检索结果-南通市图书馆

维普期刊数据库

miR-130b在猪和大鼠肌内脂肪前体细胞增殖和成脂分化中的调节作用及机制研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

miR-130b在猪和大鼠肌内脂肪前体细胞增殖和成脂分化中的调节作用...

作者：陈永芳扬州大学

学位级别：硕士

肌内脂肪(Intramuscular fat,IMF)含量是决定畜禽肉品质的最重要因素之一。合理有效地增加IMF含量是当前畜禽遗传改良中亟待解决的关键科学问题,同时也是填补消费者日益增长的对优质特色畜禽肉需求缺口的有效途径之一,而其“瓶颈”在于... 详细信息

肌内脂肪(Intramuscular fat,IMF)含量是决定畜禽肉品质的最重要因素之一。合理有效地增加IMF含量是当前畜禽遗传改良中亟待解决的关键科学问题,同时也是填补消费者日益增长的对优质特色畜禽肉需求缺口的有效途径之一,而其“瓶颈”在于找到特异性调控IMF沉积的主效基因及作用机制。IMF沉积是一个十分复杂的生物学调控过程,包含前体脂肪细胞的增殖和成脂分化、脂肪的合成与分解、脂肪酸代谢以及脂肪的转运等。在细胞水平上,主要表现为前体脂肪细胞数目的增加(增殖)和体积的增大(分化成脂)。在分子水平上,主要取决于脂肪代谢相关基因、转录因子以及表观遗传因子等复杂而精确的正负调控。近年来研究表明,作为一类重要的表观遗传调控因子,microRNA(miRNA)在IMF沉积过程中发挥重要调控作用。本课题组前期研究表明,miR-130b能够显著抑制梅山猪皮下脂肪沉积,然而miR-130b在猪和大鼠肌内脂肪前体细胞(Intramuscular preadipocytes,IMA)增殖和成脂分化中的调节作用及机制还需进一步探讨。本研究共分为四个部分:***-130b对大鼠IMA成脂分化的影响及作用机制本试验以大鼠原代IMA为体外模型,探究miR-130b对分化晚期(7 d)IMA成脂分化的影响及机制。无菌分离大鼠IMA,增殖培养达85%融合时,随机分四组:(1)mNC 组(miR-130bmimic NC 转染组);(2)mimic 组(miR-130bmimic 转染组);(3)iNC 组(miR-130b inhibitor NC 转染组);(4)inhibitor 组(miR-130b inhibitor转染组)。在转染后使用“鸡尾酒法”诱导分化成脂7d。结果显示:使用差速贴壁法可以获得较为纯净的大鼠原代IMA。与mNC组相比,过表达miR-130b能够显著抑制大鼠IMA的成脂分化水平,降低成脂分化关键基因11β-羟基类固醇脱氢酶1(11β-hydroxysteroid dehydrogenase type 1,11β-HSD1)的表达,并且促进脂质水解关键酶脂蛋白脂肪酶(Lipoprotein lipase,LPL)的表达。此外,miR-130b过表达显著促进了细胞凋亡因子Caspase-3的蛋白表达。上述结果表明,miR-130b可通过显著抑制成脂分化,促进脂质水解以及诱导细胞凋亡,降低大鼠IMA内脂质沉积量。***-130b对大鼠IMA增殖的影响及作用机制本试验继续以大鼠原代IMA为体外模型,进一步探究miR-130b对大鼠分化早期阶段(24h和48h)IMA增殖、成脂分化的影响及作用机制。无菌分离大鼠原代IMA,增殖培养达85%融合时,随机分四组:(1)mNC组;(2)mimic组;(3)iNC组;(4)inhibitor组。在转染后使用“鸡尾酒法”诱导细胞成脂分化24 h和48 h。结果显示:与mNC组相比,miR-130b过表达显著降低了分化24 h时细胞内的脂质沉积量,并显著抑制了细胞的增殖能力。此外,miR-130b过表达显著抑制了分化48 h时大鼠IMA的增殖能力,导致细胞周期阻滞,同时诱导了大鼠IMA的凋亡,并显著减少了细胞内甘油三酯(Triglycerides,TG)的含量。进一步对细胞周期和凋亡标志基因的表达进行检测,结果显示miR-130b过表达显著抑制了分化48 h时IMA内细胞周期蛋白基因细胞周期素D1(Cyclind1)、凋亡抑制基因B淋巴细胞瘤基因2(Bcl-2)的表达水平。相反地,与iNC组相比,miR-130b inhibitor组细胞内Bcl-2的表达水平显著增加,细胞凋亡水平显著下降。结果表明,在成脂分化早期,miR-130b能够显著抑制大鼠IMA的增殖,并且诱导其发生凋亡,从而减少细胞内脂质沉积。***-130b对猪IMA增殖和成脂分化的影响及作用机制本部分研究以二花脸仔猪背最长肌源原代IMA为体外模型,进一步探讨miR-130b对猪IMA增殖和成脂分化的影响及作用机制。无菌分离猪背最长肌源原代IMA,增殖培养达85%融合时,随机分四组:(1)mNC组;(2)mimic组;(3)iNC组;(4)inhibitor组。在转染后使用“鸡尾酒法”诱导细胞分化成脂48h(分化早期)和7d(分化晚期)。结果显示:与mNC组相比,在成脂分化早期,miR-130b过表达通过显著上调细胞周期因子增殖细胞核抗原(Proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、Cyclinb1的表达,并降低细胞周期依赖性激酶抑制因子P27基因的表达,显著促进猪IMA的增殖。在成脂分化晚期,miR-130b过表达显著抑制了细胞内成脂关键基因PPAR-γ和SREBP1的mRNA和蛋白表达

关键词： miR-130b 肌内脂肪前体细胞分化成脂增殖和凋亡猪和大鼠

基于山羊肌内前体脂肪细胞RNA-seq数据的新基因发掘与分析

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

西南民族大学学报（自然科学版） 2024年第4期50卷 376-381页

作者：王友利王永李志雄李艳艳朱江江熊燕林亚秋青藏高原动物遗传资源保护与利用教育部重点实验室四川成都610041 青藏高原动物遗传资源保护与利用四川省重点实验室四川成都610041 西南民族大学生畜牧兽医学院四川成都610041

为挖掘山羊(Capra hircus)肌内前体脂肪细胞分化前后的新基因并对其进行GO功能和KEGG通路富集分析.利用转录组测序(Transcriptome sequencing,RNA-seq)技术对山羊肌内前体脂肪细胞分化前后的两组细胞cDNA样品(n=3)进行高通量测序,有效... 详细信息

为挖掘山羊(Capra hircus)肌内前体脂肪细胞分化前后的新基因并对其进行GO功能和KEGG通路富集分析.利用转录组测序(Transcriptome sequencing,RNA-seq)技术对山羊肌内前体脂肪细胞分化前后的两组细胞cDNA样品(n=3)进行高通量测序,有效数据与山羊参考基因组比对后利用StringTie软件组装新基因.基于|log2foldchange|>0和P-adj肌内脂肪细胞分化前后表达上调的新基因共28个,表达下调的新基因共57个.在GO功能富集方面,共21个新基因注释到277个GO功能亚类中,其中GO功能条目中参与生物过程、细胞组成和分子功能的基因分别占73.65%、3.97%和22.38%,且3个条目中显著富集的GO功能亚类分别与代谢功能、病毒组装和分子结合相关.此外,共21个新基因富集到16条KEGG通路中,其中氨基酸生物合成通路富集的新基因最多,为3个.研究结果挖掘了山羊肌内脂肪细胞分化前后的新基因201个,为揭示山羊肌内前体脂肪细胞分化相关的新基因并进一步完善山羊功能基因组提供基础数据.

关键词：山羊基因组肌内脂肪前体细胞转录组测序新基因

维普期刊数据库博看期刊

从江香猪肌内和皮下脂肪前体细胞分化过程中相关基因的表达

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

农业生物技术学报 2017年第12期25卷 1979-1988页

作者：孙成娟许厚强赵佳福陈伟周迪张青青贵州大学高原山地动物遗传育种与繁殖省部共建教育部重点实验室贵州大学动物科学学院贵州省动物遗传育种与繁殖重点实验室贵州大学生命科学学院

为建立从江香猪(Sus scrofa)脂肪前体细胞的体外培养模式,分析从江香猪肌内和皮下脂肪前体细胞分化过程中相关基因的表达差异。采集5日龄从江香猪背最长肌和皮下脂肪组织,利用胶原酶消化法,分别从此两种组织中分离获得脂肪前体细胞。经... 详细信息

为建立从江香猪(Sus scrofa)脂肪前体细胞的体外培养模式,分析从江香猪肌内和皮下脂肪前体细胞分化过程中相关基因的表达差异。采集5日龄从江香猪背最长肌和皮下脂肪组织,利用胶原酶消化法,分别从此两种组织中分离获得脂肪前体细胞。经诱导分化后,采用q RT-PCR技术检测细胞分化过程中脂肪合成与分解基因:转录因子过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator activated receptorγ,PPARγ)、脂蛋白脂酶(lipoprotein lipase,LPL)、脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FAS)、乙酰辅酶A羧化酶(acetyl-Co A carboxylase,ACC)、甘油三酯水解酶(adipose triacylglycerol lipase,ATGL)、激素敏感脂酶(hormone-sensitive lipase,HSL)的时序表达情况。成功构建从江香猪脂肪前体细胞的体外培养模式。通过q RT-PCR分析显示,在肌内脂肪前体细胞中,PPARγ、FAS、ACC m RNA表达水平在整个分化早期72 h时均呈现较高表达,显著高于0 h的表达水平(P0.05),但在144 h时出现显著的大幅度上调,极显著高于其他各阶段表达水平(P脂肪前体细胞中,PPARγ基因在诱导分化72 h的表达水平最高,极显著高于其他几个阶段的表达水平(P脂肪细胞分化相关基因在肌内脂肪前体细胞的分化后期,表现较活跃;而各脂肪细胞分化相关基因在皮下脂肪前体细胞的分化早期,表现较活跃。研究结果表明从江香猪皮下脂肪的形成可能远远早于肌内脂肪,对进一步研究从江香猪脂肪沉积机制具有重要意义。

关键词：从江香猪肌内脂肪前体细胞皮下脂肪前体细胞时序表达

鲜味受体TAS1R1/TAS1R3对从江香猪肌内前体脂肪细胞自噬及脂质代谢的调控研究

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

中国畜牧杂志 2021年第10期57卷 100-105,111页

作者：徐永健冯贤辀蒙利洁高艺杨艺龚婷贵州大学高原山地动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室贵州省动物遗传育种与繁殖重点实验室贵州贵阳550025 贵州大学动物科学学院贵州贵阳550025

实验旨在研究鲜味受体(Taste Receptor Family 1 Subunit 1/Taste Receptor Family 1 Subunit 3,TAS1R1/TAS1R3)对从江香猪肌内前体脂肪细胞自噬及脂质代谢的影响,为发掘从江香猪肉质优良性状的形成机制提供思路。实验通过构建TAS1R3 sh... 详细信息

实验旨在研究鲜味受体(Taste Receptor Family 1 Subunit 1/Taste Receptor Family 1 Subunit 3,TAS1R1/TAS1R3)对从江香猪肌内前体脂肪细胞自噬及脂质代谢的影响,为发掘从江香猪肉质优良性状的形成机制提供思路。实验通过构建TAS1R3 shRNA干扰载体,并转染至从江香猪前体脂肪细胞以干扰TAS1R1/TAS1R3的表达水平;通过添加低浓度(2.5 mmol/L)、中浓度(5 mmol/L)、高浓度(10 mmol/L)L-谷氨酸作用于细胞不同时间以激活鲜味受体TAS1R1/TAS1R3,用qRT-PCR检测自噬相关基因以及脂质代谢相关基因的表达水平。结果表明:构建的干扰载体可有效干扰细胞内TAS1R1/TAS1R3的mRNA表达水平(P脂肪酶(LPL)表达水平上升(P细胞6 h后,细胞内TAS1R1/TAS1R3的mRNA表达水平升高(P 肌内前体脂肪细胞自噬和脂质代谢过程,但这两个过程是否相关仍需后续研究。

关键词：从江香猪 TAS1R1/TAS1R3 肌内脂肪前体细胞自噬脂质代谢

维普期刊数据库