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乳鼠角朊细胞分离表达共刺激分子CD80/CD86

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生物医学工程学杂志 2005年第2期22卷 265-270页

作者：雷建军程惊秋李幼平李胜富张立四川大学华西医院卫生部移植工程与移植免疫重点实验室成都610041

以往研究认为角朊细胞不表达共刺激分子CD80 / CD86 ,无法提供淋巴细胞增殖过程中关键的共刺激信号,但培养的角朊细胞膜片移植后,最终供者细胞被完全排斥,具体机理不明。本实验使用近交系小鼠,有和无血清两种体系培养角朊细胞1、4、7d,... 详细信息

以往研究认为角朊细胞不表达共刺激分子CD80 / CD86 ,无法提供淋巴细胞增殖过程中关键的共刺激信号,但培养的角朊细胞膜片移植后,最终供者细胞被完全排斥,具体机理不明。本实验使用近交系小鼠,有和无血清两种体系培养角朊细胞1、4、7d,采用流式细胞技术、激光共聚焦技术,RT- PCR方法检测角朊细胞在培养过程中MHC I类、II类抗原,及CD80、CD86的表达。证实培养的细胞中不含郎格罕氏细胞,首次发现乳鼠角朊细胞在培养过程中表达CD80 ,但不表达CD86 ,可刺激异基因淋巴细胞增殖,执行抗原递呈细胞功能。本研究结果为角朊细胞膜片移植排斥提出另一种可能的解释:MHC I/ II类分子和CD80的表达,使培养的异体角朊细胞兼具外来抗原和抗原递呈细胞的功能,刺激受体淋巴细胞增殖,参与排斥反应。

关键词：共刺激分子 T细胞激活排斥反应角朊细胞 CD80/CD86 角朊细胞膜片细胞分离乳鼠淋巴细胞增殖培养的细胞

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乳鼠心肌膜微血管内皮细胞的体外培养

解剖学报 2008年第1期39卷 121-123页

作者：张涛滕可导田启超田丽芳穆祥中国农业大学动物医学院北京100094 四川农业大学动物科技学院雅安625014 北京农学院动物科学技术系北京102206 北京农学院兽医学(中医药)北京市重点实验室北京102206

目的改进心肌膜微血管内皮细胞的体外培养方法,为进一步研究其结构和功能提供实验数据。方法选取10-15d龄的SD大鼠,采用植块法培养原代心肌膜微血管内皮细胞,在继代培养中通过差速消化和差速贴壁方法、结合倒置显微镜下形态学的观察进... 详细信息

目的改进心肌膜微血管内皮细胞的体外培养方法,为进一步研究其结构和功能提供实验数据。方法选取10-15d龄的SD大鼠,采用植块法培养原代心肌膜微血管内皮细胞,在继代培养中通过差速消化和差速贴壁方法、结合倒置显微镜下形态学的观察进行继代培养和纯化,利用免疫细胞化学方法检测第Ⅷ因子相关抗原对培养细胞进行了鉴定。结果成功培养了大鼠心肌膜微血管内皮细胞,细胞呈多边形或鹅卵石状;免疫细胞化学染色第Ⅷ因子相关抗原显阳性。结论改良了心肌膜微血管内皮细胞的体外培养方法,获得了较高纯度的心肌膜微血管内皮细胞,可用于进一步的科学研究。

关键词：心肌膜微血管内皮细胞体外培养乳鼠

海胆黄多糖SEP抑制高糖高胰岛素诱导的大鼠乳鼠心肌细胞肥大

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中国药理学通报 2015年第6期31卷 844-847页

作者：周庆峰刘纯慧王洪新商丘师范学院生物技术药物重点实验室河南商丘476000 山东大学药学院山东济南250100 辽宁医学院药理学教研室辽宁锦州121001

目的观察海胆黄多糖SEP对高糖高胰岛素诱导的肥大心肌细胞的影响,并初步探索其作用机制。方法利用高糖高胰岛素模拟糖尿病机体微环境诱导乳鼠心肌细胞肥大模型,选择不同剂量海胆黄多糖SEP分组给药处理后,采用Lowrys法检测心肌细胞蛋白... 详细信息

目的观察海胆黄多糖SEP对高糖高胰岛素诱导的肥大心肌细胞的影响,并初步探索其作用机制。方法利用高糖高胰岛素模拟糖尿病机体微环境诱导乳鼠心肌细胞肥大模型,选择不同剂量海胆黄多糖SEP分组给药处理后,采用Lowrys法检测心肌细胞蛋白质含量;利用计算机图像分析系统检测心肌细胞表面积变化;采用RT-PCR法检测给药前后心肌细胞ANF和PPAR-αm RNA表达变化。结果与正常对照组相比,高糖高胰岛素组蛋白含量、细胞表面积、ANF和PPAR-αm RNA表达均明显增加;与高糖高胰岛素组相比,低、中、高给药组剂量依赖性降低了高糖高胰岛素诱导的肥大心肌细胞的蛋白含量、细胞表面积、以及ANF和PPAR-αm RNA表达。结论 SEP对高糖高胰岛素诱导的乳鼠心肌细胞肥大具有一定的抑制作用,PPAR-α信号通路可能参与了这一过程。

关键词：心肌细胞肥大乳鼠高糖高胰岛素多糖 SEP

枯草芽孢杆菌RZ001对乳鼠肠道发育、肠道菌群和Wnt信号通路相关基因表达的影响

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动物营养学报 2021年第1期33卷 506-518页

作者：郭聪聪李艳茹耿萌盖塞伦张滕勋齐威李中媛宋亚囝罗学刚张同存王楠天津科技大学生物工程学院教育部工业发酵微生物学重点实验室天津300457 天津市微生物代谢与发酵过程控制工程研究中心天津300457

本试验旨在研究枯草芽孢杆菌RZ001的早期定植对乳鼠早期生长、肠道发育、肠道菌群和Wnt信号通路相关基因表达的影响。选择4窝数量相同的新出生的C57BL/6小鼠乳鼠,分为2个组(对照组和试验组),每组2个重复。从出生后第2天开始,试验组乳鼠... 详细信息

本试验旨在研究枯草芽孢杆菌RZ001的早期定植对乳鼠早期生长、肠道发育、肠道菌群和Wnt信号通路相关基因表达的影响。选择4窝数量相同的新出生的C57BL/6小鼠乳鼠,分为2个组(对照组和试验组),每组2个重复。从出生后第2天开始,试验组乳鼠连续14 d灌胃10μL枯草芽孢杆菌RZ001(1×10^7 CFU/d),对照组乳鼠连续14 d灌胃10μL磷酸盐缓冲液(PBS)。结果表明:1)与对照组相比,试验组的乳鼠从出生后第2天到第8天体重显著或极显著增加(P0.05)。2)与对照组相比,试验组的小肠绒毛密度、绒毛长度和绒毛长度/隐窝深度显著或极显著增加(P乳鼠生长,改善肠道形态,促进肠道屏障功能成熟,从而促进早期肠道发育。早期应用枯草芽孢杆菌RZ001还能够激活Wnt信号通路,降低肠道致病菌产气荚膜梭菌的相对丰度,增加肠道益生菌双歧杆菌属的相对丰度。

关键词：枯草芽孢杆菌乳鼠肠道发育 Wnt信号通路肠道菌群

应用琼脂糖微球抗体筛选原代乳鼠肺微血管内皮细胞新方法的建立

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解放军医学杂志 2018年第5期43卷 424-428页

作者：刘姗刘艳霞闫承慧田孝祥刘丹刘美丽张坡韩雅玲锦州医科大学研究生学院辽宁锦州121000 沈阳军区总医院心内科/全军心血管病研究所实验室/全军心血管急重症救治重点实验室/辽宁省心血管病转化医学研究重点文验室沈阳110016

目的建立一种简便、高效的原代乳鼠肺微血管内皮细胞(PMVECs)培养新方法。方法选取小于1周龄的C57BL/6乳鼠,采用琼脂糖微球抗体筛选法分离、培养原代PMVECs。倒置显微镜观察细胞形态,采用CD31、血管性血友病因子(vWF)相关抗原免疫荧光... 详细信息

目的建立一种简便、高效的原代乳鼠肺微血管内皮细胞(PMVECs)培养新方法。方法选取小于1周龄的C57BL/6乳鼠,采用琼脂糖微球抗体筛选法分离、培养原代PMVECs。倒置显微镜观察细胞形态,采用CD31、血管性血友病因子(vWF)相关抗原免疫荧光染色以及基质胶体外成血管实验鉴定内皮细胞,采用CCK-8法绘制细胞生长曲线。结果倒置显微镜下观察培养的原代PMVECs呈短梭形、类圆形,单层融合呈铺路石样排列。CD31相关抗原、vWF免疫荧光染色阳性,阳性率分别为91.35%±3.06%、92.99%±2.67%,证实培养的细胞为PMVECs。PMVECs接种在基质胶上8h后,有血管腔结构形成。CCK-8法绘制的生长曲线显示,琼脂糖微球抗体筛选法提取PMVECs培养2~5d后细胞处于对数生长期。结论琼脂糖微球抗体筛选法分离、培养乳鼠原代PMVECs简便、高效,是一种值得推广的分离培养乳鼠PMVECs的新方法。

关键词：乳鼠肺微血管内皮细胞原代培养

三种不同乳鼠原代心肌细胞消化分离方法的对比研究

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四川大学学报（医学版） 2017年第2期48卷 286-289页

作者：段鹏王金鑫刘晓静卫世强段玉慧朱庆磊解放军总医院心内科北京100853 解放军371中心医院心内科新乡453000

目的对比研究三种乳鼠原代心肌细胞消化分离方法,比较不同方法分离获取的心肌细胞在数量、纯度、活力上的差异,为相关实验研究提供选择。方法按照不同的消化方法进行分组,A组为0.08%胰蛋白酶单纯消化组;B组为0.08%胰蛋白酶+0.08%Ⅱ型胶... 详细信息

目的对比研究三种乳鼠原代心肌细胞消化分离方法,比较不同方法分离获取的心肌细胞在数量、纯度、活力上的差异,为相关实验研究提供选择。方法按照不同的消化方法进行分组,A组为0.08%胰蛋白酶单纯消化组;B组为0.08%胰蛋白酶+0.08%Ⅱ型胶原酶混合消化组;C组为0.08%胰蛋白酶和0.08%Ⅱ型胶原酶分离消化组。记录差速贴壁后的细胞数和活细胞率,对贴壁24h后的心肌细胞进行免疫荧光染色,计算心肌细胞纯度,通过激光共聚焦显微镜对JC-1染色的心肌细胞进行线粒体膜电位检测,比较红绿荧光密度的差异,通过能量代谢间接反映细胞活力。结果三种方法分离获得的心肌细胞数差异无统计学意义(P>0.05),而活细胞率C组高于A组(P0.05);线粒体膜电位,A组荧光比值为0.928±0.078,B组荧光比值为0.943±0.099,C组荧光比值为1.160±0.089,三组之间差异有统计学意义(P乳鼠心肌细胞分离方法的选择。

关键词：乳鼠胰蛋白酶 Ⅱ型胶原酶激光共聚焦显微镜线粒体膜电位

生后不同时间乳鼠心肌细胞的形态结构和功能特征

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解剖学报 2009年第4期40卷 567-572页

作者：谭玉珍王海杰复旦大学上海医学院人体解剖学与组织胚胎学系

目的观察生后不同时间乳鼠心肌细胞的形态结构和功能特征,建立理想的分离和纯化乳鼠心肌细胞技术。方法采用胰蛋白酶消化和机械分离,结合两次差速贴壁法以及使用溴脱氧尿嘧啶核苷（BrdU）,从生后1~7d乳鼠心脏分离和纯化心肌细胞。观察... 详细信息

目的观察生后不同时间乳鼠心肌细胞的形态结构和功能特征,建立理想的分离和纯化乳鼠心肌细胞技术。方法采用胰蛋白酶消化和机械分离,结合两次差速贴壁法以及使用溴脱氧尿嘧啶核苷（BrdU）,从生后1~7d乳鼠心脏分离和纯化心肌细胞。观察细胞的形态和自发性搏动,并用心肌特异性肌钙蛋白丁（cTnT）免疫细胞化学染色进行鉴定。利用原位透射电镜术观察细胞超微结构,并观察其对肾上腺素和异丙肾上腺素的反应。结果从乳鼠心脏分离的细胞95%以上为心肌细胞,存活率为95%以上。乳鼠心肌细胞包括短柱状或杆状细胞和不规则形细胞。生后1~3d鼠大部分杆状细胞呈现幼稚心肌细胞的超微结构特征。6~7d鼠的杆状细胞具有类似于成熟心肌细胞的超微结构特征,cTnT呈高表达,横纹明显。不规则形细胞含有少量肌丝束,排列不规则。少数体积较小的细胞呈现未分化细胞的超微结构特征。培养72h后80%以上的细胞出现自发性搏动。肾上腺素和异丙肾上腺素刺激后,搏动细胞数目增多,搏动增强。生后6~7d鼠杆状细胞的药物反应较强。结论两类心肌细胞的超微结构特征、自发性搏动和对肾上腺素和异丙肾上腺素的反应不同。生后6~7d鼠心肌细胞较适合于成熟心肌细胞的体外实验研究。本实验建立...

关键词：心肌细胞超微结构自发性搏动细胞培养免疫细胞化学染色原位透射电镜术乳鼠

肾综合征出血热患者软腭粘膜对乳鼠致病性的研究

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中华实验和临床病毒学杂志 1999年第1期13卷 80-82页

作者：张琳张璐王素琴广州第一军医大学中心实验室郑州空军460医院内二科

目的探讨肾综合征出血热（ＨＦＲＳ）的发病机理。方法２～３天的近交系Ｂａｌｂ／Ｃ乳鼠，脑内接种早期ＨＦＲＳ重症患者软腭粘膜出血点组织悬液，用套式聚合酶链式反应检测乳鼠脑、肺及肾组织中的ＨＦＲＳ病毒ＲＮＡ。结果接种乳鼠发... 详细信息

目的探讨肾综合征出血热（ＨＦＲＳ）的发病机理。方法２～３天的近交系Ｂａｌｂ／Ｃ乳鼠，脑内接种早期ＨＦＲＳ重症患者软腭粘膜出血点组织悬液，用套式聚合酶链式反应检测乳鼠脑、肺及肾组织中的ＨＦＲＳ病毒ＲＮＡ。结果接种乳鼠发病死亡，剖检显示，发病乳鼠各器官呈现明显微血管系统和实质组织病变，乳鼠脑、肺及肾组织中ＨＦＲＳ病毒ＲＮＡ阳性。结论早期ＨＦＲＳ患者软腭粘膜出血点组织中含有ＨＦＲＳ病毒。

关键词：乳鼠肾综合征出血热软腭粘膜出血点 PCR

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SARS病毒对乳鼠和鸡胚致病性的初步观察

中华微生物学和免疫学杂志 2004年第2期24卷 85-87页

作者：于曼司炳银刘洪邓永强张雨范宝昌常国辉甘永华王翠娥李豫川秦鄂德祝庆余军事医学科学院微生物流行病研究所北京100071

目的　建立SARS病毒的动物模型。方法　选用 1～ 5日龄的BALB c乳鼠和昆明种乳鼠 ,通过脑内、腹腔和鼻腔 3种途径 ,分别接种自广州和北京地区非典型肺炎病人中分离的SARS病毒BJ0 1和GZ0 1株 ,观察该病毒对不同种系小鼠的致病性。同时 ,... 详细信息

目的　建立SARS病毒的动物模型。方法　选用 1～ 5日龄的BALB c乳鼠和昆明种乳鼠 ,通过脑内、腹腔和鼻腔 3种途径 ,分别接种自广州和北京地区非典型肺炎病人中分离的SARS病毒BJ0 1和GZ0 1株 ,观察该病毒对不同种系小鼠的致病性。同时 ,选用 8～ 10日龄鸡胚经尿囊腔接种这 2株病毒 ,观察对鸡胚的致病性。结果与结论　采用SARS病毒BJ0 1和GZ0 1株经脑内接种 ,均可使BALB c乳鼠和昆明种乳鼠发病或死亡 ,但这种致病性不规律 ;而从腹腔和鼻腔途径接种病毒均不能使乳鼠发病。鸡胚对该病毒不敏感。

关键词： SARS病毒乳鼠鸡胚致病性动物模型肺组织