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生后不同时间乳鼠心肌细胞的形态结构和功能特征

Morphological,strutural and functional characteristics of cardiomyocytes from neonatal rats

作     者:谭玉珍 王海杰 TAN Yu-zhen;WANG Hai-jie

作者机构:复旦大学上海医学院人体解剖学与组织胚胎学系 

出 版 物:《解剖学报》 (Acta Anatomica Sinica)

年 卷 期:2009年第40卷第4期

页      面:567-572页

核心收录:

学科分类:1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 08[工学] 100101[医学-人体解剖与组织胚胎学] 09[农学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 10[医学] 

基  金:国家自然科学基金资助项目(30470883) 高等学校博士点专项科研基金资助项目(200802460044) 

主  题:心肌细胞 超微结构 自发性搏动 细胞培养 免疫细胞化学染色 原位透射电镜术 乳鼠 

摘      要:目的观察生后不同时间乳鼠心肌细胞的形态结构和功能特征,建立理想的分离和纯化乳鼠心肌细胞技术。方法采用胰蛋白酶消化和机械分离,结合两次差速贴壁法以及使用溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU),从生后1~7d乳鼠心脏分离和纯化心肌细胞。观察细胞的形态和自发性搏动,并用心肌特异性肌钙蛋白丁(cTnT)免疫细胞化学染色进行鉴定。利用原位透射电镜术观察细胞超微结构,并观察其对肾上腺素和异丙肾上腺素的反应。结果从乳鼠心脏分离的细胞95%以上为心肌细胞,存活率为95%以上。乳鼠心肌细胞包括短柱状或杆状细胞和不规则形细胞。生后1~3d鼠大部分杆状细胞呈现幼稚心肌细胞的超微结构特征。6~7d鼠的杆状细胞具有类似于成熟心肌细胞的超微结构特征,cTnT呈高表达,横纹明显。不规则形细胞含有少量肌丝束,排列不规则。少数体积较小的细胞呈现未分化细胞的超微结构特征。培养72h后80%以上的细胞出现自发性搏动。肾上腺素和异丙肾上腺素刺激后,搏动细胞数目增多,搏动增强。生后6~7d鼠杆状细胞的药物反应较强。结论两类心肌细胞的超微结构特征、自发性搏动和对肾上腺素和异丙肾上腺素的反应不同。生后6~7d鼠心肌细胞较适合于成熟心肌细胞的体外实验研究。本实验建立...

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