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鸢尾素通过改善下丘脑视前区热敏神经元功能减轻EHS器官损伤的作用及机制研究

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国际麻醉学与复苏杂志 2023年第12期44卷 1272-1280页

作者：李婧范仲敏彭宇亮周子清尹路吴优马宏炜张西京空军军医大学西京医院重症医学科/麻醉与围术期医学科西安710032 空军军医大学基础医学院微生物学与病原生物学教研室西安710032

目的明确鸢尾素改善劳力型热射病(exertional heat stroke,EHS)的作用并探讨相关机制。方法以119只野生型雄性C57BL/6小鼠为研究对象。①将30只小鼠按随机数法分为2组(每组15只):常温对照组(SHE组)和EHS组。SHE组常规训练6 d、休息2 d后... 详细信息

目的明确鸢尾素改善劳力型热射病(exertional heat stroke,EHS)的作用并探讨相关机制。方法以119只野生型雄性C57BL/6小鼠为研究对象。①将30只小鼠按随机数法分为2组(每组15只):常温对照组(SHE组)和EHS组。SHE组常规训练6 d、休息2 d后在(25.0±1.0)℃、(40±5)%湿度的常温环境下运动,EHS组常规训练6 d、休息2 d后在(38.0±1.0)℃、(70±5)%湿度的恒温高湿环境运动舱内运动造模。记录各组小鼠的核心体温、起病及恢复时间、7 d生存率,采用H-E染色观察脑、肝、肾组织病理变化及尼氏染色计算存活细胞数,行为学实验检测自主活动和探索能力。②将18只小鼠按随机数表法分为3组(每组6只):SHE组、EHS组和热习服(heat acclimation,HA)组(HA组)。SHE组、EHS组造模方法见①,HA组在(35.0±1.0)℃、(70±5)%湿度的恒温高湿环境运动舱中进行14 d的运动训练。利用ELISA法检测各组小鼠血清鸢尾素浓度。③将63只小鼠按随机数表法分为3组(每组21只):生理盐水+EHS组(NS+EHS组)、鸢尾素+EHS组(Irisin+EHS组)、HA+EHS组。NS+EHS组在EHS造模前7 d开始给予生理盐水注射,Irisin+EHS组在造模前7 d开始给予鸢尾素注射,Irisin+EHS组在造模前7 d开始给予鸢尾素注射。记录各组核心体温、起病及恢复时间、7 d生存率,采用H-E染色观察组织病理变化,行为学实验检测自主活动和探索能力。④将8只小鼠按随机数表法分为2组(每组4只):NS+EHS和Irisin+EHS组(干预方式见③)。2组分别在造模30 min、60 min时取脑组织采用免疫荧光染色检测神经元c-Fos表达情况。电生理检测鸢尾素灌流前后下丘脑视前区(hypothalamic preoptic area,POA)热敏神经元兴奋性突触后电流(excitatory post-synaptic current,EPSC)的频率和振幅变化。结果与SHE组比较,EHS组平均在70 min发生热射病,核心体温升高,7 d生存率降低(P区域的次数和时间减少(P区域的次数和时间增加(P0.05)。与NS+EHS组造模30 min比较,NS+EHS组造模60 min时POA区c-Fos阳性细胞数减少(P前比较,鸢尾素灌流后POA热敏神经元EPSC频率和振幅减少(P<0.05)。结论鸢尾素可通过稳定POA热敏神经元电活动、减轻其兴奋性损伤,提高EHS生存率并改善脑功能,模拟HA对EHS的保护作用。

关键词：劳力型热射病热习服鸢尾素下丘脑视前区热敏神经元

去甲肾上腺素对冷适应大鼠下丘脑脑片视前区温敏神经元的影响

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生理学报 1997年第6期49卷 666-670页

作者：孙久荣马永超许兆辉赵文剑蔡益鹏北京大学生命科学学院生理及生物物理系北京100871

本工作用离体脑片的方法，观测了去甲肾上腺素（NE）对冷适应大鼠下丘脑视前区（POAH）温敏神经元自发放电活动的影响。结果表明：冷适应大鼠热敏神经元（WS），冷敏神经元（CS）和非温敏神经元（TI）对NE的敏感性较室温下生活的大鼠显... 详细信息

本工作用离体脑片的方法，观测了去甲肾上腺素（NE）对冷适应大鼠下丘脑视前区（POAH）温敏神经元自发放电活动的影响。结果表明：冷适应大鼠热敏神经元（WS），冷敏神经元（CS）和非温敏神经元（TI）对NE的敏感性较室温下生活的大鼠显著提高（对NE反应的阈浓度显著降低）；与正常室温组大鼠相比，冷适应大鼠WS中受NE兴奋的神经元比数降低，部分WS出现抑制反应；NE引起抑制反应的CS比数降低，部分CS出现兴奋性反应；而TI中受NE兴奋和抑制的比数皆升高，无反应的神经元比数减少。

关键词：冷适应下丘脑视前区温敏神经元去甲肾上腺素

去卵巢后雌性大鼠下丘脑视前区NOS阳性神经元形态学和突触素表达的变化

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解剖学杂志 2004年第2期27卷 139-142页

作者：赵岫峰陈娟潘三强韩辉吕来清宿宝贵长春医学高等专科学校长春130000 暨南大学医学院

目的 :为解释围绝经期的精神、神经症状提供实验依据。方法 :采用免疫细胞化学方法显示去卵巢雌性大鼠下丘脑视前内侧区 (MPA)和视前外侧区 (LPA)内NOS阳性神经元 ,形态学改变以及突触素表达。结果 :( 1 )去卵巢组和对照组大鼠的视前内... 详细信息

目的 :为解释围绝经期的精神、神经症状提供实验依据。方法 :采用免疫细胞化学方法显示去卵巢雌性大鼠下丘脑视前内侧区 (MPA)和视前外侧区 (LPA)内NOS阳性神经元 ,形态学改变以及突触素表达。结果 :( 1 )去卵巢组和对照组大鼠的视前内、外区内可见大量NOS阳性神经元 ;( 2 )去卵巢动物的下丘脑内NOS阳性神经元突起长度比对照组的明显变短 ,分支明显变少 ;( 3 )去卵巢组动物下丘脑内突触素表达比对照组的明显减少。结论 :大鼠去卵巢后 ,由于雌激素分泌减少 ,导致了NOS阳性神经元的突起减少和突触减少 ,结果NO介导的神经元信号传导失常 ,这些变化可能是引发围绝经期的精神、神经症状的原因之一。

关键词：雌性大鼠下丘脑视前区 NOS阳性神经元形态学突触素免疫细胞化学围绝经期综合征

大鼠下丘脑视前区前胸腺素α_1-mRNA的表达

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解剖学报 2000年第Z1期31卷 61-63,139页

作者：何威王笑海韩笑宁关晓伟张丽雁中国医科大学组织学胚胎学教研室沈阳110001 辽宁省基础医学研究所解剖学教研室沈阳110005

目的探讨胸腺素对下丘脑的作用机制。方法ＲＴ－ＰＣＲ和原位杂交组织化学技术。结果ＲＴ－ＰＣＲ检测结果表明，大鼠视前区有前胸腺素α１－ｍＲＮＡ的表达；原位杂交检测结果表明，下丘脑视前区大细胞核、室周核及视交叉上核部分... 详细信息

目的探讨胸腺素对下丘脑的作用机制。方法ＲＴ－ＰＣＲ和原位杂交组织化学技术。结果ＲＴ－ＰＣＲ检测结果表明，大鼠视前区有前胸腺素α１－ｍＲＮＡ的表达；原位杂交检测结果表明，下丘脑视前区大细胞核、室周核及视交叉上核部分神经元表达前胸腺素α１－ｍＲＮＡ。此外，在第三脑室壁附近的小胶质细胞和皮层部分中、小型锥体细胞也观察到前胸腺素α１－ｍＲＮＡ的阳性信号。结论大鼠下丘脑视前区以局部分泌形式产生前胸腺素α１，提示前胸腺素α１可能参与下丘脑功能的调节。

关键词：前胸腺素α1-mRNA 下丘脑视前区 RT-PCR 原位杂交大鼠

大麻素受体拮抗剂影响下丘脑视前区去甲肾上腺素释放治疗脓毒症低血容量

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中国危重病急救医学 2009年第5期21卷 273-273页

作者：白慧颖(编译)

脂多糖（LPS）刺激肿瘤坏死因子-α（TNF—α）及其他血管活性物质释放导致血压降低。目前研究表明，炎症信号通过迷走神经传导至中枢神经，下丘脑视前区（POA）可能与感染性休克的发生；通过抑制POA肾上腺素α受体、降低迷走神经活性... 详细信息

脂多糖（LPS）刺激肿瘤坏死因子-α（TNF—α）及其他血管活性物质释放导致血压降低。目前研究表明，炎症信号通过迷走神经传导至中枢神经，下丘脑视前区（POA）可能与感染性休克的发生；通过抑制POA肾上腺素α受体、降低迷走神经活性，可治疗LPS导致的低血压。由于下丘脑表达大麻素-1（CB1）受体合成，研究人员设想CB1受体可能参与了内毒素血症时动脉血压的调节。研究结果发现，

关键词：下丘脑视前区受体拮抗剂去甲肾上腺素大麻素低血容量治疗脓毒症血管活性物质释放

下丘脑视前区TRPM2热敏神经元引发围绝经期潮热的研究

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解剖学杂志 2021年第S1期44卷 83-83页

作者：孙艳荣杨齐岳秦丽华王珂王文娟王子月北京大学医学部基础医学院人体解剖与组织胚胎学系北京100000

女性围绝经期低雌激素状态下,下丘脑视前区(POA)体温调节中枢产热和散热失衡引发潮热。体温调节中枢主要是依靠热敏神经元来调节体温的,并且其中的谷氨酸能和GABA能神经元分别参与散热和产热过程,最新的研究提出瞬时受体电位M2型(TRPM2... 详细信息

女性围绝经期低雌激素状态下,下丘脑视前区(POA)体温调节中枢产热和散热失衡引发潮热。体温调节中枢主要是依靠热敏神经元来调节体温的,并且其中的谷氨酸能和GABA能神经元分别参与散热和产热过程,最新的研究提出瞬时受体电位M2型(TRPM2)可以作为热敏神经元的特异性标记物和关键功能蛋白。但低雌激素状态下POA区TRPM2热敏神经元异常及其中谷氨酸能和GABA能神经元的比例变化是否为引发围绝经期潮热的关键因素尚未阐明。本实验采用40只成年雌性TRPM2-Cre小鼠,随机分为假手术(SHAM)组和去卵巢(OVX)组。随后使用化学遗传学方法特异性激活或抑制POA区TRPM2热敏神经元,同时红外热像仪记录小鼠体表温度,采用RNA Scope技术检测TRPM2热敏神经元中谷氨酸能和GABA能神经元所占的比例。

关键词：下丘脑视前区热敏神经元体温调节中枢方法特异性 GABA能神经元围绝经期潮热体表温度红外热像仪

酵母和脂多糖诱导的小鼠不同体温变化的调控机制探究

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酵母和脂多糖诱导的小鼠不同体温变化的调控机制探究

作者：梁艺潇山东大学

学位级别：硕士

研究背景:肥胖已成为全球范围内重要的公共健康问题,是非传染性疾病的主要风险因素之一,因此,探究肥胖的成因及干预措施成为迫在眉睫的任务。热量摄取过量或消耗不足所造成的能量不平衡,是造成肥胖的根本原因。既往的减肥重点是增加运... 详细信息

研究背景:肥胖已成为全球范围内重要的公共健康问题,是非传染性疾病的主要风险因素之一,因此,探究肥胖的成因及干预措施成为迫在眉睫的任务。热量摄取过量或消耗不足所造成的能量不平衡,是造成肥胖的根本原因。既往的减肥重点是增加运动和减少摄食,但由于依从性差和再复发风险高,使得实际结局并不理想。目前,药理学干预肥胖已成为新的重要方向,通过药物或其他方法抑制脂肪吸收或增加能量消耗以达到减肥目的。而通过提高机体基础代谢和适应性产热是最有效和最关键的增加能量消耗的途径之一,其中升高体温和降低环境温度以增加基础代谢和适应性产热导致的能量消耗是有效减肥方法之一。有研究表明,核心温度每升高1℃,基础代谢率增加10%-13%;环境温度每降低1℃,机体需要消耗46.3 kcal/m2/d。因此,体温调控机制的探究对于寻找干预肥胖的新思路和新途径显得尤为重要。感染引起的发热反应是机体在应对外界环境刺激时大脑调控体温升高的结果,在这个过程中,各系统活动增加,基础代谢消耗和适应性产热均显著增加。下丘脑视前区(the Preoptic area,POA)是体温调节中心,主导因环境温度改变和感染引起的体温调控,其中内侧视前区(the medial Preoptic area,MPA)、外侧视前区(the lateral Preoptic area,LPO)、腹内侧视前区(the ventral medial Preoptic area,VMPO)、中位视前核(the median Preoptic nucleus,MnPO)、内视前区(the medial Preoptic area,MPO)和腹侧视前区(the ventrolateral Preoptic area,VLPO)参与其中。目前认为不同病原体引起的发热在外周和中枢的机制是相似的,但临床上发现细菌感染可导致短暂的高热或低体温,真菌感染则引起持久反复的低水平发热,未发现低体温现象。临床观察和实验研究均表明细菌引起的发热向低体温这一转变与低环境温度相关,并且是预后差的征兆。然而为什么真菌性发热容易持久反复,真菌感染是否也会依赖环境温度引起低体温,细菌和真菌引起体温表现差异的机制是什么,均不清楚。这些体温差异调控机制的解析有助于理解体温调控的过程,为干预肥胖提供新的靶点和思路。研究方法:1.实验动物:C57BL/6N雄性小鼠(八周),12 h:12 h的暗-光环境、自由饮食、22℃和50%湿度条件下适应一周,所有注射统一在早晨9:00。2.动物模型:50μg/kg革兰氏阴性细菌脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)溶液经尾静脉注射以诱导细菌感染性体温变化;20%安琪酵母混悬液以10 mL/kg剂量经颈背部皮下注射以诱导真菌感染性体温变化,分为实验前禁食12 h和全程自由饮食两组。对照组用相同方式注射同体积的生理盐水。实验动物分为LPS组、酵母组、盐水组。3.测温方法:直肠测温仪、腹腔微芯片遥测、红外成像仪分别监测小鼠直肠温度、腹腔核心温度、背部皮肤和尾部温度及肩胛区产热情况。4.免疫印迹技术:检测小鼠肩胛区棕色脂肪组织解耦连蛋白(Uncoupling protein-l,UCP-1)和酪氨酸羟化酶(Tyrosine Hydroxylase,TH)的表达水平,以评估棕色脂肪组织的产热情况。5.发热率的计算:汇总所有LPS和酵母诱导体温变化的结果,比较三种不同的测温方法对LPS和酵母致热性的影响。6.分别在30℃、26℃和22℃环境温度下,比较LPS和酵母诱导小鼠的体温变化。7.免疫组织化学染色:体温升至最高或最低点时,完整剥离小鼠脑组织,采集4个30μm厚的冠状脑切片(Bregma 0.38 mm-0.02 mm),监测下丘脑POA区c-Fos的表达情况,并用Adobe photoshop和Image Fiji等软件将脑图谱合并到全脑染色图,划分大脑区域,计数下丘脑POA区及其各核团的c-Fos+细胞数量。8.统计学处理:使用IBM SPSS 22.0软件统计、分析实验数据。采用双尾非配对学生t检验对不同组进行比较。*P区温度结果发现:LPS和酵母诱

关键词：体温调控脂多糖酵母环境温度下丘脑视前区

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酵母和脂多糖诱导小鼠不同的发热反应

生命的化学 2023年第4期43卷 610-621页

作者：梁艺潇许阳占汇东王静吴珊珊葛悦萍彭力管庆波何钊山东大学济南250012 山东省立医院内分泌科山东省内分泌与脂代谢重点实验室山东省内分泌与代谢病研究所山东省内分泌与代谢性疾病防治工程实验室济南250021

真菌感染致持久反复的低热,而细菌感染致高热或低体温,但这种差异性发热机理不清。本文使用酵母和脂多糖(LPS)建立小鼠发热模型,用不同测温方法(直肠测温、红外测温、腹部遥测)和在不同温度(30℃、26℃和22℃)下分别比较酵母和脂多糖致... 详细信息

真菌感染致持久反复的低热,而细菌感染致高热或低体温,但这种差异性发热机理不清。本文使用酵母和脂多糖(LPS)建立小鼠发热模型,用不同测温方法(直肠测温、红外测温、腹部遥测)和在不同温度(30℃、26℃和22℃)下分别比较酵母和脂多糖致热效果及下丘脑视前区(POA)神经元活性。结果发现,酵母诱导发热不被环境温度变化和操作刺激影响;酵母和LPS分别激活了不同的POA神经元,酵母和LPS诱导的发热与腹内侧视前区(VMPO)相关,而内侧视前区(MPO)与LPS诱导低体温相关。本研究结果为阐明真菌和细菌诱导不同发热反应机制研究提供了基础。

关键词：细菌性发热真菌性发热脂多糖酵母环境温度下丘脑视前区红外测温法

γ-氨基丁酸能神经元参与热应激的初步形态研究

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中华神经医学杂志 2010年第4期9卷 363-365页

作者：田季雨胡安恒张军马磊黄远桂第四军医大学西京医院神经内科西安710033 解放军第五一八医院内科西安710032

目的从形态上证实γ-氨基丁酸（GABA）神经元参与脊髓中间外侧柱胆碱能调节反应，参与热应激时下丘脑对高温调节反应。方法出生后6周的C57BL小鼠按随机数字表法分为正常对照组和热刺激组，取颈胸端脊髓及下丘脑组织切片，采用免疫组化... 详细信息

目的从形态上证实γ-氨基丁酸（GABA）神经元参与脊髓中间外侧柱胆碱能调节反应，参与热应激时下丘脑对高温调节反应。方法出生后6周的C57BL小鼠按随机数字表法分为正常对照组和热刺激组，取颈胸端脊髓及下丘脑组织切片，采用免疫组化双标记方法观察小鼠胸脊髓中间外侧柱胆碱能神经元标志物胆碱乙酰转移酶（CHAT）和谷氨酸脱羧酶65（GAD65）的免疫标记情况以及热应激后下丘脑TRPV4及GAD65分别和c-FOS的免疫双标记。结果中间外侧柱交感神经节前神经元存在ChAT和GAD65免疫荧光双标记。热激活后，下丘脑热敏感神经元与GABA能神经元存在双标记。结论GABA能神经元可能参与中间外侧柱交感神经节前胆碱能神经元调节，以及参与下丘脑对高温的反应。

关键词： GABA能神经元热应激下丘脑视前区