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中央杏仁核中促肾上腺皮质激素释放激素神经元调控吗啡戒断诱发的负性情绪

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生理学报 2019年第6期71卷 824-832页

作者：王雪颖余敏马兰王菲菲江长优复旦大学基础医学院医学神经生物学国家重点实验室药理研究中心

成瘾药物戒断诱发负性情绪并伴有脑内应激系统的激活,是导致负性强化并使成瘾个体持续觅药和复吸的重要因素。促肾上腺皮质激素释放激素(corticotrophin-releasing hormone, CRH)是应激系统发挥生理作用的重要递质,在介导焦虑、恐惧等... 详细信息

成瘾药物戒断诱发负性情绪并伴有脑内应激系统的激活,是导致负性强化并使成瘾个体持续觅药和复吸的重要因素。促肾上腺皮质激素释放激素(corticotrophin-releasing hormone, CRH)是应激系统发挥生理作用的重要递质,在介导焦虑、恐惧等负性情绪的重要核团--中央杏仁核(central amygdala, Ce A)中广泛分布。然而在Ce A中这类表达CRH的神经元在成瘾药物戒断引发的负性情绪中作用还并不清楚。本研究采用CRH-Cre转基因小鼠,通过依赖Cre-Lox P系统的化学遗传学方法特异性激活或抑制小鼠Ce A中的CRH神经元,结合条件性位置厌恶(conditioned place aversion, CPA)、高架十字迷宫、自主活动能力测试等行为学实验,探究Ce A中CRH神经元对小鼠吗啡戒断产生的厌恶、焦虑等负性情绪的影响。结果显示,抑制Ce A中CRH神经元可抑制小鼠吗啡戒断诱导的CPA形成,并降低小鼠焦虑水平。直接激活Ce A中CRH神经元可使未经历吗啡暴露的小鼠产生CPA和焦虑。吗啡自然戒断和CRH神经元的活性改变对小鼠的自主活动能力都没有显著影响。以上结果提示,Ce A中CRH神经元参与调控小鼠吗啡戒断诱导的负性情绪。本研究为药物成瘾与复吸机制提供了理论依据。

关键词：中央杏仁核促肾上腺皮质激素释放激素吗啡戒断负性情绪

中央杏仁核生长抑素阳性神经元参与小鼠急性痒和慢性痒的形态学研究

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神经解剖学杂志 2023年第3期39卷 255-261页

作者：梁怡饶茜荆雪金鑫米志宽延安大学医学院病理生理学教研室延安716000 空军军医大学基础医学院神经生物学教研室西安710032 空军军医大学基础医学院学员3大队9队西安710032

目的:观察急性痒和慢性痒小鼠中央杏仁核(CeA)内生长抑素(SST)阳性神经元的激活情况,为其参与痒觉信息的调控提供形态学证据。方法:在小鼠颈背部皮内注射组胺(His)或氯喹(CQ)建立急性痒模型;应用二苯基环丙烯酮(DCP)建立接触性皮炎慢性... 详细信息

目的:观察急性痒和慢性痒小鼠中央杏仁核(CeA)内生长抑素(SST)阳性神经元的激活情况,为其参与痒觉信息的调控提供形态学证据。方法:在小鼠颈背部皮内注射组胺(His)或氯喹(CQ)建立急性痒模型;应用二苯基环丙烯酮(DCP)建立接触性皮炎慢性痒模型。进一步结合免疫荧光染色技术分别观察急性和慢性痒小鼠CeA内SST阳性神经元的激活情况。结果:对照组小鼠30 min内抓挠次数为(16.33±5.13)次;His组小鼠30 min内抓挠次数为(110.66±22.00)次;CQ组小鼠30 min内抓挠次数为(120.33±19.50)次。急性痒模型组小鼠抓挠次数显著高于对照组(P<0.05);DCP模型组小鼠搔抓次数明显高于对照组搔抓次数(P<0.05)。免疫荧光染色结果显示在急性痒状态下,对照组CeA内SST/FOS双标神经元占SST阳性神经元的(3.1±0.99)%;His组CeA内SST/FOS双标神经元占SST阳性神经元的(20.23±1.76)%;CQ组CeA内SST/FOS双标神经元占SST阳性神经元的(19.90±2.58)%;在慢性痒状态下,对照组CeA内SST/FOS双标神经元占SST阳性神经元的(3.73±2.05)%;DCP组CeA内SST/FOS双标神经元占SST阳性神经元的(23.93±4.02)%。结论:急性和慢性痒状态下,小鼠CeA内SST阳性神经元激活,为CeA内SST阳性神经元参与痒觉的信息传递提供了形态学依据。

关键词：中央杏仁核生长抑素急性痒慢性痒小鼠

中央杏仁核EM-1对肥胖大鼠摄食和胃动力的影响及潜在机制研究

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中央杏仁核EM-1对肥胖大鼠摄食和胃动力的影响及潜在机制研究

作者：魏文文青岛大学

学位级别：硕士

目的肥胖现已经成为重大公共卫生问题,超重及肥胖影响人们的生活质量,引发心血管等各种疾病,降低预期寿命。内源性阿片肽是在体内合成,并广泛分布于动物的脑、神经及外周组织,主要包括脑啡肽、强啡肽、内啡肽、内吗啡肽及孤啡肽。阿片... 详细信息

目的肥胖现已经成为重大公共卫生问题,超重及肥胖影响人们的生活质量,引发心血管等各种疾病,降低预期寿命。内源性阿片肽是在体内合成,并广泛分布于动物的脑、神经及外周组织,主要包括脑啡肽、强啡肽、内啡肽、内吗啡肽及孤啡肽。阿片肽有多种受体亚型,其中μ阿片肽受体(μ-opioid receptor,MOR)是参与机体能量代谢、胃肠活动、免疫机能等生理调控的重要组成,与μ-阿片肽受体亲和力最强的是内吗啡肽(Endomorphin,EM)。内吗啡肽有两种亚型,内吗啡肽1(Endomorphin-1,EM-1)和内吗啡肽2(Endomorphin-2,EM-2)。侧脑室微量注射EM-1可剂量依赖性促进小鼠摄食。边缘系统的杏仁核主要参与情绪、奖赏行为及学习记忆调控,近年来愈来愈多研究显示,杏仁核尤其是中央杏仁核(Central Amygdaloid,CeA),在能量代谢调控中也扮有重要角色。有研究显示,CeA大部分神经元有μ-阿片肽受体表达。EM-1在CeA是否参与大鼠不同饮食摄入调控?是否参与胃感觉传入和胃运动传出活动调控?该调控与肥胖是否有关?均无明确结论。本研究拟采用免疫荧光组织化学染色、在体神经元放电记录、分子生物学、胃肠道运动记录、放射性配体受体结合等方法,观察微量注射EM-1对CeA内胃扩张敏感神经元放电频率和强度的影响,及对大鼠胃动力、摄食的调控作用,进一步对比分析正常和肥胖模型间的异同并推测其潜在机制,目的是补充和丰富肥胖发生有关的中枢神经调控机制,为能量代谢障碍性疾病的预防和治疗提供新的研究方向。方法(1)5周龄健康雄性Wistar大鼠,高脂饲料(脂肪含量达45%)饲养6 w,制备营养性肥胖大鼠模型。定期测量模型动物体重,超过对照组大鼠体重的20%为模型制备成功。(2)采用在体神经元放电记录方法,记录CeA微量注射EM-1或μ-阿片肽受体拮抗剂(D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Orn-Thr-Pen-Thr-NH2,CTOP)对正常和肥胖大鼠CeA胃扩张(Gastric Distension,GD)敏感神经元放电活动的作用;(3)核团埋管后CeA微量注射EM-1,记录并比较正常和肥胖大鼠摄食量(标准、高糖、高脂以及高蛋白饮食)、胃排空和在体胃运动的差异;(4)采用Western Blot和免疫荧光组织化学法,比较正常和肥胖大鼠CeA内EM-1和μ-阿片肽受体蛋白的表达;(5)标记EM-1,按放射性配体受体结合方法,比较正常和肥胖大鼠CeA内μ-阿片肽受体与EM-1结合活性,分析结合能力变化。结果(1)EM-1对CeA内GD神经元放电频率和幅度的影响实验结果显示,CeA内存在GD敏感神经元,包括胃扩张抑制性(Gastric Distension Inhibitory,GD-I)神经元和胃扩张兴奋性(Gastric Distension Exciting,GD-E)神经元;CeA微量注射EM-1,提高正常大鼠70.37%的GD-I神经元兴奋性(P0.05)。胃运动指数分析发现,与正常NS组大鼠相比,肥胖NS组大鼠MI%无显著改变(P>0.05);但CeA微量注射EM-1,显著增加正常或肥胖大鼠MI%(P杏仁核微量注射EM-1对大鼠摄食的影响CeA微量注射EM-1,正常和肥胖大鼠在0-2 h及2-4 h间标准饲料(P0.05);但CeA微量注射EM-1,正常或肥胖大鼠0-2 h、2-4

关键词：内吗啡肽中央杏仁核摄食胃动力大鼠

中央杏仁核PKC-δ+神经元调控食物偏好社会传递的机制研究

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中央杏仁核PKC-δ+神经元调控食物偏好社会传递的机制研究

作者：张甜甜华东师范大学

学位级别：硕士

在食物偏好的社会传递(Social transmission of food preference,STFP)过程中,嗅觉感官的输入与社会线索相结合诱导对食物气味的长期记忆。来自同种的化学物质信号可以构成安全信息,帮助小鼠判断食物是否安全。杏仁核作为嗅觉系统中重... 详细信息

在食物偏好的社会传递(Social transmission of food preference,STFP)过程中,嗅觉感官的输入与社会线索相结合诱导对食物气味的长期记忆。来自同种的化学物质信号可以构成安全信息,帮助小鼠判断食物是否安全。杏仁核作为嗅觉系统中重要的组成部分,可以接受来自于次级嗅觉结构的嗅觉信息,并且和神经内分泌刺激整合来调节摄食行为。杏仁核中表达蛋白激酶C-delta的PKC-δ神经元可以被多种厌食信号激活并调控食物的摄入。本课题利用行为学、化学遗传调控、分子生物学等方法探究了中央杏仁核(Central amygdala,Ce A)中PKC-δ神经元对于STFP调节的机制。首先我们建立了STFP范式,并定义社交互动的过程为信息传递阶段,社交互动结束后的过程为信息传递后阶段,信息传递后的食物选择过程为摄食阶段。我们发现,Ce A脑区在STFP的信息传递阶段以及摄食阶段被激活。在信息传递阶段利用化学遗传抑制PKC-δ神经元会影响正常的信息传递,导致STFP表达失败。在摄食阶段抑制PKC-δ神经元会导致食物口味信息提取失败,最终STFP无法正常表达。当在信息传递后抑制PKC-δ神经元并不会影响信息的存储和提取,STFP可以正常的表达。通过以上实验确定了Ce A中PKC-δ神经元在STFP中的重要作用,为以后STFP的相关研究提供新思路。

关键词：中央杏仁核 PKC-δ+神经元社会学习食物偏好的社会传递

中央杏仁核GABA神经元通过室旁核对小鼠情绪和摄食的调控研究

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中央杏仁核GABA神经元通过室旁核对小鼠情绪和摄食的调控研究

作者：刘宁青岛大学

学位级别：硕士

目的:焦虑抑郁样情绪障碍是常见的精神疾病,给患者造成很大程度的痛苦,并由于治疗存在很多副作用而效果欠佳。情绪障碍与体重减轻和食欲下降等表现也密切相关。因此,深入探讨焦虑抑郁样情绪障碍的调节机制将有助于寻找精确靶点,更有效... 详细信息

目的:焦虑抑郁样情绪障碍是常见的精神疾病,给患者造成很大程度的痛苦,并由于治疗存在很多副作用而效果欠佳。情绪障碍与体重减轻和食欲下降等表现也密切相关。因此,深入探讨焦虑抑郁样情绪障碍的调节机制将有助于寻找精确靶点,更有效地治疗疾病。中央杏仁核(central amygdala,Ce A)是杏仁核复合体的主要输出区域,在调节情绪状态、奖赏处理、能量平衡和摄食行为等多种生理和行为反应中发挥重要作用。Ce A内含有大量γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)神经元。抑制性GABA能神经元从Ce A投射到下丘脑的室旁核(paraventricular nucleus,PVN),但与此通路调节有关的作用和机制仍不清楚。此外,核组蛋白2(NUCB2)及其加工产物nesfatin-1(NUCB2/nesfatin-1)定位于下丘脑室旁核(PVN),参与摄食的调节。因此,本研究旨在研究Ce A-PVN的GABA能神经通路并探讨该通路对小鼠情绪和摄食的调控作用及与nesfatin-1有关的潜在机制。方法:1.采用慢性束缚应激(chronic restraint stress,CRS)建立小鼠焦虑抑郁样模型。在CRS和正常对照(normal control,NOR)小鼠的PVN注射0.3μL生理盐水(normal saline,NS)或者GABAA受体拮抗剂荷包牡丹碱(bicuculline,BIC),并据此将小鼠分为四组(n=10):NOR+NS;NOR+BIC;CRS+NS;CRS+BIC。然后通过旷场实验(open field test,OFT),高架十字迷宫(elevated cross maze,EPM),大理石掩埋实验(marble burial test,MBT)和强迫游泳(forced swimming test,FST)观察PVN内微量注射BIC对焦虑抑郁样模型小鼠行为学的影响。2.采用摄食分析法,观察PVN内微量注射BIC对CRS小鼠摄食的影响。3.采用荧光金逆行追踪结合荧光免疫组织化学法观察Ce A是否存在荧光金与GABA免疫阳性神经元的分布。4.采用化学遗传法,将腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)AAV2/9-m Dlxh M3D(Gq)-EGFP-ER2-WPRE-PA定向注射于小鼠的Ce A内用于激活GABA神经元。腹腔注射氯氮平N-氧化物(Clozapine N-oxide,CNO,0.3 mg kg-1)或NS。荧光免疫组织化学法观察两组小鼠PVN中GABAAR和c-Fos免疫阳性神经元共表达情况(n=6)。5.采用化学遗传法和行为学测试,向Ce A内注射过AAV的小鼠的PVN内注射NS或BIC,随后腹腔注射CNO(0.3 mg kg-1)或NS。小鼠被分为四组:NS(腹腔注射)+NS(PVN微量注射),NS+BIC、CNO+NS和CNO+BIC(n=10)。通过行为学实验观察Ce A-PVN的GABA能神经通路对小鼠情绪行为的影响。6.采用化学遗传法和摄食分析法,测量NS+NS、NS+BIC、CNO+NS和CNO+BIC(n=10)四组小鼠24 h摄食量。观察Ce A-PVN的GABA能神经通路对小鼠摄食量的影响。7.采用荧光免疫组织化学染色,观察PVN中GABAA受体(GABAAR)与NUCB2/nesfatin-1免疫阳性神经元的共表达情况。结果:1.行为学结果显示,与NOR+NS组相比,CRS+NS组在旷场中心停留的时间(P<0.01)和距离(P<0.05)显著减少,进入高架十字迷宫开放臂的次数和时间也显著减少(P<0.05),在大理石掩埋实验中小鼠埋珠数量显著增加(P<0.05),在强迫游泳实验中小鼠的不动时间显著增加(P<0.01);与CRS+NS组相比,CRS+BIC组在旷场中心停留的时间(P<0.05)和距离(P<0.05)显著增加,小鼠进入高架十字迷宫开放臂的次数和时间也显著增加(P<0.05),在大理石掩埋实验中小鼠掩珠数量显著减少(P<0.05),在强迫游泳实验中小鼠的不动时间显著减少(P<0.05)。2.摄食结果显示,与NOR+NS组相比,CRS+NS组对普通饲料6-12 h,12-24 h的摄食量显著降低(P<0.01)。与CRS+NS组相比,CRS+BIC组在6-12 h,12-24h的摄食量显著增加(P<0.05)。3.荧光金逆行追踪结合免疫荧光组织化学实验结果显示,小鼠一侧PVN内微量注射FG,GABA免疫荧光染色后镜下可观察到同侧Ce A内有FG标记的神经元和GABA免疫阳性神经元,且部分GABA免疫阳性细胞与FG共标记。4.荧光免疫组织化学结果显示,与NS组相比,CNO组激活Ce A内的GABA神经元后PVN处的c-Fos与GABAAR阳性神经元的共表达显著减少(P<0.05)。5.化学遗传法和行为学测试结果显示,与N

关键词：中央杏仁核下丘脑室旁核 GABA 情绪摄食

急性捕食者气味暴露对丘脑室旁核-中央杏仁核通路活动影响研究

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陆军军医大学学报 2022年第17期44卷 1677-1686页

作者：刘程煜赵娟娟王亚玲李思雨徐衎任栓成高东唐玲重庆医科大学附属康复医院重庆400050 重庆医科大学附属大学城医院神经科重庆401331 陆军军医大学(第三军医大学)基础医学院生理学教研室重庆400038 陆军特色医学中心医学心理科重庆400042

目的探讨小鼠在急性暴露于捕食者气味——2,4,5-三甲基噻唑(2,4,5-trimethylthiazole,TMT)应激下对丘脑室旁核(paraventricular thalamic nucleus,PVT)-中央杏仁核(central amygdala,CeA)神经通路活动的影响。方法取3只同种系小鼠在CeA注射CTB555,观察丘脑中线核团中投射到CeA的神经元;8只雄性C57BL/6小鼠按照简单随机抽样法分为生理盐水组、TMT(暴露于捕食者气味)组,每组4只,观察急性暴露于TMT应激对小鼠丘脑中线核团及杏仁核的c-Fos表达影响;取6只同种系小鼠在CeA注射RetroBeads,随后按照简单随机抽样法分为生理盐水组、TMT组,每组3只,观察急性暴露于TMT对CeA投射-PVT神经元c-Fos表达影响。取6只同种系小鼠在PVT注射AAV-EF1α-DIO-GCaMp7b、CeA注射AAV/retro-Syn-Cre,待病毒表达3周后,通过向PVT病毒注射位点上方埋置光纤,手术恢复后在体记录小鼠CeA投射-PVT神经元急性暴露于TMT前后的钙信号变化。结果通过向小鼠CeA注射CTB555,发现CeA选择性接受丘脑中线核团大量的PVT投射。与对照组相比,急性暴露于TMT应激下,PVT(P<0.01)及CeA(P<0.05)的c-Fos表达显著增加。小鼠CeA注射RetroBeads后,CeA投射-PVT神经元暴露于TMT后c-Fos表达显著增加(P<0.05)。光纤钙信号记录发现,CeA投射-PVT神经元暴露于TMT后的ΔF/F显著高于暴露于生理盐水的ΔF/F值(P<0.01)。结论CeA投射-PVT神经元在急性暴露于TMT下显著激活。

关键词：捕食者气味应激丘脑室旁核中央杏仁核

中央杏仁核注射Orexin-A对慢性不可预知温和应激模型大鼠摄食及胃功能调控研究

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中央杏仁核注射Orexin-A对慢性不可预知温和应激模型大鼠摄食及胃...

作者：张靖靖青岛大学

学位级别：硕士

目的:应激是日常生活中常见的外部影响因素,可导致生理及行为障碍,甚至影响饮食模式。而应激的反馈调节系统包括中枢和外周神经系统中各种反馈及相关肽类的调控。食欲素A(orexin-A,OXA)是下丘脑分泌的参与摄食的重要神经肽之一,与摄食... 详细信息

目的:应激是日常生活中常见的外部影响因素,可导致生理及行为障碍,甚至影响饮食模式。而应激的反馈调节系统包括中枢和外周神经系统中各种反馈及相关肽类的调控。食欲素A(orexin-A,OXA)是下丘脑分泌的参与摄食的重要神经肽之一,与摄食及肥胖的发生有着密不可分的联系。有研究报道,出现慢性不可预知温和应激症状的雄性Wistar大鼠,其下丘脑外侧区(Lateral area of hypothalamus,LHA)内orexin能神经元的数量明显减少。此外,与健康人相比,长期受到心理疾病困扰的心境障碍及抑郁患者的脑脊液内OXA水平明显降低。下丘脑包含多个与摄食相关的重要核团,其与伺情绪中枢有着密切关联,如杏仁核就是其中之一。杏仁核是产生情绪、识别情绪和调节情绪的重要中枢,其包括中央杏仁核(central amygdala,Ce A)、基底外侧杏仁核(Basolateral amygdala,BLA)和基底内侧杏仁核(Basal medial amygdala,BMA)。Ce A与下丘脑之间有往返纤维联系,参与下丘脑摄食调控。本研究采用让动物在49天时间内接受慢性、不可预知的温和刺激,模拟人类日常生活中接受的慢性低强度应激,建立慢性不可预知温和应激(Chronic unpredictable mild stress,CUMS)模型大鼠,观察Ce A orexinA对慢性不可预知温和应激大鼠摄食行为、胃酸分泌、胃运动以及胃排空的影响及潜在机制。目的是为临床应激性心理障碍疾病导致胃肠功能紊乱的防治提供可靠实验依据。方法:(1)构建慢性不可预知温和应激大鼠模型:随机选择应激因素:大鼠24 h禁食,或禁水24 h,或24 h应用潮湿垫料,或4℃下强迫大鼠游泳5 min,或大鼠处于昼夜颠倒环境(8:00-20:00黑暗,20:00-8:00光照),或鼠笼倾斜45°角24 h。每天上午8:00:00,CUMS+NS组大鼠和CUMS+OXA组大鼠随机给予上述刺激之一,每种刺激每周仅给予1次。分别于1、3、5、7周应激刺激结束后测量大鼠体重。假慢性不可预知温和应激组大鼠不进行随机应激因素处理,其他条件与慢性不可预知温和应激组大鼠一致。49天后,若CUMS模型组大鼠的体重较Sham组大鼠降低超过30%则视为建模成功。(2)实验分组:选取Sprague Dawley(SD)雄性大鼠,随机分为4组:(1)正常大鼠生理盐水组(Sham+NS组):正常大鼠Ce A注射0.5μl NS;(2)慢性不可预知温和应激大鼠NS组(CUMS+NS组):慢性不可预知温和应激大鼠Ce A注射0.5μl NS;(3)正常大鼠orexin-A组(Sham+OXA组):正常大鼠Ce A注射2.0 n M/0.5μl OXA;(4)慢性不可预知温和应激大鼠orexin-A组(CUMS+OXA组):慢性不可预知温和应激大鼠Ce A注射2.0 n M/0.5μl OXA。(3)大鼠Ce A区置管,经套管向Ce A核团微量注射OXA,观察正常和慢性不可预知温和应激模型大鼠0-1h,1-2h,2-3h摄食量及3小时累计摄食量的变化情况;(4)Ce A核团微量注射OXA,采用幽门结扎法,观察正常和慢性不可预知温和应激模型大鼠胃酸分泌的改变;(5)大鼠胃窦浆膜层植入应力传感器,Ce A核团注射OXA,观察正常和慢性不可预知温和应激模型大鼠胃运动的改变;(6)Ce A核团微量注射OXA,观察对正常和心理应激模型大鼠胃排空的影响;(7)采用免疫组化染色方法,观察和比较慢性不可预知温和应激大鼠和健康大鼠Ce A内OX-1R免疫阳性细胞的表达;(8)采用western blot方法,观察和比较慢性不可预知温和应激大鼠和健康大鼠Ce A内OX-1R的蛋白表达;(9)采用放射性配体受体结合分析法(radioligand receptor binding assays,RBA),观察和比较慢性不可预知温和应激大鼠和健康大鼠Ce A内OXA与OX-1R的结合力变化。结果:(1)Ce A微量注射OXA对CUMS大鼠摄食量影响研究显示:与正常大鼠相比,CUMS大鼠0-1h,1-2h和2-3h的食物摄入量及3小时累积食物摄入量均显著降低(P<0.05),且第1小时摄食量减少更为显著(P<0.05)。与Sham+NS组相比,正常大鼠Ce A微量注射OXA,注药后0-1h(P<0.05),1-2h(P<0.05),2-3h(P<0.05)的食物摄入量和3小时累积食物摄入量(P<0.05)均显著增加,且第1小时摄食量增加更为显著(P<0.05)。与CUMS+NS组大鼠相比,CUMS大鼠Ce A微量注射OXA,注药后0-1h(P<0.05),1-2h(P<0.05),2-3h(P<0.05)的食物摄入量和3小时累积食物摄入量(P<0.05)均显著降低,且第1小时摄食量减少更为显著(P<0.05)。进一步统计学分析显示

关键词：慢性不可预知温和应激 orexin-A 中央杏仁核摄食胃功能

中央杏仁核GLP-1受体信号通路的摄食调控研究

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中央杏仁核GLP-1受体信号通路的摄食调控研究

作者：王忠香青岛大学

学位级别：硕士

目的:中央杏仁核是胰高血糖素样肽1（GLP-1）摄食调控重要作用位点之一,中央杏仁核内GLP-1受体信号通路在摄食和能量代谢调控中发挥着重要生理作用。本研究拟通过荧光免疫组化染色、核团微量注射等方法,观察激活或阻断中央杏仁核内GLP-... 详细信息

目的:中央杏仁核是胰高血糖素样肽1（GLP-1）摄食调控重要作用位点之一,中央杏仁核内GLP-1受体信号通路在摄食和能量代谢调控中发挥着重要生理作用。本研究拟通过荧光免疫组化染色、核团微量注射等方法,观察激活或阻断中央杏仁核内GLP-1信号通路对大鼠摄食影响及潜在机制。方法:选用成年健康雄性Wistar大鼠,体重280-320 g。采用荧光免疫组织化学染色,观察大鼠中央杏仁核中GLP-1受体的分布;采用脑核团置管及中央杏仁核微量注射GLP-1受体激动剂Ex4或GLP-1受体拮抗剂Ex9,观察GLP-1受体信号通路激活或阻断对大鼠摄食量、高脂饮食、高岭土摄入、以及蔗糖和玉米油摄入的影响。结果:（1）大鼠中央杏仁核和尾壳核分别注射6-羧基荧光素（FAM）标记的Ex4（GLP-1受体激动剂）,3小时后中央杏仁核内,而不是尾壳核,可见有呈黄色荧光的FAM,结合荧光免疫组化神经元核（NeuN）染色,确认FAM位于中央杏仁核神经元内。提示,GLP-1受体在中央杏仁核内的表达具有位置特异性。（2）中央杏仁核微量注射GLP-1受体激动剂Ex4,大鼠0-20 h累计摄食量显著降低（P＜0.05）;中央杏仁核微量注射GLP-1受体拮抗剂Ex9,大鼠0-4 h和0-20 h摄食量显著增加（P＜0.05）。提示,内源性GLP-1在大鼠摄食行为中可能发挥重要作用。（3）中央杏仁核微量注射Ex4,大鼠高岭土摄入量无显著变化（P＞0.05）;虽然平均每餐摄食量有下降趋势,但差异无统计学意义（P＞0.05）;大鼠进食次数也无显著改变（P＞0.05）。提示,中央杏仁核中GLP-1受体信号通路的激活所引起的大鼠摄食量减少并不是因恶心导致的。（4）中央杏仁核微量注射Ex4,大鼠高脂饲料第9 h始摄入量显著降低（P＜0.05）,持续至第20 h;大鼠高脂饮食每餐摄入量（P＜0.05）以及进食餐数（P＜0.05）均显著降低;中央杏仁核微量注射Ex9,大鼠0-2 h、0-4 h、0-6 h以及0-7 h高脂饮食摄食量显著增多（P＜0.05）。提示,中央杏仁核内GLP-1受体信号通路兴奋可增强大鼠饱食感（每餐摄入量减少）或饱足感（进食餐数减少）。（5）中央杏仁核微量注射Ex9,大鼠0-1 h、0-1.5 h和0-2 h蔗糖（P＜0.05）或玉米油（P＜0.05）摄入量均显著增高,大鼠0-24h蔗糖摄取总卡路里也显著增加（P＜0.05）,但大鼠对玉米油0-24h总卡路里摄入无明显影响（P＞0.05）。提示,GLP-1受体信号通路的激活可能参与大鼠饮食偏好调控。结论:中央杏仁核内有GLP-1受体表达,中央杏仁核内GLP-1受体信号通路参与大鼠摄食行为调控,且该信号通路的激活也对大鼠饮食偏好产生影响。中央杏仁核也是调控生理性摄食的重要位点之一。

关键词：中央杏仁核摄食 GLP-1 高脂饮食大鼠

中央杏仁核内CGRP能阳性突触的超微结构研究

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神经解剖学杂志 2012年第4期28卷 341-346页

作者：鲁亚成田菲李云庆董玉琳第四军医大学人体解剖与组织胚胎学教研室暨梁銶琚脑研究中心第四军医大学基础部教学实验中心西安710032

目的:观察降钙素基因相关肽(calcitonin-gene-related peptide,CGRP)样阳性终末在中央杏仁核(cen-tral nucleus of amygdala,CeA)内形成的突触的超微结构。方法:应用免疫荧光组织化学和包埋前免疫电镜等方法,观察CGRP样阳性终末在CeA内... 详细信息

目的:观察降钙素基因相关肽(calcitonin-gene-related peptide,CGRP)样阳性终末在中央杏仁核(cen-tral nucleus of amygdala,CeA)内形成的突触的超微结构。方法:应用免疫荧光组织化学和包埋前免疫电镜等方法,观察CGRP样阳性终末在CeA内所形成的突触分布形式及结构特点。结果:CGRP样阳性终末在中央杏仁核内可以与细胞体、树突干和树突棘等结构形成突触;轴-体突触几乎全为对称性突触,而轴-树突触和轴-棘突触则多为非对称性突触。在所有的非对称性突触里,轴-树突触占84.9%,而轴-棘突触占15.1%。CGRP样阳性轴-树的突触后致密带的平均长度为(790.77±313.55)nm,而轴-棘突触的突触后致密带的平均长度为(723.34±357.20)nm,两者之间没有显著性差异。结论:CGPR样阳性的兴奋性突触尤其是轴-树突触在伤害性信息传递以及痛相关情绪的产生中发挥了重要作用。

关键词：轴-体突触轴-树突触轴-棘突触中央杏仁核突触后致密带 CGRP