核受体FXR新型配体的发现及其调节脂质代谢功能研究

作     者：喻莹 

作者单位：华东理工大学 

学位级别：硕士

导师姓名：沈旭

授予年度：2012年

学科分类：1006[医学-中西医结合] 10[医学] 100602[医学-中西医结合临床] 

主      题：法尼酯X受体 拮抗剂 部分激动剂 降脂作用 产热基因 

摘      要：法尼酯X受体（FXR）是一种重要的配体激活转录因子,越来越多的研究表明：FXR的拮抗剂在治疗高胆固醇血症方面可能发挥着重要的作用。然而,目前发现的有效拮抗剂不多,而且大部分都是甾体类化合物。本论文通过运用基于配体和结构的虚拟筛选,并结合分子生物学、生物物理学、细胞生物学及化学合成等技术,得到了一个非甾体类的FXR拮抗剂—化合物12u。此化合物对FXR的拮抗活性、降胆固醇和甘油三酯的效果强于阳性拮抗剂Guggulsterole （GS）。我们进一步探讨了此化合物可能通过调控CYP7A1和SHP的表达从而起到了降胆固醇以及甘油三酯的作用。 研究发现：SHP基因敲除或者CYP7A1基因过表达,会导致小鼠机体产热增加,从而抵抗高脂饮食所诱导的糖尿病和肥胖的发生。而化合物12u对SHP基因表现出强烈的抑制作用,同时又能够明显增强CYP7A1基因的表达。因此,我们对化合物12u增加褐色脂肪细胞BAT细胞产热基因表达的机制进行了初步研究。 研究表明：FXR激动剂具有降脂、降糖作用,但FXR合成激动剂GW4064会加速高脂饮食喂养的C57BL/6J小鼠患肥胖和糖尿病的进程。因此,我们通过化学合成方法合成了一个FXR的部分激动剂—化合物PD0384,此化合物包含GW4064的结构和拮抗剂12u的部分结构。我们在BAT细胞中比较了化合物PD0384和GW4064对产热基因表达的影响。研究结果表明：GW4064降低了产热基因的表达,而化合物PD0384可增加产热基因的表达,也可逆转GW4064对产热基因的抑制作用。这一研究揭示了化合物PD0384可改善GW4064的副作用,并在治疗肥胖方面具有一定的应用前景。