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重庆医学 2016年第14期45卷 1942-1944,1947页

作者：刘学良彭建华周冲徐斌秦兴虎刘亮西南医科大学附属医院神经外科四川泸州646000

目的对比pEGFP-N1-apoj质粒在不同DNA浓度条件下转染骨髓间充质干细胞的转染率,并测定载脂蛋白-j的表达情况。方法 0.8、1.2、1.6、2.0μg pEGFP-N1-apoj质粒分别在脂质体的介导下转染大鼠骨髓间充质干细胞,并在荧光显微镜下观察,确定24... 详细信息

目的对比pEGFP-N1-apoj质粒在不同DNA浓度条件下转染骨髓间充质干细胞的转染率,并测定载脂蛋白-j的表达情况。方法 0.8、1.2、1.6、2.0μg pEGFP-N1-apoj质粒分别在脂质体的介导下转染大鼠骨髓间充质干细胞,并在荧光显微镜下观察,确定24、48、72h时转染率,筛选出能获得最高转染率的质粒的量。设置pEGFP-N1-apoj质粒组、空pEGFP-N1质粒组、空白对照组,用蛋白免疫印迹法检测载脂蛋白-j在24、48、72h3个时间点的表达情况。结果 4个不同质粒浓度组转染率分别为:(16.7±1.0)%、(19.7±1.4)%、(30.1±3.6)%、(21.7±5.5)%,比较4个组间转染效率差异有统计学意义(Pj质粒组转率最高。通过蛋白免疫印迹法检测后,3个目的蛋白灰度值与内参甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)灰度值相比较,蛋白质相对表达水平为:pEGFP-N1-apoj质粒组1.91±0.12,空pEGFP-N1质粒组0.56±0.11,空白对照组0.57±0.17,差异有统计学意义(Pj可在脂质体的介导下转染入大鼠骨髓间充质干细胞,携带载脂蛋白-j基因的靶细胞可表达载脂蛋白-j。

关键词：载脂蛋白类间质干细胞载脂蛋白-j 重组质粒骨髓间充质干细胞转染蛋白免疫印迹法

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相关蛋白在携带载脂蛋白-j基因大鼠BMSCs中的表达及意义

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西安交通大学学报（医学版） 2016年第1期37卷 63-67页

作者：刘学良周冲徐斌郑晓梅刘亮泸州医学院附属医院神经外科四川泸州646000 泸州医学院附属医院神经内科四川泸州646000

目的检测重组质粒pEGFP-N1-apoj在不同量、不同时间条件下转染大鼠骨髓间充质干细胞的瞬时转染效率,并测定载脂蛋白-j(Apoj)在靶细胞中能否高表达。方法贴壁培养细胞,并用脂质体LipofectaminTM2000分别介导0.8、1.2、1.6、2.0μg重组质... 详细信息

目的检测重组质粒pEGFP-N1-apoj在不同量、不同时间条件下转染大鼠骨髓间充质干细胞的瞬时转染效率,并测定载脂蛋白-j(Apoj)在靶细胞中能否高表达。方法贴壁培养细胞,并用脂质体LipofectaminTM2000分别介导0.8、1.2、1.6、2.0μg重组质粒pEGFP-N1-apoj转染,置荧光显微镜下观察转染结果,测定在24、48、72h时间点的瞬时转染效率。蛋白免疫印迹法分别检测pEGFP-N1-apoj质粒转染组、空pEGFP-N1质粒转染组、空白对照组Apoj的表达情况。结果不同的质粒量中1.6μg pEGFP-N1-apoj质粒与3.0μL脂质体制备的复合物瞬时转染效率最高,分别作用24、48、72h可达27.8%、34.3%、28.2%。蛋白免疫印迹法检测到pEGFP-N1-apoj质粒组大量Apoj表达,空质粒及空白对照组见微量Apoj表达;并且pEGFP-N1-apoj质粒组Apo-j的表达明显高于空载体及空白对照组(Pj成功转染入大鼠骨髓间充质干细胞,Apoj在大鼠骨髓间充质干细胞中得到大量表达。

关键词：载脂蛋白-j 重组质粒骨髓间充质干细胞瞬时转染蛋白免疫印迹法

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载脂蛋白-j mRNA在实验性急性脑出血大鼠脑内的表达

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神经损伤与功能重建 2008年第2期3卷 80-82页

作者：石磊何志义李艳玲徐佳亮邓淑敏沈阳医学院沈洲医院干诊科沈阳110002 中国医科大学附属第一医院神经内科沈阳110001 辽宁省金秋医院神经内科沈阳110015

目的:探讨载脂蛋白j(Apo-j)在大鼠脑出血急性期的脑内表达及其可能的作用机制。方法:SD大鼠54只,制备脑出血模型,随机分为对照组、假手术组及脑出血后3h组、6h组、12h组、1d组、3d组、5d组和7d组。检测各组的脑含水量,以逆转录-聚合酶... 详细信息

目的:探讨载脂蛋白j(Apo-j)在大鼠脑出血急性期的脑内表达及其可能的作用机制。方法:SD大鼠54只,制备脑出血模型,随机分为对照组、假手术组及脑出血后3h组、6h组、12h组、1d组、3d组、5d组和7d组。检测各组的脑含水量,以逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)半定量检测Apo-j mRNA的含量。结果:各组均有Apo-j mRNA表达,但脑出血后各组手术侧表达明显增加(Pj mRNA表达增加,并与脑水肿程度呈正相关,推测Apo-j起细胞保护作用的可能性大。

关键词：载脂蛋白-j 脑出血逆转录-聚合酶链反应

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