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血栓调节素-凝血酶-高迁移率族蛋白1通路在慢性硬膜下血肿发生发展中的作用研究进展

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中华神经医学杂志 2024年第2期23卷 181-185页

作者：武泽军赵君爽胡钧涛锦州医科大学研究生院锦州121000 湖北医药学院附属太和医院神经外科十堰442000

慢性硬膜下血肿(CSDH)是一种位于硬脑膜边界细胞层内,由包膜包被的血液、血凝块及其降解产物的集合体。血肿腔内的炎症反应、凝血功能障碍、新生毛细血管生成异常等病理生理过程在CSDH的发生发展中起重要作用。高迁移率族蛋白1(HMGB1)... 详细信息

慢性硬膜下血肿(CSDH)是一种位于硬脑膜边界细胞层内,由包膜包被的血液、血凝块及其降解产物的集合体。血肿腔内的炎症反应、凝血功能障碍、新生毛细血管生成异常等病理生理过程在CSDH的发生发展中起重要作用。高迁移率族蛋白1(HMGB1)可介导炎症反应、血管生成及止血等过程,血栓调节素(TM)则可通过与HMGB1结合,以依赖凝血酶的方式降解HMGB1。目前研究已证实CSDH的血肿液中TM、HMGB1及其下游相关因子的表达异常增高,但TM-凝血酶-HMGB1通路在CSDH发生发展中的作用尚不完全明确。本文围绕TM-凝血酶-HMGB1通路在CSDH发生发展中的作用研究进展进行综述,旨在为CSDH的发病机制及治疗新靶点研究提供一些参考。

关键词：慢性硬膜下血肿血栓调节素凝血酶高迁移率族蛋白1

高迁移率族蛋白1对低氧状态下肺动脉平滑肌细胞的影响研究

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实用心脑肺血管病杂志 2024年第2期32卷 63-69页

作者：李鸣远李倩武云新疆医科大学第一附属医院全科医学科新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市830054

目的探讨高迁移率族蛋白1(HMGB1)对低氧状态下肺动脉平滑肌细胞(PASMC)的影响。方法本实验时间为2022年3月—2023年9月。将PASMC分为对照组、低氧组、HMGB1中和抗体(HMGB1 Ab)组、HMGB1Ab+单钠尿酸盐(MSU)组,对照组:PASMC置于37℃、21%... 详细信息

目的探讨高迁移率族蛋白1(HMGB1)对低氧状态下肺动脉平滑肌细胞(PASMC)的影响。方法本实验时间为2022年3月—2023年9月。将PASMC分为对照组、低氧组、HMGB1中和抗体(HMGB1 Ab)组、HMGB1Ab+单钠尿酸盐(MSU)组,对照组:PASMC置于37℃、21%O_(2)、5%CO_(2)培养箱中常氧培养24 h;低氧组:PASMC置于37℃、3%O_(2)、5%CO_(2)培养箱中低氧培养24 h;HMGB1 Ab组:PASMC置于37℃、3%O_(2)、5%CO_(2)培养箱中低氧培养24 h,加入终浓度为20μg/ml的HMGB1 Ab培养3 h;HMGB1 Ab+MSU组:PASMC置于37℃、3%O_(2)、5%CO_(2)培养箱中低氧培养24 h,加入终浓度为20μg/ml的HMGB1 Ab培养3 h,然后加入终浓度为200 g/L的MSU培养3 h。采用CCK-8法检测各组细胞增殖活力,细胞划痕实验检测各组细胞迁移能力,免疫荧光染色观察各组PASMC中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达情况,实时荧光定量反转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测各组PASMC中HMGB1及细胞焦亡相关因子[NLRP3、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶1(Caspase-1)、gasdermin D(GSDMD)、白介素1β(IL-1β)、白介素18(IL-18)]的mRNA相对表达量,Western blot法检测各组PASMC中HMGB1及细胞焦亡相关因子相对表达量。结果低氧组细胞增殖活力高于对照组,HMGB1 Ab组细胞增殖活力低于低氧组,HMGB1 Ab+MSU组细胞增殖活力高于HMGB1 Ab组(P率高于对照组,HMGB1 Ab组划痕愈合率低于低氧组,HMGB1 Ab+MSU组划痕愈合率高于HMGB1 Ab组(P蛋白相对表达量高于对照组,HMGB1 Ab组PASMC中HMGB1、NLRP3、Caspase-1、GSDMD、IL-1β、IL-18 mRNA及蛋白相对表达量低于低氧组,HMGB1 Ab+MSU组PASMC中HMGB1、NLRP3、Caspase-1、GSDMD、IL-1β、IL-18 mRNA及其相对表达量高于HMGB1 Ab组(P迁移相关,靶向HMGB1 Ab能够抑制低氧诱导的PASMC异常增殖、迁移,该作用与其抑制细胞焦亡有关。

关键词：肺动脉高压肌细胞平滑肌低氧高迁移率族蛋白1 细胞焦亡

高迁移率族蛋白1在非酒精性脂肪性肝病中的作用研究进展

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浙江医学 2024年第5期46卷 544-548页

作者：王佳莹许丰张谢宁波大学医学部 315211 宁波市医疗中心李惠利医学消化内科

高迁移率族蛋白1(HMGB1)是一个非组蛋白染色质相关蛋白。其可释放到细胞外与相应受体结合引发炎症和免疫反应。近年来关于HMGB1在非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)发生、发展、治疗等方面的作用逐渐引起重视。本文就HMGB1在NAFLD中炎症反应、... 详细信息

高迁移率族蛋白1(HMGB1)是一个非组蛋白染色质相关蛋白。其可释放到细胞外与相应受体结合引发炎症和免疫反应。近年来关于HMGB1在非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)发生、发展、治疗等方面的作用逐渐引起重视。本文就HMGB1在NAFLD中炎症反应、自噬、纤维化和脂质代谢等方面的作用研究进展作一综述。

关键词：高迁移率族蛋白1 非酒精性脂肪性肝病晚期糖基化终产物受体 Toll样受体炎症

高迁移率族蛋白1通过调控自噬因子P62调节心肌细胞纤维化

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国际心血管病杂志 2024年第2期51卷 109-113页

作者：聂雅琴乌日娜金慧张广平李永明智利薛仕煊娜日格乐包头医学院中心临床医学院 014040 包头市中心医院心血管内科 014040

目的:探究高迁移率族蛋白1(HMGB1)通过调控自噬活性对心肌纤维化的影响及作用机制。方法:将人心肌细胞AC16培养于DMEM培养基中,用不同浓度的HMGB1(0、4、20、100μg/L)干预AC16细胞6 h,免疫荧光染色检测心脏成纤维细胞活化的标志性蛋白... 详细信息

目的:探究高迁移率族蛋白1(HMGB1)通过调控自噬活性对心肌纤维化的影响及作用机制。方法:将人心肌细胞AC16培养于DMEM培养基中,用不同浓度的HMGB1(0、4、20、100μg/L)干预AC16细胞6 h,免疫荧光染色检测心脏成纤维细胞活化的标志性蛋白α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达水平,Western blot法检测心肌自噬相关蛋白哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、磷酸化mTOR(p-mTOR)、微管相关蛋白1轻链3(LC3)、磷酸肌醇-3-激酶3(PIK3C3)、可溶性及不可溶性P62、α-SMA、Ⅰ型胶原蛋白(CollagenⅠ)在AC16中的表达水平。免疫共沉淀检测α-SMA与P62之间的互相作用。结果:不同浓度的HMGB1刺激AC16细胞,AC16细胞中心肌纤维化标志蛋白CollagenⅠ与α-SMA的表达水平呈浓度依赖性升高,自噬蛋白PIK3C3、不可溶性P62的蛋白表达水平,p-mTOR与mTOR的比值,LC3-Ⅱ与LC3-Ⅰ的比值呈浓度依赖性升高,可溶性P62的蛋白表达水平呈浓度依赖性降低。各组间的差异均有统计学意义(P均<0.01)。免疫共沉淀实验显示P62与α-SMA存在相互作用。结论:外源性HMGB1可抑制AC16细胞中的自噬流,诱导AC16细胞纤维化。

关键词：高迁移率族蛋白1 AC16细胞自噬心肌纤维化

血清程序性死亡蛋白1和高迁移率族蛋白1水平与脓毒症并发肝损伤的相关性研究

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福建医药杂志 2024年第1期46卷 8-11页

作者：林爱芳甘巧蓉吴旭玮福建医科大学孟超肝胆医院肝病内科福州350007

目的探讨血清程序性死亡蛋白1(programmed cell death protein 1,PD1)、高迁移率族蛋白1(high mobility group protein 1,HMGB1)水平与脓毒症并发肝损伤的相关性。方法选取58例脓毒症并发肝损伤患者作为肝损伤组,同期选择58例单纯脓毒... 详细信息

目的探讨血清程序性死亡蛋白1(programmed cell death protein 1,PD1)、高迁移率族蛋白1(high mobility group protein 1,HMGB1)水平与脓毒症并发肝损伤的相关性。方法选取58例脓毒症并发肝损伤患者作为肝损伤组,同期选择58例单纯脓毒症患者作为对照组。根据肝损伤程度将肝损伤组患者分为轻度损伤组(n=18)、中度损伤组(n=26)、重度损伤组(n=14);比较患者血清PD1、HMGB1表达水平;采用Spearman秩相关分析患者血清PD1、HMGB1表达水平与肝损伤程度的相关性;采用受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic,ROC)评估血清PD1、HMGB1表达水平对脓毒症患者并发肝损伤的诊断价值。结果肝损伤组患者的血清PD1、HMGB1表达水平均高于对照组(P<0.05);轻度损伤组、中度损伤组、重度损伤组患者的血清PD1、HMGB1表达水平依次递增(P<0.05);Spearman秩相关分析显示:脓毒症患者血清PD1、HMGB1表达水平与肝损伤程度呈正相关(P<0.05);ROC曲线结果显示,血清PD1、HMGB1表达水平对脓毒症并发肝损伤的曲线下面积(area under the curve,AUC)值分别为0.718和0.777,且两者联合检测的AUC值最大,为0.865。结论血清PD1、HMGB1表达水平与脓毒症并发肝损伤密切相关,且两者联合检测对脓毒症患者并发肝损伤的诊断价值最高。

关键词：程序性死亡蛋白1 高迁移率族蛋白1 脓毒症肝损伤

毛蕊异黄酮靶向高迁移率族蛋白1对心肌缺血再灌注损伤大鼠保护作用实验研究

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陕西医学杂志 2024年第7期53卷 873-878,883页

作者：赵明慧薛凌锦州医科大学附属第三医院心内科辽宁锦州121001

目的:探讨毛蕊异黄酮对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)大鼠的保护作用及机制。方法:SPF级SD大鼠,建立心肌缺血再灌注损伤大鼠模型。随机分为四组:假手术组、心肌缺血再灌注损伤组、毛蕊异黄酮低剂量组、毛蕊异黄酮高剂量组。将H9C2细胞分为四... 详细信息

目的:探讨毛蕊异黄酮对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)大鼠的保护作用及机制。方法:SPF级SD大鼠,建立心肌缺血再灌注损伤大鼠模型。随机分为四组:假手术组、心肌缺血再灌注损伤组、毛蕊异黄酮低剂量组、毛蕊异黄酮高剂量组。将H9C2细胞分为四组:对照组、缺氧/复氧组、毛蕊异黄酮组、重组高迁移率族蛋白1(HMGB1)蛋白组。超声心动图评估大鼠心功能,ELISA法测定心肌标志酶,HE染色观察心肌组织病理变化,TUNEL染色测定心肌组织和H9C2细胞凋亡情况,PPI网络分析毛蕊异黄酮的靶点预测和分子对接,胆囊收缩素八肽(CCK)8检测细胞活力,免疫荧光检测心肌HMGB1的表达量,Western blot检测高迁移率族蛋白1(HMGB1)、Toll样受体4(TLR4)、核因子-κB p65(NF-κB p65)和半胱氨酸蛋白酶-3(Cleaved caspase-3)相对表达水平。结果:心肌缺血再灌注损伤组较假手术组左心室舒张阶段末期内径(LVEDD)、左心室收缩阶段末期内径(LVESD)均上调(均P率(LVFS)均下调(均P蛋白(cTnI)水平显著升高;TUNEL阳性细胞数量升高,Cleaved caspase-3水平上调;HMGB1表达量增加(均P<0.05)。与心肌缺血再灌注损伤组比较,毛蕊异黄酮低、高剂量组LVEDD、LVESD均下调(均P<0.05),而LVEF和LVFS均上调(均P<0.05);心肌组织纤维排列尚规则,炎性细胞数量较少;血清CK-MB、LDH和cTnI水平降低;TUNEL阳性细胞数量降低,Cleaved caspase-3水平下调;HMGB1表达量降低(均P<0.05)。PPI和分子对接显示毛蕊异黄酮与HMGB1能较好的结合。缺氧/复氧组较对照组H9C2细胞TUNEL细胞阳性数量显著升高,Cleaved caspase-3、HMGB1、TLR4、NF-κB p65表达上调(均P<0.05)。毛蕊异黄酮组较缺氧/复氧组H9C2细胞TUNEL细胞阳性数量降低,Cleaved caspase-3、HMGB1、TLR4、NF-κB p65表达下调(均P<0.05)。而毛蕊异黄酮组基础上给予rHMGB1后,毛蕊异黄酮的保护作用被逆转。结论:毛蕊异黄酮能够明显改善大鼠心肌缺血再灌注损伤,这可能与抑制HMGB1/TLR4/NF-κB通路有关。

关键词：心肌缺血再灌注损伤毛蕊异黄酮高迁移率族蛋白1 炎症细胞凋亡 Toll样受体4/核因子-κB通路

高迁移率族蛋白1对脐静脉内皮细胞迁移及相关蛋白表达的影响

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太原理工大学学报 2023年第5期54卷 905-912页

作者：杜苗苗马海洋侯添郭继强安美文太原理工大学生物医学工程学院生物医学工程研究所太原030024 山西白求恩医院山西医科大学第三医院太原030032

【目的】组织工程中微循环的建立在生物材料植入中发挥重要作用,其中血管内皮细胞迁移是快速血管生成的主要影响因素。组织和器官损伤后常引发炎症反应,高迁移率族蛋白1(HMGB1)是炎症反应的起始因子,但对内皮细胞迁移的影响尚不清楚。... 详细信息

【目的】组织工程中微循环的建立在生物材料植入中发挥重要作用,其中血管内皮细胞迁移是快速血管生成的主要影响因素。组织和器官损伤后常引发炎症反应,高迁移率族蛋白1(HMGB1)是炎症反应的起始因子,但对内皮细胞迁移的影响尚不清楚。【方法】体外提取和培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),并进行细胞表型鉴定;构建培养液中含有HMGB1的浓度梯度,通过CCK-8、划痕实验和Transwell小室实验检测HUVECs的增殖能力和迁移能力,采用RT-qPCR和Western Blot检测细胞内细胞增殖因子和迁移因子基因和蛋白的表达情况。【结果】不同浓度HMGB1对HUVECs的增殖能力无显著影响,但对细胞迁移能力有浓度依赖性,随着HMGB1浓度增加,细胞的迁移能力增强。FGF-2表达随HMGB1浓度增加表达上调;高浓度HMGB1处理HUVECs后,VEGFA表达明显下降。【结论】HMGB1可通过FGF-2促进HUVECs迁移,为今后HMGB1对内皮细胞迁移能力的影响研究提供依据。

关键词：人脐静脉内皮细胞高迁移率族蛋白1 迁移血管内皮生长因子A 成纤维细胞生长因子-2

高迁移率族蛋白1和Toll样受体9在氧诱导视网膜病变小鼠视网膜中的表达及作用

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新乡医学院学报 2022年第1期39卷 1-5页

作者：梁晓洁刘向玲李晓鹏新乡医学院第三临床学院河南新乡453003 新乡医学院第三附属医院眼科河南新乡453003

目的探讨高迁移率族蛋白1(HMGB1)和Toll样受体9(TLR9)在氧诱导视网膜病变(OIR)小鼠视网膜中的表达及其在OIR发病中的作用。方法将30只7日龄C57BL/6J小鼠按随机数字表法分为OIR组和对照组,每组15只。对照组小鼠于正常空气中饲养;OIR组小... 详细信息

目的探讨高迁移率族蛋白1(HMGB1)和Toll样受体9(TLR9)在氧诱导视网膜病变(OIR)小鼠视网膜中的表达及其在OIR发病中的作用。方法将30只7日龄C57BL/6J小鼠按随机数字表法分为OIR组和对照组,每组15只。对照组小鼠于正常空气中饲养;OIR组小鼠置于含体积分数(75±2)%氧气的高浓度氧箱中饲养5 d,然后再放回正常空气中饲养5 d制备OIR模型。2组小鼠均于出生第17天处死,取眼球,采用视网膜铺片法观察视网膜新生血管形成情况,验证造模是否成功。采用免疫荧光染色和Western blot法检测小鼠视网膜中HMGB1和TLR9蛋白的表达。结果对照组小鼠视网膜完全血管化,自视盘中心向四周放射状均匀分布,血管形态及走形正常。OIR组小鼠视网膜中央处可见血管闭塞区,闭塞区周边可见大量新生血管簇,视网膜血管走形迂曲。免疫荧光染色显示,对照组小鼠视网膜各层间结构整齐,HMGB1蛋白呈红色,主要表达于神经节细胞层,在内核层及外核层可见少量表达;OIR组小鼠视网膜增厚,各层间结构紊乱,组织紧密度降低,HMGB1蛋白在神经节细胞层、内核层、外核层表达。对照组小鼠视网膜中TLR9蛋白(红色)主要表达于神经节细胞层、内核层;OIR组小鼠视网膜中TLR9蛋白在神经节细胞层及内核层的阳性表达增加。免疫荧光染色结果显示,OIR组小鼠视网膜中HMGB1、TLR9蛋白表达显著高于对照组(P蛋白印迹条带表达于相对分子质量约25000区域,OIR组小鼠视网膜中HMGB1蛋白相对表达量显著高于对照组(P蛋白印迹条带表达于相对分子质量约125000区域,OIR组小鼠视网膜中TLR9蛋白相对表达量显著高于对照组(P蛋白在OIR小鼠视网膜中表达显著增加,二者可能相互作用共同参与视网膜新生血管形成,促进OIR的发生和发展。

关键词：氧诱导视网膜病变高迁移率族蛋白1 Toll样受体9 新生血管形成

高迁移率族蛋白1在血管内皮修复中对细胞迁移作用的实验研究

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高迁移率族蛋白1在血管内皮修复中对细胞迁移作用的实验研究

作者：杜苗苗太原理工大学

学位级别：硕士

完整的血管内皮细胞对血管的正常功能至关重要。由于化学暴露或物理损伤（如血管成形术或支架植入）会导致血管损伤,原有内皮细胞的迁移和增殖是损伤修复的必要条件。在应激刺激或细胞受损后HMGB1会被释放到细胞外,作为损伤相关分子模式... 详细信息

完整的血管内皮细胞对血管的正常功能至关重要。由于化学暴露或物理损伤（如血管成形术或支架植入）会导致血管损伤,原有内皮细胞的迁移和增殖是损伤修复的必要条件。在应激刺激或细胞受损后HMGB1会被释放到细胞外,作为损伤相关分子模式,参与炎症反应,迁移,增殖以及组织再生。HMGB1可以作为促血管生成因子,通过刺激血管内皮细胞的萌发和迁移来促进血管生成进而促进损伤的修复。VEGFA以及FGF-2可以参与血管内皮的增殖,迁移以及血管化。本文针对HMGB1在血管内皮修复中对细胞迁移作用进行实验研究,主要研究内容和结论如下:（1）从脐静脉中分离HUVECs。采用胶原酶灌注消化法进行HUVECs的分离,通过细胞形态观察、细胞增殖活性检测、细胞成管能力检测以及细胞特异性蛋白检测等手段对实验细胞进行鉴定。本研究成功从脐静脉中分离提取出原代细胞,细胞由起始的梭形或多边形增长为融合的卵石样;生长曲线呈“S”曲线生长,表明细胞具有良好的活性;在基质胶上细胞融合60%-80%时,形成管腔结构,具有形成血管的能力。吞噬荧光标记的乙酰低密度脂蛋白、胞内内皮细胞特征蛋白VWF以及CD31,鉴定提取的细胞呈阳性,表明本研究方法提取的细胞为人脐静脉内皮细胞。（2）研究不同浓度HMGB1对HUVECs增殖以及迁移的影响。体外构建HMGB1浓度梯度,CCK-8法测定HUVECs的增殖能力、划痕创面愈合实验以及Transwell迁移小室实验测定HUVECs的迁移能力。细胞增殖实验结果显示不同浓度HMGB1对HUVECs的增殖影响差异较小。细胞划痕结果显示,创面愈合率和细胞迁移率随着HMGB1浓度的增加而逐渐增加,且Transwell小室实验显示穿过小室的细胞数量随HMGB1浓度的增加而增多。（3）研究不同浓度HMGB1对HUVECs的VEGFA和FGF-2分泌、基因以及蛋白的影响。体外构建HMGB1浓度梯度,RT-q PCR、Western Blot以及ELISA测定HUVECs中VEGFA和FGF-2的基因、蛋白以及分泌表达的影响。HUVECs胞外蛋白分泌检测结果显示,培养液中VEGFA的含量各组间变化较小,差异无统计学意义。长时间高浓度作用HUVECs时,细胞内的VEGFA基因与蛋白表达与对照组比较降低,差异具有统计学意义。各浓度HMGB1作用HUVECs均可引起细胞内FGF-2基因与蛋白表达的升高,差异有统计学意义。同一浓度HMGB1作用下48 h与12 h以及24 h相比,细胞内FGF-2基因与蛋白表达稍有降低。仅两组高浓度的HMGB1作用时,胞外FGF-2的水平会升高。本研究通过优化的酶灌注消化法,可成功提取HUVECs。HMGB1对HUVECs的增殖影响较小,不同浓度HMGB1对HUVECs的迁移能力均有促进作用,且呈浓度和时间依赖性,为寻找血管损伤后具有促进修复作用的新治疗靶点提供实验依据。

关键词：高迁移率族蛋白1 人脐静脉内皮细胞细胞迁移内皮细胞生长因子A 成纤维细胞生长因子-2