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β联蛋白对过氧化氢诱导人皮肤成纤维细胞增殖活性及凋亡相关基因Bcl-2、Bax表达的影响

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中华皮肤科杂志 2015年第2期48卷 112-115页

作者：田黎明谢红付李吉杨婷彭圆胡威华中科技大学附属武汉市第一医院皮肤科武汉430022 中南大学湘雅医院皮肤科南华大学附属南华医院湖南衡阳421002 湖北中医药大学基础医学院

目的观察高表达的β联蛋白对过氧化氢（H2O2）诱导衰老人皮肤成纤维细胞（HSF）增殖活性以及凋亡相关基因Bcl-2、Bax表达的影响.方法实验分3组.HSF细胞分别转染pcDNA3.1-β联蛋白或空载体pcDNA3.1,然后150 μmol/LH2O2处理2h.噻唑蓝... 详细信息

目的观察高表达的β联蛋白对过氧化氢（H2O2）诱导衰老人皮肤成纤维细胞（HSF）增殖活性以及凋亡相关基因Bcl-2、Bax表达的影响.方法实验分3组.HSF细胞分别转染pcDNA3.1-β联蛋白或空载体pcDNA3.1,然后150 μmol/LH2O2处理2h.噻唑蓝检测细胞增殖活性,流式细胞仪检测细胞凋亡水平,RT-PCR和Western印迹分析凋亡相关基因Bcl-2、Bax的表达.结果 HSF＋空载体组、HSF＋空载体＋H2O2组、HSF＋β联蛋白＋H2O2组细胞增殖活性分别为0.792±0.012、0.462±0.012、0.521±0.015,细胞凋亡率分别为（3.407±0.217）％、（24.555±1.793）％、（15.360±0.755）％,各组比较,差异有统计学意义（均P＜ 0.01）.HSF＋空载体＋ H2O2组Bcl-2 mRNA和蛋白水平（与GAPDH mRNA和蛋白的比值分别为0.333±0.003和0.336±0.004）明显低于HSF＋空载体组（分别为0.507±0.013和0.514±0.021）,两组比较,均P＜ ***＋β联蛋白＋H2O2组Bcl-2 mRNA和蛋白水平分别为0.404±0.006和0.411±0.005明显高于HSF＋空载体＋H2O2组,两组比较,均P＜ ***＋空载体＋H2O2组Bax mRNA和蛋白水平（与GAPDH mRNA和蛋白的比值分别为0.451±0.002和0.460±0.008）明显高于HSF＋空载体组,两组比较,均P＜ ***＋β联蛋白＋H2O2组BaxmRNA和蛋白水平（分别为0.339±0.012和0.346±0.013）明显低于HSF＋空载体＋H2O2组,两组比较,均P＜0.01.结论高表达的β联蛋白能够提高衰老人皮肤成纤维细胞增殖活性.

关键词：成纤维细胞细胞衰老 β联蛋白细胞凋亡基因,Bcl-2

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毛母质瘤中β联蛋白的突变基因分析

中华皮肤科杂志 2006年第9期39卷 497-499页

作者：夏建新占部和敬李玉林古江增隆吉林大学白求恩医学部第二医院皮肤科长春130041 日本九州大学医学部皮肤科吉林大学基础医学院病理生物学教研室

目的探讨β联蛋白的突变基因及其蛋白表达与毛母质瘤发生的关系。方法选取67例毛母质瘤的组织标本进行β联蛋白的免疫染色,提取基因组DNA,进行β联蛋白的PCR扩增及测序,用克隆、测序及限制性内切酶的方法证实突变的存在。结果毛母质瘤... 详细信息

目的探讨β联蛋白的突变基因及其蛋白表达与毛母质瘤发生的关系。方法选取67例毛母质瘤的组织标本进行β联蛋白的免疫染色,提取基因组DNA,进行β联蛋白的PCR扩增及测序,用克隆、测序及限制性内切酶的方法证实突变的存在。结果毛母质瘤中嗜碱粒细胞β联蛋白免疫染色阳性率为81%(26/32),β联蛋白外显子3基因突变率为61%(14/23)。其突变均位于β联蛋白外显子3的磷酸化位点或邻近位点。结论β联蛋白的基因突变及其核阳性与毛母质瘤的发生有关。

关键词：毛基质瘤突变 β联蛋白

上皮钙黏着蛋白和β联蛋白在胸腺瘤中的表达及意义

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山西医药杂志 2017年第24期46卷 2999-3002页

作者：孙波山东省济宁市第一人民医院胸外科 272029

胸腺瘤是胸外科治疗中常见的前上纵隔的原发肿瘤 ,约占所有纵隔肿瘤的20%-40% ,是纵隔肿瘤中最常见的类型.目前对胸腺瘤的发生发展过程并不清楚 ,认为胸腺瘤的发生与人体自身免疫有关 ,40-50岁人群多发 ,常并发重症肌无力.目前对胸腺瘤... 详细信息

胸腺瘤是胸外科治疗中常见的前上纵隔的原发肿瘤 ,约占所有纵隔肿瘤的20%-40% ,是纵隔肿瘤中最常见的类型.目前对胸腺瘤的发生发展过程并不清楚 ,认为胸腺瘤的发生与人体自身免疫有关 ,40-50岁人群多发 ,常并发重症肌无力.目前对胸腺瘤的研究中发现早期的胸腺瘤同样具有侵袭和转移的能力 ,仅仅通过组织学检查不能确定胸腺瘤的良恶性.临床学者认为30%-40% 的胸腺瘤是具有侵袭性的 ,建议将胸腺瘤分为侵袭性胸腺瘤和非侵袭性胸腺瘤.

关键词：非侵袭性胸腺瘤上皮钙黏着蛋白 β联蛋白纵隔肿瘤侵袭和转移重症肌无力组织学检查原发肿瘤

基于Wnt/β联蛋白信号通路探讨中医药防治骨质疏松症的研究进展

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山西医药杂志 2019年第2期48卷 160-162页

作者：王舒高毅师伟山东中医药大学中医学院济南250014 山东中医药大学附属医院骨代谢基地山东中医药大学附属医院妇科

骨质疏松症是一种与年龄增长相关的全身代谢性骨病.随着世界人口老龄化进程的发展,骨质疏松症已成为全球性日益重要的公共卫生问题[1].在骨质疏松症的预防和治疗过程中,Wnt/β-联蛋白(catenin)信号通路通过促进成骨细胞的分化,在促进骨... 详细信息

骨质疏松症是一种与年龄增长相关的全身代谢性骨病.随着世界人口老龄化进程的发展,骨质疏松症已成为全球性日益重要的公共卫生问题[1].在骨质疏松症的预防和治疗过程中,Wnt/β-联蛋白(catenin)信号通路通过促进成骨细胞的分化,在促进骨形成等方面发挥重要作用.实验研究发现,Wnt/β-catenin信号传导途径发挥促进成骨细胞分化,加速骨折愈合的作用是通过直接上调骨靶基因Runx2的表达来实现的[2,3].中医药治疗是骨质疏松症综合治疗的重要方面,通过辨证论治对骨质疏松症治疗具有一定的优势和特色,但在基础和分子水平的研究方面尚有欠缺.

关键词：骨质疏松症信号通路 Wnt/β-catenin 中医药防治 β联蛋白 Wnt 成骨细胞分化公共卫生问题

Wnt／β联蛋白信号通路在毛囊形成和毛发生长中的作用

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国际皮肤性病学杂志 2015年第6期41卷 399-402页

作者：俞梦洁夏汝山杨莉佳南京医科大学附属无锡市第二人民医院皮肤科江苏无锡214002

毛囊形态的发生过程十分复杂，许多信号通路与信号分子参与了毛囊的周期性生长，其中对Wnt／β联蛋白信号通路的研究较为深入，而其对毛囊发育、形成、周期及再生调控的机制尚未完全阐明。概述Wnt／β联蛋白通路，通过比较不同信号分子... 详细信息

毛囊形态的发生过程十分复杂，许多信号通路与信号分子参与了毛囊的周期性生长，其中对Wnt／β联蛋白信号通路的研究较为深入，而其对毛囊发育、形成、周期及再生调控的机制尚未完全阐明。概述Wnt／β联蛋白通路，通过比较不同信号分子和调节因子对毛囊生长的及对毛囊干细胞的调控作用，旨在揭示其对胚胎期毛囊的形成、发育，成熟毛囊的生长周期及毛囊干细胞增殖分化的作用机制，这将有助于建立有效的毛发再生实验，并对毛囊相关疾病的治疗产生潜在性的应用价值。

关键词：毛囊毛发信号传导干细胞 Wnt信号通路 β联蛋白

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雌二醇通过雌激素受体α/糖原合酶激酶-3β/β联蛋白信号通路调节成骨细胞增殖

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山西医药杂志 2015年第6期44卷 614-618页

作者：黄佳张宏其孙长英郭强陈勇尹新华曾科峰中南大学湘雅医院脊柱外科湘雅脊柱外科中心长沙410008

目的研究观察雌二醇对小鼠成骨细胞前体细胞增殖影响并研究经典wnt通路在其增殖过程中的作用。方法本研究利用小鼠胚胎成骨细胞前体细胞Mc3T3-E1为细胞模型,不同浓度雌二醇处理Mc3T3-E1细胞,四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测细胞增殖率,蛋白印... 详细信息

目的研究观察雌二醇对小鼠成骨细胞前体细胞增殖影响并研究经典wnt通路在其增殖过程中的作用。方法本研究利用小鼠胚胎成骨细胞前体细胞Mc3T3-E1为细胞模型,不同浓度雌二醇处理Mc3T3-E1细胞,四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测细胞增殖率,蛋白印迹法和免疫荧光技术检测经典Wnt信号通路信号分子表达。结果研究表明不同浓度雌二醇处理Mc3T3-E1细胞,MTT显示随着雌二醇浓度增加,Mc3T3-E1细胞增殖率增加,其中以10-7 mol/L浓度处理后细胞获得最佳增殖率。蛋白印迹法结果显示随着雌激素浓度增加,小鼠Mc3T3-E1细胞中p-GSK-3β,β联蛋白(catenin),细胞周期蛋白(Cyclin)D1的表达增加。经雌激素受体(ER)α沉默后,相对于空白对照组小鼠Mc3T3-E1细胞p-GSK-3β,β-catenin及Cyclin D1表达下降,而ERβ沉默后,同对照组相比成骨细胞中各分子表达则无明显变化。结论雌二醇可通过ERα/GSK-3β/β-catenin信号通路调节小鼠成骨细胞增殖。

关键词：雌二醇 Mc3T3-E1cell 细胞周期蛋白 β联蛋白细胞增殖

靶向敲低肿瘤转移相关基因1可减缓裸鼠喉鳞癌移植瘤生长并降低其转移能力

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细胞与分子免疫学杂志 2015年第9期31卷 1194-1199页

作者：刘舟周建荣王致娟柏露重庆医科大学附属第一医院耳鼻咽喉科实验研究中心重庆400016

目的通过RNA干扰(RNAi)技术,观察肿瘤转移相关基因1(MTA1)对裸鼠喉鳞癌移植瘤生长和转移能力的影响。方法设计MTA1的短发夹RNA(shRNA)慢病毒干扰载体,进行包装与转染Hep-2细胞。将无关shRNA对照组和MTA1shRNA感染的Hep-2细胞接种于裸鼠... 详细信息

目的通过RNA干扰(RNAi)技术,观察肿瘤转移相关基因1(MTA1)对裸鼠喉鳞癌移植瘤生长和转移能力的影响。方法设计MTA1的短发夹RNA(shRNA)慢病毒干扰载体,进行包装与转染Hep-2细胞。将无关shRNA对照组和MTA1shRNA感染的Hep-2细胞接种于裸鼠爪垫,每组5只。复制人喉癌移植瘤淋巴转移模型,9周后处死裸鼠,取下肿瘤组织及腹股沟淋巴结,进行HE染色形态学观察,反转录PCR检测MTA1、β联蛋白(β-catenin)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)mRNA的水平,Western blot法检测MTA1、β-catenin、MMP-9、cyclin D1蛋白水平。结果慢病毒MTA1干扰载体筛选成功;2组人喉癌裸鼠爪垫移植瘤100%成瘤;MTA1 shRNA转染细胞裸鼠肿瘤体积在同一时间点均明显小于无关shRNA对照组;MTA1 shRNA转染细胞5只裸鼠爪垫肿瘤未发现淋巴结转移;无关shRNA对照组5只裸鼠腹股沟淋巴结切片均可见喉癌细胞;与无关shRNA对照组相比,MTA1 shRNA转染细胞MTA1、β-catenin、MMP-9、cyclin D1的mRNA和蛋白水平明显降低。结论抑制MTA1基因能够减缓裸鼠喉鳞癌的生长并降低其转移能力。

关键词：喉癌肿瘤转移相关基因1 转移 β联蛋白基质金属蛋白酶9 细胞周期蛋白D1

Wnt7b/β-catenin信号通路分子在肺泡Ⅱ型上皮细胞转分化过程中的变化

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细胞与分子免疫学杂志 2015年第10期31卷 1332-1335,1341页

作者：马金帅刘秀香杨建英万彬李淑兰刘俊燕滨州医学院附属医院新生儿科山东滨州256003 滨州市技术学院医务室山东滨州256003 滨州医学院附属医院药学部山东滨州256003

目的探讨Wnt7b/β联蛋白(β-catenin)信号通路分子在胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(f AEC2)分化过程中的变化。方法取孕19 d胎鼠肺组织,分离、纯化得到fAEC2。培养细胞48、72、96 h,倒置显微镜观察fAEC2形态变化,免疫荧光染色观察β-联蛋白(β-c... 详细信息

目的探讨Wnt7b/β联蛋白(β-catenin)信号通路分子在胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(f AEC2)分化过程中的变化。方法取孕19 d胎鼠肺组织,分离、纯化得到fAEC2。培养细胞48、72、96 h,倒置显微镜观察fAEC2形态变化,免疫荧光染色观察β-联蛋白(β-catenin)的表达,实时定量PCR检测细胞中Wnt7b、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、表面蛋白C(SP-C)和水通道蛋白5(AQP5)的mRNA变化,Western blot法检测cyclin D1、细胞核β-catenin、SP-C、AQP5蛋白的表达。结果 fAEC2培养48 h,β-catenin在细胞膜表达;培养72 h,β-catenin在细胞膜的表达较前减弱,在细胞质、细胞核中表达增强;培养96 h,全细胞β-catenin表达下调。Wnt7b、cyclin D1 mRNA的表达在72 h时显著增高,96 h时下降明显;SP-C mRNA的水平随培养时间的延长逐渐下降,AQP5 mRNA的水平逐渐升高。Cyclin D1、细胞核β-catenin蛋白在72 h时表达上调,96 h时表达下调;SP-C蛋白的表达量逐渐降低;AQP5蛋白的水平逐渐升高。结论 Wnt7b/β-catenin信号通路可能在fAEC2转分化中起重要作用。

关键词：肺泡Ⅱ型上皮细胞 Wnt7b β联蛋白细胞周期蛋白D1 表面蛋白C 水通道蛋白5

LSD1在神经母细胞瘤细胞中促进β-catenin在胞质中堆积

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中华小儿外科杂志 2018年第4期39卷 296-301,289页

作者：刘铭迟仁杰陈鑫张桓瑜英庆龙李富江鹿洪亭青岛大学附属医院小儿外科 266003

目的本研究旨在证实在神经母细胞瘤细胞（neuroblastoma，NB）中赖氨酸特异性去甲基化转移酶1（1ysine specific demethylase 1，LSD1）促进β-联蛋白（β-catenin）在胞质中堆积，证实LSD1通过激活Wnt通路，从而引起NB细胞的增殖和转... 详细信息

目的本研究旨在证实在神经母细胞瘤细胞（neuroblastoma，NB）中赖氨酸特异性去甲基化转移酶1（1ysine specific demethylase 1，LSD1）促进β-联蛋白（β-catenin）在胞质中堆积，证实LSD1通过激活Wnt通路，从而引起NB细胞的增殖和转移，并探索其分子机制。方法将对数生长期的293T细胞，接种在6孔培养板上，感染时细胞密度控制在60%～80%，每孔2×106个细胞。分别配置溶液A：cDNA 10 μl＋cDNA质粒转染培养基90 μl；溶液B：空载质粒转染试剂5 μl＋cDNA质粒转染培养基95 μl，混合溶液A和溶液B，室温放置30 min形成转染复合物，在含有细胞的无抗生素培养基中加入转染复合物使终体积为2 ml。Quantitative real-time PCR（qPCR）检测LSD1在NB细胞株SH-SY5Y细胞中的表达。LSD1慢病毒过表达载体的构建上调LSD1在NB中的表达。Western blot方法检测在SH-SY5Y细胞株调控LSD1表达后β-catenin的变化。免疫组织化学方法检测在SH-SY5Y细胞株调控LSD1表达后β-catenin的变化。结果利用Western bolt方法检测人上皮细胞、大鼠神经元细胞、NB细胞中LSD1的表达量，人上皮细胞、大鼠神经元细胞、NB细胞三者的灰度值分别为133.87±10.54、135.00±12.48、192.00±13.23，三组进行单因素方差分析无明显统计学意义（P〉0.05）；建立LSD1稳转细胞株前后，SH-SY5Y细胞表达LSD1量有变化，通过qPCR对SH-SY5Y细胞株中的LSD1基因的相对量进行检测，LSD1表达抑制组的阈值循环数为22.003±0.320，转染空白质粒慢病毒载体的SH-SY5Y细胞组的阈值循环数为17.330±1.166，转染LSD1过表达慢病毒载体组的阈值循环数为13.216±0.137三组进行单因素方差分析，差异具有统计学意义（P〈0.01）。结论在神经母细胞瘤细胞株SH-SY5Y细胞中，β-catenin随着LSD1的表达量的变化而变化，两者在SH-SY5Y细胞中的量呈正相关。

关键词：神经母细胞瘤 β联蛋白慢病毒