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黄连素在高糖环境下促进骨髓间充质干细胞的成骨分化

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中国组织工程研究 2024年第19期28卷 2974-2980页

作者：苟秋童罗文豪王频兰玉燕刘敏黄海霞西南医科大学附属口腔医院修复科四川省泸州市646000 口颌面修复重建和再生泸州市重点实验室四川省泸州市646000 西南医科大学口腔医学研究所四川省泸州市646000

背景:糖尿病患者的口腔种植体骨结合率低下,失败率高,严重影响了生活质量,亟需有效手段改善糖尿病患者种植体骨结合以提高成功率。探究黄连素在高糖环境下对骨髓间充质干细胞成骨分化的影响及具体机制,将能为解决上述问题提供有效的理... 详细信息

背景:糖尿病患者的口腔种植体骨结合率低下,失败率高,严重影响了生活质量,亟需有效手段改善糖尿病患者种植体骨结合以提高成功率。探究黄连素在高糖环境下对骨髓间充质干细胞成骨分化的影响及具体机制,将能为解决上述问题提供有效的理论支撑。目的:探讨天然提取物黄连素在高糖微环境下对大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的影响。方法:通过全骨髓贴壁法培养SD大鼠骨髓间充质干细胞。CCK-8法检测在高糖生理环境下添加不同浓度黄连素对骨髓间充质干细胞增殖的影响并筛选出最适黄连素浓度。通过碱性磷酸酶活性、茜素红染色以及PCR检测Runx2、Osx表达,判断黄连素在高糖环境下对骨髓间充质干细胞成骨分化的影响。为进一步探索作用机制,添加AMPK特异性抑制剂Dorsomorphin,使用DCFH-DA活性氧荧光探针检测活性氧水平,Western blot检测p-AMPK的表达。结果与结论:①10μmol/L为黄连素促进骨髓间充质干细胞增殖的最适浓度;②黄连素在高糖微环境下促进骨髓间充质干细胞矿化结节形成并提高碱性磷酸酶活性;③黄连素在高糖微环境下促进Runx2和OSx基因表达;④黄连素可有效抑制高糖环境下骨髓间充质干细胞的活性氧水平;⑤黄连素促进骨髓间充质干细胞成骨及抑制活性氧的作用被AMPK抑制剂逆转;⑥黄连素可激活AMPK,促进p-AMPK表达;⑦上述结果表明,黄连素(10μmol/L)能够通过激活AMPK并降低细胞内活性氧水平,从而促进高糖环境下骨髓间充质干细胞的成骨分化。

关键词：黄连素骨髓间充质干细胞高糖微环境细胞增殖成骨分化 AMPK 活性氧

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黄连素调控炎症治疗心血管疾病的研究进展

中药药理与临床 2024年

作者：赵玉珂李晓凤于露钱舒乐王润英郭海珍宋博涵杜武勋天津中医药大学天津中医药大学第二附属医院

低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）是心血管疾病（CVD）防治的主要靶点，然而尽管接受强化降脂治疗使LDL-C达标，仍然面临着较高的心血管事件发生率。炎症与临床心血管风险显著相关，这支持了靶向炎症治疗似乎是在传统药物治疗背景下降低残... 详细信息

低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）是心血管疾病（CVD）防治的主要靶点，然而尽管接受强化降脂治疗使LDL-C达标，仍然面临着较高的心血管事件发生率。炎症与临床心血管风险显著相关，这支持了靶向炎症治疗似乎是在传统药物治疗背景下降低残余心血管风险的一种有希望的策略。黄连素，又称小檗碱，是从黄连中提取的异喹啉生物碱，是黄连活性成分中含量最高且最具价值的单体。目前的研究表明黄连素通过抑制炎症因子的产生与表达、调控炎症通路从而抑制炎症反应，本文对目前抗炎治疗现状和黄连素调控炎症治疗CVD的最新研究进展进行综述，以期为进一步挖掘黄连素抗炎的药理机制从而用于临床治疗CVD提供参考。

关键词：心血管疾病炎症黄连素

黄连素在血液肿瘤中的作用及相关机制研究进展

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中国实验血液学杂志 2024年第2期32卷 639-642页

作者：曹永芹孙超李建勇周新南京医科大学附属无锡市人民医院血液科江苏无锡214023 南京医科大学第一附属医院血液科江苏南京210029

传统中药黄连素是一种从黄连根茎中提取的异喹啉类生物碱,具有抗炎、止泻等作用,既往较常用于治疗感染和胃肠道疾病。近年来研究发现,黄连素可在白血病、淋巴瘤、多发性骨髓瘤等肿瘤治疗中发挥广泛的抗癌效应。在血液系统恶性肿瘤中,黄... 详细信息

传统中药黄连素是一种从黄连根茎中提取的异喹啉类生物碱,具有抗炎、止泻等作用,既往较常用于治疗感染和胃肠道疾病。近年来研究发现,黄连素可在白血病、淋巴瘤、多发性骨髓瘤等肿瘤治疗中发挥广泛的抗癌效应。在血液系统恶性肿瘤中,黄连素可诱导细胞自噬、促进细胞凋亡、调节细胞周期、抑制炎症反应、造成癌细胞氧化损伤,并可与miRNA相互作用,从而抑制癌细胞的增殖、迁移以及集落形成。本文就黄连素在恶性血液病中的作用及相关机制进行综述。

关键词：黄连素血液系统肿瘤抗癌

基于肠道菌群和代谢组学研究黄连素和黄芩苷配比对湿热内蕴型2型糖尿病粪菌移植小鼠的影响

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中国实验方剂学杂志 2024年

作者：陈梦婕刘艺敏周云余柯铭夏敏刘红宁吉燕华曾治君江西中医药大学中医基础理论分化发展研究中心/江西省中医病因生物学重点实验室

目的：从肠道菌群和代谢组学角度探讨黄连素（BBR）和黄芩苷（BAI）配比改善湿热内蕴型2型糖尿病（T2DM）的作用机制。方法：用抗生素诱导小鼠为“伪无菌鼠”，然后将30只“伪无菌鼠”随机分为正常粪菌移植组（n=10）和湿热内蕴型T2DM... 详细信息

目的：从肠道菌群和代谢组学角度探讨黄连素（BBR）和黄芩苷（BAI）配比改善湿热内蕴型2型糖尿病（T2DM）的作用机制。方法：用抗生素诱导小鼠为“伪无菌鼠”，然后将30只“伪无菌鼠”随机分为正常粪菌移植组（n=10）和湿热内蕴型T2DM粪菌移植组（n=20），分别灌胃健康人粪菌悬液和湿热内蕴型T2DM患者粪菌悬液，每只小鼠灌胃200 μL，隔日灌胃，共15次，以此重塑小鼠肠道微生物群。将造模后的T2DM小鼠随机分为模型组（n=8）和BBR-BAI给药组（n=11）。BBR给药剂量为200 mg·kg-1，根据前期对BBR和BAI配比研究结果，按照BBR:BAI=10:1加入BAI溶液后进行灌胃，连续给药8周。通过检测空腹血糖（FBG）、糖化血红蛋白（HbA1c）、胰岛素（INS）、甘油三酯（TG）、总胆固醇（CHOL）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、谷草转氨酶（AST）和谷丙转氨酶（ALT）水平，评估BBR-BAI配比对T2DM小鼠糖脂代谢和肝功能的影响；应用苏木素-伊红（HE）染色观察小鼠结肠组织病理变化；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测结肠组织紧密连接蛋白封密蛋白1（Claudin-1）、闭锁小带蛋白1（ZO-1）、闭合蛋白（Occludin）的表达；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）法检测结肠组织中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素1β（IL-1β）和白细胞介素-6（IL-6）的水平；16S rRNA测序和超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱（UPLC-Q-TOF-MS）分别检测小鼠粪便肠道菌群和差异代谢物。结果：BBR-BAI干预明显降低T2DM小鼠FBG、HbA1c及INS水平（P素抵抗（P<0.01）；此外BBR-BAI明显增加紧密连接蛋白ZO-1、Occludin、Claudin-1含量（P<0.05，P<0.01），明显降低结肠炎症因子TNF-α、IL-1β和IL-6表达水平（P<0.05，P<0.01）；16S rRNA测序结果发现BBR-BAI可明显升高Ligilactobacillus、Phascolarctobacterium、Akkermansia等菌属的相对丰度（P<0.05），明显降低Alistipes、Odoribacter、Colidextribacter等菌属的相对丰度（P<0.05）；UPLC-Q-TOF-MS分析共鉴定出28个差异代谢物，涉及的代谢通路主要为花生四烯酸代谢、α-亚麻酸代谢等。结论：BBR-BAI可通过调整肠道菌群多种菌属相对丰度和粪便代谢产物的表达进而发挥对湿热内蕴型T2DM的改善作用。

关键词：粪菌移植湿热内蕴 2型糖尿病黄连素黄芩苷肠道菌群代谢组学

载黄连素的同轴静电纺丝膜对牙周致病菌及生物膜的抑菌性研究

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国际口腔医学杂志 2024年第5期51卷 596-607页

作者：张睿郝婷吕闻任双双刘玉吴文蕾孙卫斌南京大学医学院附属口腔医院、南京市口腔医院牙周病科、南京大学口腔医学研究所南京210008 南京大学医学院附属口腔医院、南京市口腔医院牙体牙髓病科、南京大学口腔医学研究所南京210008 南京大学医学院附属口腔医院、南京市口腔医院高级专家诊疗科、南京大学口腔医学研究所南京210008

目的制备并表征负载黄连素的同轴静电纺丝膜,评价其体外抑制牙周致病菌和生物膜的作用。方法采用同轴静电纺丝法制备负载黄连素的聚己内酯/明胶膜(PCL/Gel-BBR)并对其进行表征检测,黄连素负载质量分数分别为0.25%、0.5%、1.0%。通过抑... 详细信息

目的制备并表征负载黄连素的同轴静电纺丝膜,评价其体外抑制牙周致病菌和生物膜的作用。方法采用同轴静电纺丝法制备负载黄连素的聚己内酯/明胶膜(PCL/Gel-BBR)并对其进行表征检测,黄连素负载质量分数分别为0.25%、0.5%、1.0%。通过抑菌试验评价载药膜对牙龈卟啉单胞菌(***,ATCC 33277)及具核梭杆菌(***,ATCC 25586)增殖的抑制作用。采用结晶紫染色法、苯酚-硫酸法、菌落计数法、活/死细菌染色等综合评价载药膜对***和***双菌种生物膜的影响。采用CCK-8法和共聚焦显微镜检测载药膜的细胞毒性。结果同轴黄连素载药膜理化性能良好且能在体外稳定释放黄连素。1.0%黄连素载药膜可以有效抑制***和***的增殖,对双菌种生物膜的形成和活性也有抑制作用,且以上效应呈现浓度依赖性。黄连素载药膜体外生物相容性良好。结论负载黄连素的同轴静电纺丝膜具备体外抑制牙周致病菌进而抑制生物膜形成的作用,生物相容性良好,有望用于牙周药物递送以辅助牙周炎治疗或预防牙周术后感染。

关键词：黄连素同轴静电纺丝牙龈卟啉单胞菌生物膜

香芹酚和黄连素对小鼠子宫内膜炎炎性细胞因子及相关基因表达的影响

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黑龙江畜牧兽医 2024年第4期 100-107页

作者：王亚博马占飞姜国均河北农业大学动物医学院河北保定071001

为了探究香芹酚和黄连素对小鼠子宫内膜炎炎性细胞因子及相关基因表达的影响,试验将64只小鼠随机分为4组,分别为空白组、模型组、黄连素治疗组和香芹酚治疗组,每组16只。空白组小鼠经子宫灌注生理盐水0.1 mL,模型组、黄连素治疗组和香... 详细信息

为了探究香芹酚和黄连素对小鼠子宫内膜炎炎性细胞因子及相关基因表达的影响,试验将64只小鼠随机分为4组,分别为空白组、模型组、黄连素治疗组和香芹酚治疗组,每组16只。空白组小鼠经子宫灌注生理盐水0.1 mL,模型组、黄连素治疗组和香芹酚治疗组子宫灌注大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和无乳链球菌的混合菌液0.1 mL,连续5 d;第6天,空白组和模型组小鼠子宫灌注生理盐水,黄连素治疗组子宫灌注黄连素,香芹酚治疗组子宫灌注香芹酚,各0.1 mL,连续7 d;第13天处死所有小鼠,采集子宫组织,观察子宫组织病理学变化,采用ELISA试剂盒测定子宫组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-8(IL-8)的质量浓度,采用实时荧光定量PCR法测定子宫中TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8、Toll样受体2(TLR2)和Toll样受体4(TLR4)的mRNA相对表达量。结果表明:模型组子宫内膜内陷,结缔组织排列疏松,黏膜上皮细胞脱落,炎性细胞增多,子宫组织中TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-8的质量浓度均极显著高于空白组(P黄连素组和香芹酚组子宫组织中TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-8的质量浓度均极显著低于模型组(P黄连素治疗组TNF-α质量浓度极显著高于香芹酚治疗组(P0.05)。说明黄连素和香芹酚可以减轻大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和无乳链球菌导致的小鼠子宫组织损伤,降低子宫组织中炎性细胞因子的质量浓度及相关基因的表达量,对子宫内膜炎具有治疗作用。

关键词：子宫内膜炎黄连素香芹酚炎性细胞因子 TLR2 TLR4

基于肠道菌群分析探讨黄连素对多囊卵巢综合征小鼠的作用和机制研究

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基于肠道菌群分析探讨黄连素对多囊卵巢综合征小鼠的作用和机制研...

作者：信鸽长春工业大学

学位级别：硕士

多囊卵巢综合征（PCOS）是一种内分泌和代谢类异常疾病,但其病理机制仍不明晰,肠道菌群既能关联下丘脑—垂体轴,影响性激素的分泌,又能干预代谢、炎症及胰岛素的分泌,有“上下兼治”之效。黄连素被用于清热解毒和抗肠道细菌感染,此外,... 详细信息

多囊卵巢综合征（PCOS）是一种内分泌和代谢类异常疾病,但其病理机制仍不明晰,肠道菌群既能关联下丘脑—垂体轴,影响性激素的分泌,又能干预代谢、炎症及胰岛素的分泌,有“上下兼治”之效。黄连素被用于清热解毒和抗肠道细菌感染,此外,还有改善Ⅱ型糖尿病、降血脂、抗炎等的效用,并对人体无其他明显副作用。本文主要探究黄连素预防性给药对脱氢表雄酮（DHEA）辅以高脂饮食诱导的小鼠多囊卵巢综合征的具体作用,同时探究黄连素对肠道菌群及肠道菌群对PCOS的影响,并且通过网络药理学手段预测黄连素在分子水平及代谢水平对人体多囊卵巢综合征的作用。将小鼠分为C组（即空白对照）、M组（即PCOS模型小鼠）和T组（即PCOS模型小鼠予黄连素治疗）三组,利用DHEA建立PCOS鼠模型,辅以高脂饲料喂养,并利用黄连素进行干预治疗。定时对小鼠监测体重、检测动情周期,进行腹腔葡萄糖耐量试验和胰岛素耐量试验;实验结束后,对小鼠肝脏、卵巢及脂肪垫称量湿重,并进行HE染色观察,验证是否造模成功及黄连素的治疗效果。取三组小鼠的粪便样本标记并保存,进行16S r RNA肠道菌群分析。并通过网络药理学手段预测黄连素对人的多囊卵巢综合征的治疗靶点。结果显示,PCOS造模成功,黄连素缓解了T组小鼠的动情周期紊乱,且显著缓解了小鼠的体重异常增长、脂肪积聚和糖代谢异常,T组小鼠脂肪垫细胞截面积为（2858±146）μm,显著低于M组[（9518±347）μm],两组比较,差异有统计学意义（P0.05）。门水平物种分类学组成结果显示,与C组相比,M组小鼠的厚壁菌门（Firmicutes）相对丰度有升高趋势（P>0.05）,而拟杆菌门（Bacteroidetes）的相对丰度显著降低（P黄连素对人体的作用靶点共98个,人类的多囊卵巢综合征相关基因共5476个,两者取交集获交集基因共59个。通过富集分析得到蛋白激酶活性、蛋白激酶信号B的调节和蛋白质及丝氨酸的磷酸化功能,并富集到趋化因子信号通路、脂质和动脉粥样硬化、孕激素介导的卵母细胞成熟、PI3K-Akt等的信号通路。总的来说,黄连素对PCOS小鼠的治疗作用可能主要体现在黄连素能够正向调节小鼠的肠道菌群,从而调节肠道菌群代谢产物、炎症、氧化应激、糖脂代谢及肠道屏障等。而由于内分泌系统及脑肠轴的存在,小鼠的动情周期,即性激素紊乱方面也有所改善。网络药理学分析表明黄连素在分子及代谢水平对PCOS的治疗可能是通过对氨基酸、蛋白质的修饰及对酶活性的调控实现的;并且黄连素可能通过信号通路实现对机体的抗炎作用,改善糖脂类代谢及胰岛素代谢或作用于卵巢卵母细胞的发育以及激素的调节,这与上述实验中PCOS模型小鼠的动情周期被改善的结论相一致。

关键词：黄连素多囊卵巢综合征肠道菌群网络药理学脂肪

黄连素在抑制幽门螺杆菌多重耐药中的作用研究

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浙江医学 2024年第5期46卷 459-463,469页

作者：周帆彭君伟徐小青曹勤湖州市第三人民医院消化内科 313000 上海市闵行区肿瘤医院中西医结合科上海中医药大学附属普陀医院(上海市普陀区中心医院)消化内科

目的研究黄连素抑制幽门螺杆菌(Hp)多重耐药(MDR)株对常用抗菌药物耐药性的作用。方法采用E-test法检测临床分离Hp菌株的耐药性,从中筛选出双重耐药(DR)株和MDR株;通过抗菌药物浓度两倍递增法对DR株进行体外诱导耐药;采用倍比稀释法... 详细信息

目的研究黄连素抑制幽门螺杆菌(Hp)多重耐药(MDR)株对常用抗菌药物耐药性的作用。方法采用E-test法检测临床分离Hp菌株的耐药性,从中筛选出双重耐药(DR)株和MDR株;通过抗菌药物浓度两倍递增法对DR株进行体外诱导耐药;采用倍比稀释法检测黄连素对MDR株的最小抑菌浓度(MIC);在黄连素1/2 MIC浓度下连续传代培养MDR菌株,分别在培养1代和5代后检测对应抗菌药物的MIC值变化。结果 (1)共成功分离出128株Hp菌株,根据药敏试验筛选出DR株30株,MDR株12株,阿莫西林(AMX)、左氧氟沙星(LEV)、克拉霉素(CLR)、甲硝唑(MTZ)的耐药率分别为4.7%、26.6%、32.0%、64.8%,分离株中的MDR率为9.4%。(2)体外成功诱导MDR株24株,AMX诱导失败,其中MTZ诱导株的耐药水平最高,CLR次之,LEV最低;(3)黄连素对36株MDR株有明显的抑菌作用,MIC值范围为8~128μg/mL,大部分集中在32μg/mL;(4)选取的27株高水平耐药MDR株,经黄连素作用后共有17株的MIC值降低4倍及以上或逆转为敏感株,其中分别有9株、11株、5株对应CLR、LEV、MTZ的MIC值有阳性变化。在3种抗菌药物的阳性株中,MTZ组的MIC值下降倍数最高,CLR组居中,LEV组最低,3组比较差异有统计学意义(P黄连素可有效逆转部分MDR株对常用抗菌药物的耐药性,且逆转程度与作用时间、抗菌药物种类有关。

关键词：黄连素幽门螺杆菌多重耐药

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黄连素对肝癌细胞作用机制研究进展

辽宁中医药大学学报 2024年

作者：李孟蓝王乾陕西中医药大学陕西中医药大学附属医院肝胆外科

黄连素是从黄连中提取的一种异喹啉类季铵生物碱，通过多靶点、多途径共同发挥抗肝癌作用。黄连素抗肝癌作用机制主要为通过抑制肝癌细胞增殖、诱导细胞凋亡、干预肝癌细胞上皮-间质转化、抑制肝癌细胞迁移及侵袭、诱导癌细胞自噬性死... 详细信息

黄连素是从黄连中提取的一种异喹啉类季铵生物碱，通过多靶点、多途径共同发挥抗肝癌作用。黄连素抗肝癌作用机制主要为通过抑制肝癌细胞增殖、诱导细胞凋亡、干预肝癌细胞上皮-间质转化、抑制肝癌细胞迁移及侵袭、诱导癌细胞自噬性死亡、诱导细胞周期停滞及抑制肿瘤血管生成等。通过查阅近几年的国内外相关文献，整理体内外实验结果，对黄连素在抗肝癌细胞方面的作用机制进行综述。揭示黄连素溶解性差、肠道吸收率低、口服生物利用度低等问题，提出新剂型的研发可提高黄连素生物利用度和细胞摄取，为黄连素抗肝癌细胞作用机制的深入研究及抗肝癌新药研发提供相应参考。

关键词：黄连素肝癌细胞凋亡上皮间质-转化自噬