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民猪脂肪细胞分化过程中抗寒相关基因表达规律研究

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畜牧兽医学报 2021年第7期52卷 2044-2051页

作者：范文博马红马守正汪亮刘娣东北农业大学动物科学技术学院哈尔滨150036 黑龙江省农业科学院畜牧研究所哈尔滨150000

旨在探究民猪脂肪细胞分化过程中产热基因和米色脂肪标记基因的表达变化规律,为进一步研究民猪脂肪细胞向米色脂肪细胞分化的分子机制提供依据。本研究采集1月龄民猪的背部脂肪组织,分离前体脂肪细胞进行培养及成脂诱导,观察分化过程中... 详细信息

旨在探究民猪脂肪细胞分化过程中产热基因和米色脂肪标记基因的表达变化规律,为进一步研究民猪脂肪细胞向米色脂肪细胞分化的分子机制提供依据。本研究采集1月龄民猪的背部脂肪组织,分离前体脂肪细胞进行培养及成脂诱导,观察分化过程中细胞形态并进行油红O染色鉴定;检测产热基因UCP3、PGC-1α、PPARα和米色脂肪标记基因EBF2、CD81、PDGFRα在诱导分化第0、2、4、6、8天的表达量。结果表明,随着诱导分化的时间增加,细胞中的脂滴逐渐增多,在分化第8天时进行油红O染色,多数细胞达到成熟脂肪细胞阶段。以第0天为对照,PGC-1α、EBF2、PDGFRα在第2天时表达量极显著升高(P产热和米色脂肪标记基因的表达规律,为进一步研究民猪前体脂肪细胞向米色脂肪细胞分化的分子机制和民猪抗寒能力奠定基础。

关键词：民猪米色脂肪产热基因米色脂肪标记基因

功能活性因子对机体白色和棕色脂肪组织的调控机理研究进展

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食品科学 2023年第15期44卷 278-288页

作者：谈婷罗毅皓孙万成青海大学农牧学院青海西宁810016

棕色脂肪组织(brown adipose tissue,BAT)能够通过促进能量消耗改善机体代谢水平,有助于肥胖和糖尿病等代谢性疾病的预防和治疗,BAT现已成为治疗代谢疾病的新靶点。目前有关机体BAT活性提高的研究既是热点也是难点,对食品中调节BAT的功... 详细信息

棕色脂肪组织(brown adipose tissue,BAT)能够通过促进能量消耗改善机体代谢水平,有助于肥胖和糖尿病等代谢性疾病的预防和治疗,BAT现已成为治疗代谢疾病的新靶点。目前有关机体BAT活性提高的研究既是热点也是难点,对食品中调节BAT的功能活性因子的研究与分析有助于研发新型营养激活剂。本文对BAT的发展和产热机制以及产热相关功能活性因子进行总结,同时对食品中调节棕色脂肪的活性成分及其调节机制进行综述,并简要介绍白色脂肪组织(white adipose tissue,WAT)和BAT对机体健康的影响,通过探究BAT调节机体能量代谢平衡和机体各种疾病的研究进展,为未来研发棕色脂肪营养激活剂、完善个体化健康膳食管理方案和防治疾病提供理论依据。

关键词：棕色脂肪组织产热基因活性因子机体健康

寒冷应激对阿勒泰羔羊及杂交种脂质能量代谢通路及免疫功能的影响

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寒冷应激对阿勒泰羔羊及杂交种脂质能量代谢通路及免疫功能的影响

作者：高静雯石河子大学

学位级别：硕士

正文:冷刺激有损动物的健康和福利,继而给畜牧业带来经济损失,新疆阿勒泰地区冬季严寒且积雪时间长,更是给绵羊养殖带来了很大的困难。目的:为了探究寒冷刺激对阿勒泰羔羊和阿勒泰与萨福克杂交种羔羊机体脂质能量代谢和免疫功能等方面... 详细信息

正文:冷刺激有损动物的健康和福利,继而给畜牧业带来经济损失,新疆阿勒泰地区冬季严寒且积雪时间长,更是给绵羊养殖带来了很大的困难。目的:为了探究寒冷刺激对阿勒泰羔羊和阿勒泰与萨福克杂交种羔羊机体脂质能量代谢和免疫功能等方面的影响,同时比较研究杂交羊尾部脂肪大量减少后,其抗寒能力的变化,给绵羊抗寒育种工作提供理论依据,开展以下几方面研究:方法:本试验以4月龄的阿勒泰及杂交种公羔为研究对象,选择-20℃10℃和-30℃20℃为试验条件,分时间段对羔羊进行冷刺激,构建羔羊冷应激模型;采集羔羊样品,通过免疫组化确定TH的分布;ELISA测定血清中激素、IgG和Cortisol含量变化,抗氧化因子的含量;扩增ADRB3、UCP1、HSL基因并测序,分析其与不同物种的同源性,并通过qPCR和Western Blot法测定羔羊不同组织中3种基因转录和翻译水平的变化;用HE和甲苯胺蓝染色,观察羔羊小肠显微结构的变化及其杯状细胞、上皮淋巴细胞和肥大细胞的数量变化;应用qPCR法测定羔羊外周血白细胞和脾脏细胞因子mRNA的表达量变化,观察羔羊免疫功能。结果:1.羔羊小脑和下丘脑室旁核均有TH阳性细胞和纤维分布,且冷应激后阳性表达增加;冷应激后E含量呈上升趋势;阿勒泰羔羊NE含量先上升后下降,而杂交种羔羊NE含量持续上升;羔羊GC含量在弱冷应激后先下降后上升,强冷应激后则先升高后降低;阿勒泰羔羊INS含量先下降后上升,杂交种羔羊相反;羔羊LEP含量均先下降后上升。冷应激后羔羊血清中SOD含量先增加后减少,MDA含量先上升后下降,且高于常温组,GSH-PX的含量波动但呈下降趋势,GR含量增强后减弱;2.ADRB3、UCP1和HSL基因与已有绵羊序列同源性均高于99%;冷刺激后各组织中UCP1和HSL的mRNA及蛋白表达呈动态变化,较常温组有所增加,ADRB3基因mRNA在肩胛间脂肪中表达量低于常温组,在下丘脑中表达量在强、弱冷刺激后不同。3.冷应激后羔羊血清中IgG的含量低于常温组,而皮质醇含量高于常温组,皆有略微波动;观察羔羊小肠的显微结构发现强度、长时间冷刺激后小肠绒毛明显缩短变粗,且小肠中杯状细胞和肥大细胞数量增多,上皮淋巴细胞数量减少;同时,冷应激后外周血白细胞和脾脏中IL-2、IL-4、IL-10、IL-12和IFN-β的mRNA表达量不同时间段较为浮动,但总体高于常温组。结论:综上所述,随着冷刺激时间和强度的增加,会对羔羊造成一定的损伤;同时,杂交后羔羊尾脂沉积变少,可能会对其冷应激时的产热能力、抗氧化能力及免疫功能有一定影响,但并不会使其丧失。说明阿勒泰羔羊内环境较为稳定,但冷应激后可能仍需动态调节相关基因的表达,不断调整能量代谢,去适应温度的变化。该研究结果为新疆绵羊抗寒育种工作奠定一定的理论基础。

关键词：冷应激激素抗氧化产热基因免疫系统

熊去氧胆酸通过干扰白介素-10对小鼠肥胖风险的影响

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中国美容医学 2020年第1期29卷 68-71页

作者：高黎黎张昊上海市浦东医院/复旦大学附属浦东医院医学科研与创新中心上海201399 上海市浦东医院/复旦大学附属浦东医院普外科上海201399

目的:探索熊去氧胆酸(UDCA)通过干扰脂肪组织中白介素-10(IL-10)的水平,对高脂饲料诱导小鼠肥胖风险的影响。方法:将C57BL/6J雄鼠简单随机化分为:Control组、DIO组、+UDCA组及+UDCA+IL-10组,于诱导0、6及8周后测量体重。取小鼠肠系膜白... 详细信息

目的:探索熊去氧胆酸(UDCA)通过干扰脂肪组织中白介素-10(IL-10)的水平,对高脂饲料诱导小鼠肥胖风险的影响。方法:将C57BL/6J雄鼠简单随机化分为:Control组、DIO组、+UDCA组及+UDCA+IL-10组,于诱导0、6及8周后测量体重。取小鼠肠系膜白色脂肪(mesenteric white adipose tissue,mWAT),ELISA和western-blot法检测mWAT中IL-10和IL-10Rα的蛋白浓度;RT-PCR法检测产热基因的表达水平。结果:诱导6周后,Control组小鼠体质量较其它高脂诱导组低,差异有统计学意义(P产热基因的表达较DIO组上调(P产热基因的表达,降低小鼠的肥胖风险;该效果可被外源性IL-10削弱。

关键词：熊去氧胆酸白介素-10 产热基因肥胖风险

核受体FXR新型配体的发现及其调节脂质代谢功能研究

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核受体FXR新型配体的发现及其调节脂质代谢功能研究

作者：喻莹华东理工大学

学位级别：硕士

法尼酯X受体（FXR）是一种重要的配体激活转录因子,越来越多的研究表明：FXR的拮抗剂在治疗高胆固醇血症方面可能发挥着重要的作用。然而,目前发现的有效拮抗剂不多,而且大部分都是甾体类化合物。本论文通过运用基于配体和结构的虚拟筛... 详细信息

法尼酯X受体（FXR）是一种重要的配体激活转录因子,越来越多的研究表明：FXR的拮抗剂在治疗高胆固醇血症方面可能发挥着重要的作用。然而,目前发现的有效拮抗剂不多,而且大部分都是甾体类化合物。本论文通过运用基于配体和结构的虚拟筛选,并结合分子生物学、生物物理学、细胞生物学及化学合成等技术,得到了一个非甾体类的FXR拮抗剂—化合物12u。此化合物对FXR的拮抗活性、降胆固醇和甘油三酯的效果强于阳性拮抗剂Guggulsterole （GS）。我们进一步探讨了此化合物可能通过调控CYP7A1和SHP的表达从而起到了降胆固醇以及甘油三酯的作用。研究发现：SHP基因敲除或者CYP7A1基因过表达,会导致小鼠机体产热增加,从而抵抗高脂饮食所诱导的糖尿病和肥胖的发生。而化合物12u对SHP基因表现出强烈的抑制作用,同时又能够明显增强CYP7A1基因的表达。因此,我们对化合物12u增加褐色脂肪细胞BAT细胞产热基因表达的机制进行了初步研究。研究表明：FXR激动剂具有降脂、降糖作用,但FXR合成激动剂GW4064会加速高脂饮食喂养的C57BL/6J小鼠患肥胖和糖尿病的进程。因此,我们通过化学合成方法合成了一个FXR的部分激动剂—化合物PD0384,此化合物包含GW4064的结构和拮抗剂12u的部分结构。我们在BAT细胞中比较了化合物PD0384和GW4064对产热基因表达的影响。研究结果表明：GW4064降低了产热基因的表达,而化合物PD0384可增加产热基因的表达,也可逆转GW4064对产热基因的抑制作用。这一研究揭示了化合物PD0384可改善GW4064的副作用,并在治疗肥胖方面具有一定的应用前景。

关键词：法尼酯X受体拮抗剂部分激动剂降脂作用产热基因