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AML1a在小鼠造血细胞增殖分化异常中的作用

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中国实验血液学杂志 2011年第6期19卷 1477-1481页

作者：许发美邢海燕田征唐克晶饶青王敏王建祥中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

本研究旨在探讨AML1a在小鼠造血细胞增殖分化异常中的作用及其作用机制。将构建的pMSCV-FLAG-AML1a-IRES-YFP和pMSCV-IRES-YFP分别与辅助质粒pV Pack-Eco(含Env)、pV Pack-GP(含gal-pol)组合,通过磷酸钙沉淀法转染293T细胞,制备逆转录... 详细信息

本研究旨在探讨AML1a在小鼠造血细胞增殖分化异常中的作用及其作用机制。将构建的pMSCV-FLAG-AML1a-IRES-YFP和pMSCV-IRES-YFP分别与辅助质粒pV Pack-Eco(含Env)、pV Pack-GP(含gal-pol)组合,通过磷酸钙沉淀法转染293T细胞,制备逆转录病毒。通过逆转录病毒将AML1a及YFP转导至C57 BL/6J雄性小鼠的骨髓单个核细胞(BMMNC),接种于M3434甲基纤维素完全培养液进行集落形成实验,并置于含mSCF、mIL-3、mIL-6的M5300液体培养液中进行长期培养,观察BMMNC形态变化。结果显示,转导了AML1a的BMMNC集落形成能力增强,集落数量和体积均明显大于对照组,集落以CFU-E和CFU-GEMM为主。长期培养实验中,转导AML1a组细胞形态显示分化阻滞,而对照组细胞则处于更成熟的阶段。结论:AML1a增加了造血干/祖细胞的增殖能力,并将小鼠造血干/祖细胞阻滞于较早的发育阶段。

关键词： AML1a 骨髓单个核细胞造血细胞增殖造血细胞分化

双黄升白颗粒剂对白细胞减少症模型小鼠造血细胞作用的研究

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中国中药杂志 2006年第9期31卷 754-759页

作者：沈云辉陈长勋徐振晔上海中医药大学药理教研室上海201203 上海中医药大学附属龙华医院上海200032

目的:探讨双黄升白颗粒剂升高白细胞作用及其作用机制。方法:采用Se-137放射源照射ICR小鼠,造成白细胞减少症动物模型,对模型动物给予双黄升白颗粒剂大、中、小剂量(分别为9.2,4.6,2.3 ***-1.d-1)灌胃,并设正常对照组,模型对照组,阳性... 详细信息

目的:探讨双黄升白颗粒剂升高白细胞作用及其作用机制。方法:采用Se-137放射源照射ICR小鼠,造成白细胞减少症动物模型,对模型动物给予双黄升白颗粒剂大、中、小剂量(分别为9.2,4.6,2.3 ***-1.d-1)灌胃,并设正常对照组,模型对照组,阳性对照利可君组。对小鼠外周血象,骨髓有核细胞(BMNC),脾结节(CFU-S)计数,胸腺指数(TI),脾脏指数(SI),骨髓细胞增殖,体外培养小鼠粒单系集落形成单位(CFU-GM),骨髓CD34+细胞比例,骨髓造血微环境等进行检测。结果:双黄升白颗粒可明显升高模型小鼠的白细胞(WBC);双黄升白颗粒可升高模型小鼠的BMNC计数并促进其骨髓细胞增殖;双黄升白颗粒升高模型小鼠CFU-S计数,提高CFU-GM产率,提高骨髓CD34+细胞比例,对造血干/祖细胞增殖具促进作用;双黄升白颗粒具有保护模型小鼠骨髓造血微环境作用;双黄升白颗粒升高模型动物SI,具有一定的免疫增强作用。结论:双黄升白颗粒剂具有明显升高白细胞作用,其作用机制与促进造血细胞增殖及保护骨髓造血微环境有关。

关键词：双黄升白颗粒剂白细胞减少症升高白细胞作用造血细胞增殖造血微环境

地榆总皂苷对巨核祖细胞增殖分化及相关受体表达的影响

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中国中药杂志 2014年第9期39卷 1685-1689页

作者：代燕平高小平吴建明李翔黄飞鸿邹文俊成都中医药大学四川成都610075

目的:观察地榆总皂苷(DYS)对Baf3细胞和32D细胞的促增殖和分化作用,以及对IL-3受体和干细胞因子受体c-kit表达水平的影响。方法:培养依赖IL-3生长的Baf3细胞和32D细胞,在加或不加IL-3条件下,用质量浓度为5,10,20,30,40 mg·L-1的DYS分... 详细信息

目的:观察地榆总皂苷(DYS)对Baf3细胞和32D细胞的促增殖和分化作用,以及对IL-3受体和干细胞因子受体c-kit表达水平的影响。方法:培养依赖IL-3生长的Baf3细胞和32D细胞,在加或不加IL-3条件下,用质量浓度为5,10,20,30,40 mg·L-1的DYS分别处理细胞24,48,72,96 h后,采用CCK8方法检测细胞增殖;并用Giemsa染色检测细胞分化;另以RT-PCR方法检测DYS对Baf3细胞IL-3受体及对32D细胞c-kit表达水平的影响。结果:DYS单独处理细胞48 h,明显促进Baf3细胞和32D细胞增殖;与对照细胞比较,DYS处理32D细胞呈现成簇生长并形成许多大的细胞团;在加入IL-3的条件下,DYS也能明显增强IL-3的促细胞增殖作用。此外,DYS高浓度单独处理32D细胞可明显诱导多倍体巨核细胞数增加,促进巨核细胞分化。在mRNA水平,DYS单独处理细胞也能明显上调IL-3受体和c-kit的表达。结论:地榆总皂苷单独作用能促使2种巨核祖细胞的增殖和分化,其作用与上调IL-3受体和c-kit表达水平有关。

关键词：地榆总皂苷造血细胞增殖巨核细胞分化白细胞介素3 白细胞介素3受体干细胞因子受体

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四种Notch配体信号功能活性比较

山东医药 2004年第7期44卷 13-15页

作者：叶静静马道新赵建强纪春岩山东大学齐鲁医院山东济南250012

目的　观察四种 Notch配体的功能活性 ,探讨其在 Notch信号传导机制中的作用。方法　以Notch1- CHO和 Notch2 - CHO作为宿主细胞 ,瞬时转染报告质粒 TP1,分别加入转染有不同 Notch配体 Delta1、Jagged1、Jagged2、Delta4的 CHO细胞及未... 详细信息

目的　观察四种 Notch配体的功能活性 ,探讨其在 Notch信号传导机制中的作用。方法　以Notch1- CHO和 Notch2 - CHO作为宿主细胞 ,瞬时转染报告质粒 TP1,分别加入转染有不同 Notch配体 Delta1、Jagged1、Jagged2、Delta4的 CHO细胞及未转染 CHO细胞 ,使 Notch分子与其配体充分结合 ,加入发光底物PGL10 0 ,用 L umat测定发光情况 ,由此观察并比较各配体对上述两种宿主细胞的信号功能活性水平。结果　各配体与 Notch1结合后均能引起荧光素酶活性增高 ,尤其以 Jagged2 - CHO、Delta4 - CHO1- 4、Delta4 - CHO1- 5为著 ,而 Delta1- CHO、Jagged1- CHO引起的活性增加程度较低 ,尚不能确定其信号功能活性 ;各配体与 Notch2结合后都有较高的信号功能活性 ,其反应强于与 Notch1的作用。结论　 4种配体与 Notch2作用后均能使荧光素酶活性增加多倍 ,故有较强的信号功能活性。

关键词： Notch配体功能活性信号传导机制造血细胞增殖

外源性IL-3cDNA导入骨髓基质细胞及对造血的调控作用

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第三军医大学学报 2001年第8期23卷 948-950页

作者：袁良平粟永萍程天民刘林郑华金王延江蒲晓允艾国平刘晓红瞿红云李青第三军医大学预防医学系防原医学教研室全军复合伤研究所第三军医大学成都军区成都总医院血液内科成都610083 第三军医大学医学检验系临床检验学教研室重庆400038

目的探索将外源性ＩＬ－３ｃＤＮＡ导入骨髓基质细胞的可能性。方法将小鼠ＩＬ－３ｃＤＮＡ克隆到逆转录病毒载体（ｐＬＸ－ＳＮ）上，然后将重组的ＩＬ－３ｃＤＮＡ用脂质体转染到包装细胞ＰＡ３１７上，Ｇ４１８筛选后得到抗性克... 详细信息

目的探索将外源性ＩＬ－３ｃＤＮＡ导入骨髓基质细胞的可能性。方法将小鼠ＩＬ－３ｃＤＮＡ克隆到逆转录病毒载体（ｐＬＸ－ＳＮ）上，然后将重组的ＩＬ－３ｃＤＮＡ用脂质体转染到包装细胞ＰＡ３１７上，Ｇ４１８筛选后得到抗性克隆，将含病毒的上清液转染骨髓基质细胞。用自行设计的引物，检测ｐＬＸＳＮ上的ＮｅｏＲ基因及转入的ＩＬ－３基因。同时观察了转染ｐＬＸＳＮ／ＩＬ－３的基质细胞培养上清液对小鼠骨髓ＣＦＵ－ＧＭ形成的影响，并测定其对造血因子依赖株ＮＦＳ－６０细胞增殖活性的影响。结果将含重组子ｐＬＸＳＮ－ＩＬ－３和空载体ｐＬＸＳＮ的病毒培养上清感染ＢＭＳ，前者用ＰＣＲ扩增出５００ｂｐ和１７０ｂｐ（ＮｅｏＲ）的条带，后者仅扩增出１７０ｂｐ。转染ｐＬＸＳＮ／ＩＬ－３的基质细胞上清液有促进小鼠骨髓ＣＦＵ－ＧＭ增殖的作用，与空载体组及未转染组比较，有非常显著性差异（Ｐ＜０．０１）。结论外源性的ＩＬ－３基因及ｐＬＸＳＮ上的ＮｅｏＲ已整合到骨髓基质细胞基因组ＤＮＡ中，并促进造血细胞增殖。

关键词：白细胞介素-3 基质细胞聚合酶链反应造血细胞增殖骨髓