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钠-钙交换体单克隆抗体NCX-3F10对大鼠心室肌主要离子电流的影响及对缺血/再灌注诱发心律失常的抑制作用

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中国药理学通报 2017年第7期33卷 934-941页

作者：杨明珠陈依春王晓露张堉琪薛晓艳封启龙吴博威山西医科大学生理学系细胞生理学省部共建教育部重点实验室山西太原030001 西藏民族大学医学部陕西咸阳712000

目的观察NCX-3F10抗体对大鼠心室肌细胞主要离子电流的影响及其对缺血/再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)诱发心律失常的作用。方法(1)利用全细胞膜片钳技术记录大鼠心室肌细胞Na^+/Ca^(2+)交换电流(INa/Ca)及其他主要离子电流;(2)结扎... 详细信息

目的观察NCX-3F10抗体对大鼠心室肌细胞主要离子电流的影响及其对缺血/再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)诱发心律失常的作用。方法(1)利用全细胞膜片钳技术记录大鼠心室肌细胞Na^+/Ca^(2+)交换电流(INa/Ca)及其他主要离子电流;(2)结扎左冠状动脉建立大鼠在体及离体心脏缺血/再灌注心律失常模型,观察抗体对心律失常的影响;(3)利用Ion Optix离子影像分析系统观察抗体对单个心室肌细胞钙瞬变的影响。结果(1)5~40 mg·L^(-1)的NCX-3F10抗体对I_(Na/Ca)呈剂量依赖性抑制作用,其抑制外向和内向电流的IC_(50)分别为11.15和11.69 mg·L^(-1),最大抑制率分别达到61%、62%;该抗体对钙电流(I_(Ca-L))也有一定的抑制作用,对内向整流钾电流(I_(K1))、瞬时外向钾电流(I_(to))、钠电流(I_(Na))均无影响;(2)在离体大鼠心脏I/R组,100%大鼠发生室速,88.89%大鼠出现室颤;再灌注前5 min给予NCX-3F10抗体(10 mg·L^(-1))干预后,大鼠的室速发生率下降至44.43%,室速、室颤持续时间明显减少(P体(50μg·kg-1)预处理后,大鼠室早个数、室速发生率及持续时间、室颤的发生率及持续时间均明显降低(P体对心肌细胞钙瞬变幅度呈剂量依赖性抑制作用。结论 NCX-3F10抗体对大鼠离体和在体心脏缺血/再灌注诱发的心律失常有明显抑制作用,其抗心律失常效应与抑制钠-钙交换电流和L-型钙电流、减轻细胞内钙超载有关。

关键词：钠-钙交换体单克隆抗体全细胞膜片钳离子电流心律失常缺血/再灌注

抗钠-钙交换体α-2（840-877）单克隆抗体3F10的制备及其预处理对大鼠缺血性心律失常的抑制作用

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中国免疫学杂志 2019年第23期35卷 2827-2831页

作者：王苗苗陈依春白晓洁马瑞君封启龙山西医科大学生理学系细胞生理学山西省重点实验室太原030001 西藏民族大学医学部咸阳712000

目的:制备和纯化抗钠-钙交换体(Na+-Ca 2+exchanger,NCX)α-2(840-877)单克隆抗体,并观察该抗体对大鼠缺血性心律失常的影响。方法:利用化学合成的NCXα-2(840-877)肽段为免疫原免疫BALB/c小鼠,利用杂交瘤技术和间接ELISA法筛选,获得可... 详细信息

目的:制备和纯化抗钠-钙交换体(Na+-Ca 2+exchanger,NCX)α-2(840-877)单克隆抗体,并观察该抗体对大鼠缺血性心律失常的影响。方法:利用化学合成的NCXα-2(840-877)肽段为免疫原免疫BALB/c小鼠,利用杂交瘤技术和间接ELISA法筛选,获得可稳定分泌NCXα-2(840-877)单克隆抗体的杂交瘤细胞株。通过ELISA和SDS-PAGE等方法检测其效价和纯度。结扎冠脉左前降支建立大鼠缺血性心律失常模型。缺血前5 min用3F10(10μg/ml)抗体灌注离体心脏,在体实验经大鼠尾静脉注射3F10(50μg/kg)抗体,观察抗体大鼠室早数目、室速和室颤发生率和持续时间的影响。应用全细胞膜片钳技术观察3F10(10μg/ml)抗体对正常大鼠心肌细胞I Na/Ca的影响。结果:①成功制备并获得抗NCXα-2(840-877)单克隆抗体3F10,其效价和浓度分别为1∶40960、1.62 mg/ml。②3F10抗体预处理可明显抑制大鼠离体和在体缺血性心律失常的发生。缺血前5 min给予3F10(10μg/ml)抗体预处理后,离体心脏的室速、室颤的发生率分别由100%和77.78%降至25%和25%,其持续时间和室早的个数也明显减少(P体预处理后,与模型组相比,大鼠室速和室颤的发生率分别由100%和83.33%降至33.33%和33.33%,其持续时间及室早的数目均明显减少(P体(10μg/ml)对I Na/Ca具有显著抑制作用。在钳制电位为+50 mV和-100 mV时,外向和内向I Na/Ca分别由(3.23±0.05)和(-50.57±0.13)pA/pF降至(2.14±0.03)和(-3.14±0.06)pA/pF(P体的杂交瘤细胞株(3F10),该抗体预处理对大鼠缺血性心律失常具有显著抑制作用,推测其作用机制与抑制心肌I Na/Ca有关。

关键词：缺血性心律失常钠-钙交换体单克隆抗体全细胞膜片钳

抗钠-钙交换体α-1重复序列(117-137)抗体对心肌钠-钙交换电流及钙电流的抑制作用(英文)

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生理学报 2010年第5期62卷 407-414页

作者：封启龙武冬梅崔香丽赵画晨林媛媛赵录英吴博威山西医科大学生理学系太原030001 山西医科大学细胞生理学省部共建教育部重点实验室太原030001 山西医科大学药理教研室太原030001 北京脐带血库北京100176

本研究旨在探讨抗钠-钙交换体(Na+-Ca2+ exchanger,NCX)α-1重复序列(117-137)抗体对大鼠心肌细胞钠-钙交换电流的影响。实验用合成的α-1重复序列(117-137)肽免疫大鼠制备抗α-1重复序列(117-137)抗体;应用全细胞膜片钳技术,在急性分... 详细信息

本研究旨在探讨抗钠-钙交换体(Na+-Ca2+ exchanger,NCX)α-1重复序列(117-137)抗体对大鼠心肌细胞钠-钙交换电流的影响。实验用合成的α-1重复序列(117-137)肽免疫大鼠制备抗α-1重复序列(117-137)抗体;应用全细胞膜片钳技术,在急性分离的心肌细胞上观察抗α-1重复序列(117-137)抗体对大鼠心肌细胞钠-钙交换电流的影响,同时还观察了其对大鼠心肌细胞L型钙通道、电压门控钠通道和豚鼠心肌延迟整流钾通道电流的影响;最后,采用EMBOSS Pairwise Alignment Algorithms软件对NCXα-1重复序列和L型钙通道(1076～1096)的氨基酸序列进行了比较。结果显示,抗α-1重复序列(117-137)抗体对大鼠心肌细胞Na+-Ca2+交换电流呈现剂量依赖性的抑制作用。在钳制电压为+50和-100mV时,其抑制外向和内向钠-钙交换电流的IC50分别为18.9和22.4nmol/L。此外,该抗体还对L型钙通道电流具有抑制效应(IC50=22.7nmol/L),对电压门控钠通道和延迟整流钾通道电流则无明显影响。通过氨基酸序列比对发现,NCX α-1重复序列(117-137)与L型钙通道IIIS5-S6序列(孔环)之间具有23.8%的相似性。以上结果表明,抗NCX α-1重复序列(117-137)抗体是心肌NCX的一种抑制性抗体,同时也可以抑制L型钙通道。

关键词：钠-钙交换体膜片钳技术心肌细胞抗体

抗钠-钙交换体α-1(106-145)抗体对大鼠离体心功能的影响及其机制

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中国药理学通报 2012年第8期28卷 1074-1079页

作者：杨啸燕李明华赵雷高亚男封启龙武冬梅吴博威山西医科大学生理学系细胞生理学省部共建教育部重点实验室太原030001 山西医科大学药理学教研室山西太原030001

目的观察1～103nmol·L-1抗钠-钙交换体(NCX)α-1(106-145)肽段抗体对离体大鼠心功能的影响并分析其作用机制。方法用化学合成的NCXα-1(106-145)肽段主动免疫新西兰大耳白兔制备并纯化抗体,利用Langendorff离体灌流系统观察其对大鼠离... 详细信息

目的观察1～103nmol·L-1抗钠-钙交换体(NCX)α-1(106-145)肽段抗体对离体大鼠心功能的影响并分析其作用机制。方法用化学合成的NCXα-1(106-145)肽段主动免疫新西兰大耳白兔制备并纯化抗体,利用Langendorff离体灌流系统观察其对大鼠离体心功能的影响;利用全细胞膜片钳技术观察其对心肌细胞钠-钙交换电流、L-型钙电流、瞬时外向钾电流和内向整流钾电流的影响。结果经主动免疫后兔体内抗α-1(106-145)抗血清滴度明显升高,Protein A纯化后抗体浓度为13.1 g.L-1。与对照组相比,1～10 nmol·L-1α-1抗体可使大鼠离体心脏左室发展压(LVDP)和左室压最大上升速率(+dp/dtmax)明显增加(P体(1 nmol·L-1)的上述效应进一步增强。然而,102～103nmol·L-1α-1抗体则可使大鼠离体心脏LVDP、±dp/dtmax呈不同程度地下降(P体对大鼠心肌细胞外向和内向Na+/Ca2+交换电流均表现出剂量依赖性的抑制效应,对瞬时外向钾电流和内向整流钾电流均无明显影响。此外,102～103nmol·L-1α-1抗体对L-型钙电流也具有抑制作用。结论低浓度α-1抗体(1～10 nmol·L-1)可明显增强心肌收缩,这一效应与其在低浓度时专一性抑制Na+/Ca2+交换电流有关;高浓度α-1抗体(102～103nmol·L-1)则可同时抑制心肌收缩和舒张,该作用与其同时抑制Na+/Ca2+交换电流和L-型钙电流有关。

关键词：钠-钙交换体抗体心功能全细胞膜片钳钠-钙交换电流 L型钙电流离体心脏

钠—钙交换体单克隆抗体NCX-2D2对异丙肾上腺素诱发成年大鼠心律失常的抑制作用及其机制研究

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钠—钙交换体单克隆抗体NCX-2D2对异丙肾上腺素诱发成年大鼠心律...

作者：薛晓艳山西医科大学

学位级别：硕士

目的:1.建立异丙肾上腺素(isoproterenol,ISO)诱发成年大鼠离体和在体心律失常模型,观察钠-钙交换体抗体NCX-2D2对模型大鼠心律失常的影响。2.应用全细胞膜片钳技术,观察钠-钙交换体抗体NCX-2D2对单个大鼠心室肌细胞钠-钙交换电流(INa/... 详细信息

目的:1.建立异丙肾上腺素(isoproterenol,ISO)诱发成年大鼠离体和在体心律失常模型,观察钠-钙交换体抗体NCX-2D2对模型大鼠心律失常的影响。2.应用全细胞膜片钳技术,观察钠-钙交换体抗体NCX-2D2对单个大鼠心室肌细胞钠-钙交换电流(INa/Ca)、L-型钙电流(ICa-L)、延迟后除极(DADs)的影响,并分析其电生理机制。方法:1.异丙肾上腺素诱发大鼠离体和在体心脏心律失常模型的建立(1)异丙肾上腺素诱发大鼠离体心脏心律失常模型的建立随机选取健康SD大鼠,用1%戊巴比妥钠按40 mg·kg-1行腹腔注射麻醉后,开胸迅速取出心脏,游离后悬挂于Langendorff灌流装置上,用纯氧饱和的恒温(37℃)高钙台氏液经主动脉逆行灌流心脏,利用蠕动泵将流速控制在8 ml·min-1进行恒流灌流,记录体表心电图。灌流30 min以上待波形稳定后使用注射泵给药,记录药物干预后30 min内室性早搏个数,室性心动过速的发生率、持续时间,心室颤动的发生率、持续时间。实验分组如下:1)对照组:含2.5 mmol·L-1 Ca Cl2台氏液灌流;2)2D2抗体组:NCX-2D2抗体(10μg·ml-1)和Ca Cl2(2.5 mmol·L-1)的台氏液灌流;3)ISO组:ISO(1μmol·L-1)和Ca Cl2(2.5 mmol·L-1)的台氏液灌流;4)2D2抗体+ISO组:NCX-2D2抗体(10μg·ml-1)、ISO(1μmol·L-1)和Ca Cl2(2.5 mmol·L-1)的台氏液灌流。(2)异丙肾上腺素诱发麻醉大鼠心律失常模型的建立随机选取健康SD大鼠,1%戊巴比妥钠40 mg·kg-1行腹腔注射麻醉后,将大鼠仰卧位固定于鼠板上。采用BL-420F实验系统记录大鼠标准肢体Ⅱ导联心电图,观察30 min以上待心电图稳定后通过尾静脉给药。观察不同组别大鼠体表心电图,记录药物干预后1 h内室性早搏个数,室性心动过速的发生率、持续时间,心室颤动的发生率、持续时间。实验分组如下:1)对照组:生理盐水(1 ml NS)尾静脉注射;2)2D2抗体组:NCX-2D2抗体(80μg·kg-1)溶于1 ml NS中尾静脉注射;3)ISO组:ISO(1.28 mg·kg-1)溶于1 ml NS中尾静脉注射;4)2D2抗体+ISO组:NCX-2D2抗体(80μg·kg-1)溶于0.5 ml NS中尾静脉注射,5 min后ISO(1.28 mg·kg-1)溶于0.5 ml NS中尾静脉注射;5)胺碘酮+ISO组:胺碘酮(5 mg·kg-1)溶于0.5 ml NS中尾静脉注射,5 min后ISO(1.28 mg·kg-1)溶于0.5 ml NS中尾静脉注射。2.单个大鼠心室肌细胞的分离随机选取健康SD大鼠,用1%戊巴比妥钠按40 mg·kg-1行腹腔注射麻醉后,断头颈动脉放血,开胸后迅速取出心脏,置于经纯氧饱和的4℃无钙台氏液中修剪去除多余组织,经主动脉逆行插管悬挂于Langendorff灌流装置。以无钙台氏液灌流心脏80 min后,用酶液循环灌流150 min,待心脏酶解后,在KB液中将左心室肌组织剪碎,用吸管吹打3 min后经滤网过滤(100目孔径)获得单个心室肌细胞,置于KB液中保存稳定后进行实验。3.全细胞膜片钳记录用吸管吸取1滴细胞悬液置于倒置显微镜的细胞槽内(约1 ml),贴壁3min,再用含1.8mmol·L-1 Ca Cl2台氏液复钙灌流(流速2 ml·min-1)。玻璃电极用电极拉制仪拉制并充灌记录相应电流的电极内液,电极电阻控制在3 MΩ。镜下挑选纹理清晰、无自主收缩的长杆状细胞为实验对象,用玻璃电极给予负压封接待稳定后,施以瞬间负压破膜,在进行膜电容补偿和串联电阻补偿后行全细胞记录,电压钳模式记录单个大鼠心室肌细胞Na+/Ca2+交换电流(INa/Ca),L-型钙电流(ICa-L);电流钳模式记录单个大鼠心室肌细胞动作电位(AP),施加条件刺激(15 ms 3Hz)诱发延迟后除极(DADs)。用Clampex10.3软件进行数据采集及分析。结果:1.单克隆抗体NCX-2D2可显著抑制异丙肾上腺素诱发的大鼠离体心脏心律失常的发生NCX-2D2抗体(10μg·ml-1)可显著抑制异丙肾上腺素诱发的大鼠离体心脏心律失常的发生。在离体大鼠心脏异丙肾上腺素组,室性心动过速发生率为100%,心室颤动发生率为57.14%;给予NCX-2D2(10μg·ml-1)抗体干预后30 min内,室性早搏个数由328±22减少至104±9(P体NCX-2D2可显著抑制异丙肾上腺素诱发的麻醉大鼠心律失常的发生NCX-2D2抗体(80μg·kg-1)可显著

关键词：钠-钙交换体心律失常单克隆抗体全细胞膜片钳延迟后除极

抗钠—钙交换体α-2840-877单克隆抗体对大鼠心肌主要离子电流的影响及其对缺血/再灌注诱发心律失常的抑制作用研究

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抗钠—钙交换体α-2840-877单克隆抗体对大鼠心肌主要离子电流的...

作者：陈依春山西医科大学

学位级别：硕士

目的:1.制备抗钠-钙交换体(Na+-Ca2+exchanger,NCX)α-2重复序列(840-877)(α-2(840-877))单克隆抗体,观察其对成年大鼠心室肌细胞主要离子电流的影响。2.建立大鼠心肌缺血/再灌注(Ischemia/Reperfusion,I/R)诱发的心律失常模型,观察抗... 详细信息

目的:1.制备抗钠-钙交换体(Na+-Ca2+exchanger,NCX)α-2重复序列(840-877)(α-2(840-877))单克隆抗体,观察其对成年大鼠心室肌细胞主要离子电流的影响。2.建立大鼠心肌缺血/再灌注(Ischemia/Reperfusion,I/R)诱发的心律失常模型,观察抗NCXα-2(840-877)单克隆抗体对模型大鼠心律失常的影响,并分析其作用机制。方法:1.抗NCXα-2(840-877)单克隆抗体的制备及效价检测。单克隆杂交瘤细胞株由NCXα-2第840-877位氨基酸残基肽段免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合而成,经筛选所得的阳性克隆株及三次亚克隆后获得可以稳定分泌单克隆抗体的细胞株。通过对其进行扩大培养,采用动物体内诱生法制备腹水,应用Protein A亲和柱对所得腹水进行纯化,得到单克隆抗体。利用间接ELISA法检测纯化后的单克隆抗体效价;SDS-PAGE法测定纯化后的单克隆抗体纯度。2.大鼠心室肌细胞急性分离。正常成年SD大鼠用40 mg·kg-1戊巴比妥钠腹腔注射麻醉,快速开胸取心脏,经主动脉逆行插管将心脏悬挂于Langendorff灌流装置上,以100%氧气充灌的无钙台氏液恒压(7.35 Kpa)、恒温(37℃)灌流心脏10 min,改为酶液循环灌流150 min,待心室变大,变软后剪取心室肌组织置于KB液中剪碎,玻璃吸管轻轻吹打3 min后,过滤得到单个细胞,保存于KB液中,室温下静置3 h让其稳定后进行实验。3.全细胞膜片钳记录。应用全细胞膜片钳技术,在电压钳模式下记录大鼠单个心室肌细胞Na+/Ca2+交换电流(INa/Ca),L-型钙电流(ICa-L),内向整流钾电流(IK1),瞬时外向钾电流(Ito),钠电流(INa)。4.大鼠离体和在体缺血/再灌注(I/R)诱发心律失常模型的建立。(1)大鼠离体缺血/再灌注诱发心律失常模型。SD大鼠用40 mg·kg-1戊巴比妥钠腹腔注射麻醉,开胸离体心脏后,悬挂于Langendorff灌流装置上经主动脉逆行灌流,记录心电图,待心脏收缩稳定后,结扎冠状动脉左前降支,造成局部缺血30 min,松扎后再灌注30 min。分别累计缺血后30 min和再灌注后30 min内期前收缩个数,室速的发生率、持续时间,室颤的发生率、持续时间。(2)大鼠在体心脏缺血/再灌注诱发心律失常模型。SD大鼠用10%水合氯醛(30 mg·kg-1)腹腔注射麻醉,开胸,采用BL-420F生物机能实验系统记录大鼠Ⅱ导联心电图,结扎冠脉左前降支,局部缺血15 min,松扎后再灌注15 min。抗NCXα-2(840-877)-2D2抗体、抗NCXα-2(840-877)-3F10抗体(50μg·kg-1),利多卡因(Lidocaine,7.5 mg·kg-1)分别于缺血前或再灌注前3 min尾静脉注射,观察期前收缩个数、室速的发生率、持续时间,室颤的发生率、持续时间。5.心肌细胞钙瞬变测定。将酶解法分离好的成年大鼠心室肌细胞制成细胞悬液,负载5μmol·L-1荧光染料Fura2-AM,避光孵育30 min,重复清洗三次。离子影像分析系统仪器预热后,将负载有荧光染料的细胞制成细胞悬液,在细胞槽内贴壁10 min,用台氏液持续灌流,流速约1 ml·min-1,用10 V电压以0.5 Hz频率给予场刺激触发细胞收缩,在高倍镜下选取纹理清晰,随刺激稳定收缩的心室肌细胞作为观察对象,应用离子影像分析系统记录钙瞬变。结果:1.抗NCXα-2(840-877)单克隆杂交瘤细胞株筛查及建立。ELISA法检测培养细胞上清,挑选阳性克隆,经阳性克隆筛选及连续三次亚克隆后,最终获得能稳定分泌抗NCXα-2(840-877)单克隆抗体的2株杂交瘤细胞,并将其分别命名为#2D2,#3F10。2.抗NCXα-2(840-877)单克隆抗体效价及纯度检测。纯化所得的两株抗体根据两株杂交瘤细胞的克隆号命名为抗NCXα-2(840-877)-2D2(以下简称2D2),抗NCXα-2(840-877)-3F10(以下简称3F10)。(1)纯化后的2D2抗体效价为1:81920,亲和常数9.33E+08;SDS-PAGE检测结果显示,2D2抗体在聚丙酰胺凝胶电泳时仅出现清晰的两条带,与Ig G标准品一致,纯化后的2D2抗体浓度为3.21 mg·ml-1。(2)纯化后的3F10抗体效价为1:40960,亲和常数3.8E+09。SDS-PAGE检测结果显示,3F10抗体在电泳时也仅出现清晰的两条带,与Ig G标准品一致,纯化后的3F10抗体浓度为1.62 mg·ml-1。3.抗NCXα-2(840-877)-3F10单克隆抗体对大鼠单个心室肌细胞INa/Ca的影响。INa/Ca测定在电压钳模式下进行。在本组之前的研究中已证实,2D2抗体对INa/Ca具有特异性抑制作用。本研究结果显示,50μg·ml-

关键词：钠-钙交换体单克隆抗体全细胞膜片钳离子电流心律失常

抗钠-钙交换体α-2抗体对大鼠心脏正性肌力作用

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中国公共卫生 2011年第4期27卷 435-437页

作者：封启龙吴博威山西医科大学生理学系生理教研室细胞生理学省部共建教育部重点实验室山西太原030001

目的观察抗钠-钙交换体α-2(807-820)抗体对大鼠心功能影响并分析其机制。方法以化学合成的α-2(807-820)肽段作为抗原免疫大鼠制备并纯化抗体,利用Langendorff离体灌流系统观察其对大鼠心功能影响;利用全细胞膜片钳技术观察抗体对心肌... 详细信息

目的观察抗钠-钙交换体α-2(807-820)抗体对大鼠心功能影响并分析其机制。方法以化学合成的α-2(807-820)肽段作为抗原免疫大鼠制备并纯化抗体,利用Langendorff离体灌流系统观察其对大鼠心功能影响;利用全细胞膜片钳技术观察抗体对心肌细胞钠-钙交换电流作用。结果大鼠经主动免疫后,抗α-2(807-820)抗血清滴度明显升高,纯化后抗体浓度为6.3 mg/mL,聚丙烯酰胺凝胶电泳时仅有1条带出现;10和40 nmol/L的抗体可明显升高离体灌流大鼠心脏左室发展压、左室压最大上升速率和下降速率,这一效应可被KB-R7943阻断;膜片钳实验表明,抗α-2(807-820)抗体(40 nmol/L)可使外向和内向的钠-钙交换电流分别从给药前的(1.05±0.17)、(0.86±0.21)pA/pF增加至(1.53±0.28)、(1.23±0.31)pA/pF(P体通过激动心肌钠-钙交换体不仅可以增强心肌的收缩力和加快心肌收缩的速度,还可促进心肌舒张。

关键词：心功能钠-钙交换体抗体膜片钳技术

阿托伐他汀通过调节钠-钙交换体改善心力衰竭大鼠心脏功能

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中国病理生理杂志 2016年第10期32卷 1900-1904页

作者：王姝王瑞蒋雅楠王岚峰潘薇田野哈尔滨医科大学附属第一医院心内科黑龙江护理高等专科学校哈尔滨医科大学药理教研室黑龙江哈尔滨150006

目的:探讨阿托伐他汀对心力衰竭大鼠心脏功能及心肌细胞钠-钙交换体表达的影响。方法:结扎大鼠冠状动脉左前降支8周,制备心肌梗死后心力衰竭模型。随机分3组,即假手术组、心力衰竭组与阿托伐他汀治疗组,分别于结扎后第2天给予安慰剂或... 详细信息

目的:探讨阿托伐他汀对心力衰竭大鼠心脏功能及心肌细胞钠-钙交换体表达的影响。方法:结扎大鼠冠状动脉左前降支8周,制备心肌梗死后心力衰竭模型。随机分3组,即假手术组、心力衰竭组与阿托伐他汀治疗组,分别于结扎后第2天给予安慰剂或阿托伐他汀治疗。8周后测定大鼠心脏功能及钠-钙交换体蛋白表达水平。培养原代乳鼠心肌细胞,通过缺氧模型分析阿托伐他汀对细胞内钙水平的影响。结果:阿托伐他汀治疗组较心衰组BNP水平降低,左室舒张末内径缩小,左室短轴缩短率升高。阿托伐他汀治疗明显降低心力衰竭时钠-钙交换体蛋白表达量,抑制缺氧诱导细胞内钙水平增加。结论:阿托伐他汀治疗改善心功能,可能与影响心力衰竭心肌细胞钠-钙交换体的表达及功能有关。

关键词：钠-钙交换体心力衰竭阿托伐他汀

抗钠-钙交换体α-1抗体对Langendorff灌流大鼠心脏功能的影响

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中西医结合心脑血管病杂志 2011年第3期9卷 343-345页

作者：封启龙武冬梅吴博威山西医科大学生理学系细胞生理学省部共建教育部重点实验室山西医科大学药理教研室

目的研究抗钠-钙交换体(NCX)α-1(117-137)肽段抗体对离体灌流大鼠心脏活动的影响,初步探讨其作用机制。方法用合成的NCXα-1(117-137)重复序列肽段主动免疫大鼠获取抗体,经纯化后通过Langendorff离体灌流装置观察其对心功能的效应;利... 详细信息

目的研究抗钠-钙交换体(NCX)α-1(117-137)肽段抗体对离体灌流大鼠心脏活动的影响,初步探讨其作用机制。方法用合成的NCXα-1(117-137)重复序列肽段主动免疫大鼠获取抗体,经纯化后通过Langendorff离体灌流装置观察其对心功能的效应;利用膜片钳系统观察抗体对单个心肌细胞钠-钙交换电流的影响。结果免疫后大鼠体内抗α-1(117-137)抗血清滴度明显增加,纯化后抗体浓度为1.0 mg/mL,非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳结果只显示一条带,分子量与IgG标准品一致。在浓度为10 nmol/L2、0 nmol/L和40 nmol/L时,该抗体可剂量依赖性地降低离体灌流心脏左室发展压(LVDP)、左室压最大上升/下降速率(±dP/dtmax)。进一步研究发现,在10 nmol/L^40 nmol/L浓度范围内,抗NCXα-1抗体可剂量依赖性地抑制外向和内向钠-钙交换电流。结论抗NCXα-1(117-137)抗体对心肌收缩和舒张均表现出抑制效应,这一作用与其抑制钠-钙交换活动有关。

关键词：钠-钙交换体抗体心功能