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酶法合成糖原状α-葡聚糖的研究进展

食品科学 2021年第17期42卷 299-306页

作者：刘佳林柏玉香李晓晓孙纯锐邱洪伟干福良金征宇江南大学食品学院食品科学与技术国家重点实验室食品安全与营养协同创新中心食品安全国际联合实验室江苏无锡214122 诸城兴贸玉米开发有限公司山东潍坊262200

糖原是一种天然的纳米级树状葡聚糖,可以通过物理或化学方法对其表面和内部进行修饰,从而获得功能性衍生物。但糖原的体内合成环境复杂,体外制备时提取工艺要求严苛,限制了糖原作为功能性成分或纳米载体在食品及生物医学领域的应用。因... 详细信息

糖原是一种天然的纳米级树状葡聚糖,可以通过物理或化学方法对其表面和内部进行修饰,从而获得功能性衍生物。但糖原的体内合成环境复杂,体外制备时提取工艺要求严苛,限制了糖原作为功能性成分或纳米载体在食品及生物医学领域的应用。因此,通过体外酶促合成的具有类似糖原结构和性质的糖原状α-葡聚糖成为天然糖原的良好工业替代品。本文综述了4种体外酶促合成糖原状α-葡聚糖的方法,并比较了不同方法获得的α-葡聚糖结构及理化性质。此外对控制其精细结构的可能性和广泛的应用前景进行了分析讨论,为体外合成的糖原状α-葡聚糖应用于食品、医药和化妆品等领域提供借鉴。

关键词：糖原酶促合成 α-葡聚糖

板蓝根α-葡聚糖佐剂提高H1N1流感疫苗免疫小鼠体液免疫和细胞免疫功能

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中国药理学与毒理学杂志 2014年第6期28卷 850-856页

作者：文松李倩贾培媛赵修南武军华麻浩张永平王玉霞单俊杰王海南贵州大学药学院贵州贵阳550025 军事医学科学院毒物药物研究所北京100850 北京中安佐际生物科技有限公司北京100111 国家食品药品监督管理总局北京100053

目的：研究板蓝根α-葡聚糖对H1N1流感疫苗免疫小鼠体液免疫和细胞免疫功能的影响。方法100μg α-葡聚糖按＋H1N1流感病毒裂解液3μg给每只小鼠一次性肌内注射。分别在免疫后3,5,8,10,12和14 d采血,ELlSA法检测小鼠血清特异性抗体和亚... 详细信息

目的：研究板蓝根α-葡聚糖对H1N1流感疫苗免疫小鼠体液免疫和细胞免疫功能的影响。方法100μg α-葡聚糖按＋H1N1流感病毒裂解液3μg给每只小鼠一次性肌内注射。分别在免疫后3,5,8,10,12和14 d采血,ELlSA法检测小鼠血清特异性抗体和亚类抗体滴度；MTT法测定小鼠脾T淋巴细胞、B淋巴细胞和巨噬细胞增殖反应；ELlSA法测定细胞培养上清干扰素γ（ lFN-γ）、白细胞介素4（ lL-4）、lL-12和肿瘤坏死因子-α（ TNF-α）含量；流式细胞术测定脾细胞中CD3^＋, CD19^＋, CD4^＋, CD8^＋T细胞亚群百分率。结果板蓝根α-葡聚糖对人用H1N1流感疫苗抗原显示优良的佐剂作用,初次免疫后5 d即能促进特异性抗体的生成,抗体亚型主要为lgM。免疫后5～14 d,总抗体及亚类lgG1, lgG2a和lgG2b滴度持续升高,lgG3在免疫8 d达峰,之后无明显变化。 lgA滴度水平最低,且随时间无明显变化。α-葡聚糖显著促进H1N1流感疫苗免疫小鼠脾T 细胞和B 细胞增殖（增殖率分别为44.2％和37.8％）,促进脾细胞分泌 lFN-γ（ P＜0.01）和lL-12（ P＜0.05）,刺激胸腺细胞分泌lL-4（ P＜0.01）；与单独抗原组相比,联用α-葡聚糖明显提高免疫小鼠脾 CD3^＋细胞百分率（P＜0.01）及 CD3＋/CD19＋比值（P＜0.01）,提高 CD8^＋T 细胞百分率,降低CD4^＋/CD8^＋比值（ P＜0.01）。α-葡聚糖能激活巨噬细胞,促进TNF-α的分泌。结论板蓝根α-葡聚糖能显著提高免疫小鼠的体液免疫和细胞免疫功能。

关键词：板蓝根 α-葡聚糖流感疫苗佐剂,免疫抗体生成免疫,细胞

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部分国内糖厂蔗汁中α-葡聚糖含量的调查

食品科技 2013年第5期38卷 130-133页

作者：曹惠华班甲陈骏佳黄俊生徐晓燕胡雪梅广州甘蔗糖业研究所、广东省甘蔗改良与生物炼制重点实验室广州510316

肠膜明串珠菌利用蔗汁中的蔗糖发酵产生的α-葡聚糖会造成糖分损失并使制糖过程处理困难。为了解α-葡聚糖对国内糖厂生产过程影响程度,摸索解决该问题的合理方法,对国内部分糖厂蔗汁中α-葡聚糖的含量作了调查,分析了国内外糖厂α-葡... 详细信息

肠膜明串珠菌利用蔗汁中的蔗糖发酵产生的α-葡聚糖会造成糖分损失并使制糖过程处理困难。为了解α-葡聚糖对国内糖厂生产过程影响程度,摸索解决该问题的合理方法,对国内部分糖厂蔗汁中α-葡聚糖的含量作了调查,分析了国内外糖厂α-葡聚糖问题差异的原因,提出了糖厂控制α-葡聚糖问题的措施。

关键词： α-葡聚糖蔗饭蔗汁制糖

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酒精Haze改良法测定蔗汁α-葡聚糖含量

食品科技 2012年第9期37卷 288-290页

作者：班甲胡雪梅徐晓燕陈骏佳广州甘蔗糖业研究所广东省甘蔗改良与生物炼制重点实验室广州510316

为了快速准确测定糖厂蔗汁中α-葡聚糖含量,对传统的酒精Haze法进行改良。利用淀粉酶与α-葡聚糖酶降解蔗汁中的淀粉与α-葡聚糖,以无淀粉与蔗汁α-葡聚糖的蔗汁作为空白制作α-葡聚糖在蔗汁中的工作曲线,测定样品α-葡聚糖含量。试验... 详细信息

为了快速准确测定糖厂蔗汁中α-葡聚糖含量,对传统的酒精Haze法进行改良。利用淀粉酶与α-葡聚糖酶降解蔗汁中的淀粉与α-葡聚糖,以无淀粉与蔗汁α-葡聚糖的蔗汁作为空白制作α-葡聚糖在蔗汁中的工作曲线,测定样品α-葡聚糖含量。试验结果表明:该方法RSD为2.95%,加标回收率在94.2%～96.7%之间。与传统酒精Haze法测定结果相比准确度有了显著提高。该方法克服了其他检测方法的缺点,简化了实验步骤,加快了实验速度,为糖厂实时检测糖汁中的α-葡聚糖含量提供了新的途径。

关键词：蔗汁酒精Haze法 α-葡聚糖 α-葡聚糖酶

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免疫比色法定量测定α-葡聚糖的研究

广西蔗糖 2012年第4期 17-22,27页

作者：柳颖蚁细苗林荣珍曾练强常国炜梁达奉广州甘蔗糖业研究所广东省甘蔗改良与生物炼制重点实验室广东广州510316 广西糖业研发中心广西南宁530002

α-葡聚糖对制糖工艺和产品品质造成不良影响,目前测定葡聚糖的方法存在样品前处理繁琐、杂质干扰大等缺陷。本文对免疫比色法检测α-葡聚糖进行了探讨,以特异性强的单克隆抗体定量测定样品中的α-葡聚糖,建立了比色法测定葡聚糖Ag-Ab... 详细信息

α-葡聚糖对制糖工艺和产品品质造成不良影响,目前测定葡聚糖的方法存在样品前处理繁琐、杂质干扰大等缺陷。本文对免疫比色法检测α-葡聚糖进行了探讨,以特异性强的单克隆抗体定量测定样品中的α-葡聚糖,建立了比色法测定葡聚糖Ag-Ab复合物的方法。该方法具有重复性好、简单快速、适用于测定所有糖产品及在制品的优点,可应用于糖厂生产控制α-葡聚糖的实时监测。

关键词： α-葡聚糖单克隆抗体免疫比色法定量测定

α-葡聚糖酶及其在国内制糖工业中的应用研究进展

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广西科学 2014年第6期21卷 606-609页

作者：梁达奉马步柳颖梁逸曾练强黄曾慰黄玉南林荣珍广西农垦糖业集团股份有限公司广西糖业研发中心广西南宁530002 广州甘蔗糖业研究所广东省甘蔗改良与生物炼制重点实验室广东广州510316

制糖工艺过程出现的葡聚糖主要为α-葡聚糖,它的存在会使糖汁糖分损失,糖液粘度增大,糖液过滤性降低,晶体伸长,这不但增加精炼成本,同时也严重影响产品品质。糖浆澄清仅能除去约20%的α-葡聚糖,而利用α-葡聚糖酶水解α-葡聚糖是一种理... 详细信息

制糖工艺过程出现的葡聚糖主要为α-葡聚糖,它的存在会使糖汁糖分损失,糖液粘度增大,糖液过滤性降低,晶体伸长,这不但增加精炼成本,同时也严重影响产品品质。糖浆澄清仅能除去约20%的α-葡聚糖,而利用α-葡聚糖酶水解α-葡聚糖是一种理想的方法。本文综述α-葡聚糖酶及其在国内制炼糖厂的应用研究进展,并对该研究领域进行展望。基因工程技术和蛋白质定向进化技术在提高α-葡聚糖酶酶活、热稳定性、增强底物特异性等方面发挥着重要作用,将成为今后的研究热点。

关键词： α-葡聚糖酶 α-葡聚糖制糖研究应用

板蓝根α-葡聚糖对H1N1流感疫苗免疫小鼠细胞免疫的影响

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板蓝根α-葡聚糖对H1N1流感疫苗免疫小鼠细胞免疫的影响

防风多糖的提取分离、结构解析及其抗氧化活性的初步研究

2014年中国药学大会暨中国药师周

作者：王玉霞李倩朱婷贾培媛赵修南武军华张永平单俊杰军事医学科学院毒物药物研究所北京中安佐际生物科技有限公司

目的:研究板蓝根α-葡聚糖对H1N1流感疫苗免疫小鼠体液免疫和细胞免疫功能的影响。方法:α-葡聚糖按每只100μg剂量与H1N1流感病毒裂解液(3μg)联用,肌内注射免疫小鼠1次。分别在免疫后3,5、8、10、12和14d采血,ELISA法检测小鼠血清特... 详细信息

目的:研究板蓝根α-葡聚糖对H1N1流感疫苗免疫小鼠体液免疫和细胞免疫功能的影响。方法:α-葡聚糖按每只100μg剂量与H1N1流感病毒裂解液(3μg)联用,肌内注射免疫小鼠1次。分别在免疫后3,5、8、10、12和14d采血,ELISA法检测小鼠血清特异性抗体和亚类抗体滴度;MTT法测定小鼠脾T淋巴细胞、B淋巴细胞和巨噬细胞增殖反应;ELISA法测定细胞培养上清干扰素γ(IFN-γ)、白介素4(IL-4)、IL-12和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量;流式细胞术测定脾细胞中CD3+、CD19+、CD4+、CD8+T细胞亚群百分率。结果:板蓝根α-葡聚糖对人用H1N1流感疫苗抗原显示优良的佐剂作用,初次免疫后5d即能促进特异性抗体的产生,抗体亚型主要为Ig M。免疫后54d,总抗体及亚类Ig G1、Ig G2a和Ig G2b滴度持续升高,Ig G3在免疫8d达峰,之后无明显变化。Ig A滴度水平最低,且随时间无明显变化。α-葡聚糖显著促进H1N1流感疫苗免疫小鼠脾T细胞和B细胞增殖(增殖率分别为44.2%和37.8%),促进脾细胞分泌IFN-γ(Pα-葡聚糖明显提高免疫小鼠脾CD3+细胞百分率(Pα-葡聚糖能激活巨噬细胞,促进TNF-α的分泌。结论:板蓝根α-葡聚糖能显著提高免疫小鼠的体液免疫和细胞免疫功能,并且无铝佐剂细胞免疫反应弱的缺点。

关键词：板蓝根 α-葡聚糖佐剂体液免疫细胞免疫

来源： cnki会议评论

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cnki会议

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防风多糖的提取分离、结构解析及其抗氧化活性的初步研究

作者：孟瑶苏州大学

学位级别：硕士

防风Saposhnikovia divaricate(Turcz.)Schischk是一味传统中草药,其功用可归纳为祛风解表、胜湿止痛、止痉等。一直以来,学者对防风中小分子天然产物如香豆素类、色原酮类的结构和活性做了大量的分析研究,但关于防风中的天然大分子多... 详细信息

防风Saposhnikovia divaricate(Turcz.)Schischk是一味传统中草药,其功用可归纳为祛风解表、胜湿止痛、止痉等。一直以来,学者对防风中小分子天然产物如香豆素类、色原酮类的结构和活性做了大量的分析研究,但关于防风中的天然大分子多糖的研究却相对较少。现有的防风多糖研究主要集中在其体内免疫调节、抗氧化和抗肿瘤等活性研究方面,而其结构研究非常有限,这极大地限制了我们对防风多糖结构和活性关系的理解和中药多糖潜在的临床应用。本课题经过系统提取分离从防风中得到4种不同组分的多糖,依次命名为SDP1～SDP4,其相对于水提粗多糖的得率分别为27.4%、10.1%、7.0%和41.2%。通过分子排阻色谱与多角度激光散射联用(SEC-MALLS)、高效阴离子交换色谱串联脉冲安培(HPAEC-PAD)、气质联用(GC-MS)及核磁共振(NMR)等分析手段,我们确认了防风多糖不同组分的分子量分布、单糖组成、糖苷键连接及多糖构型。结果表明SDP1是一种α-1,4-葡聚糖,并含有少量O-3/6位支链;SDP2主要含有α-1,4-葡聚糖及少量的阿拉伯半乳聚糖;SDP3主要由阿拉伯半乳聚糖构成,同时含有少量的葡聚糖;SDP4的分析结果表明其为一种果胶阿拉伯半乳聚糖。四种组分在分子和细胞水平上均表现出一定的抗氧化活性。ABTS自由基清除实验表明SDPs能够清除ABTS自由基且呈现剂量依赖性,其清除活性由高到低依次为SDP3≈SDP4>SDP2>SDP1。SDPs在1～100μg/mL预给药浓度范围内对由H2O2氧化损伤的RAW264.7细胞具有较好地保护作用并呈剂量依赖性。四种组分的保护作用由高到低依次为SDP4>SDP3>SDP2>SDP1。ROS试剂盒检测表明在100μg/mL预给药情况下,SDPs均能显著降低细胞内活性氧水平。RAW264.7中性红吞噬实验表明SDP2～SDP4在给药浓度范围内呈现较好的促进细胞吞噬作用,促进作用由大到小为SDP4>SDP3>SDP2。活性结果表明含阿拉伯半乳聚糖的防风多糖其抗氧化活性显著高于其它组分,并且其中的阿拉伯半乳聚糖的含量越多活性越明显,此外不含阿拉伯半乳聚糖的防风多糖其抗氧化活性相对较弱。随后我们通过1D/2D NMR及HPAEC-PAD-Q/TOF-MS重点分析了防风多糖中主要组分即SDP4结构。阿拉伯糖水解酶酶解去除SDP4的阿拉伯糖支链前后的NMR分析结果表明:SDP4为β-1,4半乳聚糖为主链,α-1,5阿拉伯聚糖(存在少量O-3位次级支链)为支链,同时存在α-1,4-半乳糖醛酸聚糖(其中半乳糖醛酸的酯化度为24%)的果胶阿拉伯半乳聚糖。半乳聚糖酶处理SDP4之后,利用HPAEC-MS对产生寡糖进行分析,除了检测到半乳糖、1→4连接的半乳二糖外,还检测到了大量聚合度为1～6的半乳糖醛酸寡糖,二级质谱显示它们均为1→4连接,该结果与NMR分析结果一致,我们可以进一步推测在SDP4的β-1,4-半乳聚糖主链中,存在聚合度为1～6的半乳糖醛酸支链。综上结果表明SDP4为一种以β-1,4半乳聚糖为主链,α-1,5阿拉伯聚糖和α-1,4-半乳糖醛酸寡糖为支链的非典型果胶阿拉伯半乳聚糖。上述结果为防风多糖的结构与其抗氧化活之间的构效关系研究提供有价值的线索。同时作为防风多糖中具有显著抗氧化活性组分,我们通过酶法详细的解析了 SDP4糖链组成。防风作为一味中药使用历史悠久,但防风多糖的结构和活性信息仍十分缺乏,还需要我们更多的努力去发现防风多糖的新结构和新活性。

关键词：防风多糖 α-葡聚糖果胶阿拉伯半乳聚糖 HPAEC-PAD-Q/TOF 抗氧化活性

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米糠多糖的提取纯化及其成分结构和活性分析

生命科学研究 2000年第3期4卷 273-277页

作者：汪艳吴曙光周杰徐伟徐继红第一军医大学药物研究所中国广东广州510515

研究米糠多糖 ( rice bran polysaccharide,RBS)的提取纯化方法 ,并对其进行组成成分、化学结构和物理性质分析以及活性测定 .热水抽提法从稻糠中制取粗制 RBS多糖 .层析分离纯化得到精制多糖 .对精制多糖进行元素分析、糖和蛋白含量测... 详细信息

研究米糠多糖 ( rice bran polysaccharide,RBS)的提取纯化方法 ,并对其进行组成成分、化学结构和物理性质分析以及活性测定 .热水抽提法从稻糠中制取粗制 RBS多糖 .层析分离纯化得到精制多糖 .对精制多糖进行元素分析、糖和蛋白含量测定、红外特征吸收光谱测定和碳谱核磁共振测定 ,以及对 Balb/c小鼠同源 Meth- A纤维肉瘤抑瘤活性测定等 .测定结果显示 RBS多糖为一种以 α- 1 ,4和 α- 1 ,6糖苷键为主要化学结构的葡聚糖 ,并对 Meth- A纤维肉瘤有抑制作用 .

关键词：米糠多糖提取纯化 α-葡聚糖抑瘤活性