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乌骨藤提取物对四氯化碳致大鼠慢性肝损伤的保护作用

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中国新药杂志 2017年第14期26卷 1643-1648页

作者：苏远张小磊章礼久安徽医科大学第二附属医院消化内科合肥230601

目的:探讨乌骨藤提取物对四氯化碳(CCl_4)致慢性肝损伤模型大鼠的保护作用。方法:50只SD大鼠随机分为空白对照组,模型组,乌骨藤低、中、高剂量(10,20,40 mg·kg^(-1))组。以CCl_4皮下注射每周2次制备慢性肝损伤模型。同时各给药组每天灌... 详细信息

目的:探讨乌骨藤提取物对四氯化碳(CCl_4)致慢性肝损伤模型大鼠的保护作用。方法:50只SD大鼠随机分为空白对照组,模型组,乌骨藤低、中、高剂量(10,20,40 mg·kg^(-1))组。以CCl_4皮下注射每周2次制备慢性肝损伤模型。同时各给药组每天灌胃(ig)给药1次,连续6周。计算大鼠的肝脏和脾脏指数;检测血清ALT,AST和肝组织中SOD,MDA,GSH-Px和Hyp水平;HE染色法检测肝组织病理变化;ELISA法检测大鼠血清IL-2水平;流式细胞术检测大鼠外周血T淋巴细胞亚群(CD3^+,CD4^+,CD8^+)的变化情况。结果:给予不同剂量乌骨藤治疗慢性肝损伤模型大鼠后,大鼠肝脾指数、血清ALT,AST,MDA和Hyp水平均不同程度降低,SOD,GSH-Px,IL-2水平升高,升高或降低的差异均以乌骨藤高剂量组尤为显著(P乌骨藤显著改善大鼠肝组织病理损伤;大鼠外周血CD3^+和CD4^+亚群细胞比例下降,CD8^+细胞比例上升,CD4^+/CD8^+比值降低。结论:乌骨藤提取物对CCl4诱导的大鼠慢性肝损伤有保护作用,作用可能与其平衡T淋巴细胞亚群,调节免疫功能有关。

关键词：乌骨藤提取物四氯化碳慢性肝损伤 T淋巴细胞亚群白介素2

乌骨藤提取物对MKN-45大鼠人原位胃癌模型肿瘤生长、转移及环氧合酶-2表达的影响

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中国老年学杂志 2015年第11期35卷 2939-2941,2941页

作者：陈轶陈益耀林诚海南省人民医院消化内科海南海口570311

目的探讨乌骨藤提取物对MKN-45大鼠人原位胃癌模型肿瘤生长、转移及环氧合酶(COX)-2表达的影响。方法健康雄性裸大鼠,共24只,随机分为:乌骨藤组、西药组和对照组,收集体外培养生长处于对数期的MKN-45胃癌细胞,注射于裸大鼠近腋部皮下,... 详细信息

目的探讨乌骨藤提取物对MKN-45大鼠人原位胃癌模型肿瘤生长、转移及环氧合酶(COX)-2表达的影响。方法健康雄性裸大鼠,共24只,随机分为:乌骨藤组、西药组和对照组,收集体外培养生长处于对数期的MKN-45胃癌细胞,注射于裸大鼠近腋部皮下,当皮下移植瘤长至直径约1 cm左右时,取裸大鼠癌瘤组织,植入大鼠胃大弯的血管丰富处建立模型,于造模72 h后,对照组给予生理盐水灌胃,西药组和乌骨藤组分别给予塞来昔布和乌骨藤水提物灌胃,每次0.5 ml/10 g,1次/d。连续30 d。分别在给药第15天和第30天各处死半数裸鼠,检测癌瘤的生长,肝脏及肠系膜转移情况,Western印迹法检测胃黏膜组织COX-2蛋白表达。结果各组癌瘤重量和体积均随着时间的增加而不同程度的增长,与对照组相比,西药组和乌骨藤组的癌瘤重量和体积增长均显著减慢(P乌骨藤组对于癌瘤增长的控制作用更为显著(P乌骨藤组的抑瘤率更高(P乌骨藤组癌瘤的转移数减少的更为明显(P乌骨藤组的COX-2蛋白水平下降更为明显(P乌骨藤提取物抑制MKN-45大鼠人原位胃癌模型肿瘤生长、转移及COX-2表达具有明显的改善作用。

关键词：乌骨藤提取物胃癌环氧合酶-2

乌骨藤提取物对四氯化碳诱导的大鼠肝纤维化的保护作用

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乌骨藤提取物对四氯化碳诱导的大鼠肝纤维化的保护作用

作者：张小磊安徽医科大学

学位级别：硕士

目的探讨乌骨藤提取物(the Extract of Marsdenia Tenacissima,EMT)对四氯化碳诱导的大鼠肝纤维化的保护作用以及可能的作用机制。方法雄性SD大鼠60只,适应性饲养一星期后随机分为正常对照组、EMT 10mg/kg、EMT 20mg/kg、EMT40mg/kg 3... 详细信息

目的探讨乌骨藤提取物(the Extract of Marsdenia Tenacissima,EMT)对四氯化碳诱导的大鼠肝纤维化的保护作用以及可能的作用机制。方法雄性SD大鼠60只,适应性饲养一星期后随机分为正常对照组、EMT 10mg/kg、EMT 20mg/kg、EMT40mg/kg 3个剂量给药组、秋水仙碱阳性药(0.1 mg/kg)对照组和模型组,共六组。除正常组外,剩余五组分别通过对大鼠背部皮下注射四氯化碳制备肝纤维化模型,剂量为0.3 ml/100 g,每周注射2次,连续12周。造模4周起各个给药组分别给予相应剂量的药物灌胃,正常组和模型组给予等剂量的生理盐水灌胃,直至造模结束。12周后处死大鼠,称重,制备血清及肝脏组织。测定肝脾指数;测定血清中HA、LN、CⅣ含量;制备肝脏匀浆,测定SOD、GSH-Px活性及HyP、MDA含量;HE、Masson染色并在光镜下观察肝组织病理改变及胶原沉积情况;免疫组化法检测肝组织中α-SMA蛋白表达;western blot法检测肝组织中TGF-β1、smad7水平。结果与模型组比较,EMT明显抑制肝纤维化大鼠的肝脾指数的上升,降低大鼠血清中HA、LN、CⅣ水平,减少肝组织Hyp含量;病理学表现示EMT各剂量组大鼠肝组织病变较模型组明显改善,肝纤维化程度减轻;EMT能提高SOD及GSH活性,降低MDA含量,减少肝组织中α-SMA、TGF-β1的表达,升高smad7的表达。结论乌骨藤提取物对四氯化碳诱导的大鼠肝纤维化有显著的保护作用,其机制可能与抗氧化应激及抑制TGF-β1/Smad信号通路相关。

关键词：乌骨藤提取物肝纤维化抗氧化 TGF-β1/Smad 信号通路

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乌骨藤提取物抑制新生血管生成的机制研究

乌骨藤提取物抑制新生血管生成的机制研究

作者：谢一唯浙江大学

学位级别：硕士

目的乌骨藤提取物能抑制肿瘤血管生成,但其机制不明确。本研究通过观察乌骨藤提取物（Marsdeniatenacissimaextract,MTE）对人脐静脉内皮细胞（Human Umbilical Vein Endothelial Cells,HUVEC）增殖、迁移、凋亡及新生血管生成的影响... 详细信息

目的乌骨藤提取物能抑制肿瘤血管生成,但其机制不明确。本研究通过观察乌骨藤提取物（Marsdeniatenacissimaextract,MTE）对人脐静脉内皮细胞（Human Umbilical Vein Endothelial Cells,HUVEC）增殖、迁移、凋亡及新生血管生成的影响探讨其作用机制。方法对HUVEC进行培养,采用MTS法检测MTE对细胞增殖的作用;采用划痕实验观察细胞迁移的变化;采用Hoechst/PI荧光染色法及流式细胞术检测细胞的凋亡及周期;采用ATP、葡萄糖检测试剂盒观察细胞代谢产物变化;采用qRT-PCR检测HUVEC相关基因的表达及采用鸡胚（Chick Chorioallantoic Membrane,CAM）实验观察新生血管的生成。结果 MTE对HUVEC增殖的抑制作用显著,且随浓度的升高其对细胞的抑制率逐步增强（**P＜0.01）,抑制作用呈剂量依赖效应。体外细胞划痕实验显示,MTE处理组的迁移能力明显低于对照组,进一步验证发现MTE能够抑制HUVEC的迁移运动。Hoechst/PI荧光染色法显示:MTE浓度达到160 μg/mL时,细胞核被Hoechst染成亮蓝色,PI复染呈特征性的细胞凋亡形态;流式细胞仪检测细胞凋亡发现,MTE能促进HUVEC的早期凋亡,将细胞周期阻滞在S期。不同浓度MTE处理24h后,观察ATP代谢及葡萄糖消耗情况,证实MTE处理后ATP/ADP代谢及葡萄糖消耗水平呈下降趋势,具有显著性差异（**P＜0.05）,表明MTE能够通过抑制HUVEC代谢导致细胞增殖减少。半定量RT-PCR检测MTE作用于HUVEC后相关基因的表达,显示MTE能上调Caspase-3,PICK1和ICA69,LC3-Ⅱ,Beclin-1 和 PTEN 基因的 mRNA 表达水平,下调 Bcl-2,VEGFR,P2Y6R,CCL-2,AKT和mTOR基因的mRNA表达,表明MTE能够影响HUVEC细胞中数个凋亡和迁移相关基因的表达。通过qRT-PCR相对定量检测mRNA显示:MTE处理内皮细胞 HUVEC 后,Caspase-3 mRNA 表达升高,Bcl-2,VEGFR,P2Y6R,CCL-2的mRNA表达减低。体内CAM实验显示,16 μg MTE与PBS组比较,载体内部新生血管数目几乎已经不可见,抑制作用明显（**P＜0.01）,表明MTE能有效抑制新生血管的生成。结论乌骨藤提取物在体外具有一定的抑制脐静脉内皮细胞增殖和代谢、促进其凋亡的作用,并在鸡胚实验中明显抑制新生血管生成。

关键词：乌骨藤提取物人皮静脉内皮细胞增殖凋亡血管生成

乌骨藤提取物抑制大鼠肝纤维化的分子机制研究

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乌骨藤提取物抑制大鼠肝纤维化的分子机制研究

作者：张国庆安徽医科大学

学位级别：硕士

目的研究从中药乌骨藤中提取总皂苷(SMT)对四氯化碳(CCl)诱导的肝纤维化模型大鼠的影响及作用机制。方法60只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、SMT低剂量组(10 mg.kg)和SMT高剂量组(40 mg.kg),每组15只。通过皮下注射CCl制备大鼠肝纤... 详细信息

目的研究从中药乌骨藤中提取总皂苷(SMT)对四氯化碳(CCl)诱导的肝纤维化模型大鼠的影响及作用机制。方法60只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、SMT低剂量组(10 mg.kg)和SMT高剂量组(40 mg.kg),每组15只。通过皮下注射CCl制备大鼠肝纤维化模型,按0.3 mL·100 g,每周2次,共12周。造模4周后给药组开始灌胃给予相应剂量的药物(SMT),同时正常对照组和模型组给予等量生理盐水。12周后处死大鼠,测定血清中ALT、AST、SOD、MDA、GSH-px、HA、LN和CⅣ含量;HE染色观察实验大鼠肝组织病理,Masson染色观察肝脏胶原沉积变化;Western blot法检测肝组织α-SMA、p-smad2、p-smad3、p-p38MAPK和p-PI3K的蛋白表达水平。结果病理结果显示,正常组大鼠肝细胞排列整齐、呈放射状排布,可见完整的肝小叶结构和中央静脉,未见明显的炎性和坏死特征以及纤维组织增生;模型组大鼠肝脏可见明显的细胞变性、坏死和脂肪变性特征,Masson染色可见明显的胶原沉积和肝细胞疏松;SMT各剂量组的大鼠肝组织病理较模型组明显好转,肝细胞坏死及炎细胞浸润程度明显减轻,汇管区胶原沉积减少,尤其SMT高剂量组。血清学指标检测结果显示,与正常组比较,模型组大鼠的血清ALT、AST、MDA、HA、LN和CⅣ水平均明显升高(P<0.01),而SOD、GSH-Px水平显著降低(P<0.01);与模型组比较,SMT低剂量组和SMT高剂量组的ALT、AST、MDA、HA、LN和CⅣ水平均显著降低,SOD、GSH-Px水平明显升高,且存在量效关系,差异具有统计学意义(P<0.01)。Western blot实验结果显示,与正常组比较,模型组大鼠肝组织的α-SMA、p-Smad2、p-Smad3、p-p38MAPK、p-PI3K的蛋白表达水平均显著升高(P<0.01);与模型组比较,SMT低剂量组和SMT高剂量组的α-SMA、p-Smad2、p-Smad3、p-p38MAPK、p-PI3K蛋白表达水平均显著降低,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论SMT对CCl诱导的大鼠肝纤维化有明显的抑制作用,可减轻模型大鼠肝脏病理损伤程度、降低实验大鼠的血清ALT、AST、HA、LN和CⅣ水平和肝组织α-SMA蛋白的表达水平,机制可能与其调节肝脏TGF-β/smads、PI3K/Akt和MAPK信号转导通路有关。本研究可为肝纤维化的预防和治疗提供新思路和一定的理论、实验基础。

关键词：乌骨藤提取物肝纤维化 TGF-β/Smads PI3K/Akt MAPK信号转导通路

乌骨藤提取物对人结肠腺癌细胞增殖的实验研究

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中国临床药理学与治疗学 2007年第12期12卷 1372-1375页

作者：朱萱萱赵陆华严士海张忠华邵南齐江苏省中医院药理室中国药科大学分析中心

目的:研究乌骨藤提取物对体外培养的人肠癌细胞(Lovo)增殖的影响。方法:用两种方法(A、B)制备乌骨藤提取物,分别采用不同浓度作用Lovo细胞,通过细胞形态学和MTT法检测乌骨藤提取物对Lovo细胞增殖的影响。结果:乌骨藤提取物A对细胞的最... 详细信息

目的:研究乌骨藤提取物对体外培养的人肠癌细胞(Lovo)增殖的影响。方法:用两种方法(A、B)制备乌骨藤提取物,分别采用不同浓度作用Lovo细胞,通过细胞形态学和MTT法检测乌骨藤提取物对Lovo细胞增殖的影响。结果:乌骨藤提取物A对细胞的最大无毒浓度约为0.648 mg/mL;药物浓度在0.389、0.648、1.08、1.8、3 mg/mL时的抑制率分别为6.58%、8.24%、13.02%、59.69%、66.23%,用回归法求出乌骨藤提取物A对Lovo细胞增殖的半数抑制浓度(IC_(50))为1.625 mg/mL。乌骨藤提取物B对细胞的最大无毒浓度约为0.648 mg/mL,药物浓度在0.389、0.648、1.08、1.8、3 mg/mL时的抑制率分别为14.49%、15.48%、29.69%、63.26%、64.05%,用回归法求出乌骨藤提取物B对Lovo细胞增殖的半数,IC_(50)为1.84 mg/mL。结论:乌骨藤提取物对体外培养的Lovo细胞的增殖有明显抑制作用。

关键词：乌骨藤提取物人结肠腺癌细胞 MTT法细胞形态学

乌骨藤提取物对人胃癌细胞(MKN_(28))细胞增殖的研究

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实用中医内科杂志 2007年第6期21卷 36-39页

作者：朱萱萱赵路华严士海张忠华邵南齐江苏省中医院药理室江苏南京210029 中国药科大学江苏南京210000

乌骨藤为番荔枝科植物白叶瓜馥木的根.据《中药大辞典》记载:乌骨藤性辛,味温,入肝经,现代药理提示乌骨藤含有多糖、生物碱和皂苷,临床上用于治疗胃癌获良好疗效,本实验为进一步证实乌骨藤提取物的抗胃癌作用,进行以下体外实验.

关键词：人胃癌细胞乌骨藤提取物 MTT法细胞形态学

乌骨藤提取物抑制裸小鼠胃癌模型肿瘤生长的实验研究

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实验动物科学 2012年第5期29卷 13-15页

作者：周艳艳李玉云李良范其坤丁琦禇芳江西省药物研究所南昌330029

目的观察乌骨藤提取物对人胃癌细胞MKN45裸鼠模型肿瘤的抑制作用。方法采用人胃癌细胞MKN45实体瘤接种方法建立裸鼠胃癌模型,用乌骨藤水提取物和乌骨藤水提醇沉物灌胃0.5 mL/只,每日1次,连续30天。每周连续测量体质量和肿瘤大小2次,最... 详细信息

目的观察乌骨藤提取物对人胃癌细胞MKN45裸鼠模型肿瘤的抑制作用。方法采用人胃癌细胞MKN45实体瘤接种方法建立裸鼠胃癌模型,用乌骨藤水提取物和乌骨藤水提醇沉物灌胃0.5 mL/只,每日1次,连续30天。每周连续测量体质量和肿瘤大小2次,最后一次给药后3周处死小鼠,解剖称其肿瘤质量,计算抑瘤率,观察乌骨藤水提取物和乌骨藤水提醇沉物对荷瘤的抑制作用。结果乌骨藤水提取物和乌骨藤水提醇沉物对裸鼠荷瘤均有明显的抑制作用。结论乌骨藤水提取物和乌骨藤水提醇沉物有抑制人胃癌细胞MKN45肿瘤生长的功效。

关键词：乌骨藤提取物胃癌模型抗肿瘤作用

乌骨藤提取物抑制人胃癌卵巢癌裸鼠荷瘤效果的实验观察

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实验动物与比较医学 2015年第1期35卷 23-26页

作者：褚芳李玉云费健黎砚书江西省药物研究所南昌330029

目的观察乌骨藤提取物对人胃癌、卵巢癌裸鼠模型肿瘤的抑制作用。方法采用人胃癌细胞MKN45接种裸鼠待长出实体瘤，用实体瘤移植裸鼠皮下建立人胃癌裸鼠模型；人卵巢癌移植裸鼠建立实体瘤模型，再通过裸鼠皮下移植实体瘤，建立人卵巢癌... 详细信息

目的观察乌骨藤提取物对人胃癌、卵巢癌裸鼠模型肿瘤的抑制作用。方法采用人胃癌细胞MKN45接种裸鼠待长出实体瘤，用实体瘤移植裸鼠皮下建立人胃癌裸鼠模型；人卵巢癌移植裸鼠建立实体瘤模型，再通过裸鼠皮下移植实体瘤，建立人卵巢癌裸鼠模型；之后用乌骨藤提取物分别给实验组灌胃0．5mL／只，对照组给饮用水，每日1次，连续30d。每周连续测量体质量和肿瘤大小2次，30d给药后处死小鼠，解剖称肿瘤重量，计算抑瘤率，评价乌骨藤提取物对裸鼠荷瘤的抑制作用。结果乌骨藤提取物对胃癌裸鼠荷瘤和卵巢癌裸鼠荷瘤均有抑制作用，其中乌骨藤组对人胃癌裸鼠荷瘤有明显的抑制作用。结论乌骨藤提取物对人胃癌、卵巢癌裸鼠荷瘤生长有一定抑制作用。

关键词：乌骨藤提取物胃癌模型卵巢癌模型抑制肿瘤作用