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红霉素高产菌株选育及其发酵条件的优化

中国兽药杂志 2024年第1期58卷 37-43页

作者：李春玲牛莎莎牛春石彦鹏张萍宁夏泰瑞制药股份有限公司银川750101

为选育出红霉素(Erythromycin)发酵生产的优良菌株并建立其高效发酵条件,以产红霉素的红色糖多孢菌(Saccharopolyspora erythraea)SE-2207菌株作为原始菌株,利用EMS(甲基磺酸乙酯)、UV(紫外诱变)和ARTP(常压室温等离子体诱变)诱变的方... 详细信息

为选育出红霉素(Erythromycin)发酵生产的优良菌株并建立其高效发酵条件,以产红霉素的红色糖多孢菌(Saccharopolyspora erythraea)SE-2207菌株作为原始菌株,利用EMS(甲基磺酸乙酯)、UV(紫外诱变)和ARTP(常压室温等离子体诱变)诱变的方法开展优良菌种选育,比较了三种方法的诱变效果,选育出1株遗传稳定、且对红霉素碱耐受性强的菌株SEM-7,其红霉素发酵效价达到8368mg/L,比原始菌株提高了25.5%。而且,SEM-7菌株细胞酰基辅酶A合成酶活力显著高于原始菌株。通过对发酵培养基中添加正丙醇、豆油的浓度进行优化筛选,使SEM-7菌株500L中试发酵效价达到9155mg/L。研究结果对提升红霉素工业化发酵生产水平具有重要意义。

关键词：红霉素高产菌株诱变发酵条件优化

Avermectin B_(1a)组分高产菌株的诱变育种

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中国抗生素杂志 2006年第1期31卷 52-55页

作者：任超马珦坡李宝库路新利河北大学生命科学学院保定071002 河北职工医学院保定071111 河北大学药学院保定071002

目的了解averm ectin产生菌*** itilis的生长特性,提高产生菌B1a组分的产量。方法采用紫外线、诱变剂亚硝基胍并结合甲硫氨酸诱变等手段对出发菌株*** itilis N-5-6进行诱变处理,初筛、复筛。结果筛选获得总效价达到4525.8μg/m l的高... 详细信息

目的了解averm ectin产生菌*** itilis的生长特性,提高产生菌B1a组分的产量。方法采用紫外线、诱变剂亚硝基胍并结合甲硫氨酸诱变等手段对出发菌株*** itilis N-5-6进行诱变处理,初筛、复筛。结果筛选获得总效价达到4525.8μg/m l的高产除虫链霉菌突变株A-3,B1a比例提高到56.0%。结论采用紫外线及亚硝基胍诱变方法,结合甲硫氨酸诱变筛选,与出发菌株相比可以获得averm ectin总效价及B1a组分显著提高的菌株。

关键词： Avermectin B1a组分诱变效价高产菌株

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一株丁二酮高产菌株的鉴定及发酵条件优化

应用与环境生物学报 2015年第1期21卷 41-45页

作者：郭洪秀张白梅冯顺利郭明月徐青锐曹毅乔代蓉四川大学生命科学学院微生物与代谢工程四川省重点实验室成都610065

天然丁二酮是一种香精载体,为提高其产量,有必要筛选出丁二酮高产菌株及其最佳发酵条件.从保存的一株丁二酮高产菌株6-1(2)出发,通过分子生物学方法对其进行鉴定,采用单因素试验和最佳单因素组合实验的方法筛选出该菌株的最佳发酵条件.... 详细信息

天然丁二酮是一种香精载体,为提高其产量,有必要筛选出丁二酮高产菌株及其最佳发酵条件.从保存的一株丁二酮高产菌株6-1(2)出发,通过分子生物学方法对其进行鉴定,采用单因素试验和最佳单因素组合实验的方法筛选出该菌株的最佳发酵条件.结果表明,实验菌株6-1(2)与植物乳杆菌Lactobacillus plantarum的AB326301.1序列同源性最高,初步鉴定为植物乳杆菌;发酵条件经过优化后,丁二酮的产量从初始的38 mg/L提高到167.56 mg/L,提高了340.95%,产量提高显著.优化发酵条件为:牛肉膏10 g/L,柠檬酸氢二胺2 g/L,酵母浸粉15 g/L,磷酸氢二钾2 g/L,乙酸钠2 g/L,葡萄糖20 g/L,蛋白胨30 g/L,吐温-80 1 mL/L,初始pH 6.2-6.4,接种量1.5%,37℃静置培养10 h;该发酵条件下的丁二酮产量提高显著.本研究对丁二酮的工业化生产具有一定的参考价值.

关键词：丁二酮高产菌株植物乳杆菌发酵条件优化菌株鉴定单因素试验

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β-聚苹果酸高产菌株的筛选及鉴定

浙江大学学报（医学版） 2012年第4期41卷 434-440页

作者：徐玲芬陈忠华赵婧阮红刘森泉浙江大学城市学院医学与生命科学学院浙江杭州310015

目的:从自然界筛选β-聚苹果酸(PMLA)高产菌株,并对其进行菌种鉴定。方法:从自然界取样,经过单菌落分离,根据菌落形态特征、聚苹果酸的定性检测和核酸序列分类鉴定手段,筛选PMLA高产菌株。结果:分离得到一株PMLA高产菌株,编号为Ⅱ04,经... 详细信息

目的:从自然界筛选β-聚苹果酸(PMLA)高产菌株,并对其进行菌种鉴定。方法:从自然界取样,经过单菌落分离,根据菌落形态特征、聚苹果酸的定性检测和核酸序列分类鉴定手段,筛选PMLA高产菌株。结果:分离得到一株PMLA高产菌株,编号为Ⅱ04,经形态学研究和ITS序列分析,确定为短梗霉菌Aureobasidium pullulans,命名为Aureobasidium pullulans ZUCC-41。该菌在25℃,220 r/min振荡培养7 d,采用高效液相色谱法(HPLC)进行产物定量分析,检测到PMLA产量可达26.23 g/L。结论:从自然界中分离得到一株PMLA高产菌株,经鉴定为短梗霉菌Aureobasidium pullulans,其发酵产量可达26.23 g/L。

关键词：苹果酸盐有丝分裂孢子真菌/分离和提纯聚苹果酸高产菌株鉴定

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一株法夫酵母虾青素高产菌株的生产性能

生物工程学报 2011年第7期27卷 1065-1075页

作者：倪辉洪清林肖安风李利君蔡慧农苏文金集美大学生物工程学院厦门361021 福建省高校食品微生物与酶工程技术研究中心厦门361021 厦门市食品与生物工程技术研究中心厦门361021

为了评价虾青素高产菌株-法夫酵母JMU-MVP14的生产性能及建立虾青素高产发酵技术,通过测定糖、生物量、虾青素产量、总类胡萝卜素产量等发酵参数,用摇瓶试验对比了法夫酵母JMU-MVP14和出发菌株的差异,用7 L罐试验对比了pH值调控方式及... 详细信息

为了评价虾青素高产菌株-法夫酵母JMU-MVP14的生产性能及建立虾青素高产发酵技术,通过测定糖、生物量、虾青素产量、总类胡萝卜素产量等发酵参数,用摇瓶试验对比了法夫酵母JMU-MVP14和出发菌株的差异,用7 L罐试验对比了pH值调控方式及补料培养基成分对发酵的影响,用1 m3罐试验评估了法夫酵母JMU-MVP14高密度发酵虾青素的产量水平。摇瓶发酵结果表明,法夫酵母JMU-MVP14虾青素及总类胡萝卜素的细胞产率分别达到6.01 mg/g及10.38 mg/g;7 L罐分批发酵试验结果表明,自动流加调控pH值比间歇调控pH更有利于该法夫酵母的生长及虾青素合成;法夫酵母JMU-MVP14的μmax和Ks分别为0.20 h?1及21.73 g/L,其虾青素合成的模型为部分生长关联型。7 L罐补料分批发酵试验表明,在发酵过程中只补充糖液而不补充酵母膏及玉米浆有利于高密度、高产发酵虾青素;7 L罐补料分批发酵的生物量、虾青素和总类胡萝卜素的体积产率、虾青素和总类胡萝卜素的细胞产率分别达到了32.81 g/L、155.99 mg/L、399.99 mg/L、4.94 mg/g、12.19 mg/g。1 m3罐中试补料分批发酵的生物量、虾青素和总类胡萝卜素的体积产率、虾青素和总类胡萝卜素的细胞产率分别达到85.11 g/L、279.96 mg/L、618.01 mg/L、3.29 mg/g和7.26 mg/g;法夫酵母JMV-MVP14细胞中的蛋白质、总糖、脂肪含量分别为21.54%、41.34%和34.31%。该菌株具有很强的虾青素生产能力及良好的综合利用价值,能大幅度提高虾青素的发酵生产水平。

关键词：法夫酵母虾青素高产菌株动力学补料分批发酵

原生质体诱变选育阿霉素高产菌株及发酵产品质量的初步分析

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中国抗生素杂志 2013年第2期38卷 111-115页

作者：陈华包如胜张勇军李志强叶美丽宋月爽浙江海正药业股份有限公司中研院台州318000 浙江省抗真菌药物重点实验室台州318000

目的利用原生质体诱变方法从一株链霉菌原始菌株Streptomyces sp. H-323(CGMCC 4827)选育阿霉素高产突变菌株,以提高阿霉素的发酵单位,并对发酵产品的质量进行了初步研究。方法通过研究不同甘氨酸浓度、溶菌酶酶解时间、酶解温度、酶浓... 详细信息

目的利用原生质体诱变方法从一株链霉菌原始菌株Streptomyces sp. H-323(CGMCC 4827)选育阿霉素高产突变菌株,以提高阿霉素的发酵单位,并对发酵产品的质量进行了初步研究。方法通过研究不同甘氨酸浓度、溶菌酶酶解时间、酶解温度、酶浓度对H-323原生质体形成的影响,确定了原生质体的最佳制备和再生条件。通过阿霉素抗性选育,诱变原生质体筛选阿霉素高产突变菌株。最后通过高效液相、核磁等波谱分析法初步确定发酵法生产的阿霉素产品的质量。结果制备Streptomyces sp. H-323原生质体的最佳条件:种子培养基中甘氨酸浓度0.5%、溶菌酶浓度3mg/mL、酶解时间60min、酶解温度30℃。通过原生质体诱变结合阿霉素抗性选育,得到一株高产突变株,阿霉素发酵单位由出发菌株的300mg/L提高到700mg/L。通过波谱分析,发酵产物达到国外注册标准。结论通过原生质体诱变和抗性选育大大提高了阿霉素的产量,为高产阿霉素产业化提供方法支持。

关键词：阿霉素原生质体选育高产菌株产品质量

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红霉素高产菌株的选育

中国抗生素杂志 2003年第3期28卷 181-182页

作者：张金国王敏高宏军张国强安阳大学安阳455000 河南平原制药厂安阳455000

以红霉素链霉菌 0 11 2 6为出发菌株 ,经LiCl和紫外线复合诱变处理 ,再用含有 4种不同结构类似物的培养基定向筛选 ,获得 4株突变株 ,其中M 0 3 5 9摇瓶效价 6876u/ml,比起始菌株 (5 3 2 8u/ml)提高2 9 1% ,在 10t发酵罐上连续 6批验... 详细信息

以红霉素链霉菌 0 11 2 6为出发菌株 ,经LiCl和紫外线复合诱变处理 ,再用含有 4种不同结构类似物的培养基定向筛选 ,获得 4株突变株 ,其中M 0 3 5 9摇瓶效价 6876u/ml,比起始菌株 (5 3 2 8u/ml)提高2 9 1% ,在 10t发酵罐上连续 6批验证 ,平均发酵效价 70 16u/ml ,比原生产水平 (5 65 2u/ml)提高 2 4 1% ,并且质检全部合格。

关键词：红霉素高产菌株选育红霉素链霉菌诱变育种定向筛选

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被孢霉γ-亚麻酸高产菌株选育

菌物学报 2005年第1期24卷 85-92页

作者：朱国胜刘作易雷邦星廖国会贵州省农业生物技术重点实验室贵州省农业科学院生物技术研究所贵阳550006 贵州赤天化股份有限公司科研中心贵州省农业科学院植物保护研究所

利用紫外线复合氯化锂诱变高山被孢霉SM96,筛选出一株高产γ-亚麻酸的菌株TM11,产量比出发菌株(25mg/L)提高了近3倍。对影响其多不饱和脂肪酸产生的因子Mg2+,VB6,营养盐溶液,磷源,碳源,氮源酵母膏进行了正交试验,选出TM11最佳的培养基配... 详细信息

利用紫外线复合氯化锂诱变高山被孢霉SM96,筛选出一株高产γ-亚麻酸的菌株TM11,产量比出发菌株(25mg/L)提高了近3倍。对影响其多不饱和脂肪酸产生的因子Mg2+,VB6,营养盐溶液,磷源,碳源,氮源酵母膏进行了正交试验,选出TM11最佳的培养基配方:MgSO4·7H2O1.0g,VB6150mg/L,酵母膏6g/L,葡萄糖100g/L,营养盐溶液1mL/L,K2HPO42g/L。在上述最佳培养基中TM11的生物量达18.0213g/L,总脂达10.8128g/L,GLA量达668mg/L。

关键词：选育酵母膏株高高产菌株发菌菌株培养基配方被孢霉 γ-亚麻酸 HPO

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微生物谷氨酰胺转胺酶高产菌株的诱变选育

食品科学 2003年第5期24卷 62-67页

作者：王璋王灼维中国食品发酵工业研究院北京100027

以本实验室筛选的Streptomyces ***.W-12(谷氨酰胺转胺酶活0.24U/ml)为出发菌株,孢子经预培养处理处于萌发状态后制备成单孢子悬浮液,用1-甲基-3-硝基-1-亚硝基胍(NTG)单独和结合羟胺进行多次复合诱变处理。实验发现,诱变处理后菌落的... 详细信息

以本实验室筛选的Streptomyces ***.W-12(谷氨酰胺转胺酶活0.24U/ml)为出发菌株,孢子经预培养处理处于萌发状态后制备成单孢子悬浮液,用1-甲基-3-硝基-1-亚硝基胍(NTG)单独和结合羟胺进行多次复合诱变处理。实验发现,诱变处理后菌落的形态变异等特征与产酶能力呈相关关系,并被用于最初的突变菌落挑选。接着先后采用蛋白质交联凝絮-沉淀性能分析的初筛试验和摇瓶测定酶活的复筛试验分离选育高产酶突变菌株,最后获得一产酶活力达2.18U/ml的高产菌株W-12var HZ3,酶活相对提高了8倍。对该菌株进行分类鉴定方面的理化性能测试和传代实验结果表明,该菌遗传性较为稳定,而且其理化性能与已报道的产酶菌种明显不同。

关键词：微生物谷氨酰胺转胺酶高产菌株诱变选育产酶能力形态变异复合诱变处理发酵生产