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金褐霉素(Aureofuscin)对神经末梢的递质释放和肌细胞膜的作用

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生理学报 1991年第3期43卷 286-290页

作者：施玉樑徐幼芬王文萍中国科学院上海生理研究所上海200031

利用细胞内微电极记录,在小鼠离体膈神经膈肌标本上观察了金褐霉素(20μg/ml,过饱和溶液)对运动神经末梢的递质释放和肌细胞膜电位的影响。主要作用是:(1)缓慢降低肌细胞膜的静息电位,这种作用是可逆的;(2)有一促进神经末梢的乙酰胆碱... 详细信息

利用细胞内微电极记录,在小鼠离体膈神经膈肌标本上观察了金褐霉素(20μg/ml,过饱和溶液)对运动神经末梢的递质释放和肌细胞膜电位的影响。主要作用是:(1)缓慢降低肌细胞膜的静息电位,这种作用是可逆的;(2)有一促进神经末梢的乙酰胆碱量子释放的时相:提高小终板电位的发放频率和终板电位的平均量子含量,但在持续作用下,它们又恢复至接近对照水平;(3)这种对自发量子释放的作用与胞外 Ca^(2+)有关,(4)不阻遏神经肌肉接头兴奋传递。

关键词：金褐霉素乙酰胆碱释放膜去极化

aurT基因对金褐霉素生物合成的调控及其作用机制

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食品科学技术学报 2021年第1期39卷 70-77页

作者：魏杰于文辰郝若冰杨静许德鑫高军辽宁大学生命科学院辽宁沈阳110036 辽宁省林业科学研究院辽宁沈阳110032

通过分子克隆技术获得了金褐霉素生物合成基因簇中新基因aurT(Genbank登录号:MH247109.1),并利用高效表达、基因敲除、高效液相色谱(HPLC)和生物信息学技术分析了aurT基因功能及其对金褐霉素生物合成的调控作用,以期为提高金褐霉素发酵... 详细信息

通过分子克隆技术获得了金褐霉素生物合成基因簇中新基因aurT(Genbank登录号:MH247109.1),并利用高效表达、基因敲除、高效液相色谱(HPLC)和生物信息学技术分析了aurT基因功能及其对金褐霉素生物合成的调控作用,以期为提高金褐霉素发酵产量奠定理论基础。研究结果表明:AurT属于RhtB家族调节因子,是金褐霉素生物合成的氨基酸转运蛋白;aurT基因高效表达菌株(♂aurT)的金褐霉素产量增加了1.3倍;aurT基因敲除菌株(ΔaurT)的金褐霉素产量减少了65%,但金褐霉素的产量没有完全被抑制,说明aurT对金褐霉素生物合成的调控过程不同于途径特异性调控基因aurJ3M。比较了4种不同的PI因子结构类似物(1,2-丙二醇、丙三醇、乙二醇、三乙醇胺)对金褐霉素合成的调控作用,结果表明:0.4 mL的丙三醇对金褐霉素生物合成的调节效果最佳;发酵时间达到96 h时,外源添加丙三醇后,ΔaurT菌株的金褐霉素产量为784μg/mL,而未添加的产量为244μg/mL;进一步通过R T-PCR反应验证在野生型菌株培养中添加丙三醇后,增加了aurT基因的转录水平和表达,说明PI因子结构类似物与基因簇中的特异性受体结合并启动了相关基因的表达,aurT是通过介导PI因子的胞外运输来参与金褐霉素的生物合成与调控的。

关键词：金褐霉素 aurT基因高效表达基因敲除 PI因子

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金褐霉素高产菌株的选育及发酵条件的优化

食品与生物技术学报 2009年第2期28卷 240-242页

作者：魏杰孟宪军姜秋实刘宏生辽宁大学生命科学院辽宁沈阳110036 沈阳农业大学食品学院辽宁沈阳110161

采用单因素分析方法找到金褐链霉菌较适合的发酵培养基:玉米淀粉和葡萄糖为主要碳源,黄豆粉和酵母粉为混合氮源。较优的发酵条件为:接种体积分数为10%、pH 7.5、装液体积分数为20%、种龄为40 h、转速为220 r/min、发酵时间为66 h,其产... 详细信息

采用单因素分析方法找到金褐链霉菌较适合的发酵培养基:玉米淀粉和葡萄糖为主要碳源,黄豆粉和酵母粉为混合氮源。较优的发酵条件为:接种体积分数为10%、pH 7.5、装液体积分数为20%、种龄为40 h、转速为220 r/min、发酵时间为66 h,其产素单位达到2 897.41μg/mL。金褐链霉菌原始菌株经紫外诱变,照射时间30 s的金褐霉素产量最高。

关键词：金褐霉素发酵条件优化诱变

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金褐霉素高产相关基因的筛选与表达

食品科学 2014年第9期35卷 203-206页

作者：魏杰宋威石佳辽宁大学生命科学院辽宁沈阳110036

通过高效表达金褐霉素生物合成基因簇中的调控基因来提高其产量。本实验从野生金褐链霉菌SYAU0709克隆aurJ3M基因,连接载体pMD19-T并测序。将带有aurJ3M基因的表达质粒pBJAUM转化金褐链霉菌SYAU0709,高效表达aurJ3M基因,获得重组菌株。... 详细信息

通过高效表达金褐霉素生物合成基因簇中的调控基因来提高其产量。本实验从野生金褐链霉菌SYAU0709克隆aurJ3M基因,连接载体pMD19-T并测序。将带有aurJ3M基因的表达质粒pBJAUM转化金褐链霉菌SYAU0709,高效表达aurJ3M基因,获得重组菌株。通过高效液相色谱分析检测,重组菌株的金褐霉素产量提高约6倍,并且遗传性能稳定,发酵结果说明过量表达aurJ3M基因能够提高金褐霉素的产量。

关键词：金褐链霉菌金褐霉素 aurJ3M基因发酵

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金褐霉素高产菌株复合诱变选育的研究

食品研究与开发 2013年第10期34卷 102-105页

作者：李辉魏杰孟宪军沈阳农业大学食品学院辽宁沈阳110161 辽宁大学生命科学院辽宁沈阳110036

通过复合诱变的方法获得金褐霉素的高产菌株。首先采用紫外诱变,筛选到高产菌株UV-0709-40s-3;再以UV-0709-40s-3为出发菌株,采用EMS诱变,筛选到金褐霉素的高产菌株UV-0709-40min-14。经过液相色谱测定分析,菌株UV-0709-40s-3和UV-0709-... 详细信息

通过复合诱变的方法获得金褐霉素的高产菌株。首先采用紫外诱变,筛选到高产菌株UV-0709-40s-3;再以UV-0709-40s-3为出发菌株,采用EMS诱变,筛选到金褐霉素的高产菌株UV-0709-40min-14。经过液相色谱测定分析,菌株UV-0709-40s-3和UV-0709-40min-14的金褐霉素产量比原始菌株分别提高了58.33%和90.34%。

关键词：金褐霉素复合诱变高产菌株

金褐霉素产生菌——金褐链霉菌固体种子培养的研究

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江西农业大学学报 2006年第4期28卷 602-605页

作者：王华高勇生江西农业大学国土资源与环境学院江西南昌330045

对金褐链霉菌（Streptomyces ***）固体培养基进行筛选，筛选出金褐链霉菌每支斜面产孢子达120多亿个的固体培养基，约是原先所用培养基产孢量的4000倍，培养时间缩短为5～6d。同时初步探讨了金褐链霉菌在此培养基上有利于代谢产物金褐... 详细信息

对金褐链霉菌（Streptomyces ***）固体培养基进行筛选，筛选出金褐链霉菌每支斜面产孢子达120多亿个的固体培养基，约是原先所用培养基产孢量的4000倍，培养时间缩短为5～6d。同时初步探讨了金褐链霉菌在此培养基上有利于代谢产物金褐霉素的合成，有利于接种摇瓶进行发酵产金褐霉素，且有利于菌种的保藏。

关键词：金褐链霉菌金褐霉素培养基

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金褐霉素对冬枣的保鲜效果及机制研究

金褐霉素对冬枣的保鲜效果及机制研究

作者：宋威辽宁大学

学位级别：硕士

冬枣老少咸宜、营养丰富,且具有多种保健功能及食疗价值,素有“枣中极品”的美称。但冬枣感染链格孢属(Alternaria alternata)、青霉属(Penicilliun expansum)等病原菌后,会引起黑霉病、黑斑病、红斑病、青霉病等病害,造成其贮存期极短... 详细信息

冬枣老少咸宜、营养丰富,且具有多种保健功能及食疗价值,素有“枣中极品”的美称。但冬枣感染链格孢属(Alternaria alternata)、青霉属(Penicilliun expansum)等病原菌后,会引起黑霉病、黑斑病、红斑病、青霉病等病害,造成其贮存期极短,通常情况下仅为3-5d,这一问题严重限制着冬枣产业的发展。在冬枣采后保鲜应用中,使用化学药剂后会造成果实,尤其是果皮上的残留。由于冬枣采后即食,食用部分包含果皮,很容易随皮食入残留药物,危害消费者身体健康。所以选择高效、低残留且天然、安全的保鲜防腐药剂对整个冬枣产业的发展有重要意义。金褐霉素(Aureofuscin)与纳他霉素(Natamycin)具有极为相似的化学结构和生物活性。纳他霉素是一种高效的食品防腐保鲜剂,天然、低毒的特性使其在水果保鲜上也显示出了巨大潜力,但其在我国没有自主知识产权,使用依赖于进口。我国拥有自主知识产权的四烯类生物防腐剂只有金褐霉素,来源于天然真菌发酵、对多种真菌具有很好的抑制活性。将其与纳他霉素的抑菌谱对比后可以发现,在抑制青霉、单孢枝霉、黑根霉等水果病原菌时金褐霉素具有更强的抗菌作用,而酵母菌、青霉、根霉等都是冬枣的病原菌,故推测金褐霉素会对冬枣有很好的保鲜效果。金褐霉素无色无味,不会对产品的感官评价产生影响。在油脂和水中极难溶解,被人食入后不被吸收,直接随粪便排出,所以具有极大潜力被开发成为新型的高效、低残留、天然安全的食品防腐剂。而且作为我国唯一拥有自主知识产权的四烯类生物防腐剂,金褐霉素对冬枣的保鲜应用研究,对冬枣产业,乃至整个食品工业都具有积极意义,同时又可以填补我国拥有自主知识产权的四烯类防腐剂的空白。本试验以冬枣为试材,研究了金褐霉素对冬枣主要致病菌——青霉菌、链格孢属的抑菌作用及常温和冷藏两种温度条件下药剂处理对冬枣的防腐保鲜作用,并检测金褐霉素保鲜冬枣的残留动态及其急性毒性,从而为金褐霉素对冬枣的保鲜应用提供了理论依据。结果表明：1.金褐霉素对冬枣主要致病菌有很好的抑制效果,100μl(0.624mg-ml-1)金褐霉素溶液对青霉菌的抑菌直径为3.7cm,对交链孢霉属的抑菌直径为1.95cm;2.相比对照组,在常温、低温(4℃)两种贮藏条件下,使用金褐霉素可以有效防止冬枣硬度、抗坏血酸、可溶性固形物以及可滴定酸下降,显著抑制了果实转红,减少重量损失和腐烂发生;使用金褐霉素还显著抑制果实丙二醛的增加、维持果胶酶和苯丙氨酸解氨酶的活性,保鲜效果良好;低温贮藏条件下,果实各指标的衰退均受到抑制,金褐霉素处理辅以低温贮藏,冬枣保鲜效果最佳;3.使用金褐霉素处理后果实残留量较少,仅为1.58 mg·kg-1,且分解迅速,处理冬枣后,枣果残留的金褐霉素常温下半衰期为3.18h;低温下半衰期为4.02h;4.按照急性毒性试验结果推测金褐霉素为低毒物质。

关键词：冬枣金褐霉素保鲜效果机制研究残留动态

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大孔树脂纯化金褐霉素的研究

食品工业科技 2010年第2期31卷 277-279页

作者：孟宪军王琼魏杰沈阳农业大学食品学院辽宁沈阳110161 辽宁大学生命科学院辽宁沈阳110036

通过比较八种大孔树脂对金褐霉素发酵液的吸附和解吸效果,从中筛选出适合金褐霉素分离纯化的树脂,并对其吸附和解吸性能进行研究。结果表明,X-5树脂最适合金褐霉素的纯化,洗脱剂甲醇的体积分数为80%,上样液pH5.0,洗脱液pH7.0,吸附流速为... 详细信息

通过比较八种大孔树脂对金褐霉素发酵液的吸附和解吸效果,从中筛选出适合金褐霉素分离纯化的树脂,并对其吸附和解吸性能进行研究。结果表明,X-5树脂最适合金褐霉素的纯化,洗脱剂甲醇的体积分数为80%,上样液pH5.0,洗脱液pH7.0,吸附流速为1.0BV/h,洗脱流速为1mL/min,此方法所得金褐霉素纯度较高,且有明显的脱色效果。

关键词：大孔吸附树脂金褐霉素纯化 HPLC法

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前体对金褐霉素生物合成的影响

食品与生物技术学报 2009年第3期28卷 429-432页

作者：魏杰孟宪军辽宁大学生命科学院辽宁沈阳110036 沈阳农业大学食品学院辽宁沈阳110161

在发酵液中分别加入乙酸钠、丙酸钠、丁酸钠、乙醇、正丙醇、正丁醇作为前体,进行前体的种类选择、加入量及加入时间的优化实验。结果表明,乙醇是比乙酸钠、丙酸钠、丁酸钠、正丙醇、正丁醇更佳的金褐霉素合成前体,正丙醇、正丁醇对金... 详细信息

在发酵液中分别加入乙酸钠、丙酸钠、丁酸钠、乙醇、正丙醇、正丁醇作为前体,进行前体的种类选择、加入量及加入时间的优化实验。结果表明,乙醇是比乙酸钠、丙酸钠、丁酸钠、正丙醇、正丁醇更佳的金褐霉素合成前体,正丙醇、正丁醇对金褐霉素生物合成无明显促进作用。在发酵24 h时向发酵培养基中添加体积分数0.2%的乙醇,金褐霉素产量与不添加前体相比,抑菌直径增加26 mm,具有较好的应用价值。

关键词：金褐霉素金褐链霉菌发酵前体