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脱氢表雄酮通过丝裂活化蛋白激酶途径促进成骨细胞增殖的研究

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中华老年医学杂志 2004年第12期23卷 867-870页

作者：王玉东李大金袁敏敏王明雁朱影复旦大学附属妇产科研究所生殖免疫室

目的研究脱氢表雄酮(DHEA)促进成骨细胞增殖的作用和机制。方法取新生2～4d的BALB/c小鼠颅骨,用酶消化法进行成骨细胞原代培养,以细胞形态学和碱性磷酸酶(ALP)染色鉴定。取传1代成骨细胞给予不同浓度DHEA,在不同培养时间后,应用光镜、... 详细信息

目的研究脱氢表雄酮(DHEA)促进成骨细胞增殖的作用和机制。方法取新生2～4d的BALB/c小鼠颅骨,用酶消化法进行成骨细胞原代培养,以细胞形态学和碱性磷酸酶(ALP)染色鉴定。取传1代成骨细胞给予不同浓度DHEA,在不同培养时间后,应用光镜、电镜、四唑盐(MTT)法及流式细胞术(FCM)检测细胞的生长和增殖;同时用免疫印迹法检测磷酸化细胞外信号调控激酶(p44/42)的表达。结果10-8～10-6mol/L的DHEA可明显促进小鼠成骨细胞的生长和增殖,经10-7mol/LDHEA处理3d后的细胞,增殖指数明显增加(P表达,以10-8mol/L浓度的作用最佳(P<001),该作用可被U0126阻断。结论DHEA能够促进小鼠成骨细胞生长和增殖,其作用与激活丝裂活化蛋白激酶信号途径有关。

关键词： DHEA 成骨细胞生长增殖脱氢表雄酮蛋白激酶小鼠表达 p44/42 信号途径细胞外信号

气相色谱与串联质谱联用检测血清中脱氢表雄酮

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分析化学 2008年第2期36卷 172-176页

作者：陈君梁琼麟罗国安王义明段雪艳章弘扬清华大学分析中心清华大学分析中心北京100084

在晚期前列腺癌雄激素全阻断治疗最终导致前列腺癌雄激素非依赖性的转变过程中,肾上腺分泌脱氢表雄酮（DHEA）被认为是重要的诱因。本研究主要利用睾丸摘除（去势）大鼠模型,对血清中DHEA浓度进行测定。采用了气相色谱与串联质谱联用（G... 详细信息

在晚期前列腺癌雄激素全阻断治疗最终导致前列腺癌雄激素非依赖性的转变过程中,肾上腺分泌脱氢表雄酮（DHEA）被认为是重要的诱因。本研究主要利用睾丸摘除（去势）大鼠模型,对血清中DHEA浓度进行测定。采用了气相色谱与串联质谱联用（GC-MS/MS）技术,建立了高灵敏度的测定大鼠血清中脱氢表雄酮（DHEA）的方法。样品经过甲醇沉蛋白,而后固相萃取提取血清中微量的DHEA,通过七氟丁酸酐（HF-BA）衍生,采用GC-MS/MS测定。对固相萃取条件、衍生化条件以及质谱测定条件进行优化。DHEA在0.1;00μg/L范围内线性良好,相关系数r为0.9996;在2;0μg/L浓度范围内,加标回收率在99%;06%之间;相对标准偏差小于5%。本方法灵敏度高,选择性好,可满足临床对于血清样品中DHEA的测定要求。对去势大鼠血清中DHEA测定结果表明,去势后DHEA明显上升。

关键词：脱氢表雄酮气相色谱-串联质谱肾上腺源雄性激素临床分析

脱氢表雄酮对大鼠机体糖代谢的调节及其生化机制

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畜牧与兽医 2016年第6期48卷 41-49页

作者：康健陈迪王典马海田南京农业大学动物医学院农业部动物生理生化重点实验室江苏南京210095

为了探讨灌喂不同剂量的脱氢表雄酮(DHEA)对大鼠糖代谢的影响及生物化学其机制,采用60只雄性SD大鼠随机分为对照组、低剂量、中剂量和高剂量组,各处理组大鼠分别灌胃每天0、25、50、100mg/kg的DHEA,连续灌胃8周,测定大鼠血糖、肝糖原、... 详细信息

为了探讨灌喂不同剂量的脱氢表雄酮(DHEA)对大鼠糖代谢的影响及生物化学其机制,采用60只雄性SD大鼠随机分为对照组、低剂量、中剂量和高剂量组,各处理组大鼠分别灌胃每天0、25、50、100mg/kg的DHEA,连续灌胃8周,测定大鼠血糖、肝糖原、肌糖原、相关激素水平、糖代谢关键酶的活性及相关基因表达量。结果表明,中剂量DHEA灌胃组大鼠的体增重相比对照组显著降低,而料重比显著升高。与对照组相比,中、高剂量的DHEA可显著增加肝糖原和肌糖原的含量,中剂量的DHEA则可显著降低血糖含量。糖代谢相关酶的活性结果表明:与对照组相比,高剂量的DHEA处理可显著提高6-磷酸果糖激酶2(PFK-2)和苹果酸脱氢酶(MDH)的活性;中剂量的DHEA处理可显著提高丙酮酸激酶(PK)和琥珀酸脱氢酶(SDH)的活性;低剂量的DHEA处理可显著提高MDH、PK和丙酮酸脱氢酶系E1的活性。糖代谢相关基因表达的结果分析表明:与对照组相比,高剂量的DHEA可显著降低磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)的mRNA表达水平,低剂量的DHEA可显著提高6-磷酸果糖激酶1(PFK1)的mRNA的表达水平。与对照组相比,低、高剂量的DHEA处理可显著提高胰岛素受体(INSR)的mRNA表达水平;低、中剂量的DHEA可显著提高胰岛素受体底物1(IRS-1)的mRNA表达水平,而中、高剂量的DHEA处理可显著提高胰岛素受体底物2(IRS-2)的mRNA表达水平。高剂量的DHEA处理可显著提高葡萄糖转运蛋白2(GLUT-2)的mRNA表达水平,而中剂量的DHEA处理可显著提高葡萄糖转运蛋白4(GLUT-4)的mRNA表达水平。说明DHEA处理主要通过促进肝脏对葡萄糖的转运、提高肝脏中糖代谢途径关键酶的活性,从而调节大鼠血糖的水平,且此种效应可能主要是能过调节胰岛素受体及胰岛素受体底物的表达而实现的。

关键词：脱氢表雄酮糖代谢生化机制大鼠

脱氢表雄酮对小鼠成骨细胞增殖周期与凋亡的影响

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中华内分泌代谢杂志 2006年第3期22卷 234-237页

作者：王凌李大金王文君朱影复旦大学上海医学院附属妇产科医院暨妇产科研究所生殖免疫室上海200011

目的探讨脱氢表雄酮(DHEA)对小鼠成骨细胞(OB)增殖周期与凋亡的调控作用。方法颅骨酶解法分离OB和体外培养OB,体外模拟雌激素撤退现象,分为对照组、10^(-10)mol/L E_2组、10^(-7)mol/L DHEA组共3组,流式细胞仪分析DNA含量,Annexin V-FIT... 详细信息

目的探讨脱氢表雄酮(DHEA)对小鼠成骨细胞(OB)增殖周期与凋亡的调控作用。方法颅骨酶解法分离OB和体外培养OB,体外模拟雌激素撤退现象,分为对照组、10^(-10)mol/L E_2组、10^(-7)mol/L DHEA组共3组,流式细胞仪分析DNA含量,Annexin V-FITC/PI双标记流式细胞仪分析细胞早期凋亡,透射电镜观察OB超微结构。结果DNA含量分析显示,DHEA组的S期和G_2/M期细胞百分率比对照组明显增加,细胞增殖指数显著增加(P＜0.01)；DHEA和E_2对OB还具有显著的抗凋亡作用(P＜0.01或P＜0.05)；透射电镜可见经10^(-7)mol/L DHEA诱导后的OB细胞器明显增多,内质网扩张,线粒体丰富等形态学改变。结论DHEA在体外可直接促进小鼠OB的增殖并抑制其凋亡。

关键词：脱氢表雄酮成骨细胞细胞周期细胞增殖细胞凋亡

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脱氢表雄酮对去势雌兔免疫功能的调节作用

中国老年学杂志 2007年第15期27卷 1457-1459页

作者：郝群梁元姣吴元赭李大金周跃华南京军区南京总医院妇产科江苏南京210002 复旦大学附属妇产科研究所生殖免疫室

目的观察脱氢表雄酮(DHEA)对去势雌兔免疫功能的影响。方法24只3月龄新西兰雌兔随机分为正常对照组、假手术组、去势对照组(卵巢切除)、DHEA治疗组(卵巢切除并以10mg·kg-1.d-1的剂量口服DHEA)。卵巢切除后2w,治疗组灌胃给药,其余各组... 详细信息

目的观察脱氢表雄酮(DHEA)对去势雌兔免疫功能的影响。方法24只3月龄新西兰雌兔随机分为正常对照组、假手术组、去势对照组(卵巢切除)、DHEA治疗组(卵巢切除并以10mg·kg-1.d-1的剂量口服DHEA)。卵巢切除后2w,治疗组灌胃给药,其余各组均灌服等量蒸馏水,连续3个月。采用MTT法测定外周血单个核细胞增殖反应;同时采用半定量逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)技术检测动物脾脏IL-2、IL-10 mRNA的表达量。结果雌兔去势后,动物外周血单个核细胞增殖活性较正常对照组明显降低;DHEA治疗后动物的外周血单个核细胞增殖活性明显增强,DHEA对动物脾脏的IL-2 mRNA表达水平有明显的升调节作用,而对动物脾脏的IL-10 mRNA表达水平有明显的降调节作用。结论DHEA对去势雌兔的免疫功能有促进作用,且使脾脏免疫活性细胞的细胞因子转录由Th2型(IL-10)向Th1型(IL-2)偏移。

关键词：脱氢表雄酮绝经期免疫 Th1型偏移

β雌激素受体介导脱氢表雄酮对OPG/RANKL的升调节

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中国药理学通报 2012年第4期28卷 482-485页

作者：王玉东陶敏芳王丽华黄勇万小平上海交通大学附属国际和平妇幼保健院妇科上海200030 上海交通大学附属第六人民医院妇产科上海200233

目的探讨β雌激素受体(ERβ)介导脱氢表雄酮(DHEA)对成骨细胞骨保护素/细胞核因子κB受体活化因子配体(OPG/RANKL)的调节作用。方法构建ERβ沉默表达(pLVTHM-GFP/ERβ-shRNA)和ERβ高表达(pWPT-ERβ)重组质粒,并转染人成骨细胞系hMG63,... 详细信息

目的探讨β雌激素受体(ERβ)介导脱氢表雄酮(DHEA)对成骨细胞骨保护素/细胞核因子κB受体活化因子配体(OPG/RANKL)的调节作用。方法构建ERβ沉默表达(pLVTHM-GFP/ERβ-shRNA)和ERβ高表达(pWPT-ERβ)重组质粒,并转染人成骨细胞系hMG63,使hMG63的ERβ沉默表达(hMG63-shERβ)和高表达(hMG63-ERβ)。有或无U0126(丝裂原活化蛋白激酶信号途径中特异抑制分子)作用后,给予生理浓度(10-7mol.L-1)的DHEA作用24、48和72 h,ELISA和Western blot法分别检测hMG63培养上清中OPG和细胞中RANKL蛋白表达;Western blot法检测丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号途径中pERK1/2、JNK和p38分子的表达。结果给予DHEA作用48和72 h后,hMG63分泌的OPG明显增高(P表达无明显变化;与hMG63细胞相比较,在DHEA作用下hMG63-shERβ和hMG63-ERβ组的ERα表达无明显改变;而hMG63-ERβ细胞中ERβ表达增高,伴随着pERK1/2和OPG的升高(P表达减少并伴随pERK1/2和OPG分泌的降低(P<0.05)。另外,DHEA对pERK1/2和OPG的升调节可部分被U0126阻断。结论 ERβ可能通过激活pERK1/2-MAPK途径介导了DHEA对成骨细胞OPG/RANKL的调节。

关键词：脱氢表雄酮成骨细胞骨保护素破骨细胞分化因子 ERβ 丝裂原活化蛋白激酶

脱氢表雄酮预治疗对高龄卵巢储备正常患者体外受精-胚胎移植结局的影响

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实用医学杂志 2015年第24期31卷 4116-4119页

作者：梁琦李静崔薇山东中医药大学第二附属医院生殖科济南市250001

目的：探讨脱氢表雄酮（DHEA）预治疗对高龄卵巢储备正常患者体外受精-胚胎移植（IVF-ET）周期结局的影响。方法：对156例36-42岁卵巢储备正常并行IVF的患者按照随机数字表随机分为两组。DHEA组81例,进入IVF周期前给予DHEA预治疗8周,对... 详细信息

目的：探讨脱氢表雄酮（DHEA）预治疗对高龄卵巢储备正常患者体外受精-胚胎移植（IVF-ET）周期结局的影响。方法：对156例36-42岁卵巢储备正常并行IVF的患者按照随机数字表随机分为两组。DHEA组81例,进入IVF周期前给予DHEA预治疗8周,对照组75例,不给予任何预处理。观察指标：获卵数、受精率、优质胚胎率、冷冻胚胎数、临床妊娠率、早期自然流产率、活产率、抗苗勒氏管激素（AMH）水平。结果：DHEA组患者优质胚胎率明显高于对照组（P〈0.05）;受精率、冷冻胚胎数、临床妊娠率、活产率均高于对照组,早期自然流产率低于对照组,但差异无统计学意义（P〉0.05）;DHEA组患者预治疗后AMH升高明显（P〈0.05）,对照组无明显变化;获卵数、周期取消率、h CG注射日子宫内膜厚度及E2水平、Gn使用量和使用天数差异均无统计学意义（P〉0.05）。结论：DHEA预治疗可以提高卵巢储备功能正常的高龄患者的优质胚胎率,其机制可能与AMH有关。

关键词：脱氢表雄酮 36-42岁卵巢储备正常体外受精-胚胎移植抗苗勒氏管激素

脱氢表雄酮调节HepG2/GFP-HBx细胞p16基因甲基化及其与细胞周期和凋亡的相关性

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中国实验动物学报 2009年第3期17卷 180-185页

作者：吕元邓春平黄冰郭中敏钟翎中山大学药学院广东广州510006 中山大学眼科中心广东广州510060

目的探讨HBx与p16基因甲基化的关系,研究脱氢表雄酮(DHEA)对p16基因甲基化以及细胞周期和细胞凋亡的调节作用。方法以HepG2、HepG2/GFP和HepG2/GFP-HBx三种细胞为材料,采用MTT法检测细胞生长;流式细胞术检测细胞周期和凋亡率;MSP-PCR检... 详细信息

目的探讨HBx与p16基因甲基化的关系,研究脱氢表雄酮(DHEA)对p16基因甲基化以及细胞周期和细胞凋亡的调节作用。方法以HepG2、HepG2/GFP和HepG2/GFP-HBx三种细胞为材料,采用MTT法检测细胞生长;流式细胞术检测细胞周期和凋亡率;MSP-PCR检测p16基因甲基化水平。比较分析HBx与p16基因启动子甲基化、DHEA与各检测指标的关系。结果HepG2/GFP-HBx细胞与HepG2细胞和HepG2/GFP细胞相比,细胞的增殖速度提高(P<0.05),G0/G1期细胞减少,S期细胞增多(P<0.05),凋亡率降低(P<0.05);HepG2/GFP-HBx细胞的p16基因启动子呈现高水平甲基化,HepG2和HepG2/GFP细胞呈现高水平非甲基化。100μmol/L的DHEA使三种细胞的增殖速度降低(P<0.05),G0/G1期细胞增加,S期细胞减少(P<0.05),凋亡率提高(P<0.05)。DHEA可下调HepG2/GFP-HBx细胞的p16基因启动子甲基化水平,但对HepG2和HepG2/GFP细胞的p16基因启动子甲基化水平不产生影响。结论HBx引起肝癌细胞p16基因甲基化,并缩短细胞周期抑制细胞凋亡;DHEA可明显下调HBx引起的p16基因甲基化水平,延长细胞周期促进细胞凋亡,在无HBx基因整合的情况下,DHEA对肝癌细胞生长、细胞周期和凋亡的影响不通过p16基因甲基化的途径实现。

关键词： p16基因甲基化脱氢表雄酮 HBx 细胞周期细胞凋亡

脱氢表雄酮治疗系统性红斑狼疮患者分子机制的研究进展

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山东医药 2008年第20期48卷 102-104页

作者：王子娥吴昊车至香卢志明山东大学附属省立医院山东济南250021

脱氢表雄酮(DHEA)在系统性红斑狼疮(SLE)中的临床应用已十分广泛,但其作用机制不明,多数学者认为其通过影响自身抗体的形成和细胞因子的变化发挥作用.现将DHEA对TH1/TH2细胞因子的免疫调节作用综述如下,旨在进一步揭示其分子作用机制.

关键词：脱氢表雄酮系统性红斑狼疮细胞因子