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菲牛蛭在幼年、青年和成年不同生长阶段差异表达基因比较研究

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基因组学与应用生物学 2022年第7期41卷 1427-1439页

作者：单会荃郑雅琳闫秀营周维官马晓聪郑景辉刘庆友广西大学亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室南宁530004 广西中医药大学附属瑞康医院心内科南宁530011 泰国天然水蛭素股份有限公司曼谷10700

医用水蛭被广泛用于生化和临床医学研究,但关于菲牛蛭(Poecilobdella manillensis)不同生长阶段的差异表达基因研究却鲜有报道。本研究通过转录组分析比较了水蛭在幼年期(larval,L)、青年期(young,Y)和成年期(adult,A)不同生长阶段的基... 详细信息

医用水蛭被广泛用于生化和临床医学研究,但关于菲牛蛭(Poecilobdella manillensis)不同生长阶段的差异表达基因研究却鲜有报道。本研究通过转录组分析比较了水蛭在幼年期(larval,L)、青年期(young,Y)和成年期(adult,A)不同生长阶段的基因表达模式。使用三个时期的样本构建了24个cDNA文库,测序得到了54639118条序列,组装了18106个mRNA转录本并注释出958个新的mRNA转录本。从这些转录本中共鉴定3356个差异表达基因,包括L vs Y的1700个、Y vs A的320个和L vs A的2799个差异表达基因,其中有47个共有的差异表达基因。对差异表达基因进行时间序列分析得到9个表达簇,其中5个有整体上调趋势,4个有整体下调趋势。进一步的GO和KEGG富集分析结果显示,幼年期和成年期差异上调基因富集在纤毛、肌纤维、收缩纤维等GO通路中,KEGG通路中富集于细胞骨架蛋白、扩张型心肌病、心肌细胞的肾上腺素信号传导等通路。研究还发现菲牛蛭的细胞脂质代谢,以及对营养物质和刺激的敏感性随着生长发育逐渐降低,这些变化解释了菲牛蛭处于幼年时期需要大量的能量用于肌肉组织和器官发育,而当菲牛蛭成熟后降低了能量代谢和对外界刺激的敏感性,为菲牛蛭对环境的适应提供了帮助,提高了生存概率。菲牛蛭素(HIRM2)在成年阶段的表达量明显上调,这为成年菲牛蛭(而非青年期菲牛蛭)广泛用于临床治疗和中医药提供了重要线索。

关键词：菲牛蛭不同生长阶段差异表达基因

菲牛蛭中多肽的Tricine-SDS-PAGE分离方法研究

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饲料研究 2022年第13期45卷 68-71页

作者：杨秀娟黄伟邓斌戚敏贾荟瑾曹志勇云南农业大学动物科学技术学院云南昆明650201 云南农业大学云南省动物营养与饲料重点实验室云南昆明650201 昆明学院发展规划处云南昆明650214 云南省农村科技服务中心云南昆明650021 云南省畜牧总站云南昆明650224 云南农业大学大数据学院云南昆明650201

试验旨在探讨适合菲牛蛭中小分子多肽的Tricine-SDS-PAGE分离方法。采用电泳纯重组水蛭素验证Tricine-SDS-PAGE的分离效果,对菲牛蛭的水提醇沉粗提物进行分离,建立小分子多肽对数分子量和迁移率的回归关系方程,计算多肽分子质量。结果显... 详细信息

试验旨在探讨适合菲牛蛭中小分子多肽的Tricine-SDS-PAGE分离方法。采用电泳纯重组水蛭素验证Tricine-SDS-PAGE的分离效果,对菲牛蛭的水提醇沉粗提物进行分离,建立小分子多肽对数分子量和迁移率的回归关系方程,计算多肽分子质量。结果显示:菲牛蛭中小分子多肽对数分子量和迁移率成正比直线关系,从菲牛蛭中分离得到7个分子量在10~31 kDa的多肽。研究表明,Tricine-SDS-PAGE对菲牛蛭中的小分子多肽具有较好的分离效果。

关键词：菲牛蛭多肽 Tricine-SDS-PAGE

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壮药菲牛蛭提取物的美白作用及其机制初探

日用化学工业 2022年第1期52卷 35-43页

作者：何瑞源王硕韦桂丽龚小妹吴佩莹缪剑华广西中医药大学药学院广西南宁530200 广西药用植物园广西药用资源保护与遗传改良重点实验室广西南宁530023 广西医科大学广西南宁530021 广西药用植物园广西壮族自治区中药资源智慧创制工程研究中心广西南宁530023

研究壮药菲牛蛭提取物的美白作用及其机制。采用MTT法检测菲牛蛭提取物对黑色素瘤细胞(B16)的增殖抑制作用;采用分光光度法检测菲牛蛭提取物对B16细胞酪氨酸酶(TYR)活力和黑色素合成的影响以及对DPPH、·OH和·O2-三种自由基的清除能力... 详细信息

研究壮药菲牛蛭提取物的美白作用及其机制。采用MTT法检测菲牛蛭提取物对黑色素瘤细胞(B16)的增殖抑制作用;采用分光光度法检测菲牛蛭提取物对B16细胞酪氨酸酶(TYR)活力和黑色素合成的影响以及对DPPH、·OH和·O2-三种自由基的清除能力和总抗氧化能力;采用紫外线照射法建立裸鼠皮肤色素沉着模型,Masson-Fontana银染法显示皮肤黑色素分布,并测定血清中TYR、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、α-促黑色素生长激素(α-MSH)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、神经生长因子(NGF)、白介素(IL-1α)、肿瘤坏死因子(TNF-α)和γ-干扰素(IFN-γ)的水平。实验结果表明,菲牛蛭提取物能明显抑制B16细胞增殖和TYR活力,降低胞内黑色素含量;具有较强的清除自由基能力;能显著减少裸鼠皮肤中黑色素细胞的数量,提高裸鼠血清中SOD含量,降低MDA、α-MSH、bFGF、NGF、IL-1α、TNF-α和IFN-γ含量及TYR活力。壮药菲牛蛭提取物具有较好的美白作用,其作用机制可能与抑制TYR活性及抗氧化作用有关。

关键词：菲牛蛭美白作用黑色素瘤细胞酪氨酸酶抗氧化

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菲牛蛭冻干粉治疗急性白血病合并肺栓塞2例

中国中西医结合杂志 2021年第9期41卷 1135-1138页

作者：裴强王娅婕李慧园陈振杰昆明理工大学附属医院云南省第一人民医院血液科昆明650032 北京中医药大学东直门医院风湿肾病科北京100700

急性白血病是一种起源于造血干细胞的恶性克隆性疾病,骨髓中白血病细胞的大量增殖抑制机体正常造血,患者临床表现多以贫血、出血为主。但疾病同时会对正常凝血纤溶系统产生影响,部分患者在诊断前或化疗过程中会发生血栓事件,严重影响了... 详细信息

急性白血病是一种起源于造血干细胞的恶性克隆性疾病,骨髓中白血病细胞的大量增殖抑制机体正常造血,患者临床表现多以贫血、出血为主。但疾病同时会对正常凝血纤溶系统产生影响,部分患者在诊断前或化疗过程中会发生血栓事件,严重影响了其治疗及预后[1]。

关键词：急性白血病凝血纤溶系统白血病细胞造血干细胞治疗及预后恶性克隆性疾病血栓事件菲牛蛭

菲牛蛭与蛋白饲料原料氨基酸平衡的灰色关联度分析

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云南农业大学学报（自然科学版） 2019年第1期34卷 43-49页

作者：杨秀娟陶琳丽邓斌曹志勇黄伟戚敏张曦云南农业大学动物科学技术学院云南昆明650201 云南农业大学云南省动物营养与饲料重点实验室云南昆明650201 云南省农村科技服务中心云南昆明650021 云南农业大学基础与信息工程学院云南昆明650201

【目的】研究菲牛蛭蛭体氨基酸与蛋白饲料原料氨基酸平衡,为菲牛蛭氨基酸平衡饲料开发提供参考。【方法】采用高效液相柱前衍生方法测定菲牛蛭蛭体和11种蛋白饲料的氨基酸含量,通过灰色关联分析方法中的灰色关联度评价11种蛋白饲料与菲... 详细信息

【目的】研究菲牛蛭蛭体氨基酸与蛋白饲料原料氨基酸平衡,为菲牛蛭氨基酸平衡饲料开发提供参考。【方法】采用高效液相柱前衍生方法测定菲牛蛭蛭体和11种蛋白饲料的氨基酸含量,通过灰色关联分析方法中的灰色关联度评价11种蛋白饲料与菲牛蛭蛭体氨基酸平衡程度。【结果】11种蛋白饲料与菲牛蛭蛭体氨基酸平衡的灰色关联度从高到低为牛肉粉>大豆浓缩蛋白>血浆蛋白粉>(猪肉粉=鸡肉粉)>(鱼粉>大豆分离蛋白)>血粉>血球蛋白粉>豆粕>全脂奶粉。【结论】牛肉粉、大豆浓缩蛋白、血浆蛋白粉、猪肉粉、鸡肉粉、鱼粉和大豆分离蛋白7种蛋白饲料原料与菲牛蛭蛭体氨基酸灰色关联度均在0.8以上,可优选作为开发菲牛蛭人工饲料的蛋白饲料原料。

关键词：菲牛蛭氨基酸灰色关联度蛋白饲料原料

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菲牛蛭体成分和养殖技术的研究进展

饲料工业 2021年第20期42卷 59-64页

作者：陈琛戚敏杨秀娟云南农业大学动物科学技术学院云南省动物营养与饲料重点实验室云南昆明650201 云南省畜牧总站云南昆明650225

菲牛蛭含有水蛭素、菲牛蛭素等多种活性成分,具有抗凝血、抗肿瘤、抗炎、降血脂等作用,在医学上有着广阔的应用前景。菲牛蛭作为一种药用动物,其主要抗凝血功能在单位质量上均优于其他几种水蛭,在经济效益上优于其他水蛭,其有效成分研... 详细信息

菲牛蛭含有水蛭素、菲牛蛭素等多种活性成分,具有抗凝血、抗肿瘤、抗炎、降血脂等作用,在医学上有着广阔的应用前景。菲牛蛭作为一种药用动物,其主要抗凝血功能在单位质量上均优于其他几种水蛭,在经济效益上优于其他水蛭,其有效成分研究和人工养殖技术也在不断地发展与完善。文章就菲牛蛭的体成分以及养殖技术研究进展进行综述,为菲牛蛭的养殖和开发提供参考。

关键词：菲牛蛭营养成分活性成分繁育特性养殖技术饲料

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菲牛蛭肠道细菌的群落结构及功能

陕西师范大学学报（自然科学版） 2018年第4期46卷 71-77页

作者：刘宇张秀秀管德龙王晓雯许升全陕西师范大学动物研究所陕西西安710119 上海凌恩生物科技有限公司上海201800

为了揭示肠道细菌对菲牛蛭(Hirudinaria manillensis)消化、代谢等生理活动的影响,采用二代测序技术测定了三个菲牛蛭个体肠道细菌的群落结构并推断了其功能。结果共鉴定出细菌7门,16纲,24目,29科,36属,40个操作分类单元(operation taxo... 详细信息

为了揭示肠道细菌对菲牛蛭(Hirudinaria manillensis)消化、代谢等生理活动的影响,采用二代测序技术测定了三个菲牛蛭个体肠道细菌的群落结构并推断了其功能。结果共鉴定出细菌7门,16纲,24目,29科,36属,40个操作分类单元(operation taxonomic units,OTUs);其中优势属分别为色杆菌属(Chromobacterium)、甲基菌属(Methylovorus)和Jonquetella。采用PICRUSt软件对菲牛蛭肠道细菌进行功能预测,结果显示其主要功能依次是膜转运、碳水化合物代谢、氨基酸代谢、细胞迁移、能量代谢、基因复制和修复、辅酶因子和维生素代谢、外源物质降解、细胞进程和信号转导等。

关键词：菲牛蛭肠道细菌功能预测二代测序技术

基于UPLC-Q-Exactive-MS的菲牛蛭酶解物肽段鉴定与分子特性表征

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药物评价研究 2022年第1期45卷 48-59页

作者：李尹郭秀欢雷艳侯觉文谢海林袁瑞娟北京中医药大学中药学院北京102488 广西复鑫益生物科技有限公司广西贵港537300

目的基于超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-Q-Exactive-MS)技术对菲牛蛭酶解物中肽段进行鉴定与表征。方法采用胰蛋白酶对菲牛蛭进行酶解,利用UPLC-Q-Exactive-MS技术结合Maxquant软件对菲牛蛭酶解物进行分析并对其... 详细信息

目的基于超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-Q-Exactive-MS)技术对菲牛蛭酶解物中肽段进行鉴定与表征。方法采用胰蛋白酶对菲牛蛭进行酶解,利用UPLC-Q-Exactive-MS技术结合Maxquant软件对菲牛蛭酶解物进行分析并对其肽段进行序列鉴定,同时采用生物信息学平台对这些肽段进行生物活性与不良反应预测以及相对分子质量、等电点(pI)、净电荷、亲水性氨基酸比例、不稳定指数等基本分子特性的预测。结果利用UPLC-Q-Exactive-MS技术联合Maxquant软件在菲牛蛭酶解物中共鉴定出32条肽段,其中肽段AGFAGDDAPR的各项肽段分子特性符合目前已知抗血栓肽的共性特征,鉴定分数为103.83,可信度高;活性概率为0.56,相对分子质量976.01,肽链长度为10;平均亲水性为0.5,亲水性氨基酸残基比例为30%,水溶性良好;pI值为4.21,净电荷为−1;不稳定性指数为20.72,在水中稳定性强;具有抗血栓活性的可能性较大。同时6条肽段SSGETSSIIRR、AGFAGDDAPR、SSGETSSIIR、DSYVGDEAQSKR、GARRER、SIEDQVKR被预测具有抗血管生成活性且无溶血现象,但仍需进一步的合成与活性验证。结论以菲牛蛭为例,提供了一种快速从酶解物中鉴定动物药肽段序列的方法,以期为动物药的肽类成分的研究提供思路。

关键词：菲牛蛭酶解物肽段鉴定超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-Q-Exactive-MS) Maxquant软件抗血栓血管生成

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菲牛蛭营养成分分析与评价

食品研究与开发 2018年第21期39卷 179-185页

作者：戚敏杨秀娟陶琳丽陈琛曹胜雄刘廷丹张曦云南农业大学动物科学技术学院云南省动物营养与饲料重点实验室云南昆明650201

通过对菲牛蛭营养成分进行测定,评价其营养价值。结果表明:菲牛蛭粗蛋白含量为16.7%、灰分为1.33%、粗脂肪为1.35%、水分含量为80.55%;菲牛蛭冻干粉17种氨基酸总量为66.09%,必需氨基酸含量为24.37%,非必需氨基酸含量为41.72%,药用氨基... 详细信息

通过对菲牛蛭营养成分进行测定,评价其营养价值。结果表明:菲牛蛭粗蛋白含量为16.7%、灰分为1.33%、粗脂肪为1.35%、水分含量为80.55%;菲牛蛭冻干粉17种氨基酸总量为66.09%,必需氨基酸含量为24.37%,非必需氨基酸含量为41.72%,药用氨基酸含量为43.44%;必需氨基酸/总氨基酸的值为36.87%,必需氨基酸/非必需氨基酸的值为58.41%,药用氨基酸/总氨基酸的值为65.73%;氨基酸组成比例平衡、评分好、药用氨基酸丰富;菲牛蛭冻干粉中18种脂肪酸的总量为27.86 mg/g,必需脂肪酸为5.49 mg/g,饱和脂肪酸的为12.92 mg/g,不饱和脂肪酸为15.13 mg/g,不饱和脂肪酸占比高于50%,对心脑血管健康有积极意义。菲牛蛭冻干粉5种矿物元素总量为16.804 mg/g,镁、钙、铁、锌、铜含量分别为12.044、2.357、1.015、1.362、0.026 mg/g,含量丰富。菲牛蛭具有良好的营养保健价值。

关键词：菲牛蛭常规营养成分氨基酸脂肪酸矿物质