检索结果-南通市图书馆

作者：陈耕中国农业科学院

学位级别：硕士

二化螟（Chilo suppressalis）是我国水稻上的一种重要害虫,每年给水稻生产造成严重的经济损失。转Bt基因水稻的研制为其防治提供了新策略,但二化螟对Bt水稻潜在的抗性风险将成为制约其可持续应用的关键因素。因此,延缓害虫抗性发展,制... 详细信息

二化螟（Chilo suppressalis）是我国水稻上的一种重要害虫,每年给水稻生产造成严重的经济损失。转Bt基因水稻的研制为其防治提供了新策略,但二化螟对Bt水稻潜在的抗性风险将成为制约其可持续应用的关键因素。因此,延缓害虫抗性发展,制定适宜的抗性治理策略已成为抗虫水稻生产应用的当务之急,而明确害虫抗性产生的分子机制是实施害虫抗性治理策略的前提和基础。前期研究已表明,二化螟中肠氨肽酶-N（CsAPN）的同工酶CsAPN1为Bt毒素的功能受体,受体基因的下调表达、缺失突变等可能导致受体蛋白与Bt毒素的结合能力下降,进而引起害虫Bt抗性产生。我们在前期克隆二化螟Bt耐受品系的CsAPN1时,发现其在编码区的3’端存在两个缺失区域,共计缺失19个氨基酸,并已通过实验表明,该缺失突变发生在二化螟基因组水平。但该突变是否引起CsAPN1与Bt毒素的结合能力下降,进而导致二化螟Bt抗性产生?该问题还未阐明。基于此,本研究利用已获得的CsAPN1正常和缺失突变的全长序列,构建蛋白表达载体,分段表达CsAPN1正常和缺失突变的多肽片段,定量测定CsAPN1正常和缺失突变的多肽片段与Bt毒素的结合能力,进一步明确缺失突变对二化螟CsAPN1与Bt毒素结合能力的影响,进而阐明二化螟中肠氨肽酶-N-CsAPN1的缺失突变与Bt抗性的关系。取得的主要结果如下:1.正常及缺失突变型二化螟CsAPN1基因全长序列的分段表达与纯化将去除信号肽的正常和缺失突变的CsAPN1全长序列分别分成4段,分别为:CsAPN1-F1、CsAPN1-F2、CsAPN1-F3和CsAPN1-F4（CsAPN1-F4L或CsAPN1-F4S）,由于缺失突变位于第4段,因此将有缺失突变区域的第4段标记为:CsAPN1-F4S,将正常型CsAPN1的第4段标记为:CsAPN1-F4L。分别将这些片段构建到pMal-c5X载体上,并导入大肠杆菌进行诱导表达与纯化。结果表明,这些片段表达出了与预期分子量一致的融合蛋白,CsAPN1-F1为73.2kDa、CsAPN1-F2为72.87 kDa、CsAPN1-F3为72.3 kDa、CsAPN1-F4L为71.19 kDa、CsAPN1-F4S为69.2 kDa。经麦芽糖柱的亲和层析纯化,得到了纯度较高的融合蛋白,用于下一步的结合试验。2.正常与缺失突变的CsAPN1多肽片段与Bt毒素的结合特性分析建立了可重复性强、数据可靠的用于昆虫中肠受体蛋白与Bt毒素结合能力测定的ELISA结合动力学测定法。经ELISA饱和结合动力学测定,Cry1Ab与CsAPN1-F1、CsAPN1-F2、CsAPN1-F3、CsAPN1-F4L和CsAPN1-F4S的结合常数Kd值分别为:9.85±2.94 nM、85.42±72.55nM、5.40±0.80 nM、2.78±0.16 nM、2.70±0.14 nM。CsAPN1-F2与Cry1Ab的结合常数Kd显著大于其他片段,即其结合能力极显著的低于其他片段。由于缺失突变区域发生在第4片段,将正常和缺失突变APN1的第4片段的Kd值进行比较发现,CsAPN1-F4L和CsAPN1-F4S与Cry1Ab均能以高亲和力结合,但结合能力差异不显著。因此,推测CsAPN1第4片段的缺失突变区域不是Cry1Ab毒素的结合位点,此缺失突变不影响CsAPN1与Cry1Ab的结合。CsAPN1与Cry1C的ELISA饱和结合动力学测定结果表明,Cry1C与CsAPN1-F1、CsAPN1-F2、CsAPN1-F3、CsAPN1-F4L、CsAPN1-F4S结合常数分别是50.48±12.07 nM、11.52±2.02nM、19.04±5.91 nM、9.74±3.06 nM、78.85±58.83 nM。Cry1C与CsAPN1-F1片段的结合能力极显著低于CsAPN1-F2、CsAPN1-F3和CsAPN1-F4L的结合能力,Cry1C与CsAPN1-F2、CsAPN1-F3、CsAPN1-F4L的结合能力相互之间差异不显著。发生缺失突变的CsAPN1第4片段,正常型的CsAPN1-F4L和缺失突变型的CsAPN1-F4S与Cry1C均能结合,但具有缺失突变区域的CsAPN1-F4S的结合能力显著低于CsAPN1-F4L。因此,推测CsAPN1第4片段的缺失突变区域存在Cry1C毒素的结合位点。此缺失突变影响了CsAPN1与Cry1C的结合。CsAPN1与Cry2Aa的ELISA饱和结合动力学测定结果表明,Cry2Aa与CsAPN1-F1、CsAPN1-F2、CsAPN1-F3、CsAPN1-F4L和CsAPN1-F4S的结合常数Kd值分别为:3.26±0.31 nM、2.50±0.25 nM、1.95±0.11 nM、19.50±7.25 nM、27.40±8.70 nM。Cry2Aa与CsAPN1-F

关键词：二化螟氨肽酶-N（CsAPN）原核表达 Elisa结合动力学结合常数

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转录组测序分析毒死蜱与醚菊酯混配对二化螟毒杀的增效机制

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江苏农业学报 2021年第2期37卷 317-325页

作者：徐鹿罗光华金瑜剑徐德进徐广春顾中言江苏省农业科学院植物保护研究所江苏南京210014 上海祥音生物科技有限公司上海201800

为明确毒死蜱与醚菊酯混配对二化螟毒杀的增效机制,采用联合毒力指数法筛选毒死蜱与醚菊酯混配的增效比例,利用转录组测序分析毒死蜱与醚菊酯混配的增效机制。结果表明,毒死蜱与醚菊酯以1∶2(质量比)混配时表现出增效作用,Illumina HiSe... 详细信息

为明确毒死蜱与醚菊酯混配对二化螟毒杀的增效机制,采用联合毒力指数法筛选毒死蜱与醚菊酯混配的增效比例,利用转录组测序分析毒死蜱与醚菊酯混配的增效机制。结果表明,毒死蜱与醚菊酯以1∶2(质量比)混配时表现出增效作用,Illumina HiSeqTM X Ten测序获得高质量的二化螟转录组。去离子水处理与毒死蜱处理、去离子水处理与醚菊酯处理、去离子水处理与增效混配剂处理、毒死蜱处理与增效混配剂处理、醚菊酯处理与增效混配剂处理的差异表达基因分别为465、392、1874、117、25个。对毒死蜱与醚菊酯混配增效主要涉及的代谢过程进行通路分析,结合维恩交集法进行分析,发现解毒代谢酶可能介导毒死蜱与醚菊酯混配的增效机制。实时荧光定量PCR结果证实差异基因的表达量与测序数据匹配。本研究结果可为解析杀虫剂混配增效机制提供分子基础,为优化杀虫剂混配比例,建立二化螟抗性治理策略提供理论依据。

关键词：二化螟毒死蜱醚菊酯转录组测序增效

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二化螟和稻纵卷叶螟谷胱甘肽-S-转移酶基因的鉴定与表达模式分析

二化螟和稻纵卷叶螟谷胱甘肽-S-转移酶基因的鉴定与表达模式分析

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作者：张邦贤安徽农业大学

学位级别：硕士

二化螟Chilo suppressalis和稻纵卷叶螟Cnaphalocrocis medinalis是亚洲地区最重要的两种水稻害虫,对我国及东南亚地区的水稻生产造成严重的经济损失。长期以来,对二化螟和稻纵卷叶螟的防治主要依靠化学农药,但无选择性地使用杀虫剂,给... 详细信息

二化螟Chilo suppressalis和稻纵卷叶螟Cnaphalocrocis medinalis是亚洲地区最重要的两种水稻害虫,对我国及东南亚地区的水稻生产造成严重的经济损失。长期以来,对二化螟和稻纵卷叶螟的防治主要依靠化学农药,但无选择性地使用杀虫剂,给二化螟和稻纵卷叶螟造成了一定的选择压力,使这两种害虫对杀虫剂的敏感性降低,导致防治更为困难。目前对于二化螟和稻纵卷叶螟对杀虫剂敏感性降低的研究主要集中于杀虫剂靶标位点的突变和解毒酶活性的改变。谷胱甘肽-S-转移酶（glutathione-S-transferase,GST）作为一类重要的解毒酶,在昆虫对内源和外源有毒物质的代谢过程中起非常重要的作用。GST催化有害物质与还原型谷胱甘肽（GSH）结合,增加其水溶性,从而能被更容易地排出体外,降低杀虫剂对昆虫的毒性。目前,关于二化螟和稻纵卷叶螟GST的报道比较有限。因此,本论文针对二化螟和稻纵卷叶螟GST的编码基因开展研究,从这两种害虫的转录组数据库里鉴定GST编码基因,明确GST在各组织中的表达模式,并研究了在亚致死剂量杀虫剂胁迫下GST基因表达水平的变化。本研究结果可为探索二化螟和稻纵卷叶螟对杀虫剂敏感性降低的分子机制奠定前期基础。1.二化螟和稻纵卷叶螟GST基因的鉴定和生物信息学分析通过搜索二化螟和稻纵卷叶螟转录组,分别鉴定出16个和25个GSTs基因。通过序列比对和生物信息学分析,明确鉴定出的二化螟16个GSTs分别属于6个已知的GSTs家族（Delta,Epsilon,Omega,Sigma,Zeta,Theta）和unclassified家族;稻纵卷叶螟的25个GSTs基因分别属于5个已知的GSTs家族（Delta,Epsilon,Omega,Sigma,Zeta）和unclassified家族,未鉴定出Theta家族GSTs基因。GSTs多氨基酸序列连配结果显示,二化螟CsGST蛋白与稻纵卷叶螟CmGST蛋白均具有谷胱甘肽结合位点和底物结合位点。谷胱甘肽结合位点的氨基酸残基在二化螟和稻纵卷叶螟Delta和Epsilon家族高度保守,它们可能是催化作用的关键残基。二化螟和稻纵卷叶螟谷胱甘肽-S转移酶在N端GSH结合位点和C端底物结合位点的高度的一致性,暗示了在进化过程中昆虫GSTs功能的保守性。通过构建系统进化树,明确了二化螟和稻纵卷叶螟GSTs和其他模式昆虫GSTs的系统进化关系。2.二化螟GST基因的组织表达谱和应对杀虫剂胁迫的表达模式以二化螟β-actin基因作为内参基因,对二化螟16个GSTs基因在幼虫不同组织（中肠、马氏管、脂肪体）中的mRNA相对表达水平进行了定量分析,结果显示:CsGSTd2、CsGSTd3、CsGSTe1、CsGSTo1、CsGSTo3和CsGSTt1主要在脂肪体中表达;CsGSTe3在马氏管中大量表达;其他基因在各组织中的相对表达水平没有显著差异。利用双酰胺类杀虫剂氯虫苯甲酰胺对二化螟进行亚致死剂量和时间诱导后,使用RT-qPCR技术检测二化螟GSTs基因应对杀虫剂胁迫的表达模式。结果表明:经氯虫苯甲酰胺诱导24h后,二化螟Delta家族和Epsilon家族GSTs基因相对表达水平均显著高于CK和6h处理,二化螟CsGSTe1表达量显著上调。Omega家族的GSTs在处理12h后,表达量相比CK也出现了显著上调。CsGSTs2在6h和12h与CK没有显著差异,无明显的时间效应。CsGSTt1与Delta家族表现了相似的表达模式,在6h处理后,CsGSTt1表达水平显著下调,但是在12h处理后,表达水平与CK相比,有显著上升。CsGSTz1在6h,12h处理后与CK相比,表达量有上调,但没有显著差异。Unclassified家族GSTs在6h和12h处理后,表达量均有下调,CsGSTu1下降水平显著,CsGSTu2相对表达水平下降但未达到显著差异。3.稻纵卷叶螟GSTs基因的组织表达谱和应对杀虫剂胁迫的表达模式以稻纵卷叶螟β-actin基因作为内参基因,对稻纵卷叶螟25个GSTs基因在幼虫不同组织（中肠、马氏管、脂肪体）中的mRNA相对表达水平进行了定量分析,结果显示:CmGSTe1,CmGSTe2,CmGSTe5在脂肪体中的表达量显著高于在中肠和马氏管中的表达量。利用有机磷类杀虫剂毒死蜱对稻纵卷叶螟进行亚致死剂量和时间诱导后,使用RT-qPCR技术检测稻纵卷叶螟GSTs基因应对杀虫剂胁迫的表达模式,结果表明:经毒死蜱诱导24h后,1个Delta家族（CmGSTd2）,2个Epsilon家族GSTs（CmGSTe6和CmGSTe7）相对表达水平显著上调,其中CmGSTe6诱导24h后相对表达量最高。CmGSTd1、CmGSTd3、CmGSTd4的表达量波动范围很小,未达到显著水平。CmGSTe1,CmGSTe4,CmGSTe5,的表达模式比较一致,均是在处理24h后相对表达量

关键词：二化螟稻纵卷叶螟谷胱甘肽-S-转移酶基因序列分析表达模式

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靶向二化螟氯虫苯甲酰胺抗药性基因纳米农药的制备及生物活性

靶向二化螟氯虫苯甲酰胺抗药性基因纳米农药的制备及生物活性

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作者：刘宇华中农业大学

学位级别：硕士

农药是重要的农业生产资料,但其不科学不合理的使用导致害虫抗性进化迅速,对害虫的抗性治理成为农业生产中的难点。利用RNAi技术沉默昆虫解毒酶系相关基因可降低其对杀虫剂的代谢抗性,利用纳米载体共同递送用于抗性基因RNAi的dsRNA和农... 详细信息

农药是重要的农业生产资料,但其不科学不合理的使用导致害虫抗性进化迅速,对害虫的抗性治理成为农业生产中的难点。利用RNAi技术沉默昆虫解毒酶系相关基因可降低其对杀虫剂的代谢抗性,利用纳米载体共同递送用于抗性基因RNAi的dsRNA和农药分子可作为抗性治理的潜在工具。介孔有机二氧化硅(Mesoporous organosilica nanoparticls,MON)是一类具有高比表面积、易进行修饰的纳米材料,构建基于MON的共递送系统可同时携带dsRNA和农药分子进入昆虫体内,递送dsRNA沉默抗性相关基因及释放出农药分子,实现对害虫的抗性治理,本研究主要结果如下:(1)利用分子生物学技术,基于L4440质粒和大肠杆菌HT115(DE3)菌株,构建高效诱导表达二化螟抗性相关P450家族基因CsCYP321F3和UGT家族基因CsUGT40AL1的合成方法,诱导表达产生的dsRNA条带清晰,大小正确。(2)以十六烷基三甲基溴化铵和水杨酸钠为模板,原硅酸四乙酯和双-[3-(三乙氧基硅基)丙基]-四硫化物为硅源,采用水热法合成粒径约为80 nm的有机二氧化硅纳米粒子,经硅烷偶联剂3-(乙氧基硅基)丙基琥珀酸酐完成羧基化修饰后负载氯虫苯甲酰胺,在EDS和NHS催化下利用酰胺反应将阳离子聚合物聚乙烯亚胺接枝至MON表面,最终在静电作用下完成dsRNA的负载,成功构建共递送纳米载体dsRNA/Chl@MON-PEI。通过多项表征技术对该共递送纳米载体进行分析,结果表明:dsRNA/Chl@MON-PEI纳米载体成功制备,粒径均一,氯虫苯甲酰胺负载率为14.40%,dsRNA负载量约10.00%。(3)进一步对该共递送纳米载体dsRNA/Chl@MON-PEI进行分析,稳定性实验表明MON-PEI可显著提高dsRNA的稳定性,保护dsRNA免受RNAase降解,延长dsRNA储存时间。细胞实验表明MON可有效降低PEI的细胞毒性;MON-PEI可有效提高细胞对dsRNA的摄取,相较于单独dsRNA处理,dsRNA@MON-PEI处理后细胞靶基因表达量显著下调约31.92%。室内生物活性测定结果表明该共递送纳米载体可有效克服二化螟对氯虫苯甲酰胺的抗性,增强氯虫苯甲酰胺对二化螟的毒力;相较于Chl@MON-PEI,ds CsCYP321F3/Chl@MON-PEI和CsUGT40AL1/Chl@MON-PEI对二化螟的LC从48.64 mg/L显著下降至32.37 mg/L和30.14 mg/L;利用qRT-PCR测定dsRNA、dsRNA@MON-PEI处理后二化螟体内目的基因的表达量变化,结果表明纳米载体的使用可有效递送dsRNA进入试虫体内发挥RNAi作用沉默靶标基因。

关键词：共递送系统 RNAi 纳米农药抗性基因二化螟生物活性

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四川省二化螟不同地理种群遗传多态性的差异分析

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应用昆虫学报 2021年第1期58卷 124-131页

作者：于文娟陈丹罗涵姬红丽彭云良四川省农业科学院植物保护研究所农业部西南作物有害生物综合治理重点实验室成都610066 中国水稻研究所水稻生物学国家重点实验室杭州311401

【目的】为了解四川省二化螟Chilo suppressalis(Walker)不同地理种群的遗传结构,分析各个种群间的亲缘关系,为区域治理对策提供新的依据。【方法】通过测定四川省17个市县二化螟样本的线粒体COⅡ基因和核糖体ITS基因,利用MEGA软件分析... 详细信息

【目的】为了解四川省二化螟Chilo suppressalis(Walker)不同地理种群的遗传结构,分析各个种群间的亲缘关系,为区域治理对策提供新的依据。【方法】通过测定四川省17个市县二化螟样本的线粒体COⅡ基因和核糖体ITS基因,利用MEGA软件分析二化螟不同地理种群的基因遗传多样性,以获取样本群体遗传多样性信息。【结果】对114条幼虫线粒体COⅡ基因序列分析发现,在500 bp的区段中共有147个位点存在多态性,包含33个单倍型;川东地区和川西地区二化螟种群的单倍型多样度分别为0.70383和0.80226;系统发育树显示,除眉山-1-1种群之外,其他二化螟地理种群聚合为一个大分支。而对同批二化螟核糖体ITS基因序列分析结果表明,在533 bp的区段中存在299个位点多态性,有92个单倍型;川东地区和川西地区二化螟种群的单倍型多样度分别为0.96748和0.97571;在系统发育树中,犍为种群聚合为一支,其余种群聚合为一支。【结论】川西地区二化螟线粒体COⅡ基因和核糖体ITS基因多态性比川东地区样本丰富。地理种群之间的遗传分化与分布之间的相关性不大,这可能与种群本身差异相差不大相关。

关键词：二化螟遗传多样性 COⅡ ITS 地理种群

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赣北二化螟卵寄生蜂寄生率动态及其对景观结构的响应

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中国生物防治学报 2021年第5期37卷 870-876页

作者：朱玉麟陈俊晖黄孝龙肖海军江西农业大学昆虫研究所南昌330045

为探索南方稻区二化螟卵寄生蜂生防功能、评估卵寄生蜂在田间寄生动态并探讨对不同景观结构的响应,本文采用对比盆栽稻株叶片载卵、离体新鲜稻叶载卵和滤纸卵卡比对二化螟卵寄生蜂寄生率差异;利用盆栽稻株叶片载卵调查卵寄生蜂在稻田中... 详细信息

为探索南方稻区二化螟卵寄生蜂生防功能、评估卵寄生蜂在田间寄生动态并探讨对不同景观结构的响应,本文采用对比盆栽稻株叶片载卵、离体新鲜稻叶载卵和滤纸卵卡比对二化螟卵寄生蜂寄生率差异;利用盆栽稻株叶片载卵调查卵寄生蜂在稻田中的寄生率季节动态变化;在5月初、7月初和9月初分别调查了在不同景观样点二化螟卵寄生蜂寄生率,对不同空间尺度下(0.2,0.5,1.0,1.5,2.0 km)景观变量与卵寄生率进行模型分析,评估不同景观变量对卵寄生率的影响。结果表明,三种诱集方法差异显著,盆栽稻株叶片载二化螟卵被寄生的比率最高,其次为离体新鲜稻叶,滤纸卵卡效果最差。田间寄生动态调查表明,早稻卵被寄生比率偏低,中稻寄生率较高,在7月中旬二化螟卵被寄生率达到高峰(66.7%),8月下旬以后,晚稻寄生率逐步下降。对不同空间尺度下景观结构变量与卵寄生率分析表明,1.5 km尺度下的林地与二化螟卵寄生蜂有着密切关系。低于40%林地面积比例时,二化螟卵寄生蜂寄生率随林地面积增加而降低;而在高于40%林地面积比例时,二化螟卵寄生率随林地面积增加而增加。综上所述,对于中国南方的小规模稻田景观,林地比例与二化螟卵寄生率有关,但相关效应并非单一地增加或减少的线性响应。研究结果可为南方稻区二化螟卵寄生蜂提供简便、有效的评估方法,并为综合利用二化螟卵寄生蜂控害功能,发展二化螟生防策略提供参考依据。

关键词：农田景观二化螟寄生蜂寄生率动态水稻

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二化螟piggyBac类转座子的克隆与分析

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昆虫学报 2012年第7期55卷 763-771页

作者：罗光华吴敏韩召军李晓欢钱路方继朝江苏省农业科学院植物保护研究所南京210014 南京农业大学植物保护学院教育部农作物病虫害综合治理重点实验室南京210095 江苏出入境检验检疫局南京210001

piggyBac转座子是DNA型转座子,广泛分布于生物体内。基于piggyBac转座子超家族成员IFP2开发的转基因工具载体是目前转基因研究中使用最广泛的载体之一,因此piggyBac转座子的研究受到广泛的关注和重视。本文是对二化螟Chilo suppressali... 详细信息

piggyBac转座子是DNA型转座子,广泛分布于生物体内。基于piggyBac转座子超家族成员IFP2开发的转基因工具载体是目前转基因研究中使用最广泛的载体之一,因此piggyBac转座子的研究受到广泛的关注和重视。本文是对二化螟Chilo suppressalis内源性piggyBac类转座子(piggyBac-like element,CsuPLE)的首次报道。克隆的CsuPLE(GenBank登录号:JX392388)全长2537bp,包含一个长1914bp的完整开放阅读框(open reading frame,ORF),编码含637个氨基酸残基的转座酶,转座酶中含有piggyBac家族保守的"DDD-domain"。CsuPLE全长序列具有完全对称的13bp反向末端重复序列(inverted terminal repeats,ITRs)以及非完全对称的21bp内部重复序列(internal repeats,IRs),在二化螟基因组上插入在特征性的"TTAA"靶位点重复(target site duplication,TSD)处。在我国地理跨度很大的不同二化螟种群中均存在结构完整的CsuPLE序列。本研究结果为深入研究piggyBac转座子的结构与功能的关系提供了新的素材,也为评价利用转座子载体系统在二化螟体内进行转基因操作的可行性和安全性提供了重要的理论基础。

关键词：二化螟 piggyBac 转座子克隆序列分析

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二化螟性信息素的合成及田间试验

二化螟性信息素的合成及田间试验

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作者：刘彬吉林大学

学位级别：硕士

二化螟属于鳞翅目,螟蛾科,是我国水稻田最常见、危害最严重的水稻害虫,在我国所有水稻种植区域均有分布,且对水稻整个生长周期都造成持续的危害。目前防治二化螟的方法是化学农药杀虫防治,但是由于长期大量不合理的使用农药,导致二化螟... 详细信息

二化螟属于鳞翅目,螟蛾科,是我国水稻田最常见、危害最严重的水稻害虫,在我国所有水稻种植区域均有分布,且对水稻整个生长周期都造成持续的危害。目前防治二化螟的方法是化学农药杀虫防治,但是由于长期大量不合理的使用农药,导致二化螟抗药性增强,同时也增加农作物中残留农药的含量,对环境污染和人类健康都产生不良影响。因此,针对水稻二化螟害虫,能够探究安全、环境相容性好的绿色诱杀药剂,对降低环境污染,增强生命健康有着重要的意义。昆虫信息素是生物体分泌到体外影响其他生物体的生理和行为反应的微量化学物质。二化螟性信息素是由二化螟雌蛾在性成熟以后,由特殊腺体分泌并释放到体外的具有特殊气味的活性物质,能引诱二化螟雄蛾前来交配,是一种很有发展前途的防治二化螟虫害的绿色农药。有三种组分构成:Z-11-十六碳烯醛、Z-13-十八碳烯醛和Z-9-十六碳烯醛。二化螟性信息素可以人工合成,目前国内外都有相关的研究,但是仍然存在合成产率较低、成本较高、反应条件苛刻以及产物比例不易控制等因素。因此,探寻高产率、低成本、简便易行的合成方法对于实现二化螟的有效防治有重要作用。本文在现有的研究基础上,在合成方法、性信息素化合物制成诱芯等方面,做了进一步的优化和改进,并对合成的性信息素在田间的应用进行了初步的试验,旨在为利用性信息素进行防治二化螟提供一定的理论依据。因此,本研究进行了以下实验,并得到相应成果:1.得到了一条通用的二化螟性信息素的合成路径,以常见易得的α,ω-二醇为起始原料,采用炔化物还原路线,实现了三种目标物的合成。此合成方法操作简单,反应条件温和,产物结构单一,总产率均在45%以上。2.不同诱芯对引诱效果差异显著,通过对传统的塑料毛细管诱芯与微胶囊膏剂诱芯进行田间试验得知,微胶囊膏剂诱芯具有更好的引诱效果。3.吉林地区田间诱引试验表明性信息素化合物不仅可以作为预测害虫发生规律的工具,还可以用于田间大量诱引试验。

关键词：二化螟性信息素合成田间试验

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二化螟人工饲养技术的优化

二化螟人工饲养技术的优化

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作者：张芝雯沈阳农业大学

学位级别：硕士

二化螟Chilo suppressalis(Walker)属昆虫纲,鳞翅目,螟蛾科,草螟亚科,是我国水稻上危害最为严重的常发性害虫之一,在水稻的各生长期都会造成危害。在水稻分孽期,二化螟幼虫会蛀蚀水稻幼苗,使水稻苗枯萎;在水稻孕穗期和抽穗期,二化螟会... 详细信息

二化螟Chilo suppressalis(Walker)属昆虫纲,鳞翅目,螟蛾科,草螟亚科,是我国水稻上危害最为严重的常发性害虫之一,在水稻的各生长期都会造成危害。在水稻分孽期,二化螟幼虫会蛀蚀水稻幼苗,使水稻苗枯萎;在水稻孕穗期和抽穗期,二化螟会蛀蚀水稻茎秆,使水稻孕穗失败,出现枯孕穗和白穗;在水稻灌浆期和乳熟期,二化螟幼虫蛀蚀水稻茎秆,造成水稻无法正常灌浆,出现半枯穗和虫伤株,使瘪粒增多,对水稻的产量和品质有很大影响。受二化螟危害的水稻茎杆有蛀孔,蛀孔外很少有虫粪,虫粪大多分布在茎内、呈黄色,使受害的稻秆干枯,易折断。二化螟危害的植物种类很广泛,除了水稻外,还能危害茭白、玉米、高粱、甘蔗、油菜、蚕豆、麦类及芦苇、稗、李氏禾等杂草。近年来,随着全球气候的变暖,二化螟的危害日益严重,亟待对其进行防治。然而,开展二化螟的防治研究需有稳定的虫源。而使用天然饲料对其进行饲养极为不便,且存活率和产卵量都较低,无法扩繁。为此,开展人工饲养二化螟的相关研究势在必行。建立合适的二化螟饲养系统需要考虑诸多因素,每个环节都会有不同的问题需要解决,不同的细节需要注意。针对以上问题,开展了二化螟人工饲料的筛选及饲养条件优化等的相关研究。主要研究结果如下。1.饲料配方的优化(1)主饲料的筛选在辅助饲料相同的情况下,选择茭白、玉米、马蹄作为主饲料,进行对比试验。结果表明:以茭白为主饲料时,二化螟的存活率最高,幼虫期最短。茭白为最优的人工饲料主要成分。(2)辅料成分的筛选在确定主要成分后,选择4种辅料成分(氯化胆碱、抗坏血酸、山梨酸、蔗糖)对人工饲料进行优化。通过正交实验法从4种辅助成分中各选择3个符合逻辑的水平数据,进行4因素3水平的数据试验。通过spss数据处理,得到这4种辅料成分的最佳含量:每千克饲料含氯化胆碱0.3g、抗坏血酸2g、山梨酸2g和蔗糖25g。2.饲料配置工艺的研究以往二化螟人工饲料的制作采用熬煮的方法,但熬煮过程中易造成水分流失,熬煮时间过长还会造成饲料老化等情况发生。针对这一问题,本研究将二化螟人工饲料的制作方法从熬煮改成了蒸煮。具体做法为:将饲料成分依次加入烧杯,盖上铝箔纸进行高温灭菌。待其冷却后,加入不耐高温的成分进行搅拌,无菌环境下冷却后保存至4℃冰箱中备用。3.温湿度对二化螟饲养的影响研究温湿度对昆虫的生长发育有重要意义。因此,本实验对二化螟幼虫的人工饲养最适宜的温度与湿度进行了筛选。温度分别设置为25℃和28℃和31℃;相对湿度分布设置为40%、60%和80%。结果表明:温度为28℃,相对湿度为60%时,二化螟幼虫的存活率较高,幼虫期较短。温度28℃,相对湿度60%为二化螟人工饲养的最适宜条件。4.二化螟产卵装置的研究二化螟产卵是饲养中很重要的环节,直接影响到二化螟是否能扩大繁衍。经过设计研究,最终得到适于二化螟产卵的装置。即正方形箱体,其底部和三面装上透明塑料,顶部和正面装上纱网,且正面的纱网上缝上拉链,以便于操作。用湿的黑布盖在箱子上使箱内保持湿润黑暗状态,模拟夏季夜间水稻田环境。5.产卵介质的筛选研究二化螟人工饲养研究至今,关于其产卵介质的试验却很少,所以采用的产卵介质一般都是天然介质水稻叶。但是人工饲养追求的是快速便捷,水稻叶作为产卵介质需要不断种植水稻,这不符合人工饲养的要求。所以本试验分几步将产卵介质进行了筛选。首先是不同介质的筛选,将水稻叶、滤纸、复写纸等常见不同介质随机放入产卵箱,供二化螟产卵选择,以产卵量作为标准,得出除水稻叶外,滤纸上的卵粒数量最多,孵化率也较其他介质时的孵化率高。由此推断,二化螟可能喜欢粗糙的质感。其次是根据水稻叶可以给二化螟提供营养这点,把用蜂蜜水和水稻汁浸泡烘干的滤纸放入培养箱进行试验。结果表明,蜂蜜水处理过的滤纸上二化螟的卵粒数量比较多。试验过程中还发现,二化螟更愿意把卵块产在介质的褶皱处。因此,人工饲养二化螟时,可用折叠的且沾有蜂蜜水的滤纸来代替水稻充当二化螟的产卵介质。本试验以数据为支撑,优化了二化螟的人工饲养技术,将人工饲养二化螟的存活率提高,幼虫期缩短,还探究了它的产卵介质,为实现全人工饲养打下基础。

关键词：二化螟人工饲料产卵

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性诱剂与黑光灯对二化螟的诱捕效果及其影响因子

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农药学学报 2020年第4期22卷 602-610页

作者：黄贤夫陈海波李程巧肖鹏飞朱国念叶建人浙江省温岭市植物保护检疫站浙江温岭317500 浙江大学农药与环境毒理研究所杭州310029 浙江农林大学暨阳学院浙江诸暨311800

在二化螟预测预报中,性诱剂和黑光灯两种诱捕方法被广泛采用,为比较这两种方法对稻田二化螟诱捕效果的差异,于2010—2014年在浙江温岭地区进行了相关研究,并对诱芯和诱捕器种类、田间越冬幼虫量以及气象因子对二化螟诱捕效果的影响进行... 详细信息

在二化螟预测预报中,性诱剂和黑光灯两种诱捕方法被广泛采用,为比较这两种方法对稻田二化螟诱捕效果的差异,于2010—2014年在浙江温岭地区进行了相关研究,并对诱芯和诱捕器种类、田间越冬幼虫量以及气象因子对二化螟诱捕效果的影响进行了研究。结果显示:对于越冬代二化螟,采用性诱剂和黑光灯诱捕的二化螟成虫数量的消长动态基本一致,但采用性诱剂诱捕的成虫峰期出现早、峰次多,而且诱捕量显著高于黑光灯诱捕;不同性诱剂诱芯与诱捕器之间的诱捕效果无显著差异;性诱剂和黑光灯两种方法诱捕的虫量与田间越冬的幼虫基数存在显著正相关关系;两种诱捕方法的诱捕虫量与气温密切相关,对于越冬代,诱捕的虫量与温度呈负相关,而其余各代的诱捕虫量则与温度成正相关。

关键词：性诱剂黑光灯二化螟诱捕效果害虫预测预报气象因子

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