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作者：赵天星吉林农业大学

学位级别：硕士

邻苯二甲酸酯(Phthalate esters,PAEs),能提高塑料制品的柔韧性、耐用性和延展性,因此作为增塑剂被大量添加到塑料制品中。邻苯二甲酸酯是一类常见的环境雌激素,可引起人体内分泌紊乱,激发潜在的癌细胞和致突变性,对人体的健康有严重的... 详细信息

邻苯二甲酸酯(Phthalate esters,PAEs),能提高塑料制品的柔韧性、耐用性和延展性,因此作为增塑剂被大量添加到塑料制品中。邻苯二甲酸酯是一类常见的环境雌激素,可引起人体内分泌紊乱,激发潜在的癌细胞和致突变性,对人体的健康有严重的危害。邻苯二甲酸酯容易从塑料中迁移至食品中,存在一定的食品安全风险。食用药菌因其营养价值和保健作用广受消费者欢迎,三萜及甾醇是主要化学成分,具有抗肿瘤、抗炎等作用,是食药用菌品质评价的重要指标之一。食药用菌产品安全问题同样备受关注,近期邻苯二甲酸酯的含量也被关注。因此在本文中(1)拟建立食药用菌中邻苯二甲酸酯的超高效液相-串联质谱检测新方法;(2)改进三萜及甾醇的紫外分光光度检测法;(3)收集菌物样品进行验证。综述部分介绍了邻苯二甲酸酯、三萜及甾醇及其检测方法的国内外研究现状。研究内容分为三个章节,包括利用超高效液相-串联质谱(UPLC-MS/MS)检测食药用菌中23种邻苯二甲酸酯类化合物方法的建立;利用所建方法对市场中购得的14种食药用菌进行邻苯二甲酸酯检测分析;利用优化改进的紫外-可见分光光度法检测36种菌物中三萜及甾醇含量。研究部分的第一章中优化了不同流动相、柱温、色谱柱和超滤膜等影响峰形及各目标物响应值大小的关键因素,通过增添捕集柱对液相系统产生的空白干扰进行排除,利用UPLC-MS/MS的Intellistart调谐程序选择各目标物质的最优质谱检测条件。结果表明流动相为甲醇-水、柱温为35℃、选择苯基柱CSHTM Phenyl-Hexyl、选择PTFE超滤膜、增添捕集柱Ghost-Buster HP Column后邻苯二甲酸二异壬酯(DINP)、邻苯二甲酸二壬酯(DNP)、邻苯二甲酸二正丁酯(DBP)、邻苯二甲酸二异丁酯(DIBP)、邻苯二甲酸二辛酯(DEHP)、邻苯二甲酸二正辛酯(DNOP)、邻苯二甲酸二戊酯(DPP)、邻苯二甲酸二异戊酯(DIPP)、邻苯二甲酸二癸酯(DNDP)、邻苯二甲酸二乙酯(DEP)、邻苯二甲酸二环己酯(DCHP)、邻苯二甲酸二丙酯(DPrP)、邻苯二甲酸异丙酯(DIPrP)、邻苯二甲酸二苯酯(DPhP)、邻苯二甲酸二正己酯(DNHP)、邻苯二甲酸二甲氧乙酯(DMEP)、邻苯二甲酸二丙烯酯(DAP)、邻苯二甲酸丁基苄酯(BBP)、邻苯二甲酸二甲酯(DMP)、邻苯二甲酸正辛正癸酯(ODP)、邻苯二甲酸二异辛酯(DIOP)、邻苯二甲酸二异葵酯(DIDP)、邻苯二甲酸二苄酯(DBzP)共23种邻苯二甲酸酯的检测条件达到最优,结合调谐程序优化锥孔电压和碰撞能量,选择相对丰度较高、出峰稳定的子离子碎片,最终建立了一种快速、准确的食药用菌中23种邻苯二甲酸酯类化合物UPLC-MS/MS检测方法。23种邻苯二甲酸酯类化合物在一定浓度范围内,线性关系良好,相关系数R2均大于0.9952,加样回收率为79.4%～104.3%,RSD为4.3%～10.7%,定量限(S/N≥10)0.2μg/kg～8.0μg/kg低于国家标准限制,为食药用菌中邻苯二甲酸酯含量检测提供了一种新的技术手段。研究部分的第二章中对从市场购买的14种食药用菌进行了邻苯二甲酸酯含量测定。结果表明14种食药用菌中元蘑Sarcomyxaedulis、香菇Lentinula edodes、榆黄蘑Pleurotus citrinopileatus、滑子蘑Pholiota nameko、鹿茸菇Lyophyllum decastes、银耳 Tremellafuciformis和木耳Auricularia heimuer均检测出邻苯二甲酸二丁酯DBP和邻苯二甲酸二异丁酯DIBP,且DBP含量均超过国家标准限量0.3mg ·kg-1,其中木耳Auricularia heimuer和银耳Tremella fuciformis还检测出邻苯二甲酸二乙酯DEP为0.05mg·kg-1和0.02mg·kg-1。研究部分的第三章中参照2020年版《中华人民共和国药典》中菌物药灵芝的三萜及甾醇含量检测方法并进行了优化,利用改进后的方法对收集的36种菌物样品进行三萜及甾醇含量测定。结果表明波长扫描后发现齐墩果酸的最大吸收波长为555nm,高于2020年版《中华人民共和国药典》中的546nm,在一定浓度范围内,线性关系良好,相关系数R2为0.9995,精密度和重复性良好,加样平均回收率为99.24%,RSD为1.28%,验证了利用改进后的紫外-可见分光光度法检测菌物中三萜及甾醇含量的可行性。多孔菌类菌物中粗毛纤孔菌Inonotus hispidus和绣球菌Sparassis crispa的三萜及甾醇含量达到3.36%和3.27%,明显高于其他类群菌物,而且在美发网菌Stemonitis splendens、鹅绒菌Ceratiomyxa fruticulosa和煤绒菌Fuligo septica 3种黏菌中也检测到三萜及甾醇含量

关键词：食药用菌邻苯二甲酸酯三萜及甾醇超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)

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三种桑黄类真菌多指标活性成分和有害重金属含量测定

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菌物学报 2023年第4期42卷 1023-1036页

作者：长城郑海婷孙孟琪李滢倩于文杰沈璐姜权范宇光蔡凤坤长白山科学研究院、长白山生物群落与生物多样性吉林省联合重点实验室吉林延边133613 东北林业大学化学化工与资源利用学院、林业植物生态学教育部重点实验室黑龙江哈尔滨150040 长白山保护开发区水资源管理服务中心吉林延边133613 长春科技学院吉林省长白山野生资源研究院吉林长春130600 吉林省产品质量监督检验院吉林长春130103 海南医学院药学院、海南省热带药用植物研究与开发重点实验室海南海口571199

目前桑黄市场产品趋向多样化,产业蓬勃发展,越来越多的省份颁布了桑黄质量标准或炮制标准,对桑黄产品质量控制起到了较好的规范和指导作用。同时,由于尚无国家级桑黄质量控制标准,各省桑黄质控评价指标和测定方法存在差异,不利于桑黄品... 详细信息

目前桑黄市场产品趋向多样化,产业蓬勃发展,越来越多的省份颁布了桑黄质量标准或炮制标准,对桑黄产品质量控制起到了较好的规范和指导作用。同时,由于尚无国家级桑黄质量控制标准,各省桑黄质控评价指标和测定方法存在差异,不利于桑黄品质的横向比较和市场监管。此外,各省级桑黄标准中未对有害重金属元素进行限定。针对以上问题,本研究选定长白山地区3种桑黄类真菌子实体为研究对象,建立并优化“一提多测”方法优化提取工艺,高效测定桑黄中多糖、总黄酮、总酚、三萜和甾醇多指标性物质含量;对目前省级标准中NaNO2-Al(NO_(3))_(3)-NaOH法与AlCl_(3)法两种桑黄总黄酮测定方法进行比较,择优选之。参考《中华人民共和国药典》2020版方法,采用微波消解-电感耦合等离子体质谱法(inductively coupled plasma mass spectrometry,ICP-MS)测定铅、镉、砷、汞和铜含量。结果显示,所用测定方法准确且满足方法学验证需求;总黄酮含量测定选择方法稳定性更好的AlCl_(3)法;人工栽培瓦尼桑黄Sanghuangporus vaninii活性物质含量高,有害重金属元素含量低,作为目前市场上应用广泛的桑黄类真菌质量有一定保证;鲍姆桑黄Sanghuangporus baumii活性物质含量较低;蒙古锈迷孔菌Porodaedalea mongolica活性成分较高,铅、铜含量明显高于其他桑黄样品。未来桑黄类真菌应用与研究中,应注意监测活性成分与有害重金属含量。本研究建立的评测方法可为桑黄科学、高效质量评价提供参考。

关键词：多糖总黄酮总酚三萜及甾醇

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灵芝子实体适宜采收期研究

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特产研究 2022年第5期44卷 49-52,57页

作者：许琳王胜刘勤来刘惠军胡清秀周亚杰闫梅霞中国农业科学院特产研究所吉林长春130112 桦甸市农业综合行政执法大队吉林桦甸132400 桦甸市农业技术推广中心吉林桦甸132400 中国农业科学院农业资源与农业区划研究所北京100081 南京中科药业有限公司江苏南京211100

为探索吉林地区赤芝子实体的最佳采收期,本研究以吉林地区栽培的3个赤芝(Ganoderma lucidum)菌株为材料,在子实体生长后期,分别对其3个采收时间样品的干鲜重、含水量、多糖和三萜及甾醇含量进行研究。结果表明,随着采收时间的延后,子实... 详细信息

为探索吉林地区赤芝子实体的最佳采收期,本研究以吉林地区栽培的3个赤芝(Ganoderma lucidum)菌株为材料,在子实体生长后期,分别对其3个采收时间样品的干鲜重、含水量、多糖和三萜及甾醇含量进行研究。结果表明,随着采收时间的延后,子实体样品干鲜重变化规律不明显,含水量和多糖含量均呈现先升高后降低趋势,三萜及甾醇含量呈现逐渐降低趋势。综合分析表明,吉林地区以收获孢子粉为主的赤芝子实体的最佳采收时间建议为9月22日左右。

关键词：赤芝采收期多糖三萜及甾醇

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不同种的灵芝醇提物对肝癌细胞增殖的抑制作用

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食用菌学报 2018年第2期25卷 121-125页

作者：刘宇苏海国周勤梅李梦婷郭力戴鸥成都中医药大学药学院中药材标准化教育部重点实验室中药资源系统研究与开发利用省部共建国家重点实验室培育基地四川成都611137

为探讨7种不同种的灵芝中三萜及甾醇含量及子实体醇提物对人肝癌细胞HepG2和SMMC-7721增殖的抑制作用,采用紫外-可见分光光度法测定三萜及甾醇含量,采用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)法测定不同种的灵芝子实体醇提物... 详细信息

为探讨7种不同种的灵芝中三萜及甾醇含量及子实体醇提物对人肝癌细胞HepG2和SMMC-7721增殖的抑制作用,采用紫外-可见分光光度法测定三萜及甾醇含量,采用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)法测定不同种的灵芝子实体醇提物对肝癌细胞增殖的抑制效果。结果表明:松杉灵芝(Ganoderma tsugae)、黄边灵芝(G.luteomarginatum)、赤芝(G.lucidum)、紫芝(G.sinense)、无柄灵芝(G.resinaceum)、无柄紫灵芝(G.mastoporum)、皱盖假芝(Amauroderma rude)三萜及甾醇含量依次降低,除无柄紫灵芝和皱盖假芝外,其余5种的含量均符合《中华人民共和国药典》的要求;7种灵芝的子实体醇提物均具有抑制HepG2细胞增殖的作用,半抑制率(IC_(50))分别为102.12、143.84、92.17、121.11、92.74、163.11、40.25μg/mL;对于SMMC-7721细胞,除皱盖假芝具有较小的抑制作用外,IC_(50)为166.21μg/mL,其余6种均无明显的抑制作用。7个种中皱盖假芝对肝癌细胞增殖的抑制作用效果最好,但其三萜及甾醇含量却最低,因此推测皱盖假芝的抗肿瘤活性成分可能除三萜及甾醇外还包含其它成分。

关键词：灵芝三萜及甾醇肝癌细胞细胞增殖抑制

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不同品种灵芝多指标的质量评价研究

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中药材 2018年第12期41卷 2847-2855页

作者：姜涛施枝江姚艺新罗安黄发军康美药业股份有限公司广东普宁515300

目的:以浸出物、灵芝多糖、三萜及甾醇和铅(Pb)、镉(Cd)、汞(Hg)、铜(Cu)、砷(As)为指标综合评价紫芝、赤芝、薄树芝的质量。方法:分别从贵州、安徽、海南收集18批紫芝、35批赤芝、14批薄树芝样品,建立测定灵芝多糖、三萜及甾醇的紫外... 详细信息

目的:以浸出物、灵芝多糖、三萜及甾醇和铅(Pb)、镉(Cd)、汞(Hg)、铜(Cu)、砷(As)为指标综合评价紫芝、赤芝、薄树芝的质量。方法:分别从贵州、安徽、海南收集18批紫芝、35批赤芝、14批薄树芝样品,建立测定灵芝多糖、三萜及甾醇的紫外分光光度法和测定5种重金属元素含量的ICP-MS法,测定其中的含量,运用ANVON单因素方差分析法、主成分分析法、曲线估计法综合比较这3种灵芝的差异,并研究其相关性。结果:浸出物的含量大小顺序为薄树芝>赤芝>紫芝,灵芝多糖含量大小顺序为赤芝>薄树芝>紫芝,三萜及甾醇含量大小为赤芝=薄树芝>紫芝。浸出物、灵芝多糖、三萜及甾醇的主成分分析综合得分为薄树芝>赤芝>紫芝。灵芝中5种重金属元素的含量大多数符合相关规定。结论:从化学成分的角度来看,紫芝的质量最差,而赤芝和薄树芝的质量较好,且二者之间的差异不明显;浸出物与综合指标的一致性较好。从安全性的角度考虑,赤芝的安全性最高,其次是薄树芝,最后是紫芝,其中Cd对重金属安全性方面的影响最大。

关键词：灵芝不同品种灵芝多糖三萜及甾醇重金属元素质量评价

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不同来源灵芝孢子粉多指标质量评价

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食品与药品 2021年第6期23卷 556-562页

作者：常馨月刘阳胡美赓米晓俞月路娟陈曦赵丹丁自勉中国医学科学院药用植物研究所北京100193 安徽省衡济堂健康科技有限公司安徽六安242232

目的以多糖、三萜及甾醇、重金属元素含量为指标评价不同来源灵芝孢子粉质量。方法采用紫外-可见分光光度法及电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)分别测定多糖、三萜及甾醇、重金属元素含量。分析不同树种及采收期灵芝孢子粉的含量差异规律... 详细信息

目的以多糖、三萜及甾醇、重金属元素含量为指标评价不同来源灵芝孢子粉质量。方法采用紫外-可见分光光度法及电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)分别测定多糖、三萜及甾醇、重金属元素含量。分析不同树种及采收期灵芝孢子粉的含量差异规律。结果桦树样品及八月上旬采收样品中多糖含量较高,桑树样品及九月中下旬采收的样品中三萜及甾醇含量较高,不同树种及采收期样品重金属含量均符合限量要求。结论灵芝孢子粉可考虑采用桑树或白杨树树种进行栽培,于九月中下旬采收。

关键词：灵芝孢子粉多糖三萜及甾醇重金属元素质量评价

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分光光度法测定破壁灵芝孢子粉中三萜类化合物的含量

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现代食品 2021年第23期6卷 188-190页

作者：施慧君吴韵瑶袁筱怡吴小玲钟小红广东省食品安全学会广东广州510100

目的:建立破壁灵芝孢子粉中三萜及甾醇含量的测定方法。方法:以齐墩果酸为对照品,用5%香草醛冰醋酸、高氯酸显色,在546 nm波长处测定样品吸光度。结果:齐墩果酸在0.01834~0.0917 mg·mL^(-1)线性关系良好,回归方程为y=7.54560x-0.01161... 详细信息

目的:建立破壁灵芝孢子粉中三萜及甾醇含量的测定方法。方法:以齐墩果酸为对照品,用5%香草醛冰醋酸、高氯酸显色,在546 nm波长处测定样品吸光度。结果:齐墩果酸在0.01834~0.0917 mg·mL^(-1)线性关系良好,回归方程为y=7.54560x-0.01161,相关系数R^(2)=0.99954,回收率为95.52%~101.29%,均值为98.55%,RSD为2.5%,方法重复性试验测定样品含量值范围为3.66%~3.85%,均值为3.76%,RSD为1.9%。结论:该方法操作简便、快速,结果稳定,重现性好,适用于破壁灵芝孢子粉中三萜及甾醇含量的测定。

关键词：破壁灵芝孢子粉分光光度法齐墩果酸三萜及甾醇

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