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超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱法与代谢组学技术分析牛乳与羊乳差异性

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食品安全质量检测学报 2020年第7期11卷 2075-2083页

作者：房艳于思雨高俊海宋敬宁谱尼测试集团股份有限公司北京100095 谱尼测试集团北京科学技术研究院有限公司北京100095

目的采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱仪(ultra-performance liquid chromatography-quadrupole time-of-flight mass spectrometry,UPLC-Q-TOF)高分辨质谱和代谢组学技术分析牛乳与羊乳差异。方法以小分子化学物质(分子量MW法-判别式分析等多元统计分析手段,借助Progenesis QI软件和数据库分析差异。结果初步鉴定出128种物质,其中在牛乳中含量高的物质有38种,在羊乳中含量高的物质90种。牛乳和羊乳在小分子代谢物上有明显差异(P法简单、便捷、且灵敏度高,为牛羊乳的真假鉴别以及牛羊乳差异性的进一步分析提供了理论支持。

关键词：牛乳羊乳超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱法小分子代谢产物生物标志物

超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱法同时快速检测水产品中37种兽药残留

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食品安全质量检测学报 2017年第2期8卷 614-619页

作者：朱万燕徐文远张伟临沂出入境检验检疫技术中心临沂276034 东营出入境检验检疫技术中心东营257000

目的建立超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱法快速检测水产品中磺胺类、喹诺酮类、四环素类、硝基咪唑类、大环内酯类、β-内酰胺类、三苯甲烷类7类37种兽药残留的方法。方法样品采用Qu ECh ERS方法(quick,easy,cheap,effective,rugge... 详细信息

目的建立超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱法快速检测水产品中磺胺类、喹诺酮类、四环素类、硝基咪唑类、大环内酯类、β-内酰胺类、三苯甲烷类7类37种兽药残留的方法。方法样品采用Qu ECh ERS方法(quick,easy,cheap,effective,rugged and safe method)进行前处理(用乙腈提取,提取液经Al_2O_3吸附剂净化);采用ZORBAX SB-C_(18)色谱柱(100 mm×2.1 mm,3.5μm)分离,以乙腈-5 mmol的乙酸铵为流动相,梯度洗脱,Q-TOF-MS电喷雾正离子模式分析检测;在全扫描采集模式下,以准分子离子峰的峰面积定量,以化合物的色谱保留时间和精确质量数定性。结果各化合物在0.5~2000μg/kg范围内均呈现良好的线性关系,相关系数均大于0.99。样品平均添加回收率为67%~109.5%,相对标准偏差(RSD)均小于15.3%(n=6)。结论方法简单、快速、可靠,可用于水产品中兽药多残留的快速筛查。

关键词：水产品兽药残留筛查同时检测超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱法

超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱法测定珠芽瓜叶乌头中毒患者血液、尿液中乌头生物碱及其代谢产物

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食品安全质量检测学报 2020年第12期11卷 4000-4010页

作者：张志清伍福仙林佶云南省疾病预防控制中心昆明650032

目的建立超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱法(ultra performance liquid chromatography coupled with quadrupole-time of flight mass spectrometry,UPLC/Q-TOF-MS)定性定量检测珠芽瓜叶乌头中毒患者血液、尿液中乌头生物碱及其相关代谢产物。方法血样经离心后,取上层血清稀释后过0.22mm微孔滤膜;尿样经稀释后过0.22mm微孔滤膜。食物经前处理后,过Oasis MCX 60 mg/3 mL固相萃取小柱,洗脱、吹干、定容,过0.22mm微孔滤膜。草乌块根经匀浆、超声、离心后,取上清液过0.22mm微孔滤膜。所有样品溶液经Aglient SB-C18色谱柱分离后用UPLC-Q-TOF进行测定。结果14种乌头类生物碱及其代谢产物在1.0~100 ng/mL的浓度范围内线性关系良好,相关系数均大于0.99,检出限在0.1~5.0ng/mL之间,样品加标回收率为78.9%~116.9%,相对标准偏差为0.5%~4.1%(n=6)。2位患者血液中检出苯甲酰乌头原碱、滇乌头碱和草乌甲素,其中苯甲酰乌头原碱未达到定量限,滇乌头碱含量分别为0.18和0.27mg/L,草乌甲素含量分别为0.25和0.62 mg/L;2位患者尿液中检出苯甲酰乌头原碱、滇乌头碱、草乌甲素,苯甲酰乌头原碱含量分别为0.063和0.055 mg/L,滇乌头碱含量分别为1.66和3.79 mg/L草乌甲素含量分别为2.31和4.89 mg/L,其中一份尿样检出印乌头碱,含量为0.159 mg/L。结论此方法操作简便、准确度好、能够快速检测检材中乌头类生物碱。珠芽瓜叶乌头含有较高的滇乌头碱和草乌甲素,尿液中乌头生物碱及代谢产物高于血液中产物含量,更适合作为检验材料。

关键词：珠芽瓜叶乌头草乌甲素滇乌头碱超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱法血液尿液

UPLC-Q-TOF快速定性定量检测云南省茯苓中13种三萜类化合物

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现代预防医学 2024年第2期51卷 322-327页

作者：孙明月寇金蟾周荣贵林佶大理大学公共卫生学院昆明医科大学公共卫生学院云南省疾病预防控制中心理化实验室

目的利用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF)快速定性定量检测茯苓中13种茯苓三萜类化合物。方法利用超声萃取法(甲醇)对茯苓中三萜类化合物进行提取。采用ACQUITY UPLC?HSS C18柱(2.1 mm×50 mm, 1.7μm)分离，10 mmol/... 详细信息

目的利用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF)快速定性定量检测茯苓中13种茯苓三萜类化合物。方法利用超声萃取法(甲醇)对茯苓中三萜类化合物进行提取。采用ACQUITY UPLC?HSS C18柱(2.1 mm×50 mm, 1.7μm)分离，10 mmol/L乙酸铵-0.1%甲酸水溶液(A)和乙腈(B)为流动相梯度洗脱，流速为0.5 ml/min,柱温30℃,采用负离子多反应监测模式进行检测，利用精确分子量和二级质谱定性定量。结果 13种茯苓三萜类化合物在线性范围内线性关系良好(r2≥0.99),样品加标回收率(n=6)为80.35%～116.92%,相对标准偏差为1.88%～9.7%,在茯苓药材中13种茯苓三萜类化合物均被检测出，检出量在79 433～85 900 mg/kg之间。结论此方法操作简便、准确、高效、灵敏，适用于茯苓药材中主要三萜类化合物的定性定量检测。

关键词：超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱法三萜类化合物茯苓

应用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱鉴定克伦特罗在猪尿中的主要代谢产物

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食品安全质量检测学报 2014年第10期5卷 3203-3209页

作者：王鹤佳李丹毕言锋孙雷徐士新中国兽医药品监察所国家兽药残留基准实验室北京100081

目的应用超高效液相色谱/四级杆-飞行时间质谱技术分析鉴定克伦特罗在猪尿中的代谢产物,并推测克伦特罗在猪体内的主要代谢途径。方法按10 mg/kg bw的剂量,给猪经口灌食克伦特罗,分别采集给药前及给药后的尿液样品。应用超高效液相色谱... 详细信息

目的应用超高效液相色谱/四级杆-飞行时间质谱技术分析鉴定克伦特罗在猪尿中的代谢产物,并推测克伦特罗在猪体内的主要代谢途径。方法按10 mg/kg bw的剂量,给猪经口灌食克伦特罗,分别采集给药前及给药后的尿液样品。应用超高效液相色谱/四级杆-飞行时间质谱技术对样品进行分析,采用MetaboLynx XS软件进行数据处理,共检测到6种克伦特罗的代谢产物,并根据碎片离子信息进行了结构鉴定。结果猪尿中克伦特罗的代谢产物包括4-N-羟基克伦特罗(4-N-OH-CLE)、4-硝基克伦特罗(4-NO2-CLE)、克伦特罗及4-N-OH-CLE的葡萄糖醛酸结合物(GLU-CLE和GLU-OH-CLE)等。结论根据所检测到的代谢产物,克伦特罗在猪体内的代谢途径包括4-N-氧化和葡萄糖醛酸结合等。

关键词：克伦特罗超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱法猪尿代谢产物

肥胖2型糖尿病前期肝脏脂肪异位沉积的脂质代谢研究

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中药药理与临床 2023年第7期39卷 74-81页

作者：高金青许清松方永青刘海云姜丽李佳李冰涛张启云曾治君徐国良江西中医药大学中医基础理论分化发展研究中心江西省中医病因生物学重点实验室江西省中药药理重点实验室南昌330004 江西中医药大学药学院南昌330004

目的:从脂质组层面揭示肝脏脂肪异位沉积对肥胖2型糖尿病前期胰岛素抵抗(IR)的影响。方法:将雄性SD大鼠按体质量随机分为正常对照组和模型对照组各6只,分别供应普通饲料和高脂饲料16 w,通过检测大鼠空腹血糖和空腹胰岛素含量、计算IR指... 详细信息

目的:从脂质组层面揭示肝脏脂肪异位沉积对肥胖2型糖尿病前期胰岛素抵抗(IR)的影响。方法:将雄性SD大鼠按体质量随机分为正常对照组和模型对照组各6只,分别供应普通饲料和高脂饲料16 w,通过检测大鼠空腹血糖和空腹胰岛素含量、计算IR指数,建立肥胖2型糖尿病前期模型;油红O染色法观察肝组织病理结构性变化;ELISA法测定肝组织炎症因子及氧化指标;采用UPLC-Q-TOF/MS技术对样本进行检测,对正常对照组、模型对照组的结果进行主成分分析法(PCA)和正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)分析,筛选VIP值>1及采用GraphPad Prism 8.0进行t检验(P四烯酸代谢途径;结合肥胖2型糖尿病前期空腹血糖,胰岛素浓度,IR指数与IL-1β、TNF-α、IL-10、SOD、MDA的相关性分析,发现肥胖2型糖尿病前期的IR指数与IL-1β、TNF-α、MDA含量呈正相关,与SOD、IL-10含量呈负相关。肥胖2型糖尿病前期肝脏脂肪异位沉积中脂质代谢物中有3种PC、3种PE、TG、GlcCer、DG、等与IL-1β、TNF-α、MDA呈正相关,与SOD、IL-10含量呈负相关;有6种PC、10种PE、PS等与IL-1β、TNF-α、MDA含量呈负相关,与SOD、IL-10含量呈正相关。结论:高脂饲料诱导的肥胖2型糖尿病前期IR的发生与肝脏甘油磷脂、鞘脂代谢和类固醇生物合成代谢等多条代谢通路密切相关。

关键词：糖尿病前期胰岛素抵抗肝脏脂肪异位沉积超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱法脂质组学

一测多评法同时测定没食子药材及制剂西帕依固龈液中5个没食子鞣质

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药物分析杂志 2023年第5期43卷 780-792页

作者：霍仕霞陈两绵祖力皮卡尔·吾斯曼窦勤高慧敏王智民李治建邢建国新疆医科大学药学院乌鲁木齐830011 新疆维吾尔自治区维吾尔医医院乌鲁木齐830049 新疆维吾尔自治区维吾尔医药研究所乌鲁木齐830049 中国中医科学院、中药研究所中药质量控制技术国家工程实验室北京100700 新疆维吾尔自治区药物研究所乌鲁木齐830002

目的:建立同时测定没食子药材及制剂西帕依固龈液中没食子酸(GA)、1-没食子酸酰葡萄糖(1-GG)、没食子酸甲酯(MG)、1,2,3,6-四没食子酰葡萄糖(TeGG)和1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖(PGG)5个没食子鞣质的一测多评方法(QAMS)。方法:采用超高... 详细信息

目的:建立同时测定没食子药材及制剂西帕依固龈液中没食子酸(GA)、1-没食子酸酰葡萄糖(1-GG)、没食子酸甲酯(MG)、1,2,3,6-四没食子酰葡萄糖(TeGG)和1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖(PGG)5个没食子鞣质的一测多评方法(QAMS)。方法:采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF MS)法,对没食子药材的主要没食子鞣质进行定性鉴别,并确定待测成分;采用HPLC建立多成分同步测定方法,色谱柱为Phenomenex C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈(A)-0.2%磷酸溶液(B),梯度洗脱(0~20 min,3%A→8%A;20~30 min,8%A→10%A;30~70 min,10%A→15%A;70~100 min,15%A→18%A;100~120 min,18%A→30%A),流速1.0 mL·min^(-1),柱温35℃,检测波长275 nm。以GA为内参物,采用斜率法,分别建立1-GG、MG、TeGG、PGG的相对校正因子(RCFs),并考察其耐用性。采用QAMS法和外标法(ESM)分别计算和比较9批次没食子药材和3批次西帕依固龈液中上述没食子鞣质的含量,以验证QAMS法的准确性和可行性。结果:从没食子中定性鉴别出GA、1-GG、MG、TeGG和PGG 5个含量较高且具有良好生物活性的没食子鞣质,选择作为HPLC定量分析的指标性成分。GA、1-GG、MG、TeGG和PGG的线性范围分别为8.13~520、6.25~400、8.28~530、9.00~576、9.00~576μg·mL^(-1)。1-GG、MG、TeGG和PGG的RCFs分别为1.75、0.95、1.12、1.25,对不同HPLC仪、色谱柱、流速和柱温的耐用性良好(RSD≤5.00%)。采用QAMS法测得9批次没食子药材中GA、1-GG、MG、TeGG和PGG的含量范围分别为3.69%~5.07%、1.26%~1.98%、14.0%~17.4%、19.8%~25.3%、5.93%~9.24%,3批次西帕依固龈液中GA、1-GG和MG的含量范围分别为1.89~2.40、0.0750~0.105、0.874~1.12 mg·mL^(-1)。QAMS法和ESM法测定的含量结果的相对误差均小于3.5%,无显著性差异。结论:以GA为内参物,建立的上述5个没食子鞣质的QAMS法,简便、准确、可靠,节省大量对照品,可用于没食子药材及制剂西帕依固龈液的定量分析及质量控制。

关键词：没食子西帕依固龈液没食子鞣质超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱法一测多评定量分析质量控制

UPLC-Q-TOF/MS法分析鉴定对叶百部碱在大鼠体内的代谢产物

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中国药房 2018年第9期29卷 1218-1221页

作者：董巍巫秋萍梁鑫崔涛潘虹齐齐哈尔医学院药学院黑龙江齐齐哈尔161006

目的:分析鉴定大鼠灌胃对叶百部碱后血浆、尿液和粪便中的代谢产物,阐明对叶百部碱的代谢途径。方法:将大鼠随机分为空白组(0.3%羧甲基纤维素)与给药组(灌胃给予对叶百部碱,50 mg/kg),每组6只。分别采集大鼠灌胃给药后0.25、0.5、1、2、... 详细信息

目的:分析鉴定大鼠灌胃对叶百部碱后血浆、尿液和粪便中的代谢产物,阐明对叶百部碱的代谢途径。方法:将大鼠随机分为空白组(0.3%羧甲基纤维素)与给药组(灌胃给予对叶百部碱,50 mg/kg),每组6只。分别采集大鼠灌胃给药后0.25、0.5、1、2、4、6、12 h的血浆以及给药后0~12 h、12~24 h的尿液和粪便并制备样品,采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱法和Triple TOF^(TM)高分辨率质谱自带的软件联合分析、鉴定各样品中代谢产物的化学结构。结果:从大鼠血浆中检测到4个化合物,包括1个原型化合物和3个代谢产物,在尿液中检测到4个代谢产物,在粪便中被检测到2个代谢产物,且代谢产物主要为Ⅰ相的水合代谢产物和羟基化代谢产物,未检测到Ⅱ相代谢产物。结论:对叶百部碱灌胃后在大鼠体内主要经水合、羟基化等途径代谢。

关键词：对叶百部碱超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱法代谢产物鉴定

基于高通量测序与UPLC-Q-TOF/MS技术的不同产地银杏叶内生菌与其主要化学成分相关性探究

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中国现代中药 2021年第12期23卷 2096-2106页

作者：陈冉张艳欣王丹丹上海上药杏灵科技药业股份有限公司上海201203

目的:利用高通量测序,通过比较不同产地银杏叶内生菌的差异,并结合化学成分相关性分析,从微生态的角度区分不同产地银杏叶的品质差异。方法:以都江堰、平邑、崇明3个产地4—7月的银杏叶片为研究对象,采用16S rDNA、内转录间隔区(ITS)扩... 详细信息

目的:利用高通量测序,通过比较不同产地银杏叶内生菌的差异,并结合化学成分相关性分析,从微生态的角度区分不同产地银杏叶的品质差异。方法:以都江堰、平邑、崇明3个产地4—7月的银杏叶片为研究对象,采用16S rDNA、内转录间隔区(ITS)扩增子高通量测序方法分析叶片内生细菌、真菌的多样性及群落组成,再基于超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱法(UPLC-Q-TOF/MS)对银杏叶主要化学成分含量进行检测,并对其内生菌多样性及主要化学成分含量进行相关性生物信息学分析。结果:3个产地银杏叶内生真菌的多样性和丰富度均为都江堰>崇明>平邑;内生细菌的多样性随着月份整体呈降低趋势,丰富度在6月份最高;不同产地叶片间优势内生真菌与优势内生细菌均一致。相关性分析发现,银杏叶片内生细菌与黄酮醇苷大多呈显著正相关,如假单胞菌(Pseudomonas)、罗姆布茨菌(Romboutsia)、葡萄球菌(Staphylococcus)等;银杏叶片内生真菌中,黄酮醇苷与链格孢属(Alternaria)、枝孢属(Cladosporium)、球腔菌属(Mycosphaerella)呈显著正相关。结论:通过高通量测序免培养的方法获得了较全面的内生菌信息,优于传统培养法。药用银杏在不同地域的内生优势菌较为一致,这可能与其稳定生成的次生代谢化合物有关。可通过属水平的群落结构区分3个产地银杏叶;化学成分与内生菌的相关性可以预测出与药效成分有关的菌群。研究结果为进一步筛选银杏叶内生菌提供了实验基础,为探讨药用银杏道地性的形成机制提供了新思路。

关键词：银杏内生菌高通量测序微生物多样性超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱法相关性分析