构建系统发育树。结合选择性培养基进行了产蛋白酶、产甘露聚糖酶、产木聚糖酶、产纤维素酶和产淀粉酶等微生物的筛选。结果表明,新疆天山雪莲根部冻土中蕴含着丰富的产酶微生物,分离得到的34株细菌中大部分都能产酶,其中以产淀粉酶为主,部分产纤维素酶、甘露聚糖酶和木聚糖酶。产淀粉酶细菌主要属于Pseudeom onas,Flavobacterium和Arthrobacter等属,产纤维素酶细菌主要属于Pseudeom onas和Arthrobacter等属。分离得到的5株真菌,以产淀粉酶和木聚糖酶为主。

关键词：雪莲根部冻土产酶微生物

“黑老虎”晾晒烟叶表面产酶细菌的鉴定及其在烟草加工上的应用

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基因组学与应用生物学 2017年第3期36卷 944-951页

作者：苏加坤徐达云帆郭磊罗娟敏邵灯寅蔡继宝江西中烟工业责任有限公司南昌330096 广州市澳键丰泽生物科技有限公司广州510760

从江西"黑老虎"晾晒烟叶表面分离筛选出具备产木聚糖酶、果胶酶、纤维素酶、蛋白酶和淀粉酶能力的细菌,并将这些菌株添加到烟丝上进行陈化。结果表明:菌株促进了烟丝的陈化过程,主要体现在香气更加充实、杂气减少、刺激性减弱、余味更净... 详细信息

从江西"黑老虎"晾晒烟叶表面分离筛选出具备产木聚糖酶、果胶酶、纤维素酶、蛋白酶和淀粉酶能力的细菌,并将这些菌株添加到烟丝上进行陈化。结果表明:菌株促进了烟丝的陈化过程,主要体现在香气更加充实、杂气减少、刺激性减弱、余味更净,同时产生香味物质,减少有害物质的含量。其中两株菌经过生理生化实验和16S rDNA鉴定,判定为短小芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌,此外对这两株菌的培养条件进行了初步优化。从烟叶表面分离筛选的产酶微生物在烟叶陈化过程起重要作用,可制备成微生物菌剂加速烟叶陈化并实现提质增香的效果。本研究以江西"黑老虎"烟叶作为研究对象,根据鉴定平板的水解圈分离筛选具有产木聚糖酶、果胶酶、纤维素酶、蛋白酶、淀粉酶能力的细菌,对陈化结果进行感官评价后发现所筛选的3株产酶细菌(82#,83#和85#)均能有效提升烟丝的品质,主要体现在香气更加充实、杂气减少、刺激性减弱、余味更净。结合形态学观察、理化试验及16S rDNA序列分析,确定3株潜在的提质增香菌均为芽孢杆菌。其中83#为短小芽孢杆菌Bacillus pumilus,而85#为解淀粉芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciens。研究结果表明筛选得到的菌株83#和85#具有作为提质增香菌剂的应用潜力,并为芽孢杆菌应用于烟叶陈化提供理论依据。

关键词：晾晒烟产酶微生物烟叶陈化芽孢杆菌菌剂