检索结果-南通市图书馆

羧酸酯酶比率型双光子荧光探针的构建及生物成像研究

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中国科学：化学 2017年第8期47卷 986-993页

作者：张培盛黄勇曾钫夏细桃吴水珠华南理工大学发光材料与器件国家重点实验室华南理工大学材料科学与工程学院广州510640 理论有机化学与功能分子教育部重点实验室精细聚合物可控制备及功能应用湖南省重点实验室分子构效关系湖南省普通高等学校重点实验室功能材料研究所湖南科技大学化学化工学院湘潭411201 华南理工大学发光材料与器件国家重点实验室华南理工大学材料科学与工程学院广州510640

羧酸酯酶(CaE)水平的异常与脂肪肝、高血脂等多种疾病的发生密切相关,发展用于快速、准确地检测CaE含量的荧光探针对上述疾病的早期诊断具有重要意义.本文基于分子内电荷转移原理,设计合成了一种对CaE具有高选择性识别的红光比率型双光... 详细信息

羧酸酯酶(CaE)水平的异常与脂肪肝、高血脂等多种疾病的发生密切相关,发展用于快速、准确地检测CaE含量的荧光探针对上述疾病的早期诊断具有重要意义.本文基于分子内电荷转移原理,设计合成了一种对CaE具有高选择性识别的红光比率型双光子荧光探针***催化水解断裂探针分子的酯键,导致酶促反应前后探针的荧光光谱性能发生显著的改变,以此实现对CaE的比率荧光检测.该探针具有较好的选择性、较低的检测下限以及较宽的pH响应范围.此外,我们成功地将DCM-CE应用于活细胞中对内源性CaE的双光子荧光成像.

关键词：红光比率型双光子羧酸酯酶荧光成像

不动杆菌生物合成新型羧酸酯酶的摇瓶培养条件优化

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高校化学工程学报 2005年第4期19卷 523-526页

作者：赵玉巧许建和华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室

对一株产(R)-烯丙醇酮乙酸酯对映选择性水解酶的不动杆菌(***0789)摇瓶发酵产酶条件进行了优化。培养基最佳组成为(g?L?1):蔗糖8.5,吐温-801.5,黄豆饼粉20.0,(NH4)2SO42.0,K2HPO42.0,NaCl1.0,MgSO4·7H2O0.2;优化后酯酶产量提高了8.3倍(由46增至427U?L?1)。添加吐温-80可以诱导酶的合成。摇瓶培养最佳条件为:装液量15%,发酵起始pH8.0,接种量6%,发酵温度30℃。考察了细胞生长及产酶的时间进程,最佳培养时间为30h.

关键词： (R)-烯丙醇酮乙酸酯羧酸酯酶不动杆菌产酶条件

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羧酸酯酶的种属差异对药物代谢的影响

国际药学研究杂志 2020年第2期47卷 91-96页

作者：邹小文盛莉李燕中国医学科学院北京协和医学院药物研究所创新药物非临床药物代谢及PK/PD研究北京市重点实验室北京100050

羧酸酯酶(CES)是人和动物体内含量最丰富的水解酶,参与多种内源性和外源性化合物及药物的代谢过程。由于CES在人和动物体内的分布、活性具有明显的种属差异,这些差异与药物在人和不同种属动物体内的药代特性、药效及毒副作用密切相关,因... 详细信息

羧酸酯酶(CES)是人和动物体内含量最丰富的水解酶,参与多种内源性和外源性化合物及药物的代谢过程。由于CES在人和动物体内的分布、活性具有明显的种属差异,这些差异与药物在人和不同种属动物体内的药代特性、药效及毒副作用密切相关,因此,本文就CES的分类、分布、诱导和抑制方面的种属差异,以及在血浆、肝、小肠、皮肤中的种属差异对酯类前药的代谢过程造成的影响进行总结,旨在为新药临床前研究正确选择实验动物提供参考,以准确预测临床药物代谢、药效和毒理作用。

关键词：羧酸酯酶种属差异药物代谢药物研发

新型四苯乙烯衍生物的设计合成及其在羧酸酯酶活性分析中的应用

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化学学报 2016年第11期74卷 871-876页

作者：杨阳黄嫣嫣张关心赵睿张德清中国科学院化学研究所有机固体院重点实验室活体分析院重点实验室北京100190 中国科学院大学北京100049

设计合成了一个含有p-乙酰氧基苄基单元的四苯乙烯吡啶盐衍生物,利用羧酸酯酶选择性地切除乙酰基以及所致的连锁反应将其从水溶性吡啶盐结构转为中性吡啶结构,使其聚集,实现荧光"点亮",从而发展了新型的羧酸酯酶活性分析和抑制剂筛选的... 详细信息

设计合成了一个含有p-乙酰氧基苄基单元的四苯乙烯吡啶盐衍生物,利用羧酸酯酶选择性地切除乙酰基以及所致的连锁反应将其从水溶性吡啶盐结构转为中性吡啶结构,使其聚集,实现荧光"点亮",从而发展了新型的羧酸酯酶活性分析和抑制剂筛选的荧光探针.

关键词：聚集诱导发光四苯乙烯荧光传感器羧酸酯酶

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羧酸酯酶介导的小菜蛾对氟虫腈的抗性

昆虫学报 2015年第3期58卷 288-296页

作者：任娜娜谢苗尤燕春李建玉陈伟军程学敏尤民生福建农林大学应用生态研究所福州350002 闽台特色作物病虫生态防控协同创新中心福州350002 农业部闽台作物有害生物综合治理重点实验室福州350002 福建农林大学生命科学学院福州350002

【目的】羧酸酯酶(carboxylesterases,Car Es)是昆虫重要的解毒代谢酶之一,可以介导靶标昆虫对多种杀虫剂的代谢抗性。本研究检测了羧酸酯酶对小菜蛾Plutella xylostella抗药性的介导功能,旨在阐明羧酸酯酶在小菜蛾代谢解毒中的生理生... 详细信息

【目的】羧酸酯酶(carboxylesterases,Car Es)是昆虫重要的解毒代谢酶之一,可以介导靶标昆虫对多种杀虫剂的代谢抗性。本研究检测了羧酸酯酶对小菜蛾Plutella xylostella抗药性的介导功能,旨在阐明羧酸酯酶在小菜蛾代谢解毒中的生理生化和分子机理。【方法】采用点滴法测定氟虫腈对小菜蛾敏感种群和抗氟虫腈种群的毒力,以及羧酸酯酶抑制剂磷酸三苯酯(triphenyl phosphate,TPP)对氟虫腈的增效作用;以LC30和LC50浓度的氟虫腈处理抗性小菜蛾,测定药剂处理后Car Es酶活性的变化;利用qRT-PCR技术分析Pxae22和Pxae31两个基因在小菜蛾不同发育阶段、组织和种群的表达模式;利用dsRNA干扰Pxae22和Pxae31后观察基因的表达变化和小菜蛾3龄幼虫对药剂敏感性的变化。【结果】TPP可以削弱小菜蛾3龄幼虫对氟虫腈的抗性,增效倍数约为6倍;使用较低剂量(LC30和LC50)氟虫腈处理小菜蛾3龄幼虫后,处理组Car Es比活力明显高于对照,提示氟虫腈对小菜蛾Car Es活性具有诱导作用。对羧酸酯酶基因Pxae22和Pxae31在小菜蛾不同发育阶段、4龄幼虫不同组织和不同种群3龄幼虫中的表达模式分析发现,这两个基因在小菜蛾4龄幼虫中的表达量最高;在4龄幼虫中以中肠组织中的表达量较高,头、表皮、脂肪体中的表达量很低;抗性种群中的表达量显著高于敏感种群。通过干扰Pxae22和Pxae31后的qRT-PCR验证,两个基因的表达量均显著降低,进一步的氟虫腈毒力测定发现,干扰Pxae22和Pxae31后的小菜蛾3龄幼虫对氟虫腈的敏感性分别增加了1.63倍和1.73倍。【结论】羧酸酯酶在小菜蛾对氟虫腈解毒代谢中具有重要作用;Pxae22和Pxae31是小菜蛾的两个抗性相关基因,其表达水平的变化直接影响小菜蛾对氟虫腈的敏感性。

关键词：小菜蛾抗药性羧酸酯酶介导抗性表达水平 RNA干扰

羧酸酯酶与北京市不同城区德国小蠊对有机磷杀虫剂抗性的关系

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中国媒介生物学及控制杂志 2008年第5期19卷 413-417页

作者：魏绪强钱坤曾晓芃高希武中国农业大学农学与生物技术学院昆虫系北京100094 北京市疾病预防控制中心消毒与有害生物防制所北京100013

目的研究羧酸酯酶在不同品系德国小蠊中的活性以及其在有机磷杀虫剂抗性形成中的作用。方法以对有机磷杀虫剂敏感品系(SS)及采自北京市宣武区(XW)、昌平区(CP)、顺义区(SY)和石景山区(SJS)的德国小蠊野外品系为试虫材料,利用生物测定、... 详细信息

目的研究羧酸酯酶在不同品系德国小蠊中的活性以及其在有机磷杀虫剂抗性形成中的作用。方法以对有机磷杀虫剂敏感品系(SS)及采自北京市宣武区(XW)、昌平区(CP)、顺义区(SY)和石景山区(SJS)的德国小蠊野外品系为试虫材料,利用生物测定、生化分析及增效剂试验等方法研究羧酸酯酶与德国小蠊对有机磷杀虫剂抗性的关系。结果增效剂TPP对马拉硫磷、敌敌畏的增效比在敏感品系中分别为1.86和1.51倍,TPP对马拉硫磷的增效比在XW、CP、SY和SJS品系中分别为5.79、20.08、15.26和4.74倍;TPP对敌敌畏的增效比在XW、CP、SY和SJS品系中分别为2.00、1.67、2.16和4.81倍。德国小蠊野外品系与敏感品系羧酸酯酶的米氏常数(Km)和最大反应速度(Vmax)之间差异有统计学意义,敏感品系羧酸酯酶的Km、Vmax分别为0.1580 mmol/L和58.4225μmol/(mg ***);野外品系(XW、CP、SY和SJS)羧酸酯酶的Km、Vmax分别为0.1279、0.1071、0.1080、0.1095 mmol/L和307.2550、338.5755、340.3300、212.4570μmol/(mg ***),2个品系的羧酸酯酶对马拉硫磷和敌敌畏的抑制作用也不同,2种有机磷药剂对敏感品系的抑制中量I50分别为17.64 mmol/L和0.91μmol/L,对野外品系(XW、CP、SY和SJS)的I50分别为80.48、35.49、83.24、82.29 mmol/L和15.35、7.89、11.52、8.60μmol/L。结论羧酸酯酶解毒代谢活性的增加是德国小蠊对有机磷杀虫剂产生抗性的机制之一。

关键词：德国小蠊羧酸酯酶有机磷杀虫剂抗性机制

基于半导体聚合物量子点的羧酸酯酶比率荧光传感

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分析化学 2017年第12期45卷 1930-1936页

作者：操婷婷孙军勇高峰安徽师范大学化学与材料科学学院

建立了以半导体聚合物聚[(9,9-二辛基芴)]量子点(PFO Pdots)为荧光探针的羧酸酯酶(Ca E)比率型荧光传感方法。带负电荷的PFO Pdots与带正电荷的聚乙烯亚胺(PEI)通过静电作用形成纳米复合物Pdots@PEI,在440和467 nm处有两个荧光发射峰。... 详细信息

建立了以半导体聚合物聚[(9,9-二辛基芴)]量子点(PFO Pdots)为荧光探针的羧酸酯酶(Ca E)比率型荧光传感方法。带负电荷的PFO Pdots与带正电荷的聚乙烯亚胺(PEI)通过静电作用形成纳米复合物Pdots@PEI,在440和467 nm处有两个荧光发射峰。在Ca E作用下,Ca E的底物荧光素二乙酸酯(FDA)水解生成带负电的产物荧光素,此物质与带正电荷的Pdots@PEI之间由于静电作用距离拉近,两者可以发生共振能量转移,导致能量供体Pdots@PEI的荧光强度逐渐减弱,而荧光素的荧光强度逐渐增强。基于Pdots@PEI的荧光减弱和荧光素的荧光增强所构成的荧光强度比率关系,建立了选择性检测Ca E的新方法。在最优实验条件下,本方法对Ca E检测的线性范围为0.75~50.00 U/L,检出限为0.75 U/L(S/N=3)。将本方法用于兔血液中Ca E含量的检测,结果令人满意。

关键词：半导体聚合物量子点比率荧光传感羧酸酯酶

毕赤酵母产伏马毒素B1羧酸酯酶发酵条件和培养基的优化

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食品与发酵工业 2021年第1期47卷 43-49页

作者：赵一凡常晓娇杜稳孙长坡刘虎军国家粮食和物资储备局科学研究院北京100037

为提高毕赤酵母重组菌产伏马毒素B1(fumonisin B1,FB1)羧酸酯酶的摇瓶发酵水平,以酶活力为指标,对发酵条件和培养基进行优化。通过单因素试验对发酵条件进行优化。通过Plackett-Burman试验筛选出关键培养基成分,再进行正交试验建立试验... 详细信息

为提高毕赤酵母重组菌产伏马毒素B1(fumonisin B1,FB1)羧酸酯酶的摇瓶发酵水平,以酶活力为指标,对发酵条件和培养基进行优化。通过单因素试验对发酵条件进行优化。通过Plackett-Burman试验筛选出关键培养基成分,再进行正交试验建立试验数据样本,最后建立误差反向传播神经网络模型进行预测并寻找最优发酵培养基组成。经优化得到的发酵条件:诱导温度28℃,初始p H 6.0,每24 h补加体积分数为1%的甲醇,诱导96 h;优化后发酵培养基组成:蛋白胨23 g/L、KH2PO444 g/L、PTM4 (Pichia trace minerals 4)微量元素溶液1.5 m L/L、K2SO47.15 g/L、Mg SO4·7H2O 5.85 g/L和酵母粉5 g/L。FB1羧酸酯酶酶活力达到402 U/m L以上,较优化前提高了1.19倍。优化后显著提高了重组菌株的产酶能力,研究结果为FB1羧酸酯酶发酵罐优化提供了基础数据。

关键词：伏马毒素羧酸酯酶发酵条件培养基优化人工神经网络

棉铃虫羧酸酯酶基因HaCarE序列分析及其RNAi效应

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植物保护学报 2023年第3期50卷 602-609页

作者：李海超楚冬冬韩心怡原国辉苗雪霞关若冰河南农业大学植物保护学院郑州450002 中国科学院分子植物科学卓越创新中心昆虫发育与进化生物学重点实验室上海200032

为明确棉铃虫Helicoverpa armigera羧酸酯酶(carboxylesterase,CarE)编码基因的功能及其RNA干扰(RNA interfering,RNAi)效应,通过棉铃虫转录组数据筛选获得CarE基因,并克隆得到其全长cDNA序列,对其进行生物信息学分析,并利用实时荧光定... 详细信息

为明确棉铃虫Helicoverpa armigera羧酸酯酶(carboxylesterase,CarE)编码基因的功能及其RNA干扰(RNA interfering,RNAi)效应,通过棉铃虫转录组数据筛选获得CarE基因,并克隆得到其全长cDNA序列,对其进行生物信息学分析,并利用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)技术检测该基因在棉铃虫不同发育时期和不同组织中的表达水平,同时通过RNAi技术检测其对棉铃虫的致死效果。结果表明,从棉铃虫中克隆获得的HaCarE基因全长cDNA序列为1677 bp,编码558个氨基酸,编码蛋白质由15个α螺旋和14个β折叠结构组成。qPCR检测结果显示该基因在棉铃虫不同发育时期均有表达,其中在1龄幼虫期的相对表达量最高,随着龄期的增长,相对表达量逐渐降低,在6龄幼虫期和蛹期的相对表达量最低;在5龄幼虫不同组织中,该基因在中肠中的相对表达量最高。注射dsHaCarE能够明显抑制靶标基因的表达,24 h抑制率为75.41%;饲喂dsHaCarE对棉铃虫2龄幼虫有显著致死作用,5 d时死亡率为64.57%,体长与对照组相比减少了23.29%。表明获得的HaCarE基因对棉铃虫生长发育有显著抑制作用,并有较好的致死效果。

关键词：棉铃虫羧酸酯酶基因克隆时空表达 RNA干扰