检索结果-南通市图书馆

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

大豆中一个新防卫基因的克隆与鉴定

中国科学（C辑） 2001年第3期31卷 193-201页

作者：贺超英吴晓雷东方阳张劲松杜保兴张志永陈受宜中国科学院遗传研究所植物生物技术开放实验室北京100101

从大豆中分离鉴定了一个单拷贝的ｃＤＮＡ克隆，该基因所编码的蛋白质富含脯氨酸，命名为ＳｂＰＲＰ．序列分析表明它具有完整的编码框，编码一个具１２６个氨基酸的蛋白质，其中含有一个由２５个氨基酸组成的信号肽．成熟蛋白ＳｂＰ... 详细信息

从大豆中分离鉴定了一个单拷贝的ｃＤＮＡ克隆，该基因所编码的蛋白质富含脯氨酸，命名为ＳｂＰＲＰ．序列分析表明它具有完整的编码框，编码一个具１２６个氨基酸的蛋白质，其中含有一个由２５个氨基酸组成的信号肽．成熟蛋白ＳｂＰＲＰ具有典型的双模块结构，包括富含脯氨酸结构域（１７个氨基酸）和一个长的疏水的富含半胱氨酸的结构域（８４个氨基酸）．ＳｂＰＲＰ的表达具有明显的器官特异性，即叶中大量表达而根中不表达．Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交进一步表明，ＳｂＰＲＰ不仅对水杨酸处理作出迅速应答，而且也可对接种大豆花叶病毒Ｓａ株系作出应答，同时还对其他非生物胁迫如盐和干旱也有明显的应答作用，因此ＳｂＰＲＰ基因可能是一个新的防卫基因．

关键词：大豆防卫基因水杨酸水分胁迫双模块结构蛋白克隆鉴定

玉米对大斑病菌抗性中防卫基因的RT-PCR研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

南昌大学学报（理科版） 2002年第2期26卷 138-142页

作者：尚俊军余潮邹燕朱友林南昌大学生物科学工程系江西南昌330047

以玉米抗、感大斑突脐孢菌近等基因系为材料 ,采用PCR和RT -PCR技术 ,初步研究了苯丙氨酸解氨酶基因 (PAL)、胞液抗坏血酸过氧化物酶基因 (apx)和过氧化物酶K基因 (POXK)等防卫基因与玉米对大斑病菌抗性的关系。结果表明 ,在玉米抗病和... 详细信息

以玉米抗、感大斑突脐孢菌近等基因系为材料 ,采用PCR和RT -PCR技术 ,初步研究了苯丙氨酸解氨酶基因 (PAL)、胞液抗坏血酸过氧化物酶基因 (apx)和过氧化物酶K基因 (POXK)等防卫基因与玉米对大斑病菌抗性的关系。结果表明 ,在玉米抗病和感病自交系间 ,没有发现防卫基因在结构和组成上的差异。但在受到玉米大斑突脐胞菌侵染诱导后 ,玉米抗病系中防卫基因在转录水平上的表达强度明显高于感病系。

关键词：大斑病菌抗性玉米大斑病防卫基因 RT-PCR 抗病分子机制抗病基因工程

采后硅酸钠处理对厚皮甜瓜防卫基因mRNA的诱导表达

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

食品工业科技 2015年第19期36卷 163-165,170页

作者：魏娟张溪桐毕阳王毅董柏余王婷甘肃农业大学食品科学与工程学院甘肃兰州730070

本文研究了采后100 mmol/L硅酸钠浸泡处理对甜瓜果实苯丙烷代谢途径关键酶苯丙氨酸解氨酶(PAL)、查尔酮合成酶(CHS)、及抗病相关酶过氧化物酶(POD)、β-1,3-葡聚糖酶基因(β-1,3-Glu)mRNA表达的影响。结果表明:硅酸钠处理可提高PAL、CHS... 详细信息

本文研究了采后100 mmol/L硅酸钠浸泡处理对甜瓜果实苯丙烷代谢途径关键酶苯丙氨酸解氨酶(PAL)、查尔酮合成酶(CHS)、及抗病相关酶过氧化物酶(POD)、β-1,3-葡聚糖酶基因(β-1,3-Glu)mRNA表达的影响。结果表明:硅酸钠处理可提高PAL、CHS、POD、β-1,3葡聚糖酶基因mRNA的表达。其中经硅酸钠处理后PAL、CHS、POD基因分别于6、6、2 d达到最大表达量,其表达量分别为对照组的2.69、2.48、3.77倍。由此表明,采后硅酸钠处理厚皮甜瓜果实可通过诱导苯丙烷代谢途径关键酶PAL、CHS,及抗病相关酶POD、β-1,3葡聚糖酶基因的转录增强采后抗病性。

关键词：厚皮甜瓜硅酸钠实时定量PCR 防卫基因诱导抗性

基因枪法介导的抗赤霉病防卫基因转化小麦的研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

基因枪法介导的抗赤霉病防卫基因转化小麦的研究

作者：孙科华中农业大学

学位级别：硕士

小麦赤霉病(Fusarium head blight,FHB)是发生于世界温暖潮湿与半潮湿麦区的主要病害。由禾谷镰刀菌(Fusarium graminearum)侵染小麦后造成小麦产量与品质下降,产生的毒素危及人畜健康。由于常规育种周期较长,种质资源匮乏,抗赤霉病育... 详细信息

小麦赤霉病(Fusarium head blight,FHB)是发生于世界温暖潮湿与半潮湿麦区的主要病害。由禾谷镰刀菌(Fusarium graminearum)侵染小麦后造成小麦产量与品质下降,产生的毒素危及人畜健康。由于常规育种周期较长,种质资源匮乏,抗赤霉病育种进程缓慢。而采用转基因技术将外源抗病基因导入小麦,为培育抗赤霉病小麦新品系提供了新途径。本研究采用基因枪介导的最小表达框共转化法,分别以bar基因与pmi基因为筛选标记,将抗赤霉病相关防卫基因导入小麦栽培品种郑麦9023及扬麦15中,经PCR、RT-PCR及Southern blot等鉴定,获得了一些能稳定遗传的转基因株系。主要结果如下：1.比较了不同品种扬麦15和郑麦9023对基因枪法转化小麦的影响,在bar/Bialaphos和pmi/甘露糖两种筛选体系下,郑麦9023的组织培养特性都优于扬麦15,更适合作为小麦遗传转化的受体。2.以bar为筛选标记,将抗体融合蛋白基因Ech42-D2和AFP2-D2共转化扬麦15,获得转Ech42-D2基因小麦1株。T1-T3代的PCR鉴定表明,该转基因株系能稳定遗传T2代的RT-PCR结果表明,该株系能在RNA水平上表达。3.以bar为筛选标记,将哈茨木霉几丁质酶基因UEch42.抗菌肽基因D4E1及抗体融合蛋白基因AFP2-D2共转化扬麦15及郑麦9023,获得T0代阳性植株18株,其中扬麦15有5株,郑麦9023有13株。T1-T2代的PCR鉴定表明,能稳定遗传的转基因株系只有2株,其中含有D4E1与AFP2-D2基因的扬麦15株系1株,得到含有UEch42基因的郑麦9023株系1株;对其T1代植株进行Southern杂交表明,外源基因已经整合到了小麦基因组中;对其T2代植株进行RT-PCR检测,证实了目的基因在RNA水平上能表达。4.以pmi为筛选标记,将大麦几丁质酶基因Hvchi、哈茨木霉几丁质酶基因Ech42及抗菌肽基因AFP2共转化扬麦15及郑麦9023,获得含有Hvchi与AFP2基因的To代转基因植株1株。T1-T2代的PCR鉴定表明,该株系所含的目的基因于T2代丢失。5.对上述能够稳定遗传的转基因株系进行了接种鉴定,结果显示部分转基因植株的抗赤霉病扩展能力有显著的提高。

关键词：基因枪小麦共转化赤霉病防卫基因

携带不同抗白叶枯病基因的水稻防卫基因pal和chs的转录特征

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

农业生物技术学报 2000年第4期8卷 337-340页

作者：齐放军高学文王金生何晨阳南京农业大学植物保护学系!江苏南京 210095

用水稻抗白叶枯病基因近等基因系材料和转基因系材料，研究了水稻—白叶枯病菌互作中，水稻防卫基因ｐａｌ与ｃｈｓ的转录特征。Ｎｏｒｔｈｅｒｎ检测结果显示，在与白叶枯病菌非亲和性互作中，水稻ｐａｌ基因和ｃｈｓ基因的转录均受到... 详细信息

用水稻抗白叶枯病基因近等基因系材料和转基因系材料，研究了水稻—白叶枯病菌互作中，水稻防卫基因ｐａｌ与ｃｈｓ的转录特征。Ｎｏｒｔｈｅｒｎ检测结果显示，在与白叶枯病菌非亲和性互作中，水稻ｐａｌ基因和ｃｈｓ基因的转录均受到白叶枯病菌的诱导；而亲和性互作中，水稻中这两种基因的转录均不受到诱导或只是受到很微弱的诱导。表明由ｐａｌ和ＣＨＳ调控的苯丙烷核心反应的启动，产物的合成，有助于增强水稻对白叶枯病菌的抗性。实验结果显示：互作中水稻ＰＡＬ及ＣＨＳ编码基因是否受到白叶枯病菌的诱导，不仅与水稻中抗病基因有关，还与抗病基因的种类有关。表明水稻ＰＡＬ及ＣＨＳ编码基因在互作中是否受到诱导转录，取决于其水稻功能性抗病基因产物对白叶枯病菌的专化性识别。

关键词：水稻白叶枯病菌防卫基因诱导抗性

甜瓜叶片形态结构及防卫基因表达与蔓枯病抗性相关性的研究

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

甜瓜叶片形态结构及防卫基因表达与蔓枯病抗性相关性的研究

作者：郭静南京农业大学

学位级别：硕士

蔓枯病在甜瓜各生育期均能发生,是为害甜瓜生产的病害之一。选育抗蔓枯病材料是最经济有效的防治方法,目前主要通过抗性鉴定筛选抗病材料,在植物防卫基因的表达和形态结构特性上选择鉴定较少。本文通过对甜瓜不同抗性材料防卫基因表达... 详细信息

蔓枯病在甜瓜各生育期均能发生,是为害甜瓜生产的病害之一。选育抗蔓枯病材料是最经济有效的防治方法,目前主要通过抗性鉴定筛选抗病材料,在植物防卫基因的表达和形态结构特性上选择鉴定较少。本文通过对甜瓜不同抗性材料防卫基因表达和形态结构特性进行比较分析,研究不同抗性甜瓜材料与防卫基因表达和形态结构的关系,为进一步研究甜瓜蔓枯病抗性机制提供理论依据。1.甜瓜蔓枯病材料抗性差异与叶片形态结构特性的关系本文利用八份甜瓜材料,包括四份高抗蔓枯病甜瓜材料,三份抗性甜瓜材料,一份感蔓枯病材料,通过石培切片、表皮撕取法、火棉股法比较分析不同抗性甜瓜材料的叶片组织结构、叶片气孔、茸毛和蜡质含量之间的差异显著性及其与病情指数的相关性。结果表明:叶片背面气孔密度和茸毛密度、海绵组织厚度、结构疏松度与病情指数的相关系数分别是r=0.86264>0.8、r=0.97672>0.8、r=0.85612>0.8、r=0.90701>0.8,甜瓜材料抗蔓枯病能力与叶片背面气孔密度茸毛密度、海绵组织厚度和结构疏松度显著正相关,抗病材料叶片背面气孔密度和茸毛密度小,海绵组织厚度小,结构紧密度大。叶片蜡质含量和下表皮厚度与病情指数的相关系数分别是r=-0.92240>-0.8、r=-0.92064>-0.8,即甜瓜材料抗蔓枯病能力与叶片蜡质含量,下表皮厚度显著负相关,抗病材料的叶片蜡质含量高,叶片下表皮厚。以高抗蔓枯病材料145-471和感蔓枯病材料为实验材料,点接种蔓枯病生理小种A1,利用苯胺蓝组织透明染色法,在荧光显微镜下观察蔓枯病菌侵染甜瓜叶片时,叶片发生的防卫反应。结果表明,蔓枯病菌侵入甜瓜叶片时,在侵染细胞周围及相邻细胞出现高亮的荧光现象,即蔓枯病菌侵染甜瓜叶片时,植物细胞壁发生防卫反应,产生胼胝质沉积现象。2.甜瓜蔓枯病材料抗性差异与防卫基因表达水平的关系本文以高抗材料145-471、082-398、抗性材料145-082和感病材料白皮脆为实验材料,甜瓜叶片接种蔓枯病生理小种A1,在转录组学上分析抗感材料六个防卫基因表达水平的变化,包括病程相关蛋白(PR-1)基因,PR-3基因,PR-9基因,脂氧合酶(LOX-2)基因,超氧化物歧化酶(SOD)基因,抗坏血酸过氧化物酶(APX)基因。结果表明:抗病材料PR-1基因、PR-3基因表达水平早于感病材料,分别在接种24h、接种12h,与感病材料相比,抗病材料PR-1基因、PR-3基因开始大量表达。在0-72h的七个时间点内,抗病材料PR-9基因、LOX-2基因、SOD基因和APX基因相对表达量高于感病材料,分别在接种72h、24h、24h和72h达到最大值,高抗材料145-471表达量最大时约为感病材料的11.81倍、5.78倍3.43倍和11.84倍。病程相关蛋白PR-1基因、病程相关蛋白PR-9基因、脂氧合酶(LOX-2)基因、超氧化物歧化酶(SOD)基因在抗病材料中表达水平始终高于感病材料。在接种后大多数时间点,抗病材料病程相关蛋白PR-3基因、抗坏血酸过氧化物酶(APX)基因的表达水平高于感病材料。本研究表明,植物对特定病原菌表现的抗性级别,与不同防卫基因的表达有关,更与防卫基因的反应时间和表达强度的不同相关。

关键词：甜瓜蔓枯病防卫基因形态结构抗性胼胝质沉积

厚皮甜瓜果实RNA的提取及采后硅酸钠处理对其防卫基因的诱导表达

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

厚皮甜瓜果实RNA的提取及采后硅酸钠处理对其防卫基因的诱导表达

作者：赵继荣甘肃农业大学

学位级别：硕士

随着甜瓜采后诱导抗病性研究的深入,对防卫基因的诱导表达分析已成为亟待研究的内容。本文以厚皮甜瓜“银帝”(Cucumis melo L. cv. Yindi)为材料,对果实RNA的提取方法主要条件进行了筛选,并对果实中7个防卫基因在100mmol硅酸钠处理和Tr... 详细信息

随着甜瓜采后诱导抗病性研究的深入,对防卫基因的诱导表达分析已成为亟待研究的内容。本文以厚皮甜瓜“银帝”(Cucumis melo L. cv. Yindi)为材料,对果实RNA的提取方法主要条件进行了筛选,并对果实中7个防卫基因在100mmol硅酸钠处理和Trichothecium roseum挑战接种下的表达模式进行了分析。结果表明:1.1ml Trizol提取200mg果实量时可得到最多的RNA量,氯仿抽提2次可使所提取RNA的A260/A280在1.9-2.0之间,所提取的RNA无蛋白质和DNA污染。室温沉淀和低温沉淀对RNA的产量无明显差异。提取的RNA可顺利反转录,反转录产物稀释5倍后扩增β-actin基因片段与设计大小一致,验证了该方法提取的RNA可用于RT-PCR。***模板量在经过几次调整后,基本达到均一化,用标准Marker比较法验证了MCHT、PAL、SOD、POD、APX和LOX基因,用测序比对的法验证了CHS基因,并得到了甜瓜CHS基因片段序列。由此表明,用标准Marker比较法和测序比对的法可验证扩增的基因,设计的引物可做表达分析。3.硅酸钠处理和处理后的挑战接种提前了MCHT和SOD基因表达高峰2d,而且也提高了表达量;处理后的挑战接种提高了PAL和CHS基因的表达量;处理后POD基因表达高峰延长了2d,提高了挑战后POD基因表达量;APX和LOX基因表达明显可被硅酸钠处理抑制。由此表明,硅酸钠处理后诱导了果实的抗病性。

关键词：硅果实 RNA 防卫基因诱导抗性

水稻抗稻瘟病单基因系防御酶活性与防卫基因表达的研究

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

水稻抗稻瘟病单基因系防御酶活性与防卫基因表达的研究

作者：王兴广东海洋大学

学位级别：硕士

以国际水稻研究所（IRRI）培育的抗谱不同的水稻抗稻瘟病单基因系IRBLKh-K3（含广谱抗性基因Pik-h）和IRBLKs-F5（含窄谱抗性基因Pik-s），IRBLta2-Re（含广谱抗性基因Pita-2）和IRBLta-K1（含窄谱抗性基因Pita）为研究材料，以其普感... 详细信息

以国际水稻研究所（IRRI）培育的抗谱不同的水稻抗稻瘟病单基因系IRBLKh-K3（含广谱抗性基因Pik-h）和IRBLKs-F5（含窄谱抗性基因Pik-s），IRBLta2-Re（含广谱抗性基因Pita-2）和IRBLta-K1（含窄谱抗性基因Pita）为研究材料，以其普感亲本丽江新团黑谷（LTH，不含抗性基因）作对照，分别接种非亲和稻瘟病菌株和亲和稻瘟病菌株，研究在稻瘟病菌诱导下不同时段，两对不同抗谱抗稻瘟病单基因系的几丁质酶、β-1,3-葡聚糖酶、过氧化物酶、多酚氧化酶和苯丙氨酸解氨酶5种防御酶酶活性及其防卫基因表达的变化规律。取得的主要研究结果如下：1、在稻瘟病菌株诱导下，Pik-h和Pik-s单基因系防御酶酶活性与空白（清水诱导）对照相比，5种防御酶酶活性总体显著升高;与LTH相比，大多数防御酶酶活性显著升高，个别防御酶无显著差异。无论是非亲和菌株还是亲和菌株诱导，Pik-h单基因系表达的几丁质酶活性水平总体高于Pik-s单基因系;在非亲和菌株G85诱导下，Pik-h单基因系表达的β-1,3-葡聚糖酶活性显著高于Pik-s单基因系，但两者在亲和菌株G64-1诱导下表达的β-1,3-葡聚糖酶活性差异不显著;在G85诱导下，Pik-h单基因系叶片中过氧化物酶快速积累早于Pik-s单基因系，但最高峰值低于Pik-s单基因系，而接种G64-1后，Pik-h单基因系过氧化物酶积累速度明显较快，其最高峰值显著高于Pik-s单基因系;在两种菌株接种后的大多数时点下，Pik-h单基因系的多酚氧化酶活性和苯丙氨酸解氨酶活性均高于和显著高于Pik-s单基因系。2、Pita-2和Pita单基因系在稻瘟病菌株诱导下，与空白（清水诱导）对照相比，5种防御酶酶活性在多数情况下显著升高;与LTH相比，Pita-2单基因系防御酶酶活性总体显著升高，Pita单基因系防御酶酶活性无显著差异。从Pita-2和Pita两个单基因系不同时点酶活性表达水平看，在非亲和菌株G64-1和亲和菌株G06诱导下，Pita-2单基因系表达的几丁质酶活性和β-1,3-葡聚糖酶活性均比Pita单基因系高;Pita-2单基因系表达的过氧化物酶活性仅在某些时点略高于Pita单基因系;在接种非亲和菌株以及亲和菌株的诱导下Pita-2单基因系多酚氧化酶活性的峰值均高于Pita单基因系;在大多数时点下，两个菌株诱导Pita-2单基因系表达的苯丙氨酸解氨酶活性均显著高于Pita单基因系。3、Pik-h和Pik-s单基因系在稻瘟病菌株诱导下，与空白对照相比，防卫基因相对表达水平总体显著升高;与LTH相比，Pik-h单基因系防卫基因相对表达水平总体显著升高，Pik-s单基因系无显著差异。Pik-h和Pik-s单基因系经菌株诱导表达的几丁质酶基因Cht-1的相对表达水平升高，其中又以Pik-h单基因系在非亲和菌株诱导的Cht-1相对表达水平升幅较大;接种非亲和菌株后，Pik-h单基因系的β-1,3-葡聚糖酶基因Glu相对表达水平在少数时点显著高于Pik-s单基因系，而接种亲和菌株后，Pik-h单基因系Glu相对表达水平某些时点比Pik-s单基因系略高，但无论接种哪种菌株，均以Pik-h单基因系峰值较高;稻瘟病菌株诱导下Pik-h单基因系过氧化物酶基因POX22.3相对表达水平在少数时点和最高峰值显著高于Pik-s单基因系;接菌后苯丙氨酸解氨酶基因PAL相对表达水平，Pik-h单基因系均显著高于Pik-s单基因系。4、Pita-2和Pita单基因系在稻瘟病菌株诱导下，与空白对照相比，防卫基因相对表达水平总体显著升高;与LTH相比，单基因系防卫基因相对表达水平总体也显著较高。在非亲和菌株G64-1诱导下，Pita-2单基因系Cht-1相对表达水平峰值高于Pita单基因系;而在亲和菌株G06诱导下，Pita-2单基因系Cht-1相对表达水平峰值早于且显著高于Pita单基因系;Pita-2单基因系在G06诱导下，前36h的β-1,3-葡聚糖酶基因Glu相对表达水平高于Pita单基因系，但在G64-1诱导下，Pita-2和Pita单基因系的Glu相对表达水平差异不显著;在G06和G64-1诱导下，Pita-2的过氧化物酶基因POX22.3相对表达水平显著高于Pita单基因系;接菌诱导后Pita-2单基因系苯丙氨酸解氨酶基因PAL相对表达水平仅某些时点和峰值高于Pita单基因系。

关键词：水稻稻瘟病抗稻瘟病单基因系防御酶防卫基因

荧光定量PCR检测灰飞虱胁迫下水稻相关防卫基因的表达量变化

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

荧光定量PCR检测灰飞虱胁迫下水稻相关防卫基因的表达量变化