检索结果-南通市图书馆

作者：秦承磊青岛大学

学位级别：硕士

松材线虫病(Pine wilt desease,PWD)是由松材线虫(Pine wood nematode,PWN)感染引起的一种松林病害,短时间内便可导致松树死亡,在全球范围内造成了巨大的生态和经济损失。PWD具有传播速度快、传播媒介广泛、致死率高、防治困难等特点。... 详细信息

松材线虫病(Pine wilt desease,PWD)是由松材线虫(Pine wood nematode,PWN)感染引起的一种松林病害,短时间内便可导致松树死亡,在全球范围内造成了巨大的生态和经济损失。PWD具有传播速度快、传播媒介广泛、致死率高、防治困难等特点。目前对于PWD的防控手段主要包括物理手段、生物手段和化学手段,其中向患病松树内注射杀线剂是最有效的防治手段之一;由于药物作用靶点单一,长期使用导致松材线虫的耐药性增强,防治效果减弱,同时大量化学药物的使用对环境造成了破坏,因此,寻找杀松材线虫有效的作用靶点,开发特异性杀线药物对于PWD的防控至关重要。在本实验室前期的研究中发现,甲吡唑是一种松材线虫醇脱氢酶的特异性抑制剂,低浓度的甲吡唑对松材线虫的生命力具有显著的抑制效果,通过对低浓度甲吡唑处理松材线虫的转录组数据分析筛选出了一个显著下调差异表达基因—丝氨酸苏氨酸蛋白激酶基因(serine/threonine protein kinase gene,stk)。经生物信息学分析,stk全序列长为5087 bp,包含11个外显子和10个内含子,5’端有一段长约600 bp的非编码区;stk编码序列长为2787 bp,编码928个氨基酸残基。该基因编码的丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(serine/threonine protein kinase,STK)相对分子质量为103 k Da,理论等电点为8.7,没有信号肽和跨膜区,亲水性氨基酸的比例高于疏水性氨基酸,疏水性较低。三级结构预测结果显示,STK为四聚体,每个亚基含有41个α-螺旋、14个β-折叠以及54个无规则卷曲,其中α-螺旋主要集中于C端,β-折叠主要集中于N端。在本研究中,提取了松材线虫的总RNA,并通过反转录获得了cDNA,以cDNA为模板通过PCR扩增得到了松材线虫stk的DNA片段,将其连接至克隆载体pEASY-T1,并进行了测序分析。结果显示,扩增的DNA片段全长2787bp,与stk编码序列相似性为100%。将松材线虫stk与表达载体pET-15b进行连接构建重组表达载体pET-15b-stk,将构建好的重组表达载体转化到大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)Rosetta(DE3)构建工程菌;使用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)成功诱导了重组STK在工程菌中的表达,SDS-PAGE分析表明,重组STK主要以包涵体的形式存在,分子量约为105 k Da。探索了包涵体溶解及复性条件,将复性后的包涵体蛋白利用Ni螯合树脂进行了纯化,SDS-PAGE结果显示,重组STK纯度得到大幅度提高。对重组STK进行酶学性质分析,结果表明其最适反应p H为8.5,最适反应温度为35C,动力学参数V为11.27 U·mg·min,K值为57.50μg·m L。利用RNA干扰技术(RNA interference,RNAi)降低松材线虫体内stk的表达水平研究了stk在松材线虫中的生物学功能。结果表明,降低松材线虫stk表达水平后,松材线虫对灰葡萄孢的取食能力显著降低;与对照组相比繁殖能力下降了62.75%;松材线虫在RNAi处理后第12 h,产卵数和卵的孵化率比空白对照组分别降低了68.28%和77.09%;stk在松材线虫幼虫和胚胎发育中发挥着重要作用:与空白对照组相比,RNAi组J2幼虫发育成为J3期和J4期的比例分别下降了65.64%和82.86%;RNAi处理48 h后,对照组松材线虫卵全部孵化,而此时实验组尚有37.76%的卵未孵化,其中63.29%的卵发育停滞在胚胎前期的细胞增殖期。进一步研究发现,RNAi组松材线虫的寿命比对照组松材线虫降低了32.71%。最后,通过2年生黑松幼苗侵染实验研究了stk对松材线虫的致病力的影响,发现在接种松材线虫后第60天,对照组黑松幼苗的针叶已经出现明显的萎蔫症状,而RNAi组黑松针叶并未出现任何萎蔫的现象;在接种后第90天,对照组黑松幼苗针叶全部萎蔫枯死,而RNAi组黑松幼苗仍未出现明显的萎蔫症状,RNAi组松材线虫的致病力显著下降。综合上述结果推测,松材线虫stk可能通过调节松材线虫的繁殖以及发育而对松材线虫的致病力产生重要影响。本课题对松材线虫致病机理的研究具有参考价值,为开发新型特异性杀线药物制剂提供了潜在的药物靶点。

关键词：松材线虫丝氨酸苏氨酸蛋白激酶 RNA干扰发育致病力

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

蝗绿僵菌丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶MaPsk1的功能研究

蝗绿僵菌丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶MaPsk1的功能研究

引用

作者：郭梅重庆大学

学位级别：硕士

生物农药具有安全环保、害虫不易产生耐药性等优点,有望在未来成为化学农药的替代品。昆虫病原真菌菌种资源丰富,作为生物农药最具开发潜力,但生物类农药普遍具有杀虫周期长,防治效果不稳定等问题,严重制约了自身的发展及其在农业上的... 详细信息

生物农药具有安全环保、害虫不易产生耐药性等优点,有望在未来成为化学农药的替代品。昆虫病原真菌菌种资源丰富,作为生物农药最具开发潜力,但生物类农药普遍具有杀虫周期长,防治效果不稳定等问题,严重制约了自身的发展及其在农业上的应用。以昆虫病原真菌为主要生物活性成分的真菌制剂也得到研制和应用,对昆虫病原真菌致病机制、产孢机制、孢子抗逆机制的研究,有利于开发并研制更加高产、高效、安全的生物农药。丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(Serine/threonine protein kinase),是激酶中较为重要的一类,可通过磷酸化其下游底物,参与调控细胞营养感知、生长发育及细胞抵抗外界胁迫等多个方面的功能。在酵母中,丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶Psk1通过调节葡萄糖的分配,响应代谢和细胞完整性信号,参与细胞的生长、增殖和抗氧化应激等过程,但其在微生物致病中的作用及其调控机制尚无研究和报道。本文以昆虫病原真菌蝗绿僵菌(Metarhizium acridum)作为研究对象,采用基因敲除、回复技术,研究了丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶MaPsk1的功能,同时通过酵母双杂交技术,获取可能与MaPsk1存在互作的蛋白,并对互作蛋白COP9signalosome complex subunit 5(MaCsn5)进行了进一步功能研究。本文得到的主要结论如下:1.MaPsk1基因登录号MAC＿03775,CDS全长1542 bp,编码513个氨基酸,具有1个S＿TKc催化域和S＿TK＿X结构域;2.MaPsk1定位于脂滴,敲除MaPsk1导致脂滴表面特异性蛋白MPL1的表达量显著降低,表明其可能参与绿僵菌脂质代谢;3.敲除MaPsk1影响蝗绿僵菌生长、产孢及逆境耐受性。ΔMaPsk1在1/4 SDAY培养基上的菌落形态更小,产孢量相比野生型显著下降;对高渗胁迫剂山梨醇(SOR)和氧化剂HO更加敏感;抗紫外、抗湿热能力降低;4.敲除MaPsk1影响蝗绿僵菌的毒力。ΔMaPsk1毒力下降,附着胞形成率、甘油含量和膨压均降低;5.RNA-Seq数据分析表明,MaPsk1在蝗绿僵菌中参与调节多个生物学过程,影响多条信号通路,尤其是涉及脂类代谢、氨基酸代谢、细胞生长发育、营养物质的合成与代谢等通路;6.酵母双杂证明MaPsk1与MaCsn5间存在互作,敲除MaCsn5后,ΔMaCsn5菌株与ΔMaPsk1菌株有类似性状,毒力下降且同样对SOR和HO更敏感。综上所述,缺失MaPsk1之后,影响蝗绿僵菌的生长、产孢、抗逆能力及毒力,MaPsk1在蝗绿僵菌中参与调控多条信号通路,MaPsk1可能通过调控MaCsn5来影响蝗绿僵菌的毒力及抗逆能力。

关键词：蝗绿僵菌丝氨酸苏氨酸蛋白激酶 COP9信号复合体亚基5 毒力产孢

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

引用

中国耳鼻咽喉头颈外科 2019年第9期26卷 476-480页

作者：谭建成刘鑫国邢金燕驻马店市中心医院耳鼻咽喉科

目的探讨RNA干扰技术(RNAi)沉默肺腺癌转移相关转录本-1(MALAT-1)基因对喉癌细胞增殖、凋亡及丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(Akt)信号通路影响。方法体外培养人喉癌细胞Hep-2、正常永生化表皮细胞Hacat,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测细胞中... 详细信息

目的探讨RNA干扰技术(RNAi)沉默肺腺癌转移相关转录本-1(MALAT-1)基因对喉癌细胞增殖、凋亡及丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(Akt)信号通路影响。方法体外培养人喉癌细胞Hep-2、正常永生化表皮细胞Hacat,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测细胞中MALAT-1mRNA表达水平。采用RNAi技术将MALAT-1阴性对照质粒、si-MALAT1分别转染至Hep-2细胞,命名为si-NC组、si-MALAT1组,未处理组作为空白对照组,分别检测三组Hep-2细胞中MALAT-1及B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、Bax、caspase-3mRNA表达水平、Bcl-2、Bax、caspase-3、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)及其磷酸化蛋白(p-PI3K)、Akt及其磷酸化蛋白(p-Akt)蛋白表达情况以及细胞增殖及凋亡情况。结果与正常细胞相比,喉癌Hep-2细胞中MALAT-1mRNA表达水平(3.24±1.02)升高(P蛋白(0.31±0.05)表达降低,细胞增殖抑制率及凋亡率[(20.48±3.41)%]均升高,Bax、caspase-3mRNA(3.02±0.50、2.58±0.43)及蛋白表达(0.86±0.14、0.94±0.16)均升高,p-PI3K、p-Akt蛋白表达(0.57±0.10、0.51±0.08)均降低(P均<0.05)。结论 MALAT-1沉默可抑制人喉癌细胞系Hep-2细胞增殖并提高其凋亡率,推测可能通过影响Akt信号通路诱导癌细胞凋亡。

关键词：喉肿瘤细胞增殖细胞凋亡肺腺癌转移相关转录本-1 丝氨酸苏氨酸蛋白激酶

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

稻瘟病菌丝氨酸苏氨酸蛋白激酶MoSch9的功能研究

稻瘟病菌丝氨酸苏氨酸蛋白激酶MoSch9的功能研究

引用

作者：孔祥一南京农业大学

学位级别：硕士

水稻原产于中国,作为重要的粮食作物在世界各地广泛种植。由稻瘟病菌(Magnaporthe oryzae)引起的稻瘟病是危害水稻生产的重要病害,在世界水稻主产区均有发生,严重时可能会造成绝收。由于稻瘟病菌生理小种多易突变的特点,高抗的水稻品种... 详细信息

水稻原产于中国,作为重要的粮食作物在世界各地广泛种植。由稻瘟病菌(Magnaporthe oryzae)引起的稻瘟病是危害水稻生产的重要病害,在世界水稻主产区均有发生,严重时可能会造成绝收。由于稻瘟病菌生理小种多易突变的特点,高抗的水稻品种经过一段时间的种植会变成感病品种,长时间单一药剂的化学防治也极易成病菌产生抗药性导致稻瘟病的防治十分艰难,因此了解稻瘟病菌生长发育及致病过程中的分子生物学机制十分重要。TOR(Target of rapamycin)途径是真核生物细胞中高度保守的生物学途径,其核心蛋白TOR是是一种蛋白激酶,最早发现是作为一种免疫抑制剂-雷帕霉素(rapamycin)的靶物质。在酵母细胞中TOR的功能通过TORC1和TORC2两种蛋白复合物实现。丝氨酸苏氨酸蛋白激酶Sch9是TORC1下游的效应器,在酵母细胞的胁迫应答,寿命及营养的感受起到重要作用。Sch9的活性对于酵母细胞耐受渗透压胁迫非常重要。本研究对稻瘟病菌野生型菌株Guy11编码丝氨酸苏氨酸蛋白激酶的MoSCH9基因利用同源重组的原理进行敲除并对其生物学功能进行测定与分析,结果发现该基因敲除突变体ΔMosch9生长速率、产孢量均显著下降,有性生殖能力丧失。突变体致病力及侵染菌丝在寄主体内扩展能力均降低。突变体菌株对于细胞壁胁迫,氧化胁迫和渗透压胁迫应答与野生型相比也更加敏感。随后的酵母双杂交实验结果表明MoSch9与稻瘟病菌高渗透压胁迫HOG通路的关键元件MoOsm1互作。我们进一步检测了突变体细胞内细胞壁完整性CWI途径的蛋白MoMps1的磷酸化水平,极其下游转录因子MoMig1和MoSwi6的表达量。结果表明突变体内MoMps1的磷酸化水平上升,其下游转录因子表达量下降。缺氮诱导条件下突变体内MoAtg8的表达量检测实验结果表明突变体自噬较野生型明显下降。以上结果表明MoSCH9基因与稻瘟病菌胁迫应答有关,并在稻瘟病菌的生长、致病过程、无性繁殖及有性生殖过程中都起到重要作用,并且影响稻瘟病菌的细胞自噬。同时MoSCH9基因还影响细胞壁完整性通路得相关基因的表达,造成稻瘟病菌对于胁迫的应答受到影响。

关键词：稻瘟病菌丝氨酸苏氨酸蛋白激酶致病性

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

东方蜜蜂微孢子虫丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶基因的生物信息学分析

引用

安徽农业大学学报 2023年第6期50卷 985-990页

作者：胡颖郭思佳荆欣高旭泽刘小玉顾小雨李琪明徐国钧陈大福郭睿福建农林大学动物科学学院(蜂学学院) 福州350002 福建省蜂疗研究所福州350002

旨在解析东方蜜蜂微孢子虫丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(serine/threonine protein kinase)基因STPK的理化性质和分子特性,并对东方蜜蜂微孢子虫和其他微孢子虫的STPK进行结构域和保守基序预测及系统进化分析,以期丰富东方蜜蜂微孢子虫的STPK... 详细信息

旨在解析东方蜜蜂微孢子虫丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(serine/threonine protein kinase)基因STPK的理化性质和分子特性,并对东方蜜蜂微孢子虫和其他微孢子虫的STPK进行结构域和保守基序预测及系统进化分析,以期丰富东方蜜蜂微孢子虫的STPK信息,并为深入开展STPK的功能研究提供基础。通过Expasy网站上的相关软件预测和分析STPK的理化性质、信号肽、磷酸化位点、二级结构和三级结构。使用MEME软件预测东方蜜蜂微孢子虫和其他物种STPK的保守基序。通过Mega 11.0软件对东方蜜蜂微孢子虫和其他物种的STPK进行氨基酸序列多重比对,并采用邻接法构建基于STPK的系统进化树。结果显示:东方蜜蜂微孢子虫STPK基因含2 595个核苷酸,编码的STPK蛋白含864氨基酸。分子量约为101.08 kDa,分子式为C_(4528)H_(7150)N_(1162)O_(1379)S_(36),脂溶系数为88.48,等电点为5.47;STPK包含40个丝氨酸磷酸化位点,24个酪氨酸磷酸化位点及23个苏氨酸磷酸化位点。东方蜜蜂微孢子虫与其他9个微孢子虫及柑橘凤蝶(Papilioxuthus)的STPK均含有2个相同的结构域(PK_Tyr_Ser_Thr和Pkinase)与5个相同的保守基序(Motif 1, Motif 2, Motif 3, Motif 4和Motif 5)。东方蜜蜂微孢子虫与其他9个微孢子虫的STPK序列一致性介于38.14%~61.06%,东方蜜蜂微孢子虫和蜜蜂微粒子虫的STPK序列一致性最高(61.06%)。东方蜜蜂微孢子虫STPK(AAJ76_500008712)与颗粒病微粒子虫(Nosemagranulosis)STPK(KAF9763807.1)聚为一支,微孢子虫属(KAH9412228.1)、脑炎微孢子虫(KAG5858968.1)和兔脑炎微孢子虫(ECU01_1320)的STPK聚为一支,康氏泰罗汉孢虫(KAF7683612.1)和蝗虫微孢子虫(AAT12343.1)聚为一支。研究结果明确了STPK的理化性质和分子特性,揭示东方蜜蜂微孢子虫和上述其他9种微孢子虫的STPK具有较高的保守性。

关键词：微孢子虫东方蜜蜂微孢子虫丝氨酸苏氨酸蛋白激酶蜜蜂分子特性系统进化

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

磷脂酰肌醇3-激酶/丝氨酸苏氨酸蛋白激酶信号传导通路在慢性阻塞性肺疾病发展“快”“慢”表型中的作用差异研究

引用

实用心脑肺血管病杂志 2019年第7期27卷 51-55页

作者：马红霞王兵新疆医科大学附属中医医院

背景近年来磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(Akt)信号传导通路在慢性阻塞性肺疾病(COPD)炎性反应机制及抗炎治疗中的作用备受临床关注,但其在COPD"快""慢"表型中的作用差异尚不清楚。目的探讨PI3K/Akt信号传导通路在COPD发... 详细信息

背景近年来磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(Akt)信号传导通路在慢性阻塞性肺疾病(COPD)炎性反应机制及抗炎治疗中的作用备受临床关注,但其在COPD"快""慢"表型中的作用差异尚不清楚。目的探讨PI3K/Akt信号传导通路在COPD发展"快""慢"表型中的作用差异。方法选取2017-2018年新疆医科大学附属中医医院呼吸科门诊或住院的COPD患者116例,其中发展"快"表型者26例(A组)、发展"慢"表型者90例(B组);另选取同期新疆医科大学附属中医医院体检中心体检健康者90例作为对照组。比较三组受试者PI3K、磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶(p-PI3K)、Akt、磷酸化丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(p-Akt)mRNA及蛋白相对表达量,血浆炎性细胞因子〔包括白介素4(IL-4)、白介素6(IL-6)、白介素10(IL-10)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)〕水平,肺功能指标〔包括第1秒用力呼气容积占预计值百分比(FEV1%pred)、用力肺活量占预计值百分比(FVC%pred)、第1秒用力呼气容积与用力肺活量比值(FEV1/FVC),改良英国医学研究学会呼吸困难指数(mMRC)评分,慢性阻塞性肺疾病评估测试量表(CAT)评分〕。结果(1)A组和B组患者PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt mRNA及蛋白相对表达量高于对照组,B组患者PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt mRNA及蛋白相对表达量低于A组(P蛋白表达上调有关;与COPD发展"慢"表型相比,COPD发展"快"表型患者肺功能更差,可能与PI3K/Akt信号传导通路调控炎性细胞因子有关。

关键词：慢性阻塞性肺疾病磷脂酰肌醇3-激酶丝氨酸苏氨酸蛋白激酶信号传导肺功能

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

磷脂酰肌醇-3-激酶／丝氨酸苏氨酸蛋白激酶／内皮型一氧化氮合酶信号通路在二氮嗪后处理缺血／再灌注大鼠心肌中的作用

引用

国际麻醉学与复苏杂志 2013年第7期34卷 581-583,587页

作者：赵其宏张颖栾恒飞叶英曾因明龚国丽蚌埠医学院第一附属医院麻醉科 233004 徐州医学院江苏省麻醉学重点实验室&江苏省麻醉与镇痛应用技术重点实验室徐州医学院附属医院ICU

目的研究磷脂酰肌醇-3-激酶，丝氨酸苏氨酸蛋白激酶／内皮型一氧化氮合酶（phosphatidylinositol-3-kiHase／protein serine threonine kinase／endothelial nitric oxide synthase，P13K／Akt／eNOS）信号通路在二氮嗪后处理大鼠在体心肌缺血/再灌注（ischemia／reperfusion，I／R）损伤中的作用。方法40只雄性sD大鼠完全随机分为5组，每组8只：假手术组（s组）、I／R组、二氮嗪组（D组）、P13K抑制剂渥蔓菁霉素组（w组）和二氮嗪＋渥蔓菁霉素组（DW组）。结扎左冠状动脉前降支30min、再开放120min，建立在体心肌I／R损伤模型，s组不结扎。再灌注5min前，5组依次分别经股静脉输入0．1％二甲基亚砜（dimethyl sulfoxide，DMSO）1ml／kg、0．1％DMSO 1ml／kg、二氮嗪7mg/μg、渥蔓菁霉素15μg／kg，DW组于输入二氮嗪前5min输入渥蔓菁霉素；所有药物均输注15min。再灌注末，测定血浆心肌肌钙蛋白I（cardiac troponin I，cTnI）浓度，苏木精咿红（HE）染色观察心肌病理变化，免疫组化分析eNOS的表达情况。结果与s组比较，其余4组cTnI显著增高（JP如．01），心肌明显损伤，eNOS表达增高（P〈0．05或P〈0．01）.与I／R组比较，D组和DW组cTnI[（36．5±5．2）μg/L与（44．5±4．5）μg/L vs（64．7±11．1）μg／L]明显降低（P〈0．01），心肌病理改变减轻，eNOS表达增高[（0．515±0．136）％与（0．394±0．100）％VS（0．241±0．077）％]（P〈0．01）。与D组比较，DW组cTnI明显增高[（44．5±4．5）μg/L VS（36．5±5．2）μg/L]（P〈O．05），心肌损伤加重，eNOS表达降低[（0．394±0．100）％VS（0．515±0．136）％]（P〈0．01）。结论二氮嗪后处理减轻大鼠心肌I／R损伤的作用部分与P13K／Akt／eNOS信号通路激活有关。

关键词：心肌再灌注损伤二氮嗪 1-磷脂酰肌醇3-激酶丝氨酸苏氨酸蛋白激酶内皮型一氧化氮合酶

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

海绵来源的smenospongine通过抑制非小细胞肺癌细胞中的EGFR-Akt-ABCG2信号通路抑制顺铂耐药

引用

上海交通大学学报（医学版） 2022年第8期42卷 997-1007页

作者：廖雅慧刘丽云朱泓睿林厚文严继舟孙凡上海海洋大学海洋生物与组织再生实验室上海201306 上海交通大学医学院附属仁济医院海洋药物实验室上海200127 上海交通大学医学院附属第九人民医院黄浦分院药剂科上海200011

目的·研究海绵来源的倍半萜胺醌类化合物smenospongine(SME)对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞A549及其顺铂耐药株A549/DDP的抗肿瘤活性及作用机制。方法·利用2种细胞(母本细胞A549和顺铂耐药细胞A549/DDP)作为... 详细信息

目的·研究海绵来源的倍半萜胺醌类化合物smenospongine(SME)对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞A549及其顺铂耐药株A549/DDP的抗肿瘤活性及作用机制。方法·利用2种细胞(母本细胞A549和顺铂耐药细胞A549/DDP)作为研究模型,采用CCK-8实验检测2株细胞对一线化学治疗药物的半抑制浓度(half maximum inhibitory concentration,IC50)以验证A549/DDP多药耐药的情况;通过克隆形成实验检测SME对母本及耐药细胞增殖的影响,同时采用Transwell侵袭实验以及蛋白质印迹法(Western blotting)检测SME对A549/DDP上皮间质转化(epithelial to mesenchymal transition,EMT)的影响;应用Western blotting和实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测2株细胞中受到SME调节的多药耐药基因的蛋白和mRNA表达水平,探讨其耐药分子机制;进一步采用Western blotting检测SME对多药耐药蛋白ATP结合盒蛋白G超家族成员2(ATP-binding cassette superfamily G member 2,ABCG2)上游蛋白的影响;通过流式细胞技术检测SME对母本细胞和顺铂耐药株细胞周期的影响,同时应用TUNEL(TdT-mediated dUTP Nick-end labeling)染色以及Western blotting检测SME对2株细胞凋亡的影响。结果·与母本细胞相比,顺铂耐药株A549/DDP细胞对顺铂表现出显著耐药性,同时对多种临床一线肺癌化学治疗药物表现出多药耐药的特征;SME显著抑制A549和A549/DDP的增殖、克隆形成,同时抑制耐药株的EMT;通过筛选多药耐药蛋白发现,SME显著下调ABCG2的蛋白以及mRNA表达;SME可抑制ABCG2上游的表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)/丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(serine/threonine kinase,Akt)信号通路,进而下调ABCG2,并上调FoxO1;SME诱导母本细胞和耐药株细胞周期阻滞在G0/G1期,同时诱导2株细胞凋亡。结论·SME作为抑制NSCLC耐药的新小分子化合物通过抑制EGFR-Akt信号通路,下调ABCG2蛋白、上调FoxO1蛋白,进而抑制A549和A549/DDP的细胞活力,抑制耐药株的EMT,最终促进细胞凋亡。

关键词： smenospongine(SME) 非小细胞肺癌顺铂耐药 ATP结合盒蛋白G超家族成员2 丝氨酸苏氨酸蛋白激酶

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

鱼腥草素钠对慢性阻塞性肺疾病模型大鼠肺组织PI3K、AKT1及mTOR mRNA表达的影响

引用

中国实验动物学报 2018年第1期26卷 8-12页

作者：吴中华闫玲玲杨爱东张海英符胜光杨云翔上海中医药大学上海201203 上海市位育中学上海200231

目的观察鱼腥草素钠对慢性阻塞性肺疾病模型大鼠肺组织中PI3K、AKT1及mTOR mRNA表达的影响,并探讨其作用机制。方法选取Wistar雄性大鼠24只,体重(220±20)g,随机分为正常组、模型组、地塞米松组和鱼腥草素钠组(每组6只)。采用烟熏和脂... 详细信息

目的观察鱼腥草素钠对慢性阻塞性肺疾病模型大鼠肺组织中PI3K、AKT1及mTOR mRNA表达的影响,并探讨其作用机制。方法选取Wistar雄性大鼠24只,体重(220±20)g,随机分为正常组、模型组、地塞米松组和鱼腥草素钠组(每组6只)。采用烟熏和脂多糖气管滴注联合方法建立慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)大鼠模型,采用实时荧光定量聚合酶链反应检测PI3K、AKT1及mTOR mRNA表达,并观察大鼠肺组织病理变化。结果与正常组相比,模型组大鼠肺组织PI3K、AKT1 mRNA表达显著增高(P<0.01,P<0.05),mTOR mRNA表达显著降低(P<0.01);与模型组相比,鱼腥草素钠组和地塞米松组肺组织PI3K、AKT1 mRNA表达显著降低(P<0.01,P<0.05),mTOR mRNA表达显著增高(P<0.01);与地塞米松组相比,鱼腥草素钠组肺组织mTOR mRNA表达显著增高(P<0.05)。病理观察结果显示,与正常组比较,模型组局部肺实变,肺泡腔内大量中性粒细胞浸润,胶原染色显示肺间质纤维组织大量增生;鱼腥草素钠组和地塞米松组肺组织病理改变明显轻于模型组,鱼腥草素钠组和地塞米松组肺组织呈轻度间质性肺炎,仅见少量的纤维组织增生。结论鱼腥草素钠能够减轻慢性阻塞性肺疾病模型大鼠肺组织损伤,其机制可能与其能够下调PI3K、AKT1 mRNA的表达、上调mTORmRNA表达有关。

关键词：鱼腥草素钠慢性阻塞性肺疾病磷脂酰肌醇3激酶丝氨酸苏氨酸蛋白激酶雷帕霉素靶蛋白大鼠

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

阿里红多糖组分对APP/PS1双转基因模型小鼠海马区AKT/GSK3β/Tau/P-tau蛋白表达的影响

引用

天然产物研究与开发 2020年第2期32卷 288-295页

作者：李珍丛媛媛阿依江·哈拜克帕丽达·阿不力孜新疆医科大学药学院乌鲁木齐830011

探究阿里红多糖组分(FOPS-a和FOPS-b)对阿尔茨海默症模型小鼠海马区AKT/GSK3β/Tau/P-tau蛋白表达的影响。实验选用64只3月龄雄性APP/PS1双转基因AD模型小鼠,随机分为模型组、多奈哌齐组(0.65 mg/kg)、阿里红多糖a组分(FOPS-a)与阿里红... 详细信息

探究阿里红多糖组分(FOPS-a和FOPS-b)对阿尔茨海默症模型小鼠海马区AKT/GSK3β/Tau/P-tau蛋白表达的影响。实验选用64只3月龄雄性APP/PS1双转基因AD模型小鼠,随机分为模型组、多奈哌齐组(0.65 mg/kg)、阿里红多糖a组分(FOPS-a)与阿里红多糖b组分(FOPS-b)高、中、低(60、30、15 mg/kg),同月龄野生型C57BL/6J小鼠为正常组,每组8只,各组分别给与药物和生理盐水灌胃给药90天。6月龄时通过跳台、旷场实验检测小鼠行为学的变化,采用尼氏染色观察各组小鼠海马区神经元形态变化,应用RT-PCR法检测小鼠海马区AKT、GSK3β、Tau mRNA转录水平,Western-blot法检测AKT、GSK3β、Tau、P-tau蛋白的表达。结果发现阿里红多糖组分(FOPS-a和FOPS-b)均能明显改善小鼠学习与记忆功能并保护海马区神经元的损伤,上调AKT mRNA转录水平和蛋白表达,下调GSK3β、Tau mRNA转录水平和GSK3β、Tau、P-tau蛋白表达。研究表明阿里红多糖组分(FOPS-a和FOPS-b)通过减少海马区神经元纤维缠结从而保护神经元的损伤,发挥拮抗AD的作用。

关键词：阿里红多糖组分阿尔茨海默病丝氨酸苏氨酸蛋白激酶糖原合成酶激酶-3β 微管相关蛋白Tau

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

欢迎您,

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

欢迎您,

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：