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β—葡萄糖醛酸酶测定对肺癌鉴别诊断的意义

中华临床医药杂志（北京） 2001年第12期2卷 18-19页

作者：于笑难杨波等沈阳军区总医院110015

目的：研究β-葡萄糖醛酸酶（β-GCD）对肺癌诊断的临床意义。方法：本文采用ELISA法对54例肺疾病患者中肺癌26例，肺良性疾病28例血清、胸水中β-葡萄糖醛酸酶水平及癌胚抗原（CEA）进行测定，并与正常对照组比较。结果：肺癌组血清β-... 详细信息

目的：研究β-葡萄糖醛酸酶（β-GCD）对肺癌诊断的临床意义。方法：本文采用ELISA法对54例肺疾病患者中肺癌26例，肺良性疾病28例血清、胸水中β-葡萄糖醛酸酶水平及癌胚抗原（CEA）进行测定，并与正常对照组比较。结果：肺癌组血清β-GCD水平高于肺良性疾病组和正常对照组（P<0.01)；胸水中β-GCD水平高血清（P<0.05）。肺癌组中β-GCD的阳性检出率（76.9%)高于（57.7%）。结论：血清、胸水中β-GCD水平的测定对肺癌的鉴别诊断具有意义。

关键词： β-葡萄糖醛酸酶测定肺癌鉴别诊断癌胚抗原

肝胆系统β-葡萄糖醛酸酶与结石形成关系的实验研究

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中华外科杂志 1990年第4期28卷 250-250页

作者：肖路加李宁李立陈世玮杨光华肖邦良高巽坤华西医科大学肝胆胰疾病研究室华西医科大学病理解剖学教研室华西医科大学微生物学与免疫学教研室

以脓性胆管炎和胆红纱结石病的动物模型(中华外科杂志 1985;23:399)为实验对象,对兔胆道成石过程,其肝胆系统的β-葡萄糖醛酸酶(B-G)活性、组织化学和超微结构变化进行了系统动态观察,以探索胆红素结石形成的病理生理学机理。

关键词：肝胆系统 β-葡萄糖醛酸酶结石

血清β-葡萄糖醛酸酶测定在早期肝癌诊断的意义

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中国组织化学与细胞化学杂志 2000年第4期9卷 422-424页

作者：张弘郑锐杨波朱善德于安民中国医科大学基础医学院病理解剖学教研室第一临床学院呼吸内科沈阳110001 沈阳军区总医院肝胆外科沈阳110015

研究血清 β-葡萄糖醛酸酶 (β- G)活性测定对早期肝癌的临床意义。用 EL ISA技术 ,测定早期肝癌患者血清 β- G活性 ,并对早期肝癌患者治疗前、后血清 β- G活性变化进行检测。结果表明早期肝癌患者血清 β- G活性明显高于对照组 ,(P<0... 详细信息

研究血清 β-葡萄糖醛酸酶 (β- G)活性测定对早期肝癌的临床意义。用 EL ISA技术 ,测定早期肝癌患者血清 β- G活性 ,并对早期肝癌患者治疗前、后血清 β- G活性变化进行检测。结果表明早期肝癌患者血清 β- G活性明显高于对照组 ,(P<0 .0 1)。早期肝癌患者经手术切除或介入治疗后 ,血清 β- G活性明显降低 ,(P<0 .0 5 )。结果显示血清 β- G检测对早期肝癌的诊断、治疗的判断均有一定的意义。

关键词：诊断血清 β-葡萄糖醛酸酶 ELISA 治疗早期肝癌

肝细胞内源性β-葡萄糖醛酸酶与胆红素结石关系的免疫电镜研究

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中华肝胆外科杂志 2000年第2期6卷 123-125页

作者：杨波朱善德赵永光岳辉杜晓炬李荫山张弘于众于安民沈阳军区总医院肝胆外科沈阳市110015 中国医科大学病理教研室

目的　了解内源性 β 葡萄糖醛酸酶 (β G)与胆红素结石的关系。方法　应用免疫电镜胶体金探针技术对胆红素结石组与健康对照组人肝细胞溶酶体内源性 β G进行定量比较研究。结果　胆红素结石组 (n=2 8)肝细胞溶酶体 β G测定为 (16 ... 详细信息

目的　了解内源性 β 葡萄糖醛酸酶 (β G)与胆红素结石的关系。方法　应用免疫电镜胶体金探针技术对胆红素结石组与健康对照组人肝细胞溶酶体内源性 β G进行定量比较研究。结果　胆红素结石组 (n=2 8)肝细胞溶酶体 β G测定为 (16 5± 4 3)个 /μm2 ,明显高于健康对照组 (n =30 ) β G测定 (10 1± 2 9)个 /μm2 (P 0 0 5 )。结论　内源性 β G作为人体内活性酶 ,在胆红素结石及健康人间存在着差异。

关键词：胆红素结石 β-葡萄糖醛酸酶肝细胞溶酶体

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血清β-葡萄糖醛酸酶诊断转移癌31例

第四军医大学学报 2002年第4期23卷 381-381页

作者：于笑难杨波秦海明郑伟沈阳军区总医院检验科辽宁沈阳110015 沈阳军区总医院肝胆外科辽宁沈阳110015

恶性肿瘤常见有多种酶的改变，近年发现肿瘤细胞含有大量的β-葡萄糖醛酸酶，β-GCD的水平与存活的细胞数有相关性。采用ELISA法测定健康人35例，良性肿瘤患者30例及恶性肿瘤患者67例血清βGCD及CEA，观察β-GCD治疗前后的变化如下。

关键词： β-葡萄糖醛酸酶转移癌疗效观察血清诊断

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大肠杆菌中β-葡萄糖醛酸酶活性的测定

中国食品学报 2003年第4期3卷 82-85页

作者：曹小红白晓丽天津科技大学食品科学与生物工程学院天津300222

目的:测定大肠杆菌β-葡萄糖醛酸酶在不同培养基配方及不同培养时间的酶活。方法:利用对硝基酚-β-D-葡萄糖醛酸苷作为酶反应底物,在波长为405nm下比色,检测酶反应所释放的对硝基酚的量,以测定液体培养基中β-葡萄糖醛酸酶活性。研究结... 详细信息

目的:测定大肠杆菌β-葡萄糖醛酸酶在不同培养基配方及不同培养时间的酶活。方法:利用对硝基酚-β-D-葡萄糖醛酸苷作为酶反应底物,在波长为405nm下比色,检测酶反应所释放的对硝基酚的量,以测定液体培养基中β-葡萄糖醛酸酶活性。研究结果表明,培养基配方2酶活性较高,对pH缓冲能力强,适合于产β-葡萄糖醛酸酶。

关键词：大肠杆菌 β-葡萄糖醛酸酶酶活性测定底物对硝基酚-β-D-葡萄糖醛酸苷食品

色素类结石患者胆汁中大肠杆菌优势血清型的分析及各亚型产生的β-葡萄糖醛酸酶活性比较

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色素类结石患者胆汁中大肠杆菌优势血清型的分析及各亚型产生的β...

作者：王悦中国医科大学

学位级别：硕士

研究背景:胆石症是胆道系统最常见的疾病,也是世界范围内的常见病。根据结石所在位置,胆结石分为胆囊结石和胆管结石,胆管结石包括肝内胆管结石和肝外胆管结石;根据来源胆管结石又分为从胆囊掉入胆管的继发性胆管结石和原发性胆管结石;... 详细信息

研究背景:胆石症是胆道系统最常见的疾病,也是世界范围内的常见病。根据结石所在位置,胆结石分为胆囊结石和胆管结石,胆管结石包括肝内胆管结石和肝外胆管结石;根据来源胆管结石又分为从胆囊掉入胆管的继发性胆管结石和原发性胆管结石;根据结石的成分,胆结石可分为胆固醇类胆结石、色素类胆结石和少见成分结石,胆囊中多数为胆固醇类结石和混合成分结石,而肝内外胆管中多数是胆色素类结石。胆囊结石在西方和日本等发达地区十分普遍,大约有15%的美国人患有胆囊结石,每年进行超过70万例胆囊切除术,其中约有10-15%的病例伴有继发性胆总管结石。但在没有胆囊结石的情况下,西方很少有肝内外胆管结石的病例发生。在亚洲,与胆囊结石无关的原发性胆管结石则非常普遍,包括在台湾、香港地区及新加坡发现的肝内胆管结石。在中国,高达10-20%的成人患有胆结石,其中女性多于男性,随年龄的增长而增高。在胆石病的病例中,胆色素类结石患者约占30-40%,虽然所占比例低于胆固醇类结石,但我国人口基数大,所以每年仍至少有数以百万的胆色素结石患者。并且由于部分地区发展落后、卫生条件差、饮食习惯不佳等种种原因,患病人口仍呈增长趋势。胆固醇类结石的危险因素包括女性、年龄、肥胖、妊娠、营养过剩及代谢综合征等,导致胆汁中胆固醇过饱和从而形成胆固醇结石,故可通过改变生活方式形成固醇性胆结石一级预防的基础。胆结石发生的大部分遗传风险来自于肝胆固醇转运蛋白ABCG8中的常见突变,约占其总风险的25%。而胆色素类结石的形成机制尚不清楚,因此学界对胆色素类结石的形成机制、形成的危险因素应给予高度重视,更深入地研究胆色素类结石的形成机制是必要的。目的:对色素类结石患者的胆管胆汁中大肠杆菌的各个亚型产生的β-葡萄糖醛酸酶活性进行对比,进而探究导致色素类结石形成的大肠杆菌优势血清型。研究方法:对胆管色素类结石的患者70例,术中无菌条件下抽取胆管胆汁行细菌培养。采用玻片凝集法鉴定胆汁中分离培养出的大肠杆菌的O血清型,根据β-葡萄糖醛酸酶的活性与β-葡萄糖醛酸酶同底物PNPG(4-硝基苯-β-D-葡萄糖苷)反应的速率k呈正比,与反应体系的OD600值成反比,计算大肠杆菌各亚型产生的β-葡萄糖醛酸酶活性。结果:共获得胆管胆汁标本70例,61例细菌培养阳性,阳性率为87.14%。其中12例标本中分离出两种或两种以上细菌,共获得菌株73株。培养结果排名第一为大肠杆菌(34.25%),对培养出的25株大肠杆菌进行血清型鉴定,共获得的13种大肠杆菌血清型,位列前三位分别为O、O、O;而O血清型大肠杆菌其时间-吸光度值曲线斜率k值明显高于其它血清型,结合其OD600值,可得出其产生β-葡萄糖醛酸酶的活性较高。结论:色素类结石的患者胆管胆汁中最常见细菌为大肠杆菌,血清型以O、O、O为主,其中O血清型大肠杆菌产生β-葡萄糖醛酸酶的活性较高。

关键词：色素类结石大肠杆菌血清型 β-葡萄糖醛酸酶

芳香基硫酸酯酶/β-葡萄糖醛酸酶抑制剂的筛选及其在污水样品保存中的应用

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芳香基硫酸酯酶/β-葡萄糖醛酸酶抑制剂的筛选及其在污水样品保存...

作者：张俊华南理工大学

学位级别：硕士

城市生活污水中的雌激素结合态有硫酸盐和葡萄糖醛酸盐结合态两种形式,而硫酸盐和葡萄糖醛酸盐结合态可以分别被污水中的芳香基硫酸酯酶和β-葡萄糖醛酸酶降解。因此,在研究雌激素或者雌激素结合态时,必须保证结合态样品保存时不发生分... 详细信息

城市生活污水中的雌激素结合态有硫酸盐和葡萄糖醛酸盐结合态两种形式,而硫酸盐和葡萄糖醛酸盐结合态可以分别被污水中的芳香基硫酸酯酶和β-葡萄糖醛酸酶降解。因此,在研究雌激素或者雌激素结合态时,必须保证结合态样品保存时不发生分解。本研究是通过抑制污水中芳香基硫酸酯酶和β-葡萄糖醛酸酶的活性来阻止结合态的分解,从而保证结合态样品的完整性。本研究首先选取了几种常见的抑制剂、高p H和低p H对芳香基硫酸酯酶和β-葡萄糖醛酸酶进行酶学抑制实验,结果发现两种酶对1m M Hg Cl、1m M EDTA和9.5%甲醇有很强的抵抗能力,不能阻止结合态的分解。低p H(p H=1)虽然可以完全抑制两种酶的活性,但是研究发现硫酸盐结合态在低p H下会进行分解。高p H(p H=11)既可以完全抑制芳香基硫酸酯酶和β-葡萄糖醛酸酶的活性,也不会对两种结合态的样品产生分解作用。最后,用破碎后的污泥样品进行验证,结果表明污泥中的结合态在p H=11的条件下未发生降解作用。因此,通过将污水样品p H调节到11是一种有效保存样品中雌激素硫酸盐和葡萄糖醛酸盐结合态的方法。本研究还对不同浓度Hg Cl下芳香基硫酸酯酶和β-葡萄糖醛酸酶的活性进行实验,通过剂量-反应曲线,可以发现浓度为2 g/L的Hg Cl对两种酶均有良好的抑制作用。再取活性污泥进行稀释并向其中加入一定浓度的雌激素硫酸盐结合态和葡萄糖醛酸盐结合态,分别在室温、4℃、p H=1、p H=11、2 g/L Hg Cl几种条件下进行保存,最终结果显示只有在污泥中加入浓度为2 g/L Hg Cl条件下,雌激素结合态才未发生分解。因此,向污水中加入浓度为2 g/L Hg Cl是也一种有效保存样品中雌激素硫酸盐和葡萄糖醛酸盐结合态的方法。芳香基硫酸酯酶和β-葡萄糖醛酸酶是人体中广泛存在的两种水解酶,与人体健康紧密相关。研究发现,乳腺癌、卵巢癌、肝癌等疾病患者体内芳香基硫酸酯酶和β-葡萄糖醛酸酶的活性明显高于正常人体内。因此,医学上把抑制患者体内这两种酶活性作为治疗此类癌症的一种手段。本实验研究了不同浓度的亚硫酸钠、过氧化氢、十二烷基硫酸钠、次氯酸钠对两种酶活性的影响。亚硫酸钠、过氧化氢、十二烷基硫酸钠、次氯酸钠对芳香基硫酸酯酶有很好的抑制作用,半抑制浓度IC分别为31.51、145.2、181.17、82.66μmol/L;次氯酸钠对β-葡萄糖醛酸酶的半抑制浓度IC为784.4μmol/L;十二烷基硫酸钠对β-葡萄糖醛酸酶有抑制但是抑制效果有限,最大抑制程度约为38%;亚硫酸钠、过氧化氢对β-葡萄糖醛酸酶没有明显抑制效果。

关键词：结合态芳香基硫酸酯酶 β-葡萄糖醛酸酶样品保存抑制

唾液乳杆菌发酵黄芩液的制备及其对鸡毒支原体感染的疗效观察

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唾液乳杆菌发酵黄芩液的制备及其对鸡毒支原体感染的疗效观察

作者：屈港圆东北农业大学

学位级别：硕士

鸡毒支原体病是由鸡毒支原体(Mycoplasma gallisepticum,MG)感染引起的一种禽类慢性呼吸道疾病。该病在临床上感染率高,死亡率低,主要以影响生产性能为主,如肉鸡饲料利用率降低,产蛋鸡产蛋率下降等,对家禽养殖行业造成了不可估量的经济... 详细信息

鸡毒支原体病是由鸡毒支原体(Mycoplasma gallisepticum,MG)感染引起的一种禽类慢性呼吸道疾病。该病在临床上感染率高,死亡率低,主要以影响生产性能为主,如肉鸡饲料利用率降低,产蛋鸡产蛋率下降等,对家禽养殖行业造成了不可估量的经济损失。在临床上使用抗生素治疗容易产生耐药性,疫苗的预防效果也不乐观。一些研究者发现中药对MG感染有很好的抑制作用。实验室前期的研究也证实了中药黄芩对鸡毒支原体病的治疗效果。黄芩苷为黄芩的主要有效成分,该成分为复原型前体药物,口服后先经过肠道菌群酶(β-葡萄糖醛酸酶)的作用水解为苷元黄芩素,黄芩素可在体内通过UDP-葡萄糖醛酸转移酶快速还原为黄芩苷,故黄芩苷的口服吸收较少。黄芩发酵剂则是通过微生物与黄芩在发酵过程中产生β-葡萄糖醛酸酶,在该生物酶的作用下,使黄芩药材中大部分黄芩苷在体外提前转化为黄芩素,药物疏水性和脂溶性增加,进入体内后可迅速转化为黄芩苷到达靶器官。本次试验的研究目的是通过微生物发酵法,提高黄芩口服后在血液中的浓度,为黄芩在鸡毒支原体病的临床治疗应用提供一种新方法。本研究首先在3种常用于中药发酵的菌种中(枯草芽孢杆菌、唾液乳杆菌、酵母菌)筛选出一株能产生β-葡萄糖醛酸酶的菌株。将筛选出的菌株根据影响发酵效果的不同条件进行工艺优化,以提高发酵剂中黄芩素的含量。通过药代动力学试验验证黄芩发酵剂口服后在体内的代谢变化。通过人工复制MG感染病理模型验证黄芩发酵剂的治疗效果。具体内容如下:(1)用平板计数法完成各菌种的活菌率检测,此方法依据《食品卫生微生物学检验菌落总数测定》的规定,从实验室保存的3种发酵菌种中进行筛选,再从各菌属中选择4株活菌率较高的菌种。使用以上菌种进行平板显色试验,筛选出一种能产生β-葡萄糖醛酸酶的菌株,由发酵实验复筛,通过HPLC法检测各发酵液中黄芩素含量来验证发酵效果。结果显示,唾液乳杆菌产酶活性较高,L30的活菌率最高为3.1×10 CFU/m L,显色直径最大为22.8 mm,经过发酵试验验证后黄芩素含量最高为4.63%。因此选用唾液乳杆菌L30作为发酵菌种。(2)微生物在不同环境条件下,生长繁殖性能和产酶活力不同,本试验通过五种不同条件的变化,每种条件设置5个水平进行单因素试验。先固定初始条件为:中药浓度:1.0 g/m L,发酵温度:37℃,接菌量:5%,摇床转速:160 rpm,发酵时间:5 d。以黄芩素含量作为评价指标依次进行优化,最佳发酵条件为中药浓度:1.5 g/m L,发酵温度:38℃,接菌量:4%,摇床转速为:180 rpm,发酵时间:3 d。(3)将90只7日龄雏鸡分为A、B、C三组,A组为未发酵黄芩给药组,B组为发酵黄芩给药组,C组为空白基质组。在给药后不同间隔时间点采集血浆样本,通过HPLC法检测鸡血浆中黄芩苷浓度,通过Win Nonlin药动学软件处理数据。结果表明,B组的峰浓度(Cmax)、药时曲线下面积(AUC)数值均高于A组,峰时间(Tmax)比A组提前了0.25 h。(4)采用人工感染MG鸡进行治疗试验,验证该发酵剂的治疗效果,共分为A、B、C、D四个组,A组为空白对照组,B组为MG感染组,C组为未发酵黄芩组,D组为发酵黄芩组,给药后在1、3、5 d检测血清炎症因子IL-1β、TNF-α的表达量,肺脏IL-1β、TNF-α的m RNA表达量及MG定植量。结果显示,D组血清炎症因子IL-1β、TNF-α的表达量,肺脏IL-1β、TNF-α的m RNA表达量和MG定植量均低于C组。综上所述,本研究发现了一种能产生β-葡萄糖醛酸酶的菌种,即唾液乳杆菌。黄芩经过唾液乳杆菌发酵后,可增加黄芩素含量,提高鸡体内的血药浓度,并且可以有效增强对抗MG感染的作用,并为鸡毒支原体病的治疗提供了一种新方法。

关键词：黄芩微生物发酵中药唾液乳杆菌 β-葡萄糖醛酸酶鸡毒支原体