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作者：范立壮河北医科大学

学位级别：硕士

目的:CD105又名Endoglin(EDG),是一种与增殖相关的内皮细胞膜抗原,仅在处于增殖状态的血管内皮细胞中高表达。可以调节细胞对转化生长因子-β(transforminggrowth factor-beta,TGF-β)的反应、参与血管生成,在伤口愈合、胚胎发育、炎性... 详细信息

目的:CD105又名Endoglin(EDG),是一种与增殖相关的内皮细胞膜抗原,仅在处于增殖状态的血管内皮细胞中高表达。可以调节细胞对转化生长因子-β(transforminggrowth factor-beta,TGF-β)的反应、参与血管生成,在伤口愈合、胚胎发育、炎性反应乃至肿瘤血管上皮生长过程中都发挥一定作用。研究发现:原发性乳腺癌患者血清中可溶性CD105(S-CD105)表达水平明显增高,经手术治疗后短期内可降至正常水平。本课题旨在应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测术后复发转移性乳腺癌患者血清S-CD105的表达情况,并与患者同期血清CEA、CA15-3表达情况进行比较,探讨血清S-CD105与CEA、CA15-3表达情况之间的关系,希望能为术后复发转移性乳腺癌的诊断提供一项新的检测指标。方法:随机选择2007年3月至2008年12月在河北医科大学第四医院外科门诊复查或再住院治疗的术后复发转移性乳腺癌患者50例,其中包括远处转移36例和局部复发14例(手术区胸壁复发7例、同侧区域淋巴结转移7例);乳腺良性疾病患者20例(乳腺纤维腺瘤9例、乳腺腺病9例、乳管内乳头状瘤2例)及健康对照15例,采用ELISA检测其血清S-CD105浓度,对结果进行分析比较。同时应用微粒子化学发光法测定复发转移性乳腺癌患者同期血清CEA、CA15-3浓度,再将S-CD105与CEA、CA15-3进行分析比较。本试验浓度值用中位数(范围)表示,并用SPSS11.5版软件进行统计分析。结果:1术后远处转移性乳腺癌组、局部复发组、乳腺良性疾病组和健康对照组血清S-CD105浓度分别为22.81ng/ml(3.30～38.10ng/ml)、20.00ng/ml(3.57～36.65ng/ml)、11.55ng/ml(0.99～22.20ng/ml)和10.62ng/ml(7.81～19.39ng/ml),四组间比较差异有统计学意义(P=0.000)。进一步分析发现,远处转移组与乳腺良性疾病及健康对照组间差异有统计学意义(P=0.000);局部复发组与乳腺良性疾病及健康对照组间差异亦有统计学意义(P=0.014)。但远处转移组与局部复发组比较,差异无统计学意义(P=0.342);乳腺良性疾病与健康对照组比较,差异亦无统计学意义(P=0.934)。2以健康对照组中S-CD105浓度的最大值19.39ng/ml为标准,低于此标准定义为S-CD105阴性(-),高于此标准为阳性(+);CEA、CA15-3以试剂盒给出的正常参考值为标准,即CEA转移性乳腺癌组血清S-CD105表达阳性率为72%,高于同期血清CEA、CA15-3表达阳性率42%和44%,且差异均有统计学意义(P=0.002、P=0.005);而与CEA、CA15-3联合表达阳性率66%相比,差异无统计学意义(P=0.517)。进一步统计发现,三者联合表达阳性率高达90%,优于单项检测S-CD105和联合检测CEA、CA15-3(P=0.022、P=0.004)。3根据复发、转移部位不同,将术后复发转移性乳腺癌患者分为:区域淋巴结转移组7例、手术区胸壁复发组7例、单纯内脏转移组15例、单纯骨转移组9例及骨与内脏联合转移组11例,血清S-CD105浓度分别为24.24ng/ml(17.09～36.65ng/ml)、13.98ng/ml(3.57～31.14 ng/ml)、24.80ng/ml(3.30～38.10ng/ml)、22.72ng/ml(13.50～29.53ng/ml)和19.47ng/ml(13.04～31.8 1ng/ml),五组比较差异无统计学意义(P=0.065)。根据不同复发、转移部位对S-CD105、CEA、CA15-3表达阳性率统计发现,单纯内脏转移时,单项检测S-CD105表达阳性率要优于CEA和CA15-3(P=0.014、P=0.035),但与CEA、CA15-3联合检测阳性率相似(P=0.330);而区域淋巴结转移、手术区胸壁复发、单纯骨转移及骨与内脏联合转移时,未发现其优越性(P>0.05)。4术后复发转移性乳腺癌患者血清S-CD105浓度与原发肿瘤病理类型(P=0.649)、腋淋巴结转移状况(P=0.611)、ER、PR、HER-2表达强度无关(P=0.071、P=0.331、P=0.623);与患者月经状况亦无关(P=0.952)。结论:1术后复发转移性乳腺癌患者血清S-CD105浓度明显高于乳腺良性疾病及健康对照组。但远处转移组与局部复发组血清S-CD105浓度差异无统计学意义

关键词：乳腺癌 CD105 复发转移血清 CEA \CA15-3 酶联免疫吸附试验(ELISA)

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shRNA诱导BRMS1基因沉默调控卵巢癌细胞侵袭转移的实验研究

shRNA诱导BRMS1基因沉默调控卵巢癌细胞侵袭转移的实验研究

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作者：周映群广州医学院

学位级别：硕士

研究背景：卵巢癌是常见的女性生殖系统恶性肿瘤之一，严重威胁妇女生命健康，死亡率居妇科恶性肿瘤首位，五年生存率仅40%左右。由于其发病隐匿，早期缺乏特异性症状与体征及有效的诊断筛查手段，而且容易出现侵袭转移，约70%卵巢癌... 详细信息

研究背景：卵巢癌是常见的女性生殖系统恶性肿瘤之一，严重威胁妇女生命健康，死亡率居妇科恶性肿瘤首位，五年生存率仅40%左右。由于其发病隐匿，早期缺乏特异性症状与体征及有效的诊断筛查手段，而且容易出现侵袭转移，约70%卵巢癌患者确诊时多为晚期，失去了手术的最佳时期，严重影响卵巢癌患者的预后。究其原因，侵袭和转移是卵巢癌治愈困难的瓶颈所在。因此，目前除了探索卵巢癌早期发现的有效手段外，如何有效控制卵巢癌侵袭和转移成为提高卵巢癌五年生存率的有效策略，也必将为最终控制卵巢癌提供新的方法，因而，也成为当今卵巢癌治疗领域研究的热点问题。乳腺癌转移抑制基因1（breast cancer metastasis suppressor1，BRMS1）是近年发现的肿瘤转移抑制基因，可抑制包括卵巢癌在内的多种肿瘤的侵袭转移。在乳腺癌细胞中已证实，BRMS1通过抑制趋化因子受体4（chemokine receptor4，CXCR4）和白细胞介素-6（interleukin-6，IL-6）的表达以及诱导肿瘤生长抑制因子4（inhibitorof growth4，ING4）的表达，从而抑制肿瘤细胞的转移。但由于其作用复杂，在卵巢癌中具体的作用机制尚不清楚。因此，通过研究BRMS1基因对卵巢癌细胞侵袭转移的作用及其机制，为寻求控制卵巢癌侵袭和转移提供新的靶点，并为卵巢癌患者的早期诊断、预后评价和综合治疗奠定理论基础。研究目的：本研究利用RNA干扰技术，构建BRMS1-shRNA真核表达载体并转染OVCAR3细胞，探讨BRMS1基因沉默对卵巢癌细胞粘附、侵袭、迁移和血管形成的作用及可能机制。研究方法： 1.高表达BRMS1基因的卵巢癌细胞株的筛选应用Western blot法在蛋白水平上检测4种不同转移潜能人卵巢癌细胞株ES-2、HO-8910、SKOV3和OVCAR3细胞中BRMS1的表达情况。 2. BRMS1真核表达载体的构建与鉴定根据前期实验结果筛选出沉默效率最高的siRNA靶序列，设计合成2条互补的靶向BRMS1寡核苷酸序列，另设随机序列作为阴性对照，退火处理后克隆至pGPU6/GFP/Neo载体，构建重组载体BRMS1-shRNA，并通过酶切和测序鉴定。 3.细胞转染和阳性克隆的筛选采用脂质体介导法将重组载体转染人卵巢癌细胞，经过G418稳定筛选，获得稳定沉默BRMS1基因的卵巢癌细胞株。采用荧光显微镜观察转染效率，采用荧光定量PCR（Q-PCR）和Western blot法分别从mRNA和蛋白水平检测BRMS1的表达。 4.沉默BRMS1基因对卵巢癌细胞转移行为的影响采用黏附实验检测细胞的黏附能力，采用Transwell侵袭实验检测细胞的体外侵袭能力，采用Transwell迁移实验和划痕实验检测细胞的体外迁移能力，采用体外血管形成实验检测细胞的诱导体外血管形成能力。 5. BRMS1影响卵巢癌细胞侵袭转移的机制研究采用荧光定量PCR法检测CXCR4mRNA的表达，采用Western blot法检测CXCR4、ING4和IL-6蛋白的表达，初步确定BRMS1基因沉默对细胞转移调控的分子机制;进一步采用凝胶电泳迁移实验（EMSA）探讨BRMS1基因沉默对核转录因子-κB（nuclear factor-κappaB，NF-κB）蛋白与CXCR4启动子结合能力的影响，从而研究肿瘤转移相关基因的调控机理。 6.统计学分析应用SPSS16.0软件统计分析。计量资料以±s表示，三组间比较采用单因素方差分析，P<0.05认为差异具有统计学意义。结果： 1.成功筛选出高表达BRMS1的卵巢癌细胞株：OVCAR3。 2.重组载体BRMS1-shRNA经酶切鉴定可以被BamHⅠ切开，位点正确，而不能被PstⅠ切开，进一步测序结果与实验设计合成的pGPU6/GFP/Neo-BRMS1靶向目标序列完全一致，成功构建了pGPU6/GFP/Neo-BRMS1重组质粒。 3. BRMS1-shRNA转染卵巢癌OVCAR3细胞，经G418稳定筛选后，Q-PCR和Western blot检测显示，干扰组细胞中BRMS1-mRNA和蛋白表达抑制率分别为85.15%和46.67%，差异有统计学意义（P<0.01），成功构建了稳定沉默BRMS1基因的卵巢癌细胞株。 4. BRMS1-shRNA转染卵巢癌细胞后，体外粘附、侵袭、迁移和诱导血管形成能力较对照组明显增强，差异有统计学意义（P<0.05）。 5. BRMS1-shRNA转染卵巢癌细胞后，Q-PCR结果显示，CXCR4mRNA表达上调，是空白对照组的1.78倍，差异有统计学意义（P<0.05）。Western blot结果显示，CXCR4和IL-6蛋白在干扰组中表达上调，分别是对照组的1.26倍和1.5倍，而ING4蛋白表达下降，抑制率为30%，差异有统计学意义（P<0.05）。 6. EMSA实验证实

关键词：卵巢肿瘤转移 BRMS1基因 RNA干扰 CXCR4

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胃癌患者组织中DLC-1和ezrin表达水平与患者肿瘤转移与复发的关系

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中国组织化学与细胞化学杂志 2017年第1期26卷 55-58页

作者：黄永平方慧英安徽人口职业学院池州247000

目的探讨胃癌组织中DLC-1和ezrin表达水平与胃癌转移或复发的关系。方法选择2005年9月至2010年12月行胃癌根治术并经病理确诊的患者160例。应用SP法检测DLC-1和ezrin在胃癌组织中的表达,采用COX回归模型探讨DLC-1和ezrin表达与肿瘤复发... 详细信息

目的探讨胃癌组织中DLC-1和ezrin表达水平与胃癌转移或复发的关系。方法选择2005年9月至2010年12月行胃癌根治术并经病理确诊的患者160例。应用SP法检测DLC-1和ezrin在胃癌组织中的表达,采用COX回归模型探讨DLC-1和ezrin表达与肿瘤复发或转移的关系。结果正常胃组织细胞中,DLC-1表达水平较高,DLC-1免疫反应产物主要分布在细胞膜表面;胃癌癌旁组织中,DLC-1表达低于正常胃组织;在胃癌组织中,DLC-1表达低于癌旁组织。正常胃组织和癌旁组织中未见明显ezrin表达,但在胃癌细胞细胞核中,ezrin免疫组织化学染色较强,表达水平较高;胃癌组织中DLC-1表达与患者性别、年龄、术前CEA水平无明显关系,但DLC-1阴性表达患者与肿瘤LNR、肿瘤N分期成正相关,ezrin阳性表达患者术前CEA值、肿瘤N分期、LNR分期成正相关,LNR、DLC-1阴性、ezrin阳性是胃癌患者转移或复发的独立危险因素。结论 DLC-1表达阴性、ezrin阳性表达与增加胃癌的转移或复发的风险,是胃癌转移或复发的独立危险因素,参与肿瘤的发生发展。

关键词：胃癌复发转移 DLC-1 ezrin

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锌指蛋白439在肝细胞性肝癌生长及转移中作用的初步研究

锌指蛋白439在肝细胞性肝癌生长及转移中作用的初步研究

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作者：陈明明浙江大学

学位级别：硕士

目的本课题旨在探究锌指蛋白439(zinc finger protein 439,ZNF439)在肝细胞性肝癌及其癌旁组织中的表达情况,初步探究其在肝细胞性肝癌发生发展过程中的作用。在人肝细胞性肝癌细胞株中过表达ZNF439,通过相关实验探究ZNF439对肝细胞性... 详细信息

目的本课题旨在探究锌指蛋白439(zinc finger protein 439,ZNF439)在肝细胞性肝癌及其癌旁组织中的表达情况,初步探究其在肝细胞性肝癌发生发展过程中的作用。在人肝细胞性肝癌细胞株中过表达ZNF439,通过相关实验探究ZNF439对肝细胞性肝癌生长增殖及迁徙转移能力的影响。方法运用免疫组织化学方法,检测21例临床病理确诊的肝细胞性肝癌及其癌旁相对正常肝组织芯片标本,观察ZNF439在肝细胞性肝癌及其癌旁相对正常肝组织中的表达情况,同时比较ZNF439在二者中的表达差异。应用G418抗性筛选,在人肝癌细胞株Hep-3b及LM3中构建ZNF439过表达稳转细胞株。通过MTS法细胞生长增殖实验,检测ZNF439过表达对肝细胞性肝癌细胞生长增殖的影响;通过transwell小室细胞迁徙实验、细胞骨架荧光染色实验以及体外血管生成实验,检测ZNF439过表达对肝细胞性肝癌细胞迁徙转移能力的影响。结果在免疫组化实验中,ZNF439只在肝细胞核中表达,细胞浆中不表达。肝细胞性肝癌组织细胞核中,ZNF439主要呈阴性及弱阳性表达,分别占总病例数的66.7%和28.6%,其次为中等阳性表达,占总病例数的4.7%;而在癌旁肝脏组织细胞核中,ZNF439绝大多数呈现强阳性及中等阳性表达,分别占总病例数的38.1%和28.6%,其次为弱阳性表达,占总病例数的33.3%。通过卡方检验,两组之间质检存在显著性差异(P转移能力受到明显抑制。细胞骨架荧光染色实验显示,ZNF439基因过表达后Hep-3b及LM3细胞的环形骨架增多,极性减少,形态改变被抑制。体外血管生成实验表明,在LM3细胞中,ZNF439基因过表达后其微血管生成能力受抑制。然而在ZNF439过表达和空载的Hep-3b细胞株中,均未观察到微血管形态生成现象。结论ZNF439在肝细胞性肝癌组织及其癌旁肝脏组织中存在差异表达,提示ZNF439可能参与到肝细胞性肝癌的发生过程中。ZNF439不影响肝细胞性肝癌的生长增殖,但ZNF439可能通过抑制肝癌细胞自身形态改变和微血管生成,降低肝癌细胞的迁徙转移能力。

关键词：肝细胞肝癌锌指蛋白439 增殖转移细胞骨架

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PD-L1反义寡核苷酸对结肠癌CT26细胞肝脏转移影响的初步研究

PD-L1反义寡核苷酸对结肠癌CT26细胞肝脏转移影响的初步研究

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作者：魏亚重庆医科大学

学位级别：硕士

目的:探讨PD-L1反义寡核苷酸对结肠癌CT26细胞系肝转移影响。方法:采用免疫组化S-P法检测大肠癌组织PD-L1表达,免疫荧光法检测大肠癌组织局部CD4、CD8淋巴细胞数目,并分析PD-L1表达与CD4、CD8淋巴细胞浸润之间的相关性。应用RT-PCR技... 详细信息

目的:探讨PD-L1反义寡核苷酸对结肠癌CT26细胞系肝转移影响。方法:采用免疫组化S-P法检测大肠癌组织PD-L1表达,免疫荧光法检测大肠癌组织局部CD4、CD8淋巴细胞数目,并分析PD-L1表达与CD4、CD8淋巴细胞浸润之间的相关性。应用RT-PCR技术检测PD-L1反义寡核苷酸处理后肿瘤细胞PD-L1的表达情况。同时采用小鼠结肠腺癌CT26细胞系肝转移模型,通过肿瘤细胞脂质体转染PD-L1反义寡核苷酸、腹腔注射PD-L1反义寡核苷酸两种方式,观察PD-L1反义寡核苷酸处理后结肠癌CT26细胞肝脏转移癌结节数量的变化。结果:1. 55例大肠癌组织中,PD-L1阳性表达29例(29/55,52.7%),明显高于对照肠黏膜(1/10,10%),χ检验,差异具显著性(P转移的33例病例中,PD-L1阳性表达22例(22/33,66.7%),而22例不伴有癌转移病例中,PD-L1阳性表达7例(7/22,31.8%),PD-L1蛋白表达在伴癌转移者高于不伴癌转移者,χ检验分析,差别具显著性(P0.05)。55例大肠癌组织中,PD-L1阳性者肿瘤局部CD4淋巴细胞和CD8淋巴细胞数分别为12.241±3.181、25.931±4.390;PD-L1阴性者肿瘤局部CD4淋巴细胞和CD8淋巴细胞数分别为29.077±4.524、68.539±5.405,Spearman相关分析,肿瘤PD-L1表达与肿瘤局部CD4、CD8淋巴细胞数均呈负相关(P转移模型中,PD-L1反义寡核苷酸CT26细胞转染组、随机寡核苷酸转染组及空白对照组肝脏表面转移癌结节数量分别为6.833±4.021、41.500±8.916、46.000±11.541,PD-L1反义寡核苷酸CT26细胞转染组明显少于随机寡核苷酸转染组及空白对照组,经单因素方差分析,差别具显著性(P转移癌结节数量分别为7.500±1.871、41.833±7.083、46.000±11.541,PD-L1反义寡核苷酸腹腔注射组肝转移结节数明显少于随机寡核苷酸注射组及空白对照组,经单因素方差分析,差别具显著性(P转移结节数,经t检验,差别无显著性(P>0.05)。结论:本研究结果提示:1人大肠癌组织表达PD-L1较对照肠黏膜增高,且与大肠癌转移有关;2大肠癌组织PD-L1对CD4、CD8淋巴细胞在肿瘤局部的聚集可能具有抑制作用;3 PD-L1反义寡核苷酸能够抑制结肠癌CT26细胞PD-L1表达,对CT26肿瘤细胞肝转移具有抑制作用,其分子机制有待进一步研究。

关键词：反义寡核苷酸 PD-L1 结肠癌转移

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胃癌术后血清转移相关蛋白质指纹的临床研究

胃癌术后血清转移相关蛋白质指纹的临床研究

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作者：马小军山西医科大学

学位级别：硕士

目的:应用SELDI-TOF-MS技术筛选胃癌术后转移相关的血清蛋白质组指纹图谱,并建立诊断、预测模型,并初步探讨其临床应用价值。方法:本实验以60例胃癌根治术后患者和26例正常人为研究对象,对胃癌患者进行2年的随访,根据是否发生转移、复... 详细信息

目的:应用SELDI-TOF-MS技术筛选胃癌术后转移相关的血清蛋白质组指纹图谱,并建立诊断、预测模型,并初步探讨其临床应用价值。方法:本实验以60例胃癌根治术后患者和26例正常人为研究对象,对胃癌患者进行2年的随访,根据是否发生转移、复发分为转移组和无转移组,应用SELDI-TOF-MS技术和CM10蛋白质芯片进行血清蛋白质指纹图谱检测;进而检测转移组患者转移前后的血清蛋白质指纹图谱,应用Biomarker Wizard Software和Biomarker Pattern Software软件进行数据分析,筛选与胃癌术后转移相关的生物标记,建立相应的诊断预测模型。结果:(1)经过2年随访,60例胃癌术后患者中有22例发生转移。术后转移患者和术后无转移患者分别与正常人相比,各有74个和69个蛋白质峰有显著性差异。将无转移组与转移组的术后早期血清蛋白质指纹图谱进行比较,发现14个蛋白质峰在两组间有显著性差异(p＜0.05);M/Z为4768和8841两个蛋白质组成的诊断模型Ⅰ可将无转移胃癌患者与转移胃癌患者准确分组,在学习模式下,灵敏度和特异度分别为95.46%(21/22)和86.84%(33/38),准确度为90%(54/60)。在测试模式下,灵敏度和特异度分别为81.82%(18/22)和84.21%(32/38),准确度为83.33%(50/60);(2)19例发生转移患者转移前后分别与正常人相比,均有70个蛋白质峰有显著性差异(p＜0.05);比较患者转移前后的指纹图谱发现,40个蛋白质峰差异有统计学意义(P＜0.05)。M/Z为2640,4115和13663的3个蛋白质峰组成的诊断模型Ⅱ可将转移前后的胃癌术后患者准确分组,在学习模式下,灵敏度和特异度分别为89.47%(17/19)和94.74%(18/19),准确度为92.11%(35/38)。在测试模式下,灵敏度和特异度分别为84.21%(16/19)和89.47%(17/19),准确度为86.84%(33/38);(3)M/Z为4115,4350和4652的三个蛋白质峰在无转移组、转移(前)组和转移后组间表达有显著性差异。结论:SELDI-TOF-MS技术用于胃癌术后患者血清蛋白质质谱分析,可筛选出胃癌转移复发相关的生物标记,建立的诊断模型有可能应用于对胃癌术后患者转移、复发的诊断和早期预测。

关键词：胃癌 SELDI-TOF-MS 转移蛋白质组

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结肠癌中VEGF、COX-2、MMP-9的表达与肿瘤侵袭转移的研究

结肠癌中VEGF、COX-2、MMP-9的表达与肿瘤侵袭转移的研究

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作者：施凉潘暨南大学

学位级别：硕士

目的:研究结肠癌标本中,血管内皮生长因子(VEGF)、环氧化酶-2(COX-2)、和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达及其相互关系;以及它们与临床、病理资料之间的关系,探讨VEGF、COX-2和HMMP-9的联合表达在结肠癌侵袭、转移的作用,寻找临床预测结... 详细信息

目的:研究结肠癌标本中,血管内皮生长因子(VEGF)、环氧化酶-2(COX-2)、和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达及其相互关系;以及它们与临床、病理资料之间的关系,探讨VEGF、COX-2和HMMP-9的联合表达在结肠癌侵袭、转移的作用,寻找临床预测结肠癌侵袭、转移的客观指标。方法:选取本院2000年1月～2007年9月行手术治疗,临床、病理等资料齐全的结肠癌患者50例,应用免疫组织化学S-P三步法,对50例结肠腺癌组织(实验组)和10例结肠癌旁正常组织(对照组)中的VEGF、COX-2、MMP-9蛋白表达进行检测,探讨VEGF、COX-2和MMP-9三种蛋白表达与结肠癌的临床病理特点(如肿瘤大小、部位、分化程度等)的关系。分析这三种蛋白的联合表达、两两联合表达及单独表达与肿瘤是否侵及浆膜层,是否淋巴结转移的相关性。单因素Logistic回归分析VEGF、COX-2和MMP-9这三种蛋白表达是否为结肠癌的浸润深度和/或淋巴结转移的影响因素。多因素Logistic回归分析这三种蛋白表达是否为结肠癌浸润深度和/或淋巴结转移的独立危险因素。结果:1、VEGF、COX-2、MMP-9三种蛋白在50例结肠癌阳性表达率分别为74%(37/50)、72%(36/50)、66.%(33/50);在10例结肠癌旁正常组织阳性表达率分别为10%(1/10)、0%(0/10)、10%(1/10)。其差异具有显著性(P＜0.05)。2、在结肠癌中VEGF、COX-2、MMP-9蛋白表达与肿瘤Dukes分期、浸润深度、淋巴结转移具有相关性(P＜0.05);但与患者的年龄、性别、肿瘤部位、肿瘤直径、及病理分化程度、CEA等无相关性(P＞0.05)。3、spearman等级相关分析显示在结肠癌中VEGF、COX-2、MMP-9三种蛋白的表达具有相关性;VEGF、COX-2、MMP-9的联合表达与肿瘤的浸润深度及淋巴结转移存在正相关,且三种蛋白的联合表达比其中两种蛋白的两两表达、单种蛋白的单独表达更具相关性。4、单因素Logistic回归分析显示:VEGF、COX-2、MMP-9蛋白表达与结肠癌的浸润深度和淋巴结转移有关。多因素Logistic回归分析显示:VEGF和MMP-9蛋白表达是结肠癌浸润深度的独立危险因素(OR值分别为5.578和9.691);而COX-2和MMP-9蛋白表达是结肠癌淋巴结转移的独立危险因素(OR值分别为6.399和4.061)。结论:COX-2、VEGF、MMP-9蛋白阳性表达的结肠癌更易浸润至浆膜层和发生淋巴结转移;COX-2、VEGF、MMP-9蛋白在结肠癌侵袭、转移的机制中起一定的作用,它们可以作为预测结肠癌侵袭、转移的分子生物学指标。

关键词：结肠癌免疫组化 COX-2 VEGF MMP-9 浸润转移

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多倍体肿瘤巨细胞数量及其上皮间质转化相关蛋白表达与人乳腺癌侵...

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作者：费飞安徽医科大学

学位级别：硕士

目的：我们前期的研究结果显示,多倍体肿瘤巨细胞(polyploid giant cancer cells, PGCCs)经氯化钴(cobalt chloride, CoCl2)诱导后可通过不对称分裂方式产生具有较强迁移和侵袭能力的子代细胞。本次研究旨在比较上皮间质转化(epithelial... 详细信息

目的：我们前期的研究结果显示,多倍体肿瘤巨细胞(polyploid giant cancer cells, PGCCs)经氯化钴(cobalt chloride, CoCl2)诱导后可通过不对称分裂方式产生具有较强迁移和侵袭能力的子代细胞。本次研究旨在比较上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)相关蛋白E-cadherin, N-cadherin和vimentin在乳腺癌细胞系MCF-7和MDA-MB-231中PGCCs及其子代细胞和与之相应的对照乳腺癌细胞中的表达情况;观察上皮间质转化相关蛋白在人乳腺癌组织中表达及其与PGCCs的关系,探讨其临床病理意义。方法：(1)利用蛋白质印迹法(western blot, WB)检测E-cadherin, N-cadherin和vimentin三种蛋白在乳腺癌细胞系MCF-7和MDA-MB-231中PGCCs及其子代细胞和相应对照乳腺癌细胞中的表达水平;划痕和侵袭实验比较上述细胞系中两组细胞之间的迁移和侵袭能力。(2)收集104例乳腺癌和11例良性乳腺肿瘤(纤维腺瘤)石蜡包埋组织,将肿瘤组织分为四组：52例伴淋巴结转移的乳腺癌原发灶(Ⅰ组)和与之相对应的淋巴结转移灶(Ⅱ组),52例不伴淋巴结转移的乳腺癌原发灶(Ⅲ组),11例良性乳腺肿瘤病灶(Ⅳ组)。检测并分析比较上述三种蛋白在各组乳腺肿瘤组织中的表达情况,计数并比较各组中PGCCs的数量差异。结果：(1)与对照组乳腺癌细胞相比,乳腺癌细胞系MCF-7和MDA-MB-231 PGCCs及其子代细胞低表达E-cadherin,而高表达N-cadherin和vimentin;且具有更强的迁移和侵袭能力。(2)四组乳腺肿瘤组织中,E-cadherin在良性乳腺肿瘤病灶(Ⅳ组)、不伴淋巴结转移的乳腺癌原发灶(Ⅲ组)、伴淋巴结转移的乳腺癌原发灶(Ⅰ组)和淋巴结转移灶(Ⅱ组)中的表达强度依次递减,结果具有统计学意义(P=0.000),与此同时N-cadherin和vimentin在上述四组中的表达强度依次递增,结果具有统计学差异(P值均=0.000)。此外,上述四组中多倍体肿瘤巨细胞的数量逐渐增多,差异具有统计学意义(P=0.000)。结论：多倍体肿瘤巨细胞的数量和上皮间质转化相关蛋白E-cadherin,N-cadherin和vimentin可作为评估乳腺癌病人淋巴结转移有价值的潜在生物标记。

关键词：多倍体肿瘤巨细胞乳腺肿瘤上皮间质转化转移

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miR-143和miR-145在胃癌中的表达及功能研究

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中华胃肠外科杂志 2015年第1期18卷 50-53页

作者：邢晓芳李子禹北京大学肿瘤医院暨北京市肿瘤防治研究所恶性肿瘤发病机制及转化研究教育部重点实验室胃肠肿瘤研究转化室 100142 北京大学肿瘤医院暨北京市肿瘤防治研究所恶性肿瘤发病机制及转化研究教育部重点实验室胃肠肿瘤外科 100142

目的：探讨miR-143和miR-145在胃癌组织中的表达情况，观察其生物学功能。方法通过高通量芯片检测比较11对胃癌原发灶及其配对肝转移灶的miRNA表达谱，采用Real-time PCR方法观察miR-145和miR-143在55例胃癌组织中的表达情况。同时使用T... 详细信息

目的：探讨miR-143和miR-145在胃癌组织中的表达情况，观察其生物学功能。方法通过高通量芯片检测比较11对胃癌原发灶及其配对肝转移灶的miRNA表达谱，采用Real-time PCR方法观察miR-145和miR-143在55例胃癌组织中的表达情况。同时使用Transwell方法观察其对细胞转移能力的影响。结果 miR-143和miR-145在胃癌组织中的表达明显低于癌旁正常组织（miR-143：0．028±0．005比0．052±0．014，P＝0．058；miR-145：0．922±0．135比1．772±0．285，P＝0．007），在转移灶中的表达明显低于原发灶（miR-143：0．059±0．025比0．182±0．045，P＝0．021；miR-145：0．164±0．076比0．594±0．283，P＝0．042），相关性分析显示，miR-143和miR-145表达具有显著相关性（r＝0．400， P＝0．000）。体外实验显示，两者可协同抑制胃癌细胞系转移。结论 miR-145和miR-143可能参与胃癌转移进程，并且两者可能发挥协同作用。

关键词：胃肿瘤 miR-143 miR-145 转移

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根皮素抑制肝癌细胞恶性表型的研究

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中药材 2008年第7期31卷 1019-1021页

作者：罗辉汪亚君陈杰刘江琴广东医学院化学教研室广东湛江524023 广东医学院生物化学与分子生物学教研室广东湛江524023

目的:探讨根皮素对肝癌BEL-7402细胞株运动、侵袭、粘附、克隆形成率的影响。方法:MTT法和Costar Transwell检测根皮素抑制BEL-7402细胞的增殖、运动、侵袭、粘附、克隆形成率。结果:根皮素能抑制BEL-7402细胞的增殖、侵袭、运动、粘附... 详细信息

目的:探讨根皮素对肝癌BEL-7402细胞株运动、侵袭、粘附、克隆形成率的影响。方法:MTT法和Costar Transwell检测根皮素抑制BEL-7402细胞的增殖、运动、侵袭、粘附、克隆形成率。结果:根皮素能抑制BEL-7402细胞的增殖、侵袭、运动、粘附及克隆形成能力,并呈现出剂量依赖性。结论:根皮素能抑制BEL-7402细胞的恶性表型。

关键词：根皮素转移肝癌

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