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中心体α、γ-微管蛋白在乳腺癌前病变及乳腺癌中的表达及其意义初探

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中华医学杂志 2006年第1期86卷 56-60页

作者：牛昀王颖于泳丁秀敏吕淑华肖绪祺天津医科大学附属肿瘤医院国家教育部乳腺癌防治重点实验室 300060 天津南开大学医学院

目的探讨中心体α-微管蛋白和γ-微管蛋白在人乳腺癌前病变和乳腺癌中的表达及其在乳腺癌发生发展过程中的作用。方法采用免疫组织化学S-P法检测乳腺导管上皮不典型增生、乳腺导管内癌和浸润性导管癌各40例中中心体α-微管蛋白和γ-微... 详细信息

目的探讨中心体α-微管蛋白和γ-微管蛋白在人乳腺癌前病变和乳腺癌中的表达及其在乳腺癌发生发展过程中的作用。方法采用免疫组织化学S-P法检测乳腺导管上皮不典型增生、乳腺导管内癌和浸润性导管癌各40例中中心体α-微管蛋白和γ-微管蛋白表达水平,30例正常乳腺组织作为对照组,并用W estern印迹进行验证。所得数据经统计学分析并结合随访情况进行评价。结果不同样本组α-微管蛋白、γ-微管蛋白表达水平不同(P=0.000),随正常上皮组织到出现不典型增生至进展为原位癌和浸润性癌的发展变化,α-微管蛋白、γ-微管蛋白表达量呈增高趋势,以浸润性癌为最高(40例中分别有14例、11例表达为+++),各组间差异均有统计学意义(P=0.001)。比较同例和同组α、γ-微管蛋白的表达程度差异无统计学意义(P>0.05)。癌前病变、导管内癌、浸润性导管癌组α、γ-微管蛋白的表达水平与预后具有相关性。结论中心体异常为乳腺癌细胞恶性表型的明显特征之一,并可能为乳腺癌形成过程中的早期事件。α、γ-微管蛋白的表达情况可为乳腺癌发生机制探讨、高危病例筛选及估测预后提供一种新的途径。

关键词：乳腺肿瘤微管蛋白中心体乳腺癌前病变

中心体异常扩增在宫颈病变中的表达及其与高危人乳头瘤病毒感染的相关性研究

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中心体异常扩增在宫颈病变中的表达及其与高危人乳头瘤病毒感染的...

作者：何海暨南大学

学位级别：硕士

目的了解中心体异常扩增在宫颈病变中的表达状态及其与高危人乳头瘤病毒感染的关系,探寻人乳头瘤病毒感染导致宫颈癌发生的可能机制。方法选择2008年11月～2010年8月在暨南大学附属第一医院妇产科收治并经病理确诊为宫颈上皮内瘤变... 详细信息

目的了解中心体异常扩增在宫颈病变中的表达状态及其与高危人乳头瘤病毒感染的关系,探寻人乳头瘤病毒感染导致宫颈癌发生的可能机制。方法选择2008年11月～2010年8月在暨南大学附属第一医院妇产科收治并经病理确诊为宫颈上皮内瘤变及宫颈鳞癌的患者89例,包括：46例宫颈上皮内瘤变(CINⅠ11例,CINⅡ12例,CINⅢ23例),43例宫颈鳞癌(Ⅰ期17例,Ⅱ期21例,Ⅲ期5例;高、中、低分化鳞癌分别为7例、11例、25例)。同时选取因子宫良性病变(子宫肌瘤、子宫腺肌症)而行子宫全切后经病理证实为正常宫颈组织者20例作为对照组。全部研究对象在未进行任何治疗前取宫颈脱落细胞并应用导流杂交方法检测其人乳头瘤病毒基因型。另通过宫颈活检、宫颈锥切及全子宫切除获取宫颈组织标本并制成石蜡标本,切片,采用间接免疫荧光染色技术,用γ-微管蛋白免疫荧光标记细胞中心体,通过荧光显微镜观察宫颈组织细胞内中心体的数量及形态。结果应用SPSS13.0软件进行分析。结果 1.在宫颈病变中检测到最常见的人乳头瘤病毒亚型为16型(55.06%),其次为58型(13.48%)、33型(12.36%)。高危型人乳头瘤病毒感染在正常对照组、CIN组及宫颈鳞癌组中的阳性率分别为5%、78.26%和93.02%,呈逐渐增高的趋势(χ2=53.227, P=0.000)。在CINⅠ、CINⅡ及CINⅢ组中的阳性率分别为45.45%、83.33%、91.30%,呈逐渐升高趋势(χ2=8.217, P=0.009)。高危型人乳头瘤病毒感染与宫颈鳞癌临床分期及组织分化程度无相关性(P>0.05)。 2.在正常宫颈组织细胞内可见大小及数目正常的中心体,而在CIN及宫颈鳞癌组织中则发现不同程度的异常中心体,表现为中心体形态的异常及数目的增多。 3.在CINⅠ、CINⅡ及CINIII组中心体异常率分别为(0.25±0.20)%、(1.34±0.73)%、(2.70±1.94)%,三组间差异有统计学意义(F=11.446,P=0.000)。宫颈鳞癌Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期的组织细胞中心体异常率分别为(3.26±0.96)%、(5.13±2.31)%、(5.71±2.11)%,三组间差异有统计学意义(F=5.973,P=0.005)。高、中、低分化鳞癌组织细胞中心体异常率分别为(3.86±1.21)%、(4.10±1.85)%、(5.66±2.63)%,三组间差异无统计学意义(F=2.692,P=0.080)。 4.CIN组与宫颈鳞癌组细胞中心体异常细胞率分别为(1.76±1.74)%、(4.46±2.08)%,差异有统计学意义(t=-6.664,P=0.000)。中心体异常细胞率随CIN级别和宫颈鳞癌临床分期的增加而增加,两者呈正相关(r=0.883,P=0.000)。 5.在CIN组中,HR-HPV阳性者的中心体异常细胞率高于HPV阴性者,差异有统计学意义(t=-4.476,P=-0.000);在宫颈鳞癌组中,HR-HPV阳性者的中心体异常细胞率高于HPV阴性者,差异有统计学意义(t=-7.083,P=0.000)。根据双变量相关分析,在宫颈病变中,中心体异常细胞率和HR-HPV感染呈正相关,Spearman等级相关系数r=0.452,P=0.000。结论 1.高危型人乳头瘤病毒感染与CIN及宫颈鳞癌的发生发展密切相关。HPV-DNA分型检测对宫颈鳞癌高危人群的筛查及疫苗的研制提供重要的理论依据。 2.中心体异常扩增是宫颈鳞癌细胞恶性表型的明显特征之一,有望发展成为宫颈鳞癌辅助诊断的标志物。 3.中心体异常扩增是宫颈鳞癌发生发展过程中的早期事件,可能与宫颈鳞癌发展进程有关。 4.在宫颈鳞癌发生发展过程中,中心体异常扩增和高危型人乳头瘤病毒感染密切相关。高危型人乳头瘤病毒感染可能通过引起中心体的异常扩增诱发宫颈癌变。

关键词：中心体高危型人乳头瘤病毒子宫颈鳞状细胞癌宫颈上皮内瘤变

口腔鳞状细胞癌细胞周期蛋白E表达与中心体扩增相关性

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中华病理学杂志 2007年第6期36卷 375-378页

作者：蔡扬柳咏发李世灵潘玉霞朱炎于燕妮贵阳医学院附属医院口腔科 550004 武警贵州总队医院口腔科贵阳医学院附属医院病理科 550004 贵阳医学院附属医院卫生统计教研室 550004

目的了解口腔鳞状细胞癌细胞周期蛋白E(cyclin E)表达与中心体扩增相关性,探讨其中心体扩增的可能分子机制。方法正常口腔黏膜组织12例,不同分化程度的口腔鳞状细胞癌46例石蜡包埋组织,采用间接免疫荧光双重染色(γ-微管蛋白单克隆抗体... 详细信息

目的了解口腔鳞状细胞癌细胞周期蛋白E(cyclin E)表达与中心体扩增相关性,探讨其中心体扩增的可能分子机制。方法正常口腔黏膜组织12例,不同分化程度的口腔鳞状细胞癌46例石蜡包埋组织,采用间接免疫荧光双重染色(γ-微管蛋白单克隆抗体及细胞角蛋白多克隆抗体)观察口腔鳞状细胞癌中心体扩增状况;采用免疫组织化学(SABC法)检测相应组织cyclin E蛋白表达情况.分析cyclin E蛋白表达与中心体扩增之间的相关性。结果中心体扩增可见于80.4%(37/46)口腔鳞状细胞癌组织中,而cyclin E蛋白过表达可在65.2%(30/46)的口腔鳞状细胞癌组织中见到;中心体扩增发生率在cyclin E阳性组为90.0%(27/30),而在cyclin E蛋白阴性组为10/16,两组间差异有统计学意义(X^2=5.014,P中心体扩增与cyclin E蛋白阳性表达间存在相关关系(r=0.330,P中心体循环调控可能是一个多因素参与的复杂过程,cyclin E蛋白表达的高调作为危险因素之一可能在口腔鳞状细胞癌中心体扩增中起一定作用。

关键词：口腔肿瘤癌鳞状细胞中心体细胞周期蛋白E

野生型p53基因对K562细胞中心体数量和蛋白的影响

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中华血液学杂志 2009年第5期30卷 326-331页

作者：王宏斌冯文莉黄世峰田文君曹唯希黄宗干重庆医科大学临床血液学教研室临床检验诊断学教育部重点实验室400016 重庆医科大学临床学院血液科

目的研究重组腺病毒介导的野生型p53基因（Ad5wtp53）对人慢性粒细胞白血病（CML）K562细胞系中心体数量和中心体蛋白表达的影响。探讨应用重组腺病毒p53基因对CML进行基因治疗的可行性。方法分别将含有野生型p53基因、突变型p53基因和... 详细信息

目的研究重组腺病毒介导的野生型p53基因（Ad5wtp53）对人慢性粒细胞白血病（CML）K562细胞系中心体数量和中心体蛋白表达的影响。探讨应用重组腺病毒p53基因对CML进行基因治疗的可行性。方法分别将含有野生型p53基因、突变型p53基因和绿色荧光蛋白基因的重组腺病毒表达载体（Ad5wtp53、Ad5mtp53和AdSGFP）反复扩增，联合多聚季胺共同感染K562细胞，观察感染效率。MTT法确定最适重组腺病毒感染滴度和感染时间。然后用RT-PCR和Western blot检测p53 mRNA和蛋白的表达。最后应用间接免疫荧光染色法对中心体γ-微管蛋白和纺锤体α-微管蛋白同时进行标记，在激光共聚焦显微镜下观察中心体γ-微管蛋白的表达和有丝分裂，并对中心体进行计数。结果多聚季胺可显著提高腺病毒载体对K562细胞的感染效率。多聚季胺的剂量选择为4μg／ml；感染K562细胞的最适腺病毒滴度为20 000 MOI，感染时间为72h；Ad5wtp53和AdSmtp53转染的K562细胞均可表达p53 mRNA和蛋白。Ad5wtp53感染K562细胞后，中心体数量减少，γ-微管蛋白的表达降低。结论重组腺病毒介导的野生型p53基因能够在白血病K562细胞中持续表达；野生型P53蛋白能够降低K562细胞中心体数量及中心体γ-微管蛋白的表达。

关键词：基因 p53 中心体 K562细胞腺病毒载体

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中心体:洞悉肿瘤的发生(英文)

中国细胞生物学学报 2010年第5期32卷 781-787页

作者：陈颖周岩黄立勇孔庆忠河南科技学院生命科技学院新乡453003 新乡医学院第一附属医院神经外科卫辉453100 山东蓝金生物工程有限公司济南250100

动物细胞中主要作为微管组织中心的中心体在细胞分裂时确保了染色体平均分配到两个子细胞的过程,从而保证了基因组的稳定性。中心体的结构或功能异常都将不可避免的引起基因组不稳定,从而导致肿瘤的发生。鉴于主要由中心体异常引起的染... 详细信息

动物细胞中主要作为微管组织中心的中心体在细胞分裂时确保了染色体平均分配到两个子细胞的过程,从而保证了基因组的稳定性。中心体的结构或功能异常都将不可避免的引起基因组不稳定,从而导致肿瘤的发生。鉴于主要由中心体异常引起的染色体不稳定是肿瘤细胞的一个典型特征,而染色体不稳定又与肿瘤细胞的耐药性有着密切联系,因而不难想象以中心体为靶点的肿瘤治疗的合理性。因此,本文将着重阐述中心体在细胞调控,特别是与肿瘤发生密切相关的细胞活动及药物耐受中的重要作用,以期为更好阐明药物耐受机制,并为与中心体相关的抗肿瘤药物研发提供新思路。

关键词：中心体细胞周期 DNA复制肿瘤治疗

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中心体异常扩增与子宫颈鳞癌相关性的研究

中心体异常扩增与子宫颈鳞癌相关性的研究

作者：李云暨南大学

学位级别：硕士

目的了解子宫颈鳞状细胞癌（本文中简称：宫颈鳞癌）癌变过程中组织细胞内中心体的状态,探讨中心体的异常扩增在宫颈鳞癌发生发展过程中的作用及意义。方法以宫颈鳞癌癌变过程中不同阶段的组织标本为研究对象。选取2... 详细信息

目的了解子宫颈鳞状细胞癌（本文中简称：宫颈鳞癌）癌变过程中组织细胞内中心体的状态,探讨中心体的异常扩增在宫颈鳞癌发生发展过程中的作用及意义。方法以宫颈鳞癌癌变过程中不同阶段的组织标本为研究对象。选取2007年6月～2009年6月在暨南大学附属第一医院病理科存档的宫颈病变的组织石蜡标本共计56例。包括：1,正常宫颈上皮组织10例;2,宫颈上皮内瘤变组织26例（轻度增生10例、中度增生7例、重度增生9例）;3,宫颈鳞癌组织20例（Ⅰ期10例、Ⅱ期7例、Ⅲ期3例;其中中分化鳞癌7例,低分化鳞癌13例,无高分化鳞癌）。石蜡标本切片,采用间接免疫荧光染色法对组织切片染色,通过荧光显微镜观察组织细胞内中心体的状态,分析其在宫颈上皮癌变过程中的变化趋势及其在各组间的差异。结果 1.正常宫颈上皮细胞及轻度宫颈上皮内瘤变的细胞内未发现中心体的异常扩增,而在中度、重度宫颈上皮内瘤变、宫颈鳞癌组织中均发现有不同程度的中心体异常扩增。中心体异常扩增主要表现为中心体形状的改变及中心体数目的增多。 2.轻、中、重度宫颈上皮内瘤变组织细胞内发现异常中心体的比例分别为0%、（3.05±2.01）%和（4.83±3.47）%,差异有统计意义（F=10.835,P＜0.01）。 3.Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期宫颈鳞癌组织细胞内中心体异常的比例分别为（6.08±2.03）%、（6.41±3.53）%和（6.98±3.70）%,差异无统计意义（F=0.119,P=0.889）。 4.中分化与低分化宫颈鳞癌内中心体异常的比例分别为（5.59±2.28）%和（7.71±3.13）%,两者比较无统计学意义（t=1.571,P=0.133）。 5.宫颈鳞癌组织细胞内出现异常中心体扩增的细胞为（6.33±2.72）%,高于宫颈上皮内瘤变组（2.50±3.06）%,两组间差异有统计学意义（P＜0.01）。 6.中心体在宫颈上皮癌变过程中的变化趋势表现为：中心体异常细胞的百分率随上皮异常增生程度的增加及宫颈鳞癌分期的增加而增加,随宫颈鳞癌分化程度的降低而增加,两者存在显著相关性（P＜0.01）。结论： 1.中心体的异常扩增是宫颈上皮内瘤变及宫颈鳞癌中普遍存在的细胞学形态的异常现象;2.中心体异常扩增可能为宫颈鳞癌发生过程中的早期事件或始动因素,并可能与宫颈鳞癌发生发展的进程有关;3.中心体异常扩增与宫颈组织癌变过程中的细胞形态学改变之间可能存在直接的相关性;4.中心体异常扩增可作为一个客观的细胞形态学异常的指标,辅助宫颈癌前病变及宫颈鳞癌诊断。

关键词：中心体扩增子宫颈鳞状细胞癌宫颈上皮内瘤变

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中心体蛋白centrin研究进展

生理科学进展 2004年第3期35卷 240-242页

作者：陈娴唐永政王永潮北京师范大学细胞生物学研究所北京100875

Centrin是普遍存在于中心体上的蛋白成分 ,具有钙离子结合能力。Centrin家族包含多种同源蛋白 ,这些蛋白在结构上高度保守。研究表明centrin可能与细胞的分化 ,纤毛的生成定向和切断 ,精子尾部的生成 ,中心体复制及其结构维持有密切关... 详细信息

Centrin是普遍存在于中心体上的蛋白成分 ,具有钙离子结合能力。Centrin家族包含多种同源蛋白 ,这些蛋白在结构上高度保守。研究表明centrin可能与细胞的分化 ,纤毛的生成定向和切断 ,精子尾部的生成 ,中心体复制及其结构维持有密切关系 ,同时也和细胞的癌变、生长及细胞周期调控有关。

关键词：中心体蛋白 centrin 中心体纤毛细胞周期癌变

p53-p21^waf1通路在口腔鳞状细胞癌中心体扩增中的作用及意义

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中华口腔医学杂志 2009年第6期44卷 332-335页

作者：蔡扬柳咏发杨宏卢虹贵阳医学院口腔医学系贵州贵阳550004 武警贵州总队医院口腔诊疗中心贵阳市口腔医院口腔内科

目的了解口腔鳞状细胞癌（oral squamous cell cancer，OSCC）p21^waf1蛋白表达与中心体扩增的相关性，探讨p53-p21^waf1通路在OSCC中心体扩增中的作用及意义。方法8例正常口腔黏膜及27例OSCC石蜡包埋组织，采用间接免疫荧光双重染色法... 详细信息

目的了解口腔鳞状细胞癌（oral squamous cell cancer，OSCC）p21^waf1蛋白表达与中心体扩增的相关性，探讨p53-p21^waf1通路在OSCC中心体扩增中的作用及意义。方法8例正常口腔黏膜及27例OSCC石蜡包埋组织，采用间接免疫荧光双重染色法了解OSCC组织中心体扩增情况；采用流式细胞术及免疫组织化学方法对相应组织p21^waf1蛋白表达量及突变型p53蛋白进行检测，分析三者间的相关性。结果中心体数目扩增（〉2个／细胞）可见于78％（21／27）的OSCC组织，p21^waf1蛋白表达量在有中心体扩增的OSCC组织中[（0.878±0.081）]低于无中心体扩增的OSCC组织[（0.952±0.018），t=3.838，P=0.001]，OSCC组织中心体扩增程度与p21^waf1蛋白表达量间存在负相关关系（r=-0.472，P〈0.05）；p21^waf1蛋白表达量在OSCC组织p53阳性组[（0.823±0.071）]低于p53阴性组[（0.909±0.075），t=3.905，P〈0.01]，两者间存在负相关关系（r=-0.491，P〈0.05）。结论p53-p21^waf1通路可能参与了OSCC中心体循环调控，p53突变导致的p21^waf1蛋白表达下调在OSCC中心体扩增中可能起一定作用。

关键词：癌鳞状细胞中心体流式细胞术 p21^waf1

野生型p53对白血病K562细胞中心体过度复制的抑制作用

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癌症 2009年第2期28卷 149-154页

作者：田文君冯文莉王宏斌黄世峰曹唯希黄宗干重庆医科大学医学检验系临床血液学教研室临床检验诊断学教育部重点实验室重庆400016 重庆医科大学临床学院血液科重庆400016

背景与目的:肿瘤组织细胞中p53基因突变或缺失是导致非整倍体的发生和基因组不稳定的主要原因之一;最近研究发现慢性粒细胞白血病(chronicmyelogenous leukemia,CML)各期患者均有中心体异常,且异常的程度与临床分期有关,急变期显示更为... 详细信息

背景与目的:肿瘤组织细胞中p53基因突变或缺失是导致非整倍体的发生和基因组不稳定的主要原因之一;最近研究发现慢性粒细胞白血病(chronicmyelogenous leukemia,CML)各期患者均有中心体异常,且异常的程度与临床分期有关,急变期显示更为严重的中心体异常。本研究建立携野生型p53基因的CML急变K562细胞株,以研究该细胞内野生型p53基因表达后p53信号转导通路对K562细胞中心体的影响。方法:用HEK293细胞扩增重组p53野生型、突变型及空载腺病毒载体,联合polybrene分别感染K562细胞;未接受感染的细胞作为空白对照。流式细胞术检测重组腺病毒载体感染效率,Western blot检测P53蛋白表达。间接免疫荧光染色后用激光共聚焦计数K562细胞中心体的变化。Western blot检测p53信号转导通路下游效应分子生长阻滞和DNA损伤应答基因Gadd45a(growth arrest and DNAdamage)、BubR1(Bub1related)、Aurora A的表达。结果:成功建立携野生型p53基因的K562细胞株,腺病毒载体感染效率达60%以上,野生型p53可在K562细胞中持续表达。感染72h后,携野生型p53基因的K562细胞中中心体数量异常(n>2)的细胞比例降至(0.38±0.02)%,与空白对照组(0.71±0.14)%比较其差异有统计学意义(P中心体的过度复制。

关键词： p53基因信号转导中心体 K562细胞 Gadd45a蛋白 BubR1蛋白 Aurora A激酶